Summary
I denne protokollen beskriver vi den fullstendige prosessen med eksperimentelle myopi tilskyndelse i mus med nydesignede briller og teknikken nødvendig for å oppnå stabil og reproduserbar resultatene i okulær parameteren målinger.
Abstract
Murine modell av myopi kan være et kraftig verktøy for nærsynthet forskning på grunn av relativt enkelt genetisk manipulering. En måte å indusere myopi i dyr er å sette klare minus linser foran øynene for uker (linse-indusert myopi, LIM). Men varierer bevarte protokoller for tilskyndelse og evaluering fra laboratoriet til laboratoriet. Her beskrev vi en svært praktisk og reproduserbar metode for å indusere LIM i mus med nydesignede briller. Metoden hurtigreparasjoner linsen stabilt foran øyet musen mens du gjør objektivet tas av for rengjøring eller aktuelle stoffet administrasjon. Fenotypen er robust og effektiv avviket er liten. Metoden beskrevet her kan brukes til mus rett etter avvenning som utvider mulig varighet for eksperimenter. Vi ga også teknisk rådgiver for å oppnå reproduserbar resultatene i brytning og aksial lengdemål. Vi håper trinnvise protokollen beskrevet her og detaljert artikkelen kan hjelpe forskerne å utføre myopi eksperimenter med myopi jevnere og gjøre dataene sammenlignbare over laboratorier.
Introduction
Utbredelsen av myopi har økt dramatisk nylig, mens mekanismen utbruddet og progresjon er fortsatt i stor grad unknow1. Mest karakteristiske fenotypen av myopi er forlengelse av aksial lengde (AL), noe som øker risikoen for retinal komplikasjoner eller blindhet2. For å bedre forstå patogenesen av myopi og utvikle effektive behandlinger, er robust nærsynt dyremodeller og stabil fenotypen evaluering nødvendig.
Kort, to metoder finnes for inducing nærsynt stater i dyr: skjema-deprivasjon myopi (FDM) og linse-indusert myopi (LIM)3. Tidligere steder diffusorer foran øyet eller sutures øyelokket skal skjule bildet, som påvirker normal utvikling av øyeeplet, noe som resulterer i en myopi fenotypen. De siste stedene minus linser foran øyet å flytte fokuspunkt bak netthinnen. Netthinnen oppdager skifte av fokus og elongates øyeeplet du justere netthinnen og samlingspunkt. Øyelokket er lukket eller diffuseren har vært fast foran øyet, for FDM kreves nesten ingen ytterligere vedlikehold. For LIM må linsen tas av for rengjøring for å holde det gjennomsiktig. Dermed er FDM relativt lett å bli indusert teknisk. Men mekanismer for FDM og LIM er forskjellige, og hvilken metode som etterligner myopi i menneskelig bedre er fortsatt under debatten3. En av styrkene til LIM er sterkere fenotypen sammenlignet med FDM, minst i mus4.
Dyr som har blitt brukt for å indusere myopi inkluderer damer5, apekatter6, tre kjerringer7, marsvin8og mus4. Vurderer muligheten for genetisk manipulasjon, rikelig tilgjengelig antistoffer og lave kostnader for formering, kunne mus vært førstevalget som dyr modell av myopi. Men er sammenlignet med andre større dyr, fikse linser eller diffusorer foran musen øyet relativt vanskelig spesielt for unge mus som rett etter venne. For eksperimentene trenger aktuell narkotikabruk administrasjon eller flere midlertidige øye mål, er det også nødvendig for rammen fjernes. En annen utfordring er små morfologiske endring av musen øyeeplet, som trenger enheter å evaluere og sofistikert technics. Hittil har gjør forskjellige inducing og måle protokoller som brukes i forskjellige forskergrupper det vanskelig å sammenligne og gjenta resultatene over laboratorier. En standardprotokoll detaljer er nødvendig.
Tidligere arbeider beskrives flere metoder å fastsette linser eller diffusorer foran musen øyet, for eksempel liming9, søm10 og hode montert goggle ramme11,12. Vi kombinerte eksisterer hode montert goggle technics11,12,13 med våre nydesignede ramme å utvikle en ameliorated protokoll for inducing robust og effektiv eksperimentelle myopi i mus. Protokollen kan brukes til små mus snart etter venne på postnatal dag 21 (p21). Vi har også optimalisert prosessene for stabil og nøyaktig vurdering av fenotyper inkludert brytning og AL. Vi håper denne standardisert protokollen kan hjelpe for å lage nærsynt mus en lettere tilgjengelig modell for nærsynthet forskning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle prosedyrer ble godkjent av den etiske komiteen på dyr forskning på Keio University School of Medicine overholdt ARVO erklæringen for bruk av dyr i Ophthalmic og visjon forskning, institusjonelle retningslinjene på dyr eksperimentering på Keio University og dyr forskning: rapportering av i Vivo eksperimenter (ANKOMME) retningslinjer for bruk av dyr i forskning.
1. montering briller for mus
- Forberede deler som trengs for montering briller (figur 1a). For hver mus, forberede alle followings: et hode montert nylon pinne, en høyere og en lavere titanium ramme, to linser med riktig krefter etter eksperimentet, en M1.4 størrelse skruen med lengden på 10 mm, en mutter for M1.4 størrelse skruen, en ren vaskemaskin for M1.4 størrelse skruen med tykkelsen på 0,3 mm og to kunstige fingernegl tips (Tabell for materiale).
Merk: To typer rammer eksisterer med ulike høyder. En mus brukes en høyere ramme og en lavere bildefrekvens som et sett. Høyere rammer bør settes over lavere seg for å gjøre feltene visjon symmetrisk. Rammer og linser er spesielt konstruert og produsert av forfatternes research group. Disse er tilgjengelige ved å kontakte tilsvarende forfatterne av denne artikkelen. Forøvrig finnes i verktøyet butikker. - Samle rammen for høyre og venstre øyet separat.
- Ordne fingernegl spissen møte utenfor retning for å oppnå den beste beskyttende effekten. Justere vinkelen mellom finger spissen og rammen å være ca 130° å unngå maskering musen visjon feltet (figur 1b). Overholde de kunstige fingernegl tipsene til rammen ved hjelp av cyanoakrylatlim.
Merk: Fingernegl tips kan bidra til å beskytte linsen arbeidsunderlaget av musen. Retning av negl tips må være motsatt fordi høyere rammen og nederst i rammen brukes til høyre øye og det venstre øyet, henholdsvis. - Vent minst 12 h å la limet tørke helt, så bruk en nagle avklipt å justere formen på negl tips for å være ca 1 cm × 1 cm ved å klippe og trimming.
- Overholde linsen i delbildet ved hjelp cyanoakrylatlim. Sette linsen på rammen for hånd og hold rammen vannrett. Injisere cyanoakrylatlim fra kanten av linsen og la selvklebende spredning av overflatespenningen.
Merk: Limet vil erodere linsen og påvirke sin åpenhet, så sørg for at limet berører bare den ytre delen av linsen. Bruk 0 diopter (D) plano linse som kontroll og minus objektivet å indusere myopi. Effekten av ulike krefter minus linser (–10 D til –50 D) har vært beskrevet andre steder4. For å maksimere myopi tilskynder, anbefales –30 D linse for inducing myopi. FDM kan også bli satt med samme enhet ved å endre linsen i hetten av 1,5 mL microtube som diffuseren.
- Ordne fingernegl spissen møte utenfor retning for å oppnå den beste beskyttende effekten. Justere vinkelen mellom finger spissen og rammen å være ca 130° å unngå maskering musen visjon feltet (figur 1b). Overholde de kunstige fingernegl tipsene til rammen ved hjelp av cyanoakrylatlim.
- Skru inn nylon pinne med vaskemaskinen fra den flate siden av pinnen. Forberede briller og pinner før eksperimentet henholdsvis og lager for videre bruk (figur 1 c).
Merk: Protokollen kan pauses her.
2. målinger av Refraction og AL planlagt.
- Bruke en dråpe mydriatic agent som inneholder 5 mg/mL tropicamide og 5 mg/mL phenylephrine hydroklorid på hver side av øyeeplet å dilate elevene. Vent minst 5 minutter før narkose.
Merk: Dilate elevene under generell anesthesia vil føre reversibel cataract som påvirker måling etterpå. Alltid dilate elevene før narkose og vent minst 5 minutter. En dråpe (omtrent 0,05 mL) mydriatic agent er nok for utvidelsen elev av musen øyet, mens mer agent vil gjør ingen skade følgende trinn. - Sette musen under narkose. Forstå tilbake huden på sakte å holde musen fra dunk øyet før det er helt anaesthetized. Dommer dybden av generell anestesi er nok hvis musen ikke flytte når det legges på bordet fritt.
Merk: En kombinasjon av midazolam (40 μg/100 μL), medetomidine (7,5 μg/100 μL) og butorphanol tartrate (50 μg/100 μL) brukes her til generell anestesi for mus med et volum på 0,01 mL/g intraperitoneal injeksjon. Vanligvis er mindre enn 5 min nødvendig for mus å sovne. Lang tid for narkose forårsaker lav kroppstemperatur og langsom hjerteslag. For å unngå mulige påvirkning av generell anestesi målenheten, slutter alle målingene i 10 min etter injeksjon av bedøvende anbefales. Butorphanol i bedøvende cocktail gir ca 4 timer med analgesi. Riktig oppskrift for narkose kan forskjellige av institusjoner. - Måle brytningen med musen øyet ved hjelp av en infrarød photorefractor4,9,14. Justere retning man musen øynene å holde første Purkinje bildet i midten av eleven og måle brytning langs den optiske aksen. Etter måling, måle motsatt øyet med de samme fremgangsmåtene (figur 2a).
Merk: Verdien målt for refraksjonen som oppstår er sterkt påvirket av plasseringen av musen øyet langs den optiske aksen. Sikre det første Purkinje bildet justeres innenfor ±3 grader fra midten av eleven. Workbench av spectral domene optical coherence tomografi (SD-oktober) kan brukes for finjustering for elev i brytning målinger4. - Måle AL av musen øyet med en SD-oktober systemet4,15,16. Definere AL som avstanden fra hornhinnen toppunktet til den smarteste grensen i nærheten av den optiske nerven (figur 2b).
Merk: I likhet med måling av refraksjonen som oppstår, AL er sterkt påvirket av retning av musen øyet. Hornhinnen toppunktet kan bekreftes av punkt-lignende refleksjon på overflaten av hornhinnen. Grensen til netthinnen siden blir meget tåkete på optiske nerven. Juster retningen litt å la grensen være klar nok for å måle, men ikke så langt fra den optiske nerven.
3. fiksering av rammen på musen kraniet.
- Bruke en dråpe 0,1% renset natrium mengden øyedråper å hindre tørrhet i hvert øye.
Merk: Eye slipp på øyet overflaten vil påvirke verdien for brytning og aksial lengdemål. Ikke bruk øyedråper etter anestesi før alle mål gjøres. - Sette haken bedøvet museklikk på en skråning laget av leire eller noe kan brukes som en pute å gjøre forhånd flyet i kraniet vannrett.
- Sterilisere håret og hodebunnen mellom ørene og øynene bomullspinne med 70% etanol.
- Kutt huden mellom ørene og øynene å avsløre skallen om 0,8 cm2 kirurgisk saks og pinsett. Bruk dental etsing væske og bomull swab for å fjerne periosteum. Sterilisere kirurgisk saks og pinsett med 70% etanol før operasjonen hver mus.
Merk: Klipping håret og bruk sterile hansken kan være nødvendig. Sjekk bestemmelsene i relevante dyr omsorg komiteen før denne prosedyren. Oftest kan dental etsing væsken bli funnet som et av vedleggene i det selv dental lim systemet. Hvis dental etsing væske ikke er tilgjengelig, bruk 70% etanol. - Sette sammen et sett av rammer uten objektiv for å fikse pinnen til riktig posisjon. Legge rammer på mus hodet. Nøye justere plasseringen av rammene at begge øynene er i den tomme rammen.
- Bruk en selv dental lim system for å koble pinnen på mus hodet. Vær forsiktig med å la væsken av adhere systemet inn i musen øyet.
Merk: Metoden for å bruke det selv dental lim systemet er forskjellig mellom produkter. Se instruksjonene nøye.
Advarsel: Noen av reagensene i dental lim system kan være giftig. - Vent ca 5 min og ta av rammen og mutteren forsiktig uten å endre plasseringen av stokken (figur 3a).
- Injisere 0.75 mg/kg atipamezole hydroklorid intraperitoneally slik at musen hurtigere til utvinning av bedøvelsen. Sett musepekeren i en individuell bur til helt frisk. Ikke la musen uovervåket før det har gjenvunnet tilstrekkelig bevissthet for å opprettholde sternal recumbency. Protokollen kan pauses her.
4. oppstart av myopi induksjon og vedlikehold etterpå
- Vent minst 24 timer etter operasjonen la musen gjenopprette bedøvelsen helt. Hold pinnen og sette på rammer med linser. Tilskynder begynner på dette tidspunkt (figur 3b).
Merk: For å redusere ubehag under gjenoppretting etter anestesi og gi nok tid for dental lim system å koagulere, det anbefales å sette på rammen etter mus helt tilbake fra anestesi. Harpiks sement selvklebende systemet dekker fullt ut kuttet av hodebunnen. Derfor er ingen bestemt post-kirurgisk behandling nødvendig for å forebygge infeksjon og ameliorating etter kirurgiske smerte. Rett etter første gang setter på rammen, mus er over bevisst til eksistensen av linsen og skraper den mye. Brutto virkemåten vil være tilbake til normalen etter noen timer. Mus med linser kan holdes med samme tetthet til normal mus. - Fjern rammen og rengjør objektiver og negl tips med bomull vattpinner minst to ganger i uken for å beholde gjennomsiktigheten av linsen.
Merk: Det er ikke nødvendig å sette musen under narkose for å fjerne og sette på rammen. Gir støtte for mus å sitte på, i stedet for å ha dem henge mens arbeider med dem kan redusere smerte.- Hvis en midlertidig måling er nødvendig, legger musen under narkose og måle musen som beskrevet tidligere. Tilskynder kan videreføres etter musen gjenoppretting av bedøvelsen.
- Feilfri byrået minst to ganger i uken.
Merk: Bidra til å opprettholde linsen klarhet. Å sette en netto mellom musen og bur bunnen til Filtrer maten utklipp kan også være nyttig. - Overvåke kroppsvekt og grov oppførsel. Sammenligne dem med samme alder urørt mus under hele eksperimentelle prosessen.
Merk: Bortsett fra noen avlysning atferd, ingen betydelig endring inkludert kroppsvekten er funnet mellom eksperiment mus med ubehandlet mus.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
På først, sjekk hvis alle nødvendige deler er forberedt (figur 1a). Et eksempel på et stykke montert briller er vist i figur 1b. Bortsett fra hoveddelen av rammene og beste er alle andre deler disponibel for hver musen. Et sett med fullført briller er vist i figur 1 c. Endre vinkelen mellom de to rammene å passe musen med ulike aldre.
Et eksempel på brytning målingen er vist i figur 2a. Dette er en mus øye indusert av en-30 D linse i 3 uker fra p21. Merk at blikket skal kontrolleres nær 0 grader i både x- og y-aksen som betyr at musen ser rett foran kameraet9. Figur 2b viser et eksempel på en hele øyet bilde tatt av SD-oktober innstilt for mus og definisjonen av hver del av øyet. Vanligvis presenterer SD-oktober systemer faktisk målt verdi direkte.
Et bilde av pinnen overholdt musen hodet er vist i figur 3a. Grensen på kuttet bør være minst 3 mm fra øyet å unngå påvirke funksjonen til øyelokket. Pinnen forblir på mus hodet til slutten av tilskynder og gir grunnlag for å fikse briller. Limet styrke dental selvklebende systemet skal være nok for fiksering av briller under hele eksperimentet i ca 3 til 4 uker. Samle briller som vist i figur 3b. To stykker av briller bør være ganske symmetrisk.
Presentative resultater er vist i Figur 4. I dette eksperimentet, 0 D plano linser er løst det venstre Eyes som interne kontroller og -30 D objektiver var fast foran høyre øye å indusere myopi (C57B6/J mus, tilskynder startet fra p21, n = 4). Refractions og ALs ble målt ukentlig etter tilskynder i tre uker. Sammenlignet med 0 D plano linser, indusert-30 D en sterk nærsynt skift i både brytning og AL. Endring av brytning nådde toppen i den første uken og bodde flat for de følgende to ukene. Forskjellen mellom endring av nærsynt øyne og kontroll øyne i AL var betydelig fra den første uken og ble større og større i de følgende to ukene.
Figur 1: utformingen av skallen montert briller. (en) alle deler nødvendig for montering musen glass. (b) et eksempel på plasseringen og spiker tips for høyre side av øyet. (c) et eksempel på ett sett av sammensatte briller. Justere den felles delen for å endre vinkelen på rammer som passer for mus i ulike aldre. Dette tallet er endret fra Jiang, X. et al4, tilgjengelig under en Creative Commons Attribution 4.0 International License. http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2: eksempler på bilder av måling av brytning og AL. (et) et bilde av brytning målene for en nærsynt øye benytter en infrarød photorefractor. (b) en prøven bilde av en AL måling av musen øyet med en SD-oktober og definisjonen av hver del av øyet. Dette tallet er endret fra Jiang, X. et al4, tilgjengelig under en Creative Commons Attribution 4.0 International License. http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3: et bilde av en mus etter operasjonen. (et) et eksempel på en musen etter operasjonen for å overholde pinnen. (b) en mus med briller i begge sider. Dette tallet er endret fra Jiang, X. et al4, tilgjengelig under en Creative Commons Attribution 4.0 International License. http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4: Presentative resultatene av en tre ukers oppfølging av myopi tilskyndelse i fire mus med-30 D linser og 0 D objektiver som internkontroll. (en) endringer av refractions i tre uker. En plutselig endring kan observeres en uke etter tilskynder. (b) derimot endringer i AL var relativt mild. Stjernen merker viste de statistiske betydninger mellom øynene iført 0 D og -30 D objektiver i hver uke, henholdsvis. p < 0,05, **p < 0,01. Student t-test. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 5: anbefalt flytskjema for å indusere myopi i mus. Flytskjemaet viste her representerer en mulig mønster for inducing myopi i mus. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Sikre briller fikses stabilt på mus hodet, må flere trinn i denne protokollen være betalt stor oppmerksomhet. Periosteum må fjernes helt før du bruker det dental lim systemet. Blod på skallen også må renses opp med forsiktighet. Mens litt finjustering er akseptabel rett etter limet, flyttes ikke pinne ofte før limet tørker opp. Følg instruksjonen av det lim systemet nøye, spesielt forholdet mellom hver komponent av endelige blandingen. Forstå når musen under vedlikehold av briller eller oppfølging målene etter operasjonen, ikke forstå pinne med liket av musen sammen. Den relative bevegelsen mellom skallen og pinnen er den hyppigste årsaken til drop ned av pinnen. Riktig og fatte dyktighet, ville antall personer som rullgardin stokk være mindre enn en i en 3 ukers eksperiment inkludert 20 personer.
Hår og matrester kan gli inn i intervallet mellom øyet og linsen. Dette vil ikke bare påvirke gjennomsiktighet av linsen, men også potensielt kan skade hornhinnen overflaten fysisk. For å holde er gjennomsiktigheten av linsen, minst to ganger av renhold nødvendig hver uke. Dette vil også gi mus sjansen å groom ansikt å redusere forekomsten av komplikasjoner for hornhinnen. La plass til ca 1 mm mellom rammen og huden slik at musen å blinke. Rammen kan gjøre det vanskelig for mus å nå maten utenfor cage gjennom rutenettet over. Det anbefales derfor å sette mat på gulvet i buret direkte. Endre buret i ren en for omtrent to ganger i uken vil også bidra til holde linsene ren. Skitne linsene blir diffusorer inducing myopi gjennom skjemaet-deprivasjon mekanisme. Dette kan forskyve data og gjøre resultatet skal være vanskelig å tolke siden bevisene viste at FDM og LIM er forskjellige modellsystemer i etiologi3.
På grunn av den lille størrelsen på musen øyet pleier parameterne målt øye å være ustabil. Vi anbefaler den infrarøde photorefractor utviklet av Dr. Schaeffel for brytning måling9 og en SDOCT for AL4 (se Tabell for materiale). Begge systemene presenterer nok informasjon for å bedømme påliteligheten av den målte verdien å sikre repeatability av måling. For brytning, som hevdet i tidligere rapporter, er det svært viktig å opprettholde måling på-akse4,14. Å holde kontrollen blikk ±3 grader få stabile resultater. For å oppnå denne presise målingen, kan tube SDOCT systemet være nyttig når tweaking retning av musen øyet. For AL måling er det reflekterte lyset på hornhinnen toppunktet og smarteste grensen i nærheten av den optiske nerven to pålitelig anatomiske merker som sikrer repeatability av denne målingen.
Protokollen beskrevet her indusert betydelig nærsynt stater i mus innen en uke. Selv om mekanismen er fortsatt ukjent, endringen i brytning og AL er ikke nødvendigvis parallelt. Siden AL holdt økende nærsynt etter en uke, anbefaler vi målingen gjøres tre ganger totalt: før, en uke og tre uker etter tilskynder. En av eksempel flytskjemaer for nærsynthet induksjon er viste i figur 5. Basert på tidligere rapport4starter fra p21 og bruker - 30 D objektiver anbefales for LIM. eksperimenter sist for over 4 uker kan ha høy forekomst av alvorlig hornhinnen komplikasjoner som påvirker målt verdien og akselerere forbruket av linser . Den vanligste komplikasjonen er hornhinnen arrdannelse. Mus rengjøre ikke deres ansikter og øyelokk iført rammen, som kan være årsaken til komplikasjon.
Enhet som er beskrevet i denne protokollen kan brukes til mus rett etter avvenning (p21). Dette kan delvis bidra til sterk fenotypen observert4. Rammen er flyttbar uten narkose. Dette gjør ikke bare forskeren å rydde opp linsene lett, men også gjøre de aktuelle stoff levering mulig4. En annen styrke er at linsene kan enkelt endres i diffusorer eller linser med forskjellige diopter (f.eks., pluss linser), som utvider mulighetene for denne metoden. En begrensning av denne metoden er at operasjonen trenger litt øvelse før rammene kan bli overholdt stabilt for hele eksperimentet. Målene må også tålmodighet å samle pålitelige data.
Mus er uerstattelig dyremodell med sin mulighet for genetisk manipulasjon og den lave kostnaden for formering. Vi håper protokollen beskrevet her kan gjøre den eksperimentelle myopi i mus mer praktisk modell for nærsynthet forskning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Utformingen av musen øyeglasset har blitt søkt om patent (programmet nr. 201741349).
Acknowledgments
Vi takker Mt Pardue for råd om SDOCT, F. Schaeffel for råd om målinger av brytning og hornhinnen kurvatur, Mr. Sanshouo for å gjenskape tredimensjonale ramme dataene, M. Miyauchi; K. Tsubota; Y. Tanaka; S. Kondo; C. Shoda; M. Ibuki; Y. Miwa; Y. Hagiwara; A. Ishida; Y. Tomita; Y. Katada; E. Yotsukura; K. Takahashi; og Y. Wang for kritiske diskusjoner. Dette arbeidet ble støttet av tilskudd inAid for vitenskapelig forskning (KAKENHI, nummer 15K 10881) fra Kunnskapsdepartementet, kultur, sport, vitenskap og teknologi (MEXT) til TK. Dette arbeidet er også støttet av stipendet for nærsynthet forskning fra Tsubota Laboratory, Inc. (Tokyo Japan).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| screw | NBK | SNZS-M1.4-10 | |
| washer | MonotaRO | 42166397 | |
| nut | MonotaRO | 42214243 | |
| stick | DMM Make | none | designed by authers and output by the 3D printer rented from DMM Make. |
| frame | DMM Make | none | designed by authers and output by the 3D printer rented from DMM Make. |
| lenses | RAINBOW CONTACT LENS | none | customized for mice use by the company |
| cyanoacrylate glue | OK MODEL | MP 20g | |
| dental adhesive resin cement | SUN MEDICAL | super bond | contains the etching liquid used for removing the periosteum of the mouse skull |
| infrared photorefractor | Steinbeis Transfer Center | none | designed and offered by Dr. Frank Schaeffel from university of Tübingen |
| Spectral domain OCT | Leica | R4310 | |
| Tropicamide, Penylephrine Hydrochloride solution | Santen | Mydrin-P | |
| midazolam | Sandoz K.K. | SANDOZ | components for the anesthetic |
| medetomidine | Orion Corporation | Domitor | components for the anesthetic |
| butorphanol tartrate | Meiji Seika Pharma | Vetorphale | components for the anesthetic |
| 0.1 % purified sodium hyaluronate | Santen | Hyalein | |
| atipamezole hydrochloride | Zenoaq | antisedan |
References
- Dolgin, E. The myopia boom. Nature. 519 (7543), 276-278 (2015).
- Ohno-Matsui, K. Pathologic Myopia. Asia-Pacific Journal of Ophthalmology (Philadelphia, Pa). 5 (6), 415-423 (2016).
- Morgan, I. G., Ashby, R. S., Nickla, D. L. Form deprivation and lens-induced myopia: are they different. Ophthalmic & Physiological Optics. 33 (3), 355-361 (2013).
- Jiang, X., et al. A highly efficient murine model of experimental myopia. Scientific Reports. 8 (1), 2026 (2018).
- Torii, H., et al. Violet Light Exposure Can Be a Preventive Strategy Against Myopia Progression. EBioMedicine. 15, 210-219 (2017).
- Smith, E. L. 3rd, et al. Effects of Long-Wavelength Lighting on Refractive Development in Infant Rhesus Monkeys. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 56 (11), 6490-6500 (2015).
- Gawne, T. J., Siegwart, J. T., Ward, A. H., Norton, T. T. The wavelength composition and temporal modulation of ambient lighting strongly affect refractive development in young tree shrews. Experimental Eye Research. 155, 75-84 (2017).
- Wu, Y., et al. Early quantitative profiling of differential retinal protein expression in lens-induced myopia in guinea pig using fluorescence difference two-dimensional gel electrophoresis. Molecular Medicine Reports. , (2018).
- Schaeffel, F., Burkhardt, E., Howland, H. C., Williams, R. W. Measurement of refractive state and deprivation myopia in two strains of mice. Optometry and Vision Science. 81 (2), 99-110 (2004).
- Tkatchenko, T. V., Shen, Y., Tkatchenko, A. V. Mouse experimental myopia has features of primate myopia. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 51 (3), 1297-1303 (2010).
- Faulkner, A. E., Kim, M. K., Iuvone, P. M., Pardue, M. T. Head-mounted goggles for murine form deprivation myopia. Journal of Neuroscience Methods. 161 (1), 96-100 (2007).
- Gu, Y., et al. A Head-Mounted Spectacle Frame for the Study of Mouse Lens-Induced Myopia. Journal of Ophthalmology. 2016, 8497278 (2016).
- Siegwart, J. T. Jr, Norton, T. T. Goggles for controlling the visual environment of small animals. Laboratory Animal Science. 44 (3), 292-294 (1994).
- Tkatchenko, T. V., Tkatchenko, A. V. Ketamine-xylazine anesthesia causes hyperopic refractive shift in mice. Journal of Neuroscience Methods. 193 (1), 67-71 (2010).
- Chou, T. H., et al. Postnatal elongation of eye size in DBA/2J mice compared with C57BL/6J mice: in vivo analysis with whole-eye OCT. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 52 (6), 3604-3612 (2011).
- Park, H., et al. Assessment of axial length measurements in mouse eyes. Optometry and Vision Science. 89 (3), 296-303 (2012).
