इस कागज एक प्रवाह का उपयोग करता है-cytometry आधारित परख के लिए अवरोधकों की पहचान के लिए रासायनिक अवरोधकों की स्क्रीन पुस्तकालयों और उनके लक्ष्य है कि प्रभाव टी सेल रिसेप्टर संकेतन । यहां वर्णित तरीकों को भी उच्च प्रवाह की जांच के लिए विस्तारित किया जा सकता है ।
टी सेल रिसेप्टर (TCR) मार्ग संकेत मध्यस्थों की एक भीड़ है कि TCR के सक्रियण पर संकेत संचारित शामिल हैं । विभिन्न रणनीतियों का प्रस्ताव किया गया है और TCR संकेतन के नए मध्यस्थों की पहचान के लिए लागू है, जो सक्रियण और thymic चयन सहित टी-सेल प्रक्रियाओं की समझ में सुधार होगा. हम एक स्क्रीनिंग परख का वर्णन है कि अणुओं की पहचान है कि प्रभाव TCR thymocytes विकासशील के सक्रियकरण के आधार पर संकेतन सक्षम बनाता है । मजबूत TCR संकेतों के कारण विकासशील thymocytes एक नकारात्मक चयन के रूप में जाना जाता प्रक्रिया में अपोप्तोटिक मशीनरी को सक्रिय करने के लिए । कळेनासे अवरोधकों के आवेदन के माध्यम से, उन लक्ष्यों के साथ जो TCR संकेतन को प्रभावित करने के लिए नकारात्मक चयन की प्रक्रिया को ओवरराइड करने में सक्षम हैं । इस पत्र में विस्तृत विधि TCR संकेतन रास्ते में स्थापित भूमिकाओं के साथ विहित kinases के अवरोधकों की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है और भी नए kinases के अवरोधकों अभी तक TCR संकेतन रास्ते में स्थापित किया जाना है । स्क्रीनिंग रणनीति यहां TCR संकेतन में उपंयास druggable लक्ष्य की पहचान के लिए उच्च प्रवाह के स्क्रीन के लिए लागू किया जा सकता है ।
टी कोशिकाओं लिम्फोसाइटों की एक वंश है कि अनुकूली उन्मुक्ति के रखरखाव में एक निर्णायक भूमिका निभा रहे हैं । वे TCR, जो उंहें अपने लाइगैंडों पहचान करने के लिए सक्षम बनाता है एक्सप्रेस, एक बड़े histocompatibility जटिल अणु (MHC) के साथ एक बाध्य पेप्टाइड, जो प्रतिजन की सतहों-पेश कोशिकाओं (APCs) पर पाए जाते है से मिलकर जटिल । TCR/MHC बातचीत के माध्यम से TCR संकेतन मार्ग के ट्रिगर टी सेल सक्रियकरण और विकास के लिए महत्वपूर्ण है1।
टी सेल विकास में, अस्थि मज्जा-व्युत्पंन टेम स्टेम सेल (HSCs) थाइमस, जहां वे भेदभाव से गुजरना और टी सेल वंश प्रगति2के चरणों के माध्यम से जाने के लिए विस्थापित । डबल-पॉजीटिव (DP) thymocytes, दोनों CD4 और सीडी 8 coreceptors को व्यक्त करते हुए, MHC पर स्व-पेप्टाइड/APCs के साथ संलग्न करें । अपने स्वयं के लिए एक उदारवादी संबंध के साथ Thymocytes-पेप्टाइड/MHC लाइगैंडों परिपक्व बनने के लिए सिंगल पॉजिटिव (सपा) CD4 या सीडी 8 Thymocytes, एक प्रक्रिया सकारात्मक चयन के रूप में पद । इसके विपरीत, thymocytes कि स्व के माध्यम से अत्यधिक TCR उत्तेजना प्राप्त पेप्टाइड/MHCs से गुजरना apoptosis के माध्यम से नकारात्मक चयन3,4। उत्तेजना प्रेरित, caspase-निर्भर apoptosis की इस प्रक्रिया thymocytes उत्तेजक द्वारा इन विट्रो में नकल उतारा जा सकता है, उदाहरण के लिए विरोधी के साथ CD3/28 एंटीबॉडी-लेपित मोती5। चयन प्रक्रिया पास करने वाली परिपक्व टी कोशिकाओं APCs से परिधि में गैर-स्व-पेप्टाइड/MHC लाइगैंडों द्वारा सक्रिय किए जाते हैं । स्व-पेप्टाइड/MHCs अभी भी परिधीय टी कोशिकाओं के लिए प्रासंगिक है, अस्तित्व और समस्थिति प्रसार के लिए संकेतन टॉनिक के संदर्भ में, सहायक टी कोशिकाओं के भेदभाव, और टी सेल प्रतिक्रियाओं को बढ़ाने के लिए गैर-स्व पेप्टाइड/MHCs के माध्यम से coagonism6,7,8,9. उच्च-संबध TCR पेप्टाइड/MHC ligand करने के लिए बाइंडिंग कई बहाव संकेतन रास्ते, जो एक जटिल TCR संकेतन नेटवर्क10बनाने के कई संकेतन अणुओं को शामिल सक्रिय करता है । TCR संकेत रास्ते कई दशकों के लिए अध्ययन किया गया है, और अभी तक मार्ग के नए मध्यस्थों की खोज11,12थमी का कोई संकेत नहीं दिखाता है । TCR संकेतन रास्ते के मॉडुलन नैदानिक प्रासंगिकता है और immunotherapeutic अनुप्रयोगों के लिए potentiating टी सेल प्रतिक्रियाओं या प्रतिरक्षा13के नियंत्रण के लिए टी-सेल प्रतिक्रियाओं के निषेध शामिल कर सकते हैं । टी के मॉडुलन के लिए रणनीति-सेल प्रतिक्रियाओं मुख्य रूप से कळेनासे या फॉस्फेट गतिविधि के विघटन पर निर्भर14,15,16.
हम TCR संकेतन और टी-सेल सक्रियण17मिलाना करने की क्षमता के लिए छोटे रासायनिक यौगिकों की स्क्रीनिंग के लिए एक प्रवाह-cytometry-आधारित परख के एक आवेदन का वर्णन । परख जब मजबूत TCR संकेतों को उजागर thymocytes apoptosis मार्ग को सक्रिय करने की घटना पर टिका है । परख पर्याप्त उत्तेजना शक्ति में परिवर्तन की पहचान के प्रति संवेदनशील है; ट्रांसजेनिक TCR के साथ पेप्टाइड/MHC tetramers के साथ thymocytes व्यक्त करने के साथ बढ़ती समानता caspase में एक इसी वृद्धि के परिणामस्वरूप सक्रियण-अपोप्तोटिक प्रतिक्रिया5के एक उपाय के रूप में इस्तेमाल किया । स्क्रीन के लिए, हम कळेनासे अवरोधकों की एक पुस्तकालय का इस्तेमाल किया और मजबूत TCR संकेतों के लिए thymocyte प्रतिक्रिया मिलाना करने की क्षमता का आकलन.
कई प्रवाह-cytometry-आधारित या प्रतिदीप्ति रिपोर्टर-आधारित रणनीतियाँ विभिन्न टी-सेल सबसेट में परिधीय सक्रियण phenotypes का एक वर्गीकरण का उच्च-प्रवाह स्क्रीनिंग के लिए वर्णन किया गया है । इस तरह की रणनीतियों आनुवंशिक फ्लोरोसेंट पत्रकारों का उपयोग करने के लिए समय और टी के परिमाण-सेल सक्रियकरण18, साइटोटोक्सिक टी के एक readout के रूप में दानेदार का उपयोग सेल गतिविधि19,20, और का विश्लेषण शामिल सेलुलर सिग्नलिंग में शामिल विभिन्न प्रोटीन्स की फास्फारिलीकरण21.
स्क्रीनिंग परख यहां प्रस्तुत सफलतापूर्वक यौगिकों कि TCR संकेतन मार्ग के विहित अणुओं को बाधित की पहचान करने में सक्षम है, के रूप में अच्छी तरह के रूप में क्षमता, TCR संकेत पर निरोधात्मक प्रभाव के साथ उपंयास यौगिकों । उदाहरण के लिए, हम नए यौगिकों को प्रभावित करने के रूप में GSK3β और Hsp90 के अवरोधकों की पहचान की टी-सेल प्रतिक्रियाओं17. परख अवरोधकों कि संकेत transduction के साथ हस्तक्षेप, अपोप्तोटिक प्रतिक्रिया में कमी के कारण, TCR-सेलुलर विषाक्तता पर अवरोधकों के स्वतंत्र प्रभाव से भेद करने में सक्षम है । apoptosis के प्रेरण के अलावा, हम भी CD69 के विनियमन और सक्रियण के मार्कर के रूप में TCR downregulation उपाय । के रूप में TCR संकेत नेटवर्क जटिल हैं, एकाधिक readouts का उपयोग एक ही मार्ग पर विशिष्ट प्रभाव के साथ अणुओं की खोज की संभावना बढ़ सकती है । यहां, हम भी एक उच्च प्रवाह cytometric विश्लेषण के लिए तैयार करने में कोशिकाओं के धुंधला के दौरान मूल प्रोटोकॉल के लिए विकल्प के रूप में एक केंद्रापसारक-स्वतंत्र प्रोटोकॉल का उपयोग परिचय । इस पत्र में वर्णित परख कळेनासे अवरोधकों की एक छोटी सी यौगिक पुस्तकालय का उपयोग करता है, लेकिन सिद्धांत रूप में, यह उच्च प्रवाह स्क्रीनिंग के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । विकल्प के पुस्तकालय भी अवरोधकों या अंय अणुओं की एक किस्म को शामिल कर सकते हैं ।
यहां प्रस्तावित स्क्रीनिंग की रणनीति छोटे-अणु अवरोधकों की क्षमता का मूल्यांकन करने के लिए उत्तेजना के बाद thymocytes में अपोप्तोटिक प्रभाव को दबाने के लिए, टी सेल सक्रियण के अधिक पारंपरिक मार्कर के अलावा-CD69 और TCR downregulation . अतिरिक्त मार्कर भी अलग thymocyte सबसेट३२के विश्लेषण को सक्षम करने के लिए शामिल किया जा सकता है । वर्तमान परख का एक दिलचस्प पहलू तथ्य यह है कि अवरोधकों कि TCR भी apoptosis की प्रेरण, और TCR के अंतर को उजागर-स्वतंत्र प्रभाव अवरोधकों सेल मौत उत्प्रेरण पर हो सकता है में बाधा उत्पंन करना होगा में निहित है । इसके अलावा, एक प्रवाह cytometry आधारित परख अलग सक्रियण मार्करों के रूप में एकाधिक readouts के उपयोग की अनुमति देता है, जो TCR संकेतन के अलग अलग शाखाओं पर अवरोधकों के प्रभाव की रिपोर्ट सकता है । मामले में यहां प्रस्तुत है, वहां अवरोधकों कि caspase के एक अंतर अवरोध-3 सक्रियण और CD69 विनियमन दिखाया गया । कुछ यौगिकों ऐसे प्रोटीन संश्लेषण या vesicular तस्करी के रूप में साफसफाई कार्यों को प्रभावित कर सकते हैं, क्योंकि यह डी नोवो संश्लेषित मार्करों (जैसे, CD69) पर नहीं posttranslational पर प्रभाव का पालन करने के लिए आश्चर्य की बात नहीं है संशोधन (जैसे, caspase के proteolytic सक्रियण-3)।
के रूप में परख यहां प्रस्तुत एक readout के रूप में apoptosis उपाय है, यह जरूरी है कि अवरोधकों के अव्यक्त विषाक्त प्रभाव परिणाम अस्पष्ट नहीं है । उदाहरण के लिए, स्क्रीन में, हम 1 एनएम से परे staurosporine पतला नहीं था, इसके बावजूद यह अभी भी है कि एकाग्रता में कोशिकाओं को विषाक्त किया जा रहा है । प्रतिनिधि परिणाम staurosporine के साथ समझौते में है एक अनेक कळेनासे अवरोध करनेवाला जा रहा है और apoptosis३३के एक उत्प्रेरण । विषाक्त सांद्रता के लिए परीक्षण यौगिकों के एक पर्याप्त कमजोर पड़ने के बिना, यह संभावित हिट को नजरअंदाज करने के लिए संभव है.
यहां विस्तृत स्क्रीनिंग रणनीति उच्च प्रवाह स्क्रीनिंग के लिए thymocytes की पर्याप्त संख्या प्राप्त करने के साथ जुड़े जटिलताओं के कारण मनुष्यों पर लागू करने के लिए मुश्किल होगा । हालांकि, यह बाल चिकित्सा कार्डियक बायोप्सी३४,३५ या से भ्रूण३६,३७से मानव थाइमस नमूने प्राप्त करने के लिए संभव है । बहरहाल, TCR संकेत रास्ते और संकेत प्रोटीन के एमिनो एसिड दृश्यों के रूप में मोटे तौर पर चूहों और मनुष्यों के बीच संरक्षण कर रहे हैं, thymocyte परख एक उपयोगी प्रारंभिक स्क्रीनिंग रणनीति प्रदान करता है, और किसी भी इस माउस का उपयोग परख के साथ प्राप्त परिणाम thymocytes, तो प्राथमिक मानव लिम्फोसाइटों में सत्यापित किया जा सकता है ।
पारंपरिक केंद्रापसारक के एक सीमा निर्भर प्रोटोकॉल कोशिका हानि की संभावना से संबंधित है, जो प्रक्रिया है, जो इस तरह के सेल permeabilization और केंद्रापसारक के रूप में कदम शामिल है की multistep प्रकृति के लिए जिंमेदार ठहराया जा सकता है । प्रत्येक केंद्रापसारक और निलंबन कदम अनिवार्य रूप से कोशिकाओं के नुकसान में परिणाम है । हालांकि इस तरह के घाटे के नमूनों की एक सीमित संख्या में शामिल अध्ययन के लिए महत्वपूर्ण नहीं हो सकता है, यह समस्याओं जब उच्च प्रवाह स्क्रीनिंग में लागू किया, विशेष रूप से परख प्रारूप ९६ से प्रगति-३८४-१५३६ के लिए-अच्छी तरह से कर सकते हैं । एक तरह से इस समस्या को दरकिनार सेल के उपयोग के माध्यम से है-पारगंय फ्लोरोसेंट caspase सेंसर३८ कि caspase सक्रियण का पता लगाने के सक्षम है जबकि सेल permeabilization और कई बहाकर5की जटिलताओं से परहेज । वैकल्पिक रूप से, लामिना प्रवाह द्वारा कोशिकाओं को धोने के एक केंद्रापसारक-स्वतंत्र विधि को रोजगार सेल नुकसान को कम करने के लिए भी संभव है । एक दीवार से कम प्लेट के साथ संयोजन के रूप में एक स्वचालित थाली धोने स्टेशन के साथ, कोशिकाओं को एक केंद्रापसारक के उपयोग के बिना लामिना प्रवाह से धोया जाता है । रिएजेंट के घातीय कमजोर पड़ने के लिए अनुमति देता है की पूरी तरह से और कुशल कोशिकाओं के धोने से कम 3 मिनट, जो केंद्रापसारक धोने के दो दौर के लिए एक समकक्ष कमजोर पड़ने का प्रतिनिधित्व करता है । बाहरी केंद्रापसारक के कारण तनाव के बिना, कोशिकाओं को और अधिक व्यवहार्य है और कोशिका हानि कम से अधिक कर रहे हैं ।
हम भी ९६ में thymocytes संवर्धन के बाद स्वचालित प्लेट वाशिंग स्टेशन का उपयोग करने की संभावना का पता लगाया-अच्छी तरह से U-नीचे प्लेटों और, भी, सीधे दीवारों कम स्वचालित प्लेट वाशिंग स्टेशन के साथ संगत प्लेटों में कोशिकाओं की संवर्धन । दीवार कम प्लेटों में कोशिकाओं के संवर्धन सभी केंद्रापसारक कदम के उंमूलन और प्लेटों में एक नमूना हस्तांतरण के लिए की आवश्यकता को नष्ट करने से कम सेल नुकसान सक्षम होना चाहिए । आम तौर पर, तीन अलग प्रोटोकॉल दोनों उत्तेजना दक्षता और धुंधला में तुलनीय हैं । स्वचालित वाशिंग स्टेशन स्वचालन, गति और दक्षता का लाभ प्रदान करता है, जो उच्च-प्रवाह विश्लेषण के लिए आसान बनाता है । इसके अलावा, वृद्धि हुई स्वचालन के साथ, धोने कदम बाहर तेजी से किया जा सकता है, और प्रयोगों या प्रयोगकर्ता के बीच एक बड़ी निरंतरता है । हालांकि, वाशिंग स्टेशन कुछ कमियां हैं: वाशिंग बफ़र्स के बड़े खंड वॉशर भड़काना के लिए आवश्यक हैं (बफर परिवर्तन के प्रति १५० मिलीलीटर, जिनमें से ५० मिलीलीटर धोने के लिए प्रयोग किया जाता है); छोटी मात्रा की प्लेट के कुओं के बीच सीमित विभाजन के कारण कुओं के किसी भी पार संदूषण से बचने के लिए प्लेट हैंडलिंग करते समय अतिरिक्त देखभाल की जरूरत है; आवश्यक धोने के बाद कुओं में 25 µ एल के अवशिष्ट बफर एक उच्च 1x से अधिक एकाग्रता में तैयार एजेंट का उपयोग करें । के लिए अवशिष्ट मात्रा और प्लेट की सीमित मात्रा क्षमता, एक गौण ७० µ l से १५० µ एल के लिए गर्मी की मात्रा का विस्तार करने के मुद्दों का पता जोड़ा जा सकता है, पारंपरिक प्रोटोकॉल की गोद लेने की सुविधा । जबकि स्वचालित प्लेट हैंडलिंग सिस्टम वर्तमान में उपलब्ध हैं, वे लामिना वॉश सिस्टम है, जो की एक छोटी इकाई है की तुलना में एक महत्वपूर्ण पदचिह्न है ~ 1 घन फुट (~ ०.०२८ एम3) । इसके अलावा, स्वचालित प्लेट हैंडलिंग सिस्टम में केंद्रापसारक के एकीकरण चुनौतीपूर्ण है, सेल धोने में उनके उपयोग सीमित । वहां वर्तमान में कोई अंय केंद्रापसारक-स्वतंत्र सेल वाशिंग उपकरण उपलब्ध हैं, जहां तक हम जानते हैं ।
स्क्रीनिंग रणनीति यहां प्रस्तुत छोटे अणुओं की पहचान करने में सक्षम है, और उनके कथित लक्ष्य kinases, कि TCR संकेतन और टी सेल सक्रियण प्रभावित करते हैं । पुस्तकालय यहां इस्तेमाल मुख्य रूप से छोटे kinases के अणु अवरोधकों शामिल है और संभावित दिलचस्प हिट के एक नंबर उत्पंन करने में सक्षम था । प्रोटोकॉल भी आसानी से अंय एंजाइम वर्गों के अवरोधक पुस्तकालयों या छोटे अणुओं के अंय प्रकार के लिए लागू किया जा सकता है, साथ ही साथ अंय यौगिकों के पुस्तकालयों के लिए (जैसे, विभिंन अणुओं) । प्रोटोकॉल का उपयोग अंय सेल प्रकारों, जैसे कि परिधीय T लिम्फोसाइटों या अमर कोशिकाओं के रूप में भी किया जा सकता है, जिसमें ट्रांसजेनिक TCRs या ले जाने वाले रिपोर्टर सिस्टम शामिल हैं । की पहचान और निस्र्पक टी के नए मध्यस्थों-सेल संकेतन मार्ग के हमारे ज्ञान में सुधार और भी प्रतिरक्षा रोगों में लक्षित चिकित्सा के विकास में सहायता कर सकते है13,14,15, 16. सभी में, यह अध्ययन टी के मध्यस्थों का पता लगाने के लिए उपलब्ध विकल्पों की सीमा के लिए कहते हैं, उच्च प्रवाह जांच परख के द्वारा संकेत सेल ।
The authors have nothing to disclose.
यह काम सिंगापुर स्वास्थ्य मंत्रालय के राष्ट्रीय आयुर्विज्ञान अनुसंधान परिषद, NMRC CBRG15may017, और सिंगापुर शिक्षा मंत्रालय, २०१४-टी 2-1-136 (N.R.J.G.) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था ।
RPMI | HyClone | SH30027FS | |
FBS | HyClone | SH3007103 | |
L-Glutamine | HyClone | SH3003401 | |
Sodium pyruvate | HyClone | SH3023901 | |
Penicillin/Streptomycin | HyClone | SV30010 | |
b-mercaptoethanol | Sigma Aldrich | 516732 | |
10X PBS | Vivantis | PB0344 – 1L | |
Kinase Screening Library (96-Well) | Cayman Chemical | 10505 | Exact contents of the library may vary |
DMSO | Sigma Aldrich | D2650 | |
Dexamethasone | Sigma Aldrich | D4902 | |
anti-CD3/CD28 beads | Thermo Fisher Scientific | 11452D | |
FITC Active Caspase-3 Apoptosis Kit | BD Pharmingen | 550480 | Contains Fixation/Permeabilisation buffer, 10X Perm/Wash buffer and anti-caspase 3 antibody |
DA-Cell Washer | CURIOX | HT1000 | |
96-well DA-Cell Plate | CURIOX | 96-DC-CL-05 | |
Antibodies | |||
CD3e | BioLegend | 100236 | |
TCRb | BD Biosciences | 553174 | |
CD4 | BD Biosciences | 740007 | |
CD8 | BD Biosciences | 563786 | |
CD69 | eBioscience | 25-0699-42 | |
Inhibitors | |||
TG003 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PKC 412 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Doramapimod | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Paclitaxel | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Erlotinib | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Necrostatin-5 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
NVP-BEZ235 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Phthalazinone pyrazole | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AG-879 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
1-NA-PP1 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Torin 1 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Bisindolylmaleimide II | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
BIBF 1120 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SMI-4a | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Bisindolylmaleimide XI (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10657 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AS-703026 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Chelerythrine chloride | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Tunicamycin | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
GSK 1059615 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Ruxolitinib | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Necrostatin-1 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SB 505124 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
INK128 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Canertinib (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SB 431542 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PD 173074 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Valproic Acid (sodium salt) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PD 0325901 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SB 203580 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
VX-702 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Emodin | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CHIR99021 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
BIO | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Imatinib (mesylate) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Sunitinib Malate | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Gefitinib | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PP2 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
3-Methyladenine | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Bisindolylmaleimide I | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Bisindolylmaleimide IV | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Bisindolylmaleimide V | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
NSC 663284 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
D 4476 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
NU 7026 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
H-9 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Indirubin-3'-monoxime | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
KN-62 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
KN-93 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CGP 57380 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Iso-Olomoucine | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
(S)-Glycyl-H-1152 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Bisindolylmaleimide VIII (acetate) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
ST638 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SU 6656 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
LY364947 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SB 203580 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10621 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
YM-201636 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
ZM 447439 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AS-041164 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
NVP-AEW541 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PP242 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
ABT-869 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10622 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
17β-hydroxy Wortmannin | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10626 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SU 6668 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10572 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
N,N-Dimethylsphingosine | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
LY294002 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
U-0126 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Staurosporine | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
KN-92 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AS-605240 (potassium salt) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
O-1918 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Y-27632 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Leelamine | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PD 98059 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PD 169316 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
TGX-221 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
(S)-H-1152 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AS-605240 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
D-erythro-Sphingosine C-18 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
OSU03012 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
JNJ-10198409 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Leelamine (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Arachidonic Acid Leelamide | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Lauric Acid Leelamide | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AS-252424 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10505 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PI-103 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PIK-75 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Sphingosine Kinase Inhibitor 2 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Piceatannol | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SC-1 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
(R)-Roscovitine | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
BAY-43-9006 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10561 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
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PI3-Kinase α Inhibitor 2 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
ML-9 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Triciribine | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Erbstatin Analog | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Kenpaullone | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Olomoucine | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
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AG-825 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
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SB 216763 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SB 415286 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
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H-8 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
LFM-A13 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SC-514 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Apigenin | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AG-18 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10554 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
DRB | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
RG-13022 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
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AG-490 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
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AG-99 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AG-213 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
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Lavendustin C | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
ZM 336372 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
5-Iodotubercidin | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SB 202190 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10571 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Nilotinib | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
SP 600125 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
L-threo-Sphingosine C-18 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
H-89 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
HA-1077 (hydrochloride) | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AG-370 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Wortmannin | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
AG-1296 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
KT 5823 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
Janex 1 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10574 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10575 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10576 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
NH125 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
TWS119 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
NSC 210902 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10577 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CAY10578 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
PD 184161 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
CCT018159 | Cayman Chemical | – | From the Kinase Screening Library |
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