Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

Een gedrags testbatterij voor de herhaalde beoordeling van motorische vaardigheden, humeur en cognitie bij muizen

Published: March 2, 2019 doi: 10.3791/58973
Automatic Translation
1,2,3, 3, 3
1Nanjing Key Laboratory of Pediatrics, Children's Hospital of Nanjing Medical University, 2Nanjing Key Laboratory of Pediatrics, Nanjing Medical University, 3Laboratory of Neurodegenerative Disease, Li Ka Shing Faculty of Medicine, University of Hong Kong, Pokfulam, Hong Kong Special Administrative Region (HK SAR)

Summary

Een uitgebreide gedrags testbatterij van motorische vaardigheden, stemming — met inbegrip van sociale interactie, depressie en angst — en cognitie is ontworpen voor de herhaalde beoordeling van neurodegeneratie-gerelateerde gedragsveranderingen bij muizen.

Abstract

Farmacologische en toxicologische studies in neurodegeneratie vereisen uitgebreide gedragsanalyse in muizen omdat de dysfuncties van de motor en stoornissen in de stemming en cognitie gemeenschappelijk zijn en vaak gedeeld symptomen bij neurodegeneratieve ziekten. Hieronder is een gedragsmatige testbatterij voor motor, humeur en cognitie, die herhaaldelijk kan worden getest in een longitudinale studie. Deze batterij beoordeelt de algehele gedrags fenotype in muizen door het onderzoek van elk domein van gedrag met ten minste twee onafhankelijke goed aanvaarde tests (dat wil zeggen, open-veldtest en rotarod test voor motor functie, sociale interactie test, verhoogde plus doolhof test, en gedwongen zwemmen test voor emotionele functie, en Morris water maze test en roman object herkenningstest voor cognitieve functie). Daarom is deze gevoelige en uitgebreide testbatterij een krachtig hulpmiddel voor de studie van gedrags afwisseling in neurodegeneratie.

Introduction

Neurodegeneratieve ziekten gekenmerkt verwoestende gedrags symptomen, waaronder cognitieve stoornissen, stemming disfuncties zoals angst en depressie, of motor dysfunctie1. De pathogenese van verschillende soorten neurodegeneratieve ziekten is onduidelijk2. Accumulatieve studies blijkt dat genetische en omgevingsfactoren zowel tot de pathogenese van neurodegeneratieve ziekten bijdragen kunnen. Identificatie van de risicofactor van neurodegeneratie vereist gedragsanalyse. Hoewel elk type neurodegeneratieve ziekte haar handtekening gedrags symptoom heeft (bijvoorbeeld de ziekte van Alzheimer [AD] wordt gekenmerkt met cognitieve stoornissen en de ziekte van Parkinson [PD] met motorische dysfunctie). De patiënten manifesteren met de progressie van de ziekte, comorbiditeit van verschillende gedrags afwijkingen3. Bijvoorbeeld vertonen AD patiënten symptomen van een dysfunctie van de stemming in de vergevorderd stadium4,5. PD-patiënten kunnen vooruitgang in PD-gerelateerde dementie en cognitieve stoornissen6te ontwikkelen. Op basis van deze functies, is de gedragsanalyse in neurodegeneratie modellen meestal uitgebreide en herhaalde.

Om dit te bereiken, werd een batterij die klassieke en meest gebruikte gedrags proeven voorzien van een uitstekende geldigheid ontworpen voor gedrags analyses in motor, humeur en cognitie. De motor functie kan worden getest door de open-veld test7,8 en detest rotarod versnellen. Stemming dysfunctie, met inbegrip van sociale stoornissen, depressie en angst, worden meestal gezien in neurodegeneratieve ziekten5. Vandaar bevat deze batterij een test van de sociale interactie voor gezelligheid9, de verhoogde plus doolhof test voor angst10, en de gedwongen duik-test voor depressie11. Cognitieve stoornissen is een van de meest kenmerkende symptomen in neurodegeneratieve ziekten zoals AD en Frontotemporale dementie lobar12. Cognitieve domeinen, met inbegrip van korte-termijn geheugen en het episodische geheugen, zijn vatbaar voor neurodegeneratie13,14,15. De Morris water maze test voor ruimtelijke leren en geheugen,16 en de herkenningstest roman object voor korte-termijn geheugen17 zijn daarom opgenomen in de batterij. Deze tests zijn compatibel met elkaar. De volgorde van de tests is ontworpen om te maximaliseren van gewenning en om interferentie, om verdere verhoging de verenigbaarheid binnen de batterij te minimaliseren. Aangezien elke functie wordt getest door ten minste twee onafhankelijke tests die verschillen in principe en methode, kunnen de resultaten van elke test verder worden gevalideerd. Bovendien, de protocollen van sommige tests worden gemarkeerd voor herhaalde testen, vergemakkelijking van de longitudinale studie van de ontwikkeling van neurodegeneratieve ziekten. Dit gedrag testbatterij bestudeert daarom verschillende subdomeinen van gedragsveranderingen gezien in verschillende stadia van neurodegeneratie terwijl kost een minimum aantal dieren. Deze batterij is gebruikt in een longitudinale studie die de gedragsveranderingen bij jonge volwassenen (3-maand-oude) mannelijke C57BL/6N muizen na respiratoire blootstelling aan silica nanodeeltjes, een beroepsziekte gevaar dat een potentiële risico factor is geëvalueerd neurodegeneratie18. Echter mogelijk andere stammen of modellen, zoals veroudering van muizen en genetisch gemanipuleerd muizen, anders dan de jonge C57BL/6N muizen werken. Daarom, Let op eventueel bij het gebruik van deze batterij in deze muizen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de Commissie op het gebruik van levende dieren in onderwijs en onderzoek (CULATR), de Universiteit van Hongkong.

1. algemeen protocol

Opmerking: Deze sectie is gebaseerd op diaken19.

  1. Gedrags kamer setup
    1. Get rid van ongerelateerde stimulatie/afleiding, met inbegrip van directe fel licht op de experimentele apparatuur, geur, geluid en andere irrelevante dieren, in de gedragsmatige kamer (die moet worden ongeveer 10 m2 met verstelbare verlichting en, bij voorkeur, hebben een wachtkamer).
      Opmerking: Aangezien de muis een nachtelijke dier is, verlichting onder 15 lux in de open-veld test, kon roman object herkenningstest sociale interactie test minimaliseert de interferentie/stress van het licht en helpen van de muis te concentreren op de test.
    2. De camera voor video-opname van ten minste 1,5 m boven de vloer, om ervoor te zorgen dat het uit het zicht van de testen muis instellen.
  2. Huisvesting en gewenning
    1. Groep-huis de muizen in een dierlijke eenheid onder observatie (bijvoorbeeld groepshuisvesting niet meer dan vier volwassen muizen).
      Opmerking: Hier, 3-maanden oude mannelijke C57BL/6N muizen werden gebruikt en in een 1144B kooi waren gehuisvest. Zieke, gewonde of ernstig gestrest muizen uitsluiten. Ervaringen van honger, dorst of gepest invloed kunnen zijn op de prestaties van de muis.
    2. Regelen voor de dezelfde dierlijke handler voeren alle gedrags proeven, om te verminderen variabiliteit. Uitvoeren van het vervoer, behandeling van, en experimenteren tijdens de lichte cyclus van 7:00 uur tot 7:00 pm Indien mogelijk, regelen alle andere handelingen, zoals het beheer van alle drugs/toxine (bijvoorbeeld intranasale toediening van silica nanodeeltjes) of kooi-reiniging, na de test.
    3. Hernoemen de kooien met willekeurige getallen te blind de experimentator vóór elk experiment. Koeien de muizen aan de experimentele omgeving in de gedragsmatige kamer voor 15 tot 30 min in hun huis kooien. Houd de home kooien in de gedrags kamer tijdens het hele experiment.
    4. Voordat u het experiment start, zet u een nonexperimental C57BL/6N muis in het apparaat, zodat de experimentele voorwaarde voor de eerste muis hetzelfde als de rest is. Vervolgens, schoon het apparaat als volgt: verwijderen van de urine en ontlasting met een schoon papieren handdoek, schoon het experimentele apparaat met leidingwater en vervolgens de dekking van de geur achtergelaten door de muis door het apparaat af te vegen met een papieren handdoek licht gespoten met 70% ethanol.
    5. Vragen om te minimaliseren van de afleiding veroorzaakt door de experimentator, de experimentator te verlaten de gedrags kamer tijdens video-opname, of achter het gordijn blijven tijdens de Morris water maze test.
  3. Gedrags test regeling
    1. Schik de gedrags test in de volgorde zoals aangegeven in figuur 1A. Plan voor het uitvoeren van de tests gespreid door 24 h, met uitzondering van de verhoogde plus doolhof test.
      Opmerking: Aangezien de hele procedure tot 2 weken vereist, vereenvoudiging van de batterij door te kiezen onder soortgelijke proeven voor toepassing in een acute of op korte termijn studie.
      Let op: De 2 dag open-praktijktest zorgt voor juiste gewenning voor het nieuwe object erkenning test. Test de gedwongen zwemmen test duren omdat het kan leiden tot stress in C57BL/6N muizen.

2. BehavioralTest Protocol

  1. Open-veldtest8,18,19,20
    1. Voor het uitvoeren van de test van de open-veld in een 60 cm (lengte [L]) x 60 cm (breedte [W]) x 40 cm (hoogte [H]) niet-transparante witte kunststof arena.
      Opmerking: Het gebruik van meerdere arenas kan verhogen de doorvoer van de test.
    2. De camera-opname te starten en zachtjes zet de muis naast het midden van een muur van de arena, geconfronteerd met dat dezelfde muur. Record het gedrag van de muis voor 10 minuten vóór het terug te zenden naar de kooi. Reinig het apparaat zoals beschreven in stap 1.2.4.
      Opmerking: Ook kan het beginpunt in de open-veld test het midden van de arena. Wees consistent onder de muizen.
    3. Herhaal totdat alle de muizen klaar bent met het protocol. Tegenwicht bieden aan de testen volgorde tussen groepen.
    4. Voer de data-analyse als volgt.
      1. Verdeel de arena in de vier rechthoeken, met vier vierkanten (denkbeeldig raster) op het computerscherm. Om te beoordelen motorische functie, het aantal lijnen doorkruist door de muis in de arena-19.
        Opmerking: De definitie van "crossing een lijn" is wanneer beide hind ledematen doorkruisen. Deze definitie geldt ook voor de verhoogde plus doolhof test.
      2. Het meten van de tijd doorgebracht in het centrum als een indicator van angst. Het centrale gedeelte is de vier pleinen in het centrum van de arena.
        Opmerking: Extra parameters, zoals het fokken (beide voorste poten van de grond, met de voorste poten tegen een muur of staande), latency eerste achterzijde, en grooming en bevriezing geven de emotionaliteit van de muis.
      3. Ook gebruiken een tracking-software, zoals in detail beschreven door Seibenhener en Wooten8, voor het meten van de afgelegde afstand, de snelheid en de tijd doorgebracht in het centrum-gebied.
  2. Versnelde rotarod test18
    1. De 3-daagse opleiding van de versnelde rotarod test vóór elke behandeling van drugs of toxine/modeling/begin van de ziekte en de motor functie test voor 1 dag, zoals gepland in figuur 1Auitvoeren
      Opmerking: De muis ontvangt drie proeven per dag tijdens de training en testen. Elk proces begint met de rotatie van de staaf en eindigt met de daling van de muis.
    2. Plaats het apparaat van de rotarod op de Bank in de gedragsmatige kamer. Vermijd directe verlichting aan de apparatuur. Het programma van de apparatuur als vanaf 4 rpm en versnellen tot 40 TPM binnen 5 min.
    3. In elk afzonderlijk experiment, zet u de muis op de statische staaf, geconfronteerd met de muur van de machine. Start het apparaat wanneer de muis wordt afgewikkeld. Het apparaat stoppen zodra de muis druppels en opnemen van de tijd van de muis op de staaf. Onmiddellijk herhalen voor een ander twee proeven voordat hij terugkeerde van de muis terug naar de kooi.
    4. Herhaal de procedure voor de andere muizen.
    5. Het meten van de gemiddelde tijd doorgebracht op de stang van drie proeven tijdens het testen als u wilt schatten motor functie.
      Opmerking: De gemiddelde tijd op de staaf tijdens de derde dag van de opleiding is de basislijn van motor functie.
  3. Sociale interactie test18
    1. Gebruiken voor de test van de sociale interactie, een open-veld arena met twee identieke transparante kamers (8 cm [L] x 6 cm [W] x 12 cm [H]) op het oppervlak rijggat — en een nieuwe muis (helper) die is een jonge conspecific van hetzelfde geslacht, die heeft geen eerdere contact gehad met de onderwerp muis. Figuur 1B toont de regeling van de procedure. Reinig de arena en de kamers zoals beschreven in stap 1.2.4.
      Opmerking: De nieuwe muis kan een littermate of kooi stuurman van de onderwerp-muis niet. Groep-gehuisvest en gezond is. De nieuwe muis koeien naar de gedrags kamer voor 15 tot 30 min, zoals beschreven in stap 1.2.3.
    2. Afzonderlijk plaats de twee kamers in het midden van de twee tegenoverliggende wanden van de arena. De onderwerp-muis in de arena als beschreven in stap 2.1.2 en getoond in figuur 1B, een verkenning van de 3 min introduceren. De muis van het onderwerp terug naar de kooi en verwijderen van urine of ontlasting in de arena.
    3. De helper gezet in één van de kamers. De onderwerp-muis opnieuw naar de arena en registreert voor 3 min. daarna retour beide muizen aan elk van hun eigen huis kooien. Herhaal de procedures met andere muizen onderwerp zoals hierboven beschreven.
      Opmerking: Tegenwicht bieden aan de kant van de helper of willekeurig toewijzen binnen de groep.
    4. Schatten uit de video, de parameter met een beschrijving van de activiteit van de sociale interactie van de muizen als thelper/tleeg, wat betekent dat de verhouding van interactie met de helper zaal (t-helper) en de lege tijd een (tleeg), of gebruik de erkenning index t-helper/ (t-helper + tleeg).
      Opmerking: Een interactie tussen de muis van het onderwerp en de kamer wordt gedefinieerd als wanneer de neus van de muis is binnen 2 cm van de kamer en die naar het wijst.
  4. Verhoogde plus doolhof test 10
    1. Voeren van de verhoogde plus test op dezelfde dag nadat alle muizen zijn getest in de open-praktijktest doolhof. Reinig het apparaat zoals beschreven in stap 1.2.4.
      Opmerking: De configuratie van de verhoogde plus doolhof is een "+"-vorm. Het heeft twee open armen (30 x 5 cm x 0,5 cm) tegenover elkaar en loodrecht op de twee gesloten armen (30 x 5 x 16 cm) met een center-platform (5 x 5 cm x 0,5 cm). De doolhof is verhoogde 40 cm van de grond.
    2. Plaats de muis op het kruispunt van de open en gesloten armen, geconfronteerd met de open arm die is tegengesteld aan de experimentator (Figuur 1 c). Record het gedrag voor 5 min voordat hij terugkeerde van de muis naar de kooi. Herhaal tot alle muizen zijn getest.
      Opmerking: De doolhof met haar gezicht naar de open arm in te voeren kan verhoging van de muis exploratie van de open arm.
    3. Meten van de tijd de muis in de open armen (topen) en in de armen gesloten (tsluit) op basis van de video: topen/tsluiten geeft het niveau van angst.
  5. Gedwongen zwemmen test11
    1. Het apparaat van de gedwongen duik-test is een cilindervormige tank die is 30 cm hoog en 20 cm in diameter. Vullen van de tank tot 15 cm hoog met leidingwater bij kamertemperatuur (23-25 ° C).
      Opmerking: Vers water voor elke muis gebruiken.
    2. Start de video-opname en zachtjes zet de muis in het water, in het centrum van het apparaat. Record de video voor 6 min alvorens de muis terug in zijn kooi onder infrarood licht.
      Opmerking: De muis niet storen door verdrinking het of verdraaien van zijn staart.
    3. De tijd van de immobiliteit in de laatste 5 min van de opgenomen video te meten. Mobiliteit betekent bewegingen dan die nodig is voor het evenwicht van het lichaam en de hoofd boven water te houden.
  6. Roman Objectherkenning testen17,18
    1. De herkenningstest roman object ingesteld kunnen bevatten van 2 dagen van gewenning, 1 dag van vertrouwd, en 1 dag testen (Figuur 1 d); elke sessie is 10 min per muis, en het intersession-interval is 24 h.
      Opmerking: De gewenning met behulp van de open-veld-test wordt uitgevoerd zoals beschreven in punt 2.1. De muis interageert met twee identieke objecten (oude) in vertrouwd. In de test, de muis samenwerkt met een van de oude voorwerpen en een nieuw object, beide geplaatst op dezelfde plaats als de objecten in de basisopleiding. Het apparaat van de herkenningstest roman object bevat een open-veld arena en twee sets van objecten. Elke set bestaat uit twee identieke objecten (objecten A en A en B en B-objecten). Objecten A en B zijn vergelijkbaar in grootte, maar verschillend in textuur (glas/plastic/papier), vorm (ronde/cubic) en kleur (licht/donker). De objecten worden geur-vrij en groot genoeg voor de muis om te verkennen binnen 10 min. De juiste grootte voor volwassen C57BL/6N muizen is 8 cm hoog en 5 cm breed/in diameter.
    2. Mark de standpunten van de twee objecten in vertrouwd en test, die 5 cm vanaf de zijkant en 7 cm van de bovenkant van de arena.
      Opmerking: Markeer de plaats op de avond vóór de vertrouwd om te voorkomen dat de geur van de markering.
    3. In de basisopleiding samenwerkt de muis met een aantal identieke objecten. Reinigen van de arena en de objecten zoals beschreven in stap 1.2.4 vóór het plaatsen van de muis in de arena, tegenover het midden van de muur, zoals aangegeven in Figuur 1 d. Record voor 10 min voordat hij terugkeerde van de muis naar de kooi. Herhaal tot alle van de muizen hebt voltooid en alle kooien terug te naar de dierlijke eenheid keren.
      Opmerking: Tegenwicht vormen voor de volgende objecten gebruikt in vertrouwd binnen de groep te verminderen van bias (bijvoorbeeld muizen No. 1 en 2 Ontdek objecten A en A, en muizen No. 3 en 4 ontdekken objecten B en B; op deze manier, het nieuwe object is object B voor muizen No. 1 en 2 en object A voor muizen Nee. 3 en 4).
    4. Uitvoeren van de test 24 h na de basisopleiding. Gebruik dezelfde procedure als voor de basisopleiding, behalve vervangen door een van de objecten uit een andere set (Figuur 1 d). Herhaal totdat alle de muizen de test hebben uitgevoerd en daarna alle kooien terug te naar de dierlijke eenheid keren.
      Opmerking: Tegenwicht bieden aan de kant van het nieuwe object in de groep te verminderen van bias (bijvoorbeeldmuizen No. 1 en 3 kennismaken met objecten A en B, en muizen No. 2 en 4 op objecten B en A). Op deze manier toont het nieuwe object op de rechterzijde is voor muizen No. 1 en 4, en op de linkerzijde voor muizen nr. 2 en 3. Hier, is de linker kant de linker kant van de experimentator wanneer geconfronteerd met de arena.
    5. Het meten van de tijd die elke muis met het nieuwe object (tnieuwe) en het oude object (toude) apart van de videobeelden in de testfase samenwerkt. Een interactie tussen het dier en het object wordt beschreven in de volgende stap 2.3.4 notitie. Het geheugen van de muis als de voorkeur voor het nieuwe object berekenen = tnieuwe/toude; of tnieuwe/ (nieuwe t + toude).
      Opmerking: tnieuwe/toude gelijk aan 1 of tnieuwe/ (nieuwe t + toude) gelijk aan 0,5 betekent de muis heeft geen voorkeur voor het nieuwe object (dat wil zeggen, geheugen stoornis). De tijd die interactie met objecten in de basisopleiding kan dienen als een controle van het experiment. De totale tijd geeft de activiteit van de exploratie van de muis, en tlinker/tjuiste suggereert ruimtelijke bias.
  7. Morris water maze testen16
    1. Het apparaat als volgt instellen.
      1. Zet het water labyrint, een cirkelvormig zwembad (van 120 cm diameter en 60 cm diep), in het midden van een gedrags kamer en markeer de positie van de doolhof om ervoor te zorgen dat de positie blijft hetzelfde tijdens het hele experiment.
      2. Verdeel de doolhof in vier gelijke imaginaire kwadranten. Hang de visuele aanwijzingen (bijvoorbeeld, cirkel, vierkant, driehoek en pentagon) in het midden van elk kwadrant, 130 cm boven de vloer en 53 cm van de muur van de maze.
        Opmerking: Het doolhof en de cue moeten blijven in dezelfde positie tijdens de gehele proef, zodat de muis nauwkeurige ruimtelijke geheugen vormen kan.
      3. Plaats een platform 25 cm afstand van de muur, in het midden van het vierde kwadrant en markeer de positie. Het platform voor de muis is 10 cm in diameter.
        Opmerking: De positie en de diameter van het platform bepalen de moeilijkheidsgraad van de taak. De dichter is aan de wand van de doolhof, of hoe groter het platform, hoe makkelijker de taak.
      4. Vul het water labyrint met water (met een temperatuur van 23 tot 25 ° C, gekleurde in wit en ondoorzichtige gemaakt door melkpoeder/voedsel whitening poeder) totdat het waterniveau 1 cm hoger is dan het platform is. Breng de muizen in de gedrags ruimte voor 15 tot 30 min van gewenning, zoals aangegeven in stap 1.2.3 en inschakelen van de infrarood licht boven de hokken, die worden gebruikt voor het drogen van de muizen.
        Opmerking: Betrekking hebben op de top van het platform met witte doek en net zodat de muis gemakkelijk kan klim op het. Zorg ervoor dat er geen directe verlichting boven het water.
    2. Voeren de trainingsfase als volgt.
      1. De fase van de opleiding duurt 5 dagen, vier proeven per dag. Semi-willekeurig regelen de uitgangspunten op elke dag zoals aangetoond in de literatuur16. Deze inspanning wordt voorkomen dat de muis tot de oprichting van associatief geheugen, dat de meest voorkomende manier is om het "bedriegen" in de test.
      2. Aan het begin van elke proef, start de video-opname en de muis voorzichtig gestoken door het doolhof.
        Opmerking: Laat niet de muis vallen in de tank en draai haar staart, die extra stress en desoriëntatie kan veroorzaken.
      3. Vraag de experimentator verblijven uit het zicht van de muis en om terug te keren om de muis terug naar haar kooi wanneer een van de volgende gebeurt: (i) de muis niet vinden het platform binnen 60 s; (ii) de muis vindt het platform binnen 60 s en verblijf op het voor 10 s. Omstandigheid (i), vraagt de experimentator plaatst u de muisaanwijzer op het platform en laat het daar blijven voor 10 s.
        Opmerking: Punt ii betekent dat de muis gelegen met succes het platform.
      4. De video stoppen en zet de muis terug in hun kooi onder infrarood licht.
        Opmerking: Handhaven van de lichaamstemperatuur van de muizen is essentieel voor hun prestaties, omdat hypothermie wijst op muizen en invloed kan zijn op de volgende tests.
      5. Herhaal de procedure met een andere muis.
      6. Record de latentie ontsnappen, die de duur van de periode dat de muis in de doolhof doorbrengt, uit het invoeren van het labyrint tot het moment dat het met succes is zoekt gebaseerd op de video, het platform. Als de muis niet kunt het platform of blijft daar voor minder dan 10 vinden s in 60 s, de ontsnapping latentie telt als 60 s. complot de leercurve tegen de trainingsdagen met de gemiddelde ontsnappen latentie per dag.
        Opmerking: De ontsnapping-latentie omvat niet de 10 s doorbrengen op het platform.
    3. De sonde fase als volgt uitvoeren.
      1. Op de zesde dag van de Morris water maze test, instellen het apparaat zoals beschreven in stap 2.7.1., neem een foto van de maze de positie van het platform, en verwijder het platform uit de tank.
      2. Start de video-opname en de muis voorzichtig gestoken in de doolhof in het kwadrant diagonaal tegenover het doel Kwadrant.
      3. Vraag de experimentator om te verblijven uit het zicht van de muis tijdens de 1 min video-opname. Daarna hebben de experimentator nemen de muis uit het doolhof, en zet het terug in hun kooi.
      4. Gebruik de foto genomen bij stap 2.7.3.1. Als een verwijzing naar het meten van de duur van de eventuele overschrijding van het platform. Tijd de duur van die de muis blijft werken in de target-Kwadrant (tdoel), volgens de video. De totale tijd is ttotaal. Meet de voorkeur naar de doel-Kwadrant als tdoel /ttotale.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Deze gedrags testbatterij is ontworpen voor de volledige en geldige gedragsanalyse motor, of stemming, cognitie, die vaak worden getroffen in neurodegeneratie5. Wij hebben deze batterij om te bestuderen van de gedragsveranderingen bij jonge volwassen C57BL/6N muizen na respiratoire blootstelling aan silica nanodeeltjes voor 1 maand en 2 maanden18toegepast. De resultaten bleek dat C57BL/6N muizen blootgesteld aan silica nanodeeltjes verschillende gedragsveranderingen toonde na verschillende blootstelling keer18. Kortom, resultaten in de open-veld (figuur 2A) en de versnellende rotarod test (figuur 2B) aangetoond dat kiezelzuur nanodeeltjes blootstelling niet de functie van het motorische of motor in muizen beïnvloedde, met vermelding van een volledige vermogen van vervullen van de andere tests. Sociale interactie activiteit geraakt na een 1 maand blootstelling aan silica nanodeeltjes (figuur 2C). Gezien angst of depressie zou ook afnemen, gezelligheid, we geanalyseerd gegevens van de open-veld test, verhoogde plus doolhof (figuur 2DE), en de gedwongen zwemmen test (2F figuur), die heeft niet duiden op een eventuele comorbiditeit van angst of depressie op het tijdstip van 1 maand. Een 2 maand blootstelling aan silica nanodeeltjes geresulteerd in angst volgens de resultaten in de verhoogde plus doolhof test (figuur 2E). Een soortgelijke trend werd vertoond in het middengebied duur in de open-veld test (figuur 2D). Cognitieve stoornissen is het ook opgetreden in de Morris water maze test en roman object herkenningstest na 2 maand blootstelling (Figuur 3). Opgemerkt moet worden dat het protocol neerkwam lichtjes verschillend in de twee proeven van de Morris water maze test. Een extra lamp werd toegevoegd in de tweede proef, dus alle de muizen altijd bleef onder de lamp om warm te houden. Vandaar, bleek geen nonperformer in de tweede proef, terwijl twee van de acht muizen werd nonperformers in de test van de sonde in de eerste proef.

We het protocol zo aangepast dat de meeste van de tests in de batterij kan herhaaldelijk worden getest. De sleutel is het handhaven van de motivatie van de tests. Tests als sociale interactie test, roman object herkenningstest en verhoogde plus doolhof test worden gemotiveerd door nieuwheid (dat wil zeggen, een roman van de jonge helper, nieuwe objecten en een nieuwe omgeving, respectievelijk). Door de nieuwigheid in het protocol, toonde de jonge volwassen C57BL/6N muizen een consistente prestaties wanneer opnieuw na 1 maand getest. Volgens onze gegevens, toen ingevoerd om twee verschillende helpers in de twee proeven, muizen consequent toonde een voorkeur meer dan tien keer naar de helper dan de lege vergaderzaal in de sociale interactie testen (figuur 4A). In de roman object erkenning test voorkeur de normale muizen consequent het nieuwe object op het oude object (figuur 4B). Echter, in de verhoogde plus doolhof test, wanneer opnieuw getest in dezelfde omgeving na 1 maand, de exploratie daalde de helft (figuur 4C)10. Theoretisch, jonge volwassen C57BL/6 muizen kunnen worden getest herhaaldelijk in deze tests, zolang de experimentele conditie, met inbegrip van de nieuwheid en de status van de muizen, hetzelfde blijft. We hebben deze proeven elke maand voor maximaal driemaal herhaald in ons lab. Opmerkelijk, de Morris water maze-test kan niet worden getest herhaaldelijk in dezelfde groep van jonge volwassen C57BL/6N muizen als de ervaring aanzienlijk de prestaties verstoort wanneer herhaaldelijk getest. Volgens onze gegevens herinnerde de muizen nog het platform zelfs na 1 maand, tonen correct en op lange termijn ruimtelijke geheugen. Bij het wijzigen van de positie van het platform, leerden de ervaren muizen sneller dan naïef muizen, als ze geleerd hadden de regels en de strategie van het zoeken van de voorafgaande opleiding (Figuur 4 d).

Figure 1
Figuur 1: schema. (A) regeling van de gedrags test van de accu en de schematische percelen van (B) de sociale interactie test, (C) de verhoogde plus doolhof test, en (D) de herkenningstest van het nieuwe object. Afkortingen: R = versnelde rotarod test; VAN = open-veld test; EPM = verhoogde plus doolhof test; NOCH = roman object herkenningstest; SI = sociale interactie test; MWM = Morris water maze test; FST = gedwongen zwemmen test. Het uitgangspunt van de muis in de test wordt aangegeven door de muis in de regeling. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 2
Figuur 2: veranderingen in de motor- en stemmingsstoornissen bij muizen blootgesteld aan silica nanodeeltjes voor 1 maand of 2 maanden, gedetecteerd door de gedrags testbatterij. Muizen werden getest in (A en D) de open veldtest, (B) de rotarod, (C) de sociale interactie test, (E) de verhoogde plus doolhof, en (F) de gedwongen zwemmen test bestaat in de batterij. N = 8, 12 of 20, wat betekent dat elke groep had 8, 12 of 20 muizen, respectievelijk, zoals aangetoond in elk figuur. N = 17-20 betekent elke groep had 20 muizen, met uitzondering van een controlegroep op 1 maand, die bestond uit 17 muizen. In panelen A, Den E, gegevens werden eerst genormaliseerd naar controle op elk tijdstip en, vervolgens, werden geanalyseerd met de tweezijdige Student t-test. De gegevens in het deelvenster B werden geanalyseerd door herhaalde maatregelen two-way ANOVA. De gegevens in de panelen C en F werden geanalyseerd met de tweezijdige Student t-test. Alle data wordt getoond aangezien betekenen ±S.E.M. * en *** p < 0,05 en 0,0001, respectievelijk te betekenen. Deze gegevens zijn eerder gepubliceerd door u et al.18. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 3
Figuur 3: veranderingen in cognitie na wordt blootgesteld aan silica nanodeeltjes voor 1 maand of 2 maanden. Wijzigingen in de muizen van cognitie na wordt blootgesteld aan silica nanodeeltjes voor (A) 1 maand of (E) 2 maanden, gedetecteerd door de roman Objectherkenning test. Veranderingen in de muizen van cognitie na wordt blootgesteld aan silica nanodeeltjes voor (B - D) 1 maand of (F - H) 2 maanden, gedetecteerd door de Morris water maze test. Muizen werden herhaaldelijk getest in de herkenningstest van het nieuwe object. Een andere partij van muizen werd getest in de Morris water maze test op verschillende tijdstippen. N = 6, 8, 12 of 20, wat betekent dat elke groep had 6, 8, 12 of 20 muizen, respectievelijk, zoals aangetoond in elk figuur. In panelen A, C, D, E, Gen H, werden de gegevens geanalyseerd met de tweezijdige Student t-test. De gegevens in de panelen B en F werden geanalyseerd door herhaalde maatregelen two-way ANOVA. Alle gegevens worden weergegeven als bedoel ±S.E.M. * p < 0.05 betekent. Deze gegevens zijn eerder gepubliceerd door u et al.18. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Figure 4
Figuur 4: representatieve gegevens in testen. Representatieve gegevens in proeven, met inbegrip van (A) de sociale interactie test, (B) de roman Objectherkenning test, en (C) de verhoogde plus doolhof test, getest in naïef muizen (trial 1) en herhaaldelijk in dezelfde batch van muizen (trial 2) . (D) de representatieve gegevens van de Morris water maze testen wanneer herhaaldelijk getest. Dit cijfer is gewijzigd van u et al.18. Alle gegevens worden weergegeven als bedoel ±S.E.M. en geanalyseerd met ongepaarde Student t-test. P < 0.001, in vergelijking met trial 1. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Gedragsanalyse van muizen is van cruciaal belang voor neurodegeneratie onderzoek. Terwijl cognitieve functie vaak het meest gevoelige domein van gedrag beïnvloed in neurodegeneratieve ziekten is, is stemming disfunctie, zoals depressie en angst, vaak comorbide. Bovendien, motor functie vaak van invloed is op de interpretatie van de resultaten in sommige tests, zoals de herkenningstest roman object, de verhoogde plus doolhof test en de sociale interactie-test. Op basis van deze gedachten, is een uitgebreide gedrags testbatterij vereist voor een algehele en nauwkeurige evaluatie van het gedrag.

De eerste stap is het kiezen van de juiste tests. Wij opgenomen goed geaccepteerd en klassieke tests, namelijk de open-praktijktest en detest rotarod voor motor functie, de verhoogde plus doolhof test voor angst, de gedwongen duik-test voor depressie, de sociale interactie test voor gezelligheid en de Morris water maze test en de roman Objectherkenning test voor cognitie. Er zijn drie klassieke tests voor angst, namelijk de open-praktijktest, de verhoogde plus test en het donker/licht vak test. Deze tests alle misbruik maken van het conflict tussen de aangeboren nieuwsgierigheid over het nieuwe milieu en de afkeer van het open, verhoogde of fel verlichte veld. Vandaar, muizen zijn niet geconditioneerd door schadelijke stimuli, zoals elektrische schok, predator geur, enzovoort. Echter, overvloedige studies is gebleken dat deze tests slechte intertest betrouwbaarheid, zelfs binnen één laboratorium21 hebben. Wij gebruikt van de open-praktijktest en verheven plus doolhof test voor het analyseren van de angst in muizen in de kortst mogelijke tijd. De open-veld test onderzoekt angst-achtig gedrag naast motorische functie en is ook de gewenning voor het nieuwe object erkenning en sociale interactie test. We kozen voor de verhoogde plus doolhof test omdat er een gevestigde paradigma. Het heeft uitstekende face validiteit (fenomenologische gelijkenis tussen het gedrag in muizen en de symptomen in patiënten), constructvaliditeit (de mate waarop de test de theoretische aannames weerspiegelt), en predictieve validiteit (de juistheid van de testresultaten bij het vertalen van hen voor de mens)10. Als angst de prioriteit was, de onderzoekers kunnen overwegen met inbegrip van het donker/licht-vak testen en uitvoerig analyseren het gedrag in deze tests met meer parameters, zoals de broedperiode frequentie, stretch-bijwonen van gedrag, en ontlasting21. Ten tweede, de resultaten van deze tests kunnen gemakkelijk worden uitgelegd omdat de motivatie van de tests duidelijk zijn, die zijn de aangeboren nieuwsgierigheid naar nieuwheid of water, een eenvoudige taak uitvoeren in een beheersbare aandoening. In tegenstelling tot honger en pretraining, die verschillende niveaus van motivatie bij muizen veroorzaken kan, zijn dit soort van motivatie sterk genoeg voor de meeste van de C57 muis de taak uit te voeren. Ten derde, deze tests moeten een goede compatibiliteit met elkaar, omdat de motivatie niet te stressvol te leiden tot langdurige of zelfs permanente stress, is zoals elektrische schok of voedsel/water ellende kan veroorzaken. Wanhoop proeven, met inbegrip van de gedwongen duik-test en de staart schorsing test, gebruik maken van het principe dat de muis worstelen geeft als gevangen in een wanhopige omgeving. Door het meten van de "tijd van wanhoop", vertellen de proeven hoe depressief de muis is. C57BL/6N muizen meestal Toon 180 s van immobiliteit uit 300 s in deze test11,22. We kozen het gedwongen zwemmen test over de staart schorsing test omdat er relatief minder stressvol wanneer de muis heeft ervaring in het water doolhof van opleiding. Op deze manier, ze zijn aangepast aan water en weet hoe te voorkomen hypothermie na nat. Daarentegen waargenomen we ongeveer 2 g van body weight loss's nachts na de staart schorsing test, met vermelding van grote stress. Niettemin, herhaalde proeven van de gedwongen zwemmen test moeten voorzichtig worden uitgevoerd, en de muizen moeten herstellen voor een langere tijd dan 24 h vóór elke verdere experimenten/offers. Als alternatief kunnen de wetenschappers beschouwen inclusief sacharose voorkeur test, een paradigma op grote schaal gebruikt in stress-geïnduceerde depressie-achtige Anhedonie, in de batterij. Het protocol voor deze test vereist echter dagen van gewenning aan individuele huisvesting23, die mogelijk een prikkel die invloed op de resultaten van andere proeven. Tot slot, de tests hier redelijk doorvoer. Alle tests kunnen worden voltooid binnen 10 min/muis. Bij het verhogen van de hoeveelheid apparatuur, zoals de open-veld arena, de kanalen in de rotarod-test, de tanks in de gedwongen zwemmen-test en de rijstroken in de staart schorsing test, kan het zijn dat ook de doorvoer worden verhoogd. Hoewel de Morris water maze test het moeilijk maakt om het testen van meerdere muizen tegelijk, duurt elk afzonderlijk experiment slechts ~ 60-75 s.

De meest kritieke zorg tijdens het toepassen van de gedragsmatige testbatterij is de interferentie tussen de tests en de stress van frequente behandeling. De negatieve effecten van deze kwesties kunnen geminimaliseerd worden door het verder optimaliseren van de volgorde en het interval tussen het testen. Terwijl het gezond verstand dat de volgorde van de gedragsmatige tests van worden moet de laagste naar de meest stressvolle op de muis, sommige tests in deze batterij als acclimatisering kan worden gebruikt voor de volgende tests en verbeteren van de stabiliteit van de prestaties. Bijvoorbeeld, het uitvoeren van de verhoogde plus doolhof test na de open-praktijktest verhoogt de verkenning van de open arm10. Bovendien, wanneer de muizen zijn getest in de volgorde van open-veld test, roman object herkenningstest en sociale interactie test, ze geleidelijk koeien voor het milieu en de taak, inclusief de gedrags kamer, het open veld en de objecten. Vandaar zijn de muizen onwaarschijnlijk om te manifesteren neophobia7,24,25, wat betekent een ongebruikelijk lage interactie met het nieuwe object/individu tonen, en zijn alle voldoende gericht op de taak. Dit arrangement verlaagt de schommelingen in gegevens van proeven die worden gedreven door de aangeboren nieuwsgierigheid. De Morris water maze test en de gedwongen zwemmen test hebben een sterkere motivatie. Vandaar, de muizen zijn waarschijnlijk worden beïnvloed door de ervaring van de tests. Regelmatig vervoer en goederenbehandeling gedurende de gehele procedure is een andere bron van stress, waarvoor derhalve een correcte afhandeling van de dierlijke en voldoende gewenning. Het is aanbevolen dat het test-interval in de batterij ten minste 24 uur, moet zodat de muizen van de stress van deze stressoren26,27,28 herstellen kunnen. Er zijn echter andere studies die muizen in meerdere tests per dag29getest.

Een andere zorg over de herhaalde beproeving van het gedrag is de invloed van de eerdere ervaringen. De open velden en de versnellende rotarod test kunnen herhaaldelijk worden gebruikt in motor functie analyse. Nieuwigheid gemotiveerde proeven, met inbegrip van de verhoogde plus doolhof test, de herkenningstest van het nieuwe object en de test van de sociale interactie, kunnen herhaaldelijk worden gebruikt wanneer de motivatie is roman in elk proces, dat een nieuwe experimentele omgeving, paren van objecten betekent , of helper, respectievelijk. Zoals blijkt uit de representatieve gegevens, kunnen niet C57BL/6N muizen worden getraind herhaaldelijk in het klassieke protocol van de Morris water maze test zoals zij de zoeken strategie uit ervaring herinnerden.

Deze batterij beoordeelt meerdere domeinen van gedrag. Op deze manier kunnen de resultaten in sommige tests een verwijzing voor de interpretatie van de gegevens van anderen. In de representatieve gegevens in Figuur 1, toen de muizen blootgesteld aan silica nanoparticle voor 1 maand een reductie in de activiteit van de sociale interactie toonde, zou het het fenotype van depressie of angst of het gevolg van een tekort van motor functie. Echter, de resultaten van de motor functie en angst tests aangegeven dat de afname van de sociale interactie primaire, niet later was. Deze batterij bevat ook verschillende tests voor hetzelfde domein van gedrag, met verschillende gevoeligheid en gebruik. Consistente trend/resultaten in deze tests verhogen de betrouwbaarheid van de batterij. Deze regeling houdt echter extra tijd voor de gehele procedure. De korte experiment dat minder dan 1 maand duurt moet gebruiken een vereenvoudigde versie van deze batterij.

Deze gedrags testbatterij is ontworpen om het scherm van het gedrags fenotype getoond in verschillende stadia na blootstelling aan de genetische of milieu risicofactor van neurodegeneratie. Daarom dit protocol alleen maakt een lijst de essentiële uitlezingen van elke test. Het is opmerkelijk dat elke gedrags test heel veel informatie bieden kan; Vandaar, de gebruiker kan het uitvouwen van het protocol voor verder onderzoek. Bijvoorbeeld, onthult spontane activiteit zoals de verzorging, kweek, ontlasting en thigmotaxis in het veld openen emotionaliteit8. Deze gedrag eigenschappen in de verhoogde plus doolhof test kan ook indicatoren van angst10,21. De rotarod test studies motorisch leren de muizen zijn getraind na modellering/ziekte begin/blootstelling aan milieufactoren risico30. De sociale interactie test kan ook sociale geheugen door de invoering van een tweede roman helper na de gezelligheid test9bestuderen. Uitbreiding van de batterij kan dus worden aangepast aan verschillende prioriteiten van de studie. Deze batterij is echter alleen getest bij jonge volwassen C57BL/6N muizen vanwege beperkingen van de tijd. De prestaties van de basislijn van andere stammen of leeftijd C57BL/6 muizen kan afwijken. Bovendien kunnen de transgene neurodegeneratieve muizen modellen gedrags tekorten zoals hypo- of hyperactiviteit vertonen. Vandaar, zij mogelijk niet geschikt voor proeven met een lage motivatie, zoals de herkenningstest van het nieuwe object. Dus verdere moeten optimalisatie gedrags Voordebeoordeling van deze muizen.

Kortom, kunt deze batterij een overtuigend en alomvattend gedragsanalyse van neurodegeneratie in de C57 muis stam. Het is meest geschikt voor neurodegeneratie-gerelateerde longitudinaal onderzoek van de toxiciteit van potentiële risicofactoren/neurotoxine of Geneesmiddelenontwikkeling, die op lange termijn beheer en herhaalde testen vaak kenmerkt.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

De auteurs hebben niets te onthullen.

Acknowledgments

De auteurs bedanken Dr. Cora SW Lai van de School in de Biomedische Wetenschappen, de Universiteit van Hong Kong, voor leningen van de verhoogde plus doolhof test en de afdeling Anesthesiologie van de Universiteit van Hongkong voor de proefinrichting rotarod leningen.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
chambers in social interaction test home made (8 cm (L) x 6 cm (W) x 12 cm (H)), transparant with holes, plastic
cylindrical tanks used in forced swimming test home made 30 cm height, 20 cm diameters, glass
elevated plus maze home made open arms (30 cm x 5 cm x 0.5 cm) ,closed arms (30 cm x 5 cm x 16 cm), center platform (5 cm x 5 cm x 0.5 cm), 40 cm tall. Plastic, nontransparant
IITC Roto-Rod Apparatus IITC life science Inc. 755, series 8
open field arena home made 60 cm (L) x 60 cm (W) x 40 cm (H), plastic, nontransparant
water maze home made 120 cm in diameter, 60 cm deep, steel

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Baquero, M., Martin, N. Depressive symptoms in neurodegenerative diseases. World Journal of Clinical Cases. 3 (8), 682-693 (2015).
  2. Brown, R. C., Lockwood, A. H., Sonawane, B. R. Neurodegenerative Diseases: An Overview of Environmental Risk Factors. Environmental Health Perspectives. 113 (9), 1250-1256 (2005).
  3. Bossy-Wetzel, E., Schwarzenbacher, R., Lipton, S. A. Molecular pathways to neurodegeneration. Nature Medicine. 10, S2-S9 (2004).
  4. Cummings, J. L., Diaz, C., Levy, M., Binetti, G., Litvan, I. I. Neuropsychiatric Syndromes in Neurodegenerative Disease: Frequency and Signficance. Seminars in Clinical Neuropsychiatry. 1 (4), 241-247 (1996).
  5. Levenson, R. W., Sturm, V. E., Haase, C. M. Emotional and behavioral symptoms in neurodegenerative disease: a model for studying the neural bases of psychopathology. Annual Review of Clinical Psychology. 10, 581-606 (2014).
  6. Kehagia, A. A., Barker, R. A., Robbins, T. W. Neuropsychological and clinical heterogeneity of cognitive impairment and dementia in patients with Parkinson's disease. Lancet Neurology. 9 (12), 1200-1213 (2010).
  7. Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E. The Open Field Test. Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. Gould, T. D. , Humana Press. Totowa, NJ. 1-20 (2009).
  8. Seibenhener, M. L., Wooten, M. C. Use of the Open Field Maze to measure locomotor and anxiety-like behavior in mice. Journal of Visualized Experiments. (96), e52434 (2015).
  9. Kaidanovich-Beilin, O., Lipina, T., Vukobradovic, I., Roder, J., Woodgett, J. R. Assessment of social interaction behaviors. Journal of Visualized Experiments. (48), e2473 (2011).
  10. Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nature Protocols. 2 (2), 322-328 (2007).
  11. Can, A., et al. The mouse forced swim test. Journal of Visualized Experiments. (59), e3638 (2012).
  12. Veerappan, C. S., Sleiman, S., Coppola, G. Epigenetics of Alzheimer's disease and frontotemporal dementia. Neurotherapeutics. 10 (4), 709-721 (2013).
  13. Kirova, A. M., Bays, R. B., Lagalwar, S. Working memory and executive function decline across normal aging, mild cognitive impairment, and Alzheimer's disease. Biomed Research International. 2015, 748212 (2015).
  14. Draganski, B., Lutti, A., Kherif, F. Impact of brain aging and neurodegeneration on cognition: evidence from MRI. Current Opinion in Neurology. 26 (6), 640-645 (2013).
  15. Schliebs, R., Arendt, T. The cholinergic system in aging and neuronal degeneration. Behavioural Brain Research. 221 (2), 555-563 (2011).
  16. Vorhees, C. V., Williams, M. T. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nature Protocols. 1 (2), 848-858 (2006).
  17. Leger, M., et al. Object recognition test in mice. Nature Protocols. 8 (12), 2531-2537 (2013).
  18. You, R., et al. Silica nanoparticles induce neurodegeneration-like changes in behavior, neuropathology, and affect synapse through MAPK activation. Particle and Fibre Toxicology. 15 (1), 28 (2018).
  19. Housing Deacon, R. M. husbandry and handling of rodents for behavioral experiments. Nature Protocols. 1 (2), 936-946 (2006).
  20. Poon, D. C., et al. PKR deficiency alters E. coli-induced sickness behaviors but does not exacerbate neuroimmune responses or bacterial load. Journal of Neuroinflammation. 12, 212 (2015).
  21. O'Leary, T. P., Gunn, R. K., Brown, R. E. What are we measuring when we test strain differences in anxiety in mice? Behavior Genetics. 43 (1), 34-50 (2013).
  22. Can, A., et al. The tail suspension test. Journal of Visualized Experiments. (59), e3769 (2012).
  23. Angoa-Perez, M., et al. Mice genetically depleted of brain serotonin do not display a depression-like behavioral phenotype. ACS Chemical Neuroscience. 5 (10), 908-919 (2014).
  24. Blazquez, G., Canete, T., Tobena, A., Gimenez-Llort, L., Fernandez-Teruel, A. Cognitive and emotional profiles of aged Alzheimer's disease (3xTgAD) mice: effects of environmental enrichment and sexual dimorphism. Behavioural Brain Research. 268, 185-201 (2014).
  25. Gimenez-Llort, L., et al. Modeling behavioral and neuronal symptoms of Alzheimer's disease in mice: a role for intraneuronal amyloid. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 31 (1), 125-147 (2007).
  26. Lad, H. V., et al. Behavioural battery testing: evaluation and behavioural outcomes in 8 inbred mouse strains. Physiology & Behavior. 99 (3), 301-316 (2010).
  27. Powell, T. R., Fernandes, C., Schalkwyk, L. C. Depression-Related Behavioral Tests. Current Protocols in Mouse Biology. 2 (2), 119-127 (2012).
  28. Paylor, R., Spencer, C. M., Yuva-Paylor, L. A., Pieke-Dahl, S. The use of behavioral test batteries, II: effect of test interval. Physiology & Behavior. 87 (1), 95-102 (2006).
  29. Lee, K. M., Coehlo, M., McGregor, H. A., Waltermire, R. S., Szumlinski, K. K. Binge alcohol drinking elicits persistent negative affect in mice. Behavioural Brain Research. 291, 385-398 (2015).
  30. Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. Journal of Neuroscience Methods. 189 (2), 180-185 (2010).

Tags

Gedrag kwestie 145 neurodegeneratie motor sociale interactie angst depressie cognition
Een gedrags testbatterij voor de herhaalde beoordeling van motorische vaardigheden, humeur en cognitie bij muizen
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

You, R., Liu, Y., Chang, R. C. C. A… More

You, R., Liu, Y., Chang, R. C. C. A Behavioral Test Battery for the Repeated Assessment of Motor Skills, Mood, and Cognition in Mice. J. Vis. Exp. (145), e58973, doi:10.3791/58973 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter