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सामाजिक Wasp कालोनियों की उत्पादकता का मूल्यांकन (Vespinae) और पारंपरिक जापानी Vespula Wasp शिकार तकनीक के लिए एक परिचय

Published: September 11, 2019 doi: 10.3791/59044
Automatic Translation
1,2
1Tajimi Senior High School, 2Faculty of Applied Biological Science, Gifu University

Summary

इस methodological कागज कंघी के प्रति 100 कोशिकाओं meconia की संख्या की जांच करके एक सामाजिक wasp कॉलोनी की उत्पादकता का मूल्यांकन करता है, वयस्कों की कुल संख्या का अनुमान लगाने के लिए wasps का उत्पादन किया. संबंधित वीडियो का वर्णन करता है कि कैसे Vespula wasp घोंसले, शौकिया wasp चेज़र द्वारा विकसित एक विधि के लिए खोज करने के लिए.

Abstract

वेस्पिन wasps के लिए, कॉलोनी उत्पादकता आम तौर पर लार्वा कोशिकाओं की संख्या की गणना से अनुमान लगाया जाता है। यह पेपर एक बेहतर विधि प्रस्तुत करता है जो शोधकर्ताओं को उत्पादित वयस्कों की संख्या का अधिक सटीक अनुमान लगाने में सक्षम बनाता है, प्रत्येक कंघी में वयस्कों में पिल्ले लार्वा द्वारा कोशिकाओं में छोड़ दिया गया मल (सेल में छोड़ दिया मल) प्रत्येक कंघी में। इस विधि से पहले या कॉलोनी पतन के बाद लागू किया जा सकता है(यानी,सक्रिय या निष्क्रिय घोंसले में). कागज भी वर्णन करता है कि कैसे जंगली Vespula wasp कालोनियों का पता लगाने के लिए "झटबंद" wasp baits और उन्हें इकट्ठा wasp का पीछा करते हुए, एक विधि पारंपरिक रूप से मध्य जापान में स्थानीय लोगों द्वारा प्रदर्शन का उपयोग कर (के रूप में संबद्ध वीडियो में सचित्र). Vespula पीछा विधि वर्णित कई फायदे हैं: यह एक बिंदु है जहां forager घोंसले के लिए वापस उड़ान से पीछा फिर से शुरू करने के लिए आसान है खो गया था, और यह चिह्नित wasps के रूप में घोंसला स्थान इंगित करने के लिए आसान है अक्सर घोंसले में अपना झंडा खो प्रवेश. कॉलोनी उत्पादकता का आकलन और घोंसले इकट्ठा करने के लिए इन तरीकों सामाजिक wasps का अध्ययन शोधकर्ताओं के लिए मूल्यवान हो सकता है.

Introduction

हर प्रजाति संभव रणनीतियों की एक विशाल सरणी के बीच अस्तित्व और प्रजनन के लिए एक इष्टतम रणनीति विकसित करने के लिए सोचा है। प्राकृतिक चयन में, लक्षण है कि एक व्यक्ति की प्रजनन सफलता को अधिकतम के साथ व्यक्तियों को और अधिक वंश छोड़ देंगे (और जीन) अगली पीढ़ी के लिए. इसलिए, एक व्यक्ति द्वारा उत्पादित वंश की संख्या व्यक्ति के रिश्तेदार विकासवादी फिटनेस का एक संकेत के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है. एक दिए गए पारिस्थितिक संदर्भ में, वैकल्पिक व्यवहार रणनीतियों के सापेक्ष उत्पादित संतानों की संख्या की तुलना शोधकर्ताओं को फिटनेस1के अनुकूलन के लिए सबसे अच्छी रणनीति की भविष्यवाणी करने में मदद कर सकती है।

सामाजिक Hymenoptera (जैसे wasps, मधुमक्खियों, और चींटियों के रूप में) तीन अलग अलग जातियों, जो कार्यकर्ता (स्टीरेमहिला), रानियों (स्त्री), और पुरुषों1हैं की एक प्रणाली है. केवल नई रानियों (स्त्री) और पुरुषों सामाजिक Hymenoptera में फिटनेस की ओर गिनती. कामगार उत्पादन सीधे फिटनेस में योगदान नहीं करता है क्योंकि कामगार निष्फल है। दूसरी ओर, एक रानी है कि एक उच्च कॉलोनी उत्पादकता का उत्पादन कर सकते हैं (जैसे कुल कोशिकाओं या एक भारी घोंसले की एक उच्च संख्या के रूप में) सामाजिक Hymenoptera में एक उच्च फिटनेस है माना जाता है, वास्तव में उत्पादित नई रानियों और पुरुषों की संख्या की परवाह किए बिना (देखें , उदा,टिब्बट्स और रीव2 और मैटिला और सीले3) । सामान्य तौर पर, यह ठीक सामाजिक Hymenoptera की एक कॉलोनी द्वारा उत्पादित संतानों की संख्या की गणना करने के लिए मुश्किल है. वास्तव में, कई सामाजिक कीटों की रानियां 1 वर्ष से अधिक समय तक जीवित रहती हैं (उदाहरण केलिए,पत्ती-कटर चींटी रानियां रह सकती हैं और 20 वर्ष4 और मधुमक्खियां 8 वर्ष5वर्ष तक रह सकती हैं। इसके अतिरिक्त , एक रानी कई सप्ताहों या महीनों के दौरान हजारों प्रजनन संतानों का उत्पादन कर सकती है , यहां तक कि वंश वेस्पा और वेस्पा6,7,8की वार्षिक प्रजातियों में भी . इसके अलावा, मजदूरों की उम्र उनकी माँ रानी की तुलना में कम होती है और अकसर मज़दूर अपने घोंसले से दूर मर जाते हैं। इसलिए, अगर कोई किसी भी समय घोंसले में सभी वयस्कों की सही गिनती कर सकता है, तो भी इस तरह की गिनती से पैदा होने वाली संतानों की संख्या को सही ढंग से नहीं दर्शाया जा सकता। अतः नीड के आकार, नीड में श्रमिकों की संख्या अथवानीडके वजन से उत्पन्न संतानों की संख्या का अनुमान 3,9,10के समय में किसी दिए गए बिंदु पर लगाया गया है। लार्वा कोशिकाओं की संख्या जब कुछ कोशिकाओं को खाली कर रहे हैं वंश उत्पादन के एक overestimation में परिणाम हो सकता है. इसी विधि से वंश उत्पादन में भी संभावना कम हो सकती है क्योंकि जिन छोटी कोशिकाओं में श्रमिक का बच्चा होता है , उनकी कंघी लार्वा6,7,11के दो या तीन सहगण उत्पन्न कर सकती हैं .

इस काम का पहला उद्देश्य उत्पादित वयस्कों की संख्या के संदर्भ में वेस्पिन wasp कॉलोनी उत्पादकता का आकलन करने के लिए एक बेहतर विधि प्रदान करना है। यामाने और यामने ने सुझाव दिया कि एक उपनिवेश द्वारा उत्पादित संतानों की संख्या का अनुमान लगाने का सबसे अच्छा तरीका घोंसले12में मेकोनिया की गणना करना है . मेकोनिया मल गोली है जिसमें लार्वा क्यूटिकल, आंत और आंत की सामग्री होती है जो प्यूपा (चित्र 1क) के दौरान अपनी कोशिका में लार्वा छोड़ देती है। कंघी प्रति उत्पादित मेकोनिया की कुल संख्या की गणना सेल प्रति मेकोनिया की औसत संख्या से उपस्थित कोशिकाओं की कुल संख्या को गुणा करके की जाती है। एक सेल में अक्सर मेकोनिया की कई परतें होती हैं, और प्रत्येक मेकोनिया इंगित करता है कि एक व्यक्ति उस कक्ष6,11 (चित्र 1ख) में सफलतापूर्वक प्यूप किया जाता है। जब सेल प्रति meconia की औसत संख्या का आकलन, अगर कोशिकाओं की संख्या की जांच की छोटी है (एक छोटा नमूना आकार), मानक त्रुटि (एसई) बढ़ जाती है, और एक परिणाम के रूप में, प्रति कंघी meconia की कुल संख्या के लिए त्रुटि से अधिक हो जाता है अगर नमूना आकार बड़ा था. मतलब का एसई (SEM) जनसंख्या मतलब के आसपास नमूना साधन के फैलाव का एक उपाय है. इसलिए, इस अध्ययन में, मैं प्रति सेल meconia की संख्या के SEM पर ध्यान केंद्रित करने के लिए जनसंख्या का अनुमान लगाने के लिए (उत्पादित वयस्कों की संख्या) नमूना मतलब से (प्रति सेल meconia की औसत संख्या). यह अध्ययन यह निर्धारित करने का प्रयास करता है कि कितने नमूने 0.05 प्रति सेल से कम की एक एसई दर प्राप्त करने के लिए आवश्यक हैं। ऐसा करने के लिए, एक संख्यात्मक सिमुलेशन कंघी प्रति meconia की संख्या पर वास्तविक डेटा के साथ किया जाता है, न्यूनतम नमूना आकार निर्धारित करने के लिए (दोनों कार्यकर्ता और रानी कंघी के लिए) इस मूल्य का अनुमान लगाने के लिए की जरूरत है 0.05 की परिभाषित एसई के भीतर सही.

वेस्पिन तप कालोनियों में कई क्षैतिज कंघी से बना छुपा घोंसले (भूमिगत या हवाई) में रहते हैं, जो ऊपर सेनीचे 6,7,11तक श्रृंखला में निर्मित होते हैं। कोशिकाओं का औसत आकार पहले (ऊपर) से अंतिम (नीचे) कंघी तक बढ़ जाता है। नीचे कंघी में, औसत सेल आकार में अचानक बदलाव देखा जा सकता है। इन व्यापक कोशिकाओं नई रानियों के विकास के लिए बनाया गया है. इसलिए, कॉलोनी उत्पादकता का एक अधिक सटीक अनुमान(अर्थात्,उत्पादित व्यक्तियों की संख्या) प्राप्त किया जा सकता है जब कार्यकर्ता कोशिकाओं (छोटे कोशिकाओं) और रानी कोशिकाओं (बड़े कोशिकाओं) में meconia की कुल संख्या पर विचार कर रहे हैं. कॉलोनी स्तर पर फिटनेस का अनुमान लगाने के लिए, शोधकर्ताओं ने उत्पादित रानियों की संख्या का अनुमान लगाया और अकेले रानी कोशिकाओं में मेकोनिया पर ध्यान केंद्रित कर सकते हैं। प्रजनन पुरुषों के लिए के रूप में, इन या तो कार्यकर्ता या रानी कोशिकाओं में पाला जाता है, प्रजातियों पर निर्भर करता है. इस प्रकार, किसी कॉलोनी के नर उत्पादन का अनुमान लगाना कठिन हो सकता है, सिवाय उन प्रजातियों को, जहाँ नरों का एक तिहाई, अद्वितीय कोशिका आकार13 (उदाहरण के लिए, डोलिकोवेपुला ऐनेरिया)होता है।

इस काम का दूसरा उद्देश्य क्षेत्र में जंगली वेस्पिन wasp कालोनियों का पता लगाने और उन्हें प्रयोगशाला घोंसला बक्से में प्रत्यारोपण के लिए एक उपयोगी तकनीक पेश करने के लिए है। यद्यपि कुछ शोधकर्ता कीट नियंत्रण कॉलों से wasp घोंसले प्राप्त करते हैं (अर्थात, लोग उन्हें कीट14,15के रूप में रिपोर्ट करते हैं ), यह विधि हमेशा संभव या वांछनीय नहीं होती है . शोधकर्ताओं को जंगली और बसे क्षेत्रों में घोंसले इकट्ठा करने की आवश्यकता हो सकती है जहां कीट नियंत्रक काम नहीं करते हैं, या विशिष्ट समय पर घोंसले प्राप्त करने के द्वारा अपने शोध का संचालन करने के लिए। दिलचस्प बात यह है कि मध्य जापान के पहाड़ी क्षेत्रों में रहने वाले लोग पारंपरिक रूप से भोजन के लिए पारंपरिक रूप से एकत्र और पीछे के wasps (वेस्पुला शिदाई, वेस्पुला फ्लैप, और वेस्पुला वल्गेरिस) इकट्ठा करते हैं और पीछे करते हैं । अतः इन वसुओं के लिए कृत्रिम पालन तकनीकों का संग्रहण और कृत्रिम पालन उन क्षेत्रों में अच्छी तरह से विकास किया जाताहै।

इस पत्र में वेस्पुला wasps को पीछे करने के लिए नियोजित विधियों का सारांश भी दिया गया है। इस अध्ययन के लिए प्रयोगात्मक जीव वी shidai,एक सामाजिक, जमीन नेस्टिंग wasp पश्चिमी एशिया और जापान में निवास किया गया था. वी shidai सभी जापानी vespine wasps के बीच सबसे बड़ा कॉलोनी आकार के पास, घोंसले के प्रति 8,000 से 12,000 कोशिकाओं की कुल के साथ, 33,400 कोशिकाओं की एक अधिकतम के साथ14,18. वी shidai के श्रमिकों के एक औसत गीला वजन है 67.62 - 9.56 मिलीग्राम. नर आमतौर पर कार्यकर्ता कोशिकाओं में पाला जाता है; इसके विपरीत, नई रानियों को विशेष रूप से निर्मित, व्यापक रानी कोशिकाओं 14 में पाला जाताहै।

Figure 1
चित्र 1: एक लार्वा सेल में मेकोनियम। (क) वेस्पुला शिदईकी कंघी का क्रॉस सेक्शन . Meconia लाल तीर से संकेत दिया है. (बी) दो मेकोनिया स्तरित होते हैं। प्रत्येक नीला तीर एक मेकोनियम को इंगित करता है। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Protocol

1. कॉलोनी उत्पादकता का मूल्यांकन

  1. कंघी प्रति कोशिकाओं की संख्या का अनुमान
    1. कंघी को एक-एक करके अलग करें। कंघी से सभी वयस्क wasps दूर स्वीप और छनयक के साथ कोशिकाओं से सभी लार्वा और प्यूपा बाहर खींच.
    2. इमेजिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग करके, एक कंघी प्रति 10 बेतरतीब ढंग से चुना कोशिकाओं के वर्ग उपायों को मापने(उदा.,छवि जम्मू संस्करण 1.48, http://imagej.nih.gov/ij/ देखें).
      1. पैमाने संदर्भ के साथ एक तस्वीर ले लो इतना है कि सभी कोशिकाओं को सही ऊपर से चित्र हैं.
      2. पैमाने की वास्तविक लंबाई के आधार पर, पिक्सल के लिए सभी मापा लंबाई परिवर्तित करें।
      3. पिक्सेल में 10 कोशिकाओं के क्षेत्रों को मापने और उन्हें वास्तविक क्षेत्रों में परिवर्तित.
      4. कामगार और रानी कोशिकाओं के औसत क्षेत्र की गणना करें।
    3. प्रत्येक कंघी के क्षेत्रफल को प्रति कंघी औसत कोशिका क्षेत्र से विभाजित करके कामगार और रानी कोशिकाओं की संख्या का अनुमान की जा सकती है।
  2. कॉलोनी उत्पादकता के मूल्यांकन के लिए meconia की संख्या गिनती
    1. ध्यान से कंघी तोड़ने और meconia की जांच करके प्रत्येक कंघी के लिए 100 कोशिकाओं के प्रति meconia की संख्या की गणना.
      नोट: कोशिकाओं की यह संख्या यहाँ निर्धारित किया गया था पर्याप्त होने के लिए (प्रति सेल meconia की संख्या का एसई 0.05 के भीतर है, प्रतिनिधि परिणाम अनुभाग देखें). मेकोनिया कक्ष में दो या अधिक परतों में जम सकता है (चित्र 1) ।
    2. इन 100 कोशिकाओं के लिए प्रति सेल meconia की औसत संख्या की गणना.
    3. प्रत्येक कंघी के लिए मेकोनिया की कुल संख्या की गणना करें(अर्थात्,उत्पादित व्यक्तियों की संख्या, उपनिवेश उत्पादकता), कोशिकाओं की अनुमानित संख्या और उस कंघी के लिए प्रति सेल मेकोनिया की औसत संख्या से अतिरिक्त।

2. वेस्पुला नेस्ट ढूँढना

  1. Baiting
    1. कटलफिश, मीठे पानी की मछली, या चिकन दिल (कुल में लगभग 10 ग्राम) के टुकड़े एक ऊंचाई पर एक पेड़ की शाखा पर लटकाएं जो आसानी से हाथ से पहुँचा जा सकता है (चित्र 2)।
    2. इन चाराओं को एक ट्रान्सेक्ट(उदा., एक जंगल को पार करने वाली सड़क के साथ या नदी के किनारे) 50 से 100 स्टेशनों पर रखें, जिसमें प्रत्येक स्टेशन के बीच कम से कम 5 मीटर की सीमा होती है।

Figure 2
चित्र 2: एक ध्वजांकित मांस चारा के साथ wasps प्रदान करना. (ए) छड़ी की नोक से जुड़े मांस के साथ बैटिंग wasps. (बी) मांस का टुकड़ा एक धागे से प्लास्टिक के झंडे से बंधा होता है। (ग) तसप उस मांस पर धारण करता है जो ध्वज से बंधा होता है। इस तरह के "फ्लैग्ड" चारा उड़ान forager की दृश्यता में वृद्धि होगी. पैनल बी और सी में तस्वीरें Fumihiro Sato द्वारा लिया गया. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

  1. एक "झंझमक" चारा के साथ wasps प्रदान करना
    1. निर्माण और अनुलग्नक फ्लैग करें
      1. एक बॉक्स कटर का उपयोग करके 3 - 5 मिमी चौड़ाई में और लंबाई में 15 सेमी की स्ट्रिप्स में प्लास्टिक (पॉलीथीन) बैग कट।
      2. एक बांस कटार या पतली शाखा पर चिकन दिल या cuttlefish के 1.5 मिमी3 तैयार (मांस चारा का व्यास हो सकता है 1 - 2 मिमी, कम से कम 15 एक वी shidai कार्यकर्ता के लिए मिलीग्राम; चित्र 2)
      3. झंडा करने के लिए एक धागा टाई (प्लास्टिक पट्टी, कम से कम 10 mg) और फिर मांस चारा के लिए, यह ध्वज से 3 मिमी के भीतर संलग्न (यह कहा जाता है "झंडा" चारा). गाँठ के ऊपर ढीले धागे को काट दें।
        नोट: सामान्य रूप से सिलाई मशीनों के साथ इस्तेमाल किया अत्यंत ठीक पॉलिएस्टर धागे का प्रयोग करें।
    2. एक wasp के लिए मांस चारा की प्रस्तुति
      नोट: एक घोंसला छोड़ने के 4 मिनट के भीतर बार-बार चारा करने के लिए वापसी कि wasps निम्नलिखित द्वारा सबसे कुशलता से पाया जाता है। इसका कारण यह है wasps कि चारा लेने के लिए और जल्दी से वापस पास में एक घोंसला है.
      1. प्रत्येक छाती पर एक अद्वितीय निशान पेंट करने के लिए व्यक्तिगत रूप से wasps की पहचान जब वे baits काट रहे हैं (पानी आधारित रंग कलम के साथ preferable, सामग्री की तालिकादेखें).
      2. Wasp के नीचे धागे के साथ झंडा उन्मुख जबकि यह wasp के लिए चारा पेश करते समय ध्वजा काटता है (यह और धागा अपने वक्ष के नीचे से wasp के पेट के नीचे से गुजरती हैं ताकि झंडा जगह).
    3. चिह्नित तप के बाद
      1. आसपास के क्षेत्र से चारा इकट्ठा, इतना है कि लौटने wasp अधिक एक ही स्थान पर लौटने की संभावना है, एक तसने से पहले.
        नोट: निम्नलिखित चिह्नित wasps सबसे अच्छा दो या दो से अधिक लोगों के एक समूह के साथ पूरा किया है. कम से कम एक व्यक्ति transect पर रहता है, ध्वजांकित चारा के साथ foraging wasps प्रदान करते हैं, जबकि अन्य (ओं) चिह्नित wasp का पालन करें. जब एक से अधिक wasp एक ही चारा की ओर आकर्षित किया है, निशान और केवल wasps कि एक ही दिशा में उड़ का पालन करें.
      2. एक ध्वजांकित चारा के साथ एक wasp का पालन करें.
      3. जब एक पीछा wasp अपने घोंसले के रास्ते पर कहीं भूमि, धीरे एक लंबी छड़ी (शाखा) या मछली पकड़ने की छड़ी के साथ wasp उठा और यह घड़ी जब तक यह उड़ान शुरू.
        नोट: कोमल हो सकता है और यह चारा छोड़ देंगे और दूर उड़ जाएगा, क्योंकि आराम wasp हड़ताल नहीं है।
      4. जब wasp फिर से अपने घोंसले के लिए वापस उड़ान से पहले एक और मांस गेंद को आकार दे रहा है, ध्वज को फिर से समायोजित, यदि आवश्यक हो तो.
        नोट: Wasps कभी कभी भूमि और धागे के माध्यम से चबाना होगा, मांस चारा से झंडा हटाने. यदि ऐसा अक्सर होता है, झंडे forager उड़ान की क्षमता को बढ़ाने के लिए कम कर.
      5. जब एक wasp का पता लगाने से बच जबकि पीछा किया जा रहा है, का पीछा शुरू करने से पहले transect पर चारा स्टेशन पर लौटने के लिए wasp के लिए प्रतीक्षा करें। इस बार, जबकि तसवीर नए चारा काट रहा है, चारा छड़ी ले (और wasp) बिंदु पर जहां यह पिछले पता लगाने से बच गया था.
        नोट: foraging wasps आसानी से उनके चारा के चलते नहीं है, और अगर धीरे से संभाला डंक नहीं है. इसलिए, ध्वजांकित चारा के साथ wasp झंडा पकड़े द्वारा वांछित स्थान पर ले जाया जा सकता है, wasp भागने के बिना.

3. नेस्ट का स्थानांतरण

  1. ले जाने के बॉक्स की संरचना
    1. विभिन्न आकारों के घोंसले को समायोजित करने के लिए, लंबाई और चौड़ाई में 10 से 20 सेमी और ऊंचाई में 10 से 20 सेमी से विभिन्न आकारों के घोंसले बक्से का निर्माण करें।
      नोट: इस आकार के बक्से वी shidai के युवा घोंसले को समायोजित करने के लिए काफी बड़े हैं (मध्य जुलाई और मध्य अगस्त के बीच मध्य जापान में एकत्र). प्रत्येक प्रजाति के घोंसले के आकार के अनुसार एक ले जाने के बॉक्स बनाओ, प्रत्येक विकास चरण के लिए.
    2. बांस ग्रिड का निर्माण और यह बॉक्स के नीचे से लगभग 2 सेमी ऊपर बॉक्स के अंदर करने के लिए देते हैं, ले जाने के बॉक्स के अंदर घोंसले की नियुक्ति की सुविधा के लिए.
    3. ले जाने वाले बॉक्स के तल को समाचार पत्र के साथ ढककर लकड़ी, हटाने योग्य बोर्ड पर चिपकाएं (चित्र 3)।
      नोट: अखबार, बाद में, wasps इसके माध्यम से चबाने के रूप में वे ले जाने के बॉक्स के नीचे अतिरिक्त कंघी का निर्माण जब यह एक घोंसला बॉक्स में रखा गया है की अनुमति होगी (अनुभाग 3.2 देखें).
  2. घोंसले की खुदाई
    1. पूरे घोंसले के जोखिम से पहले
      नोट: अपने घोंसले का बचाव wasps द्वारा डंक से बचने के लिए सुरक्षात्मक कपड़े पहनें।
      1. एक बार जब तने का घोंसला मिल जाता है, घोंसले की खुदाई.
      2. लगभग 10 से 20 मिनट के लिए घोंसले के चारों ओर जमीन पर जोरदार मोहर ताकि श्रमिकों को छोड़ने और घोंसले में लौटने के लिए इसे बचाने के अंदर रहते हैं, के रूप में संभव के रूप में कई श्रमिकों को इकट्ठा करने के लिए.
        नोट: अगर wasps घोंसले के बाहर रहने के लिए जारी है, यह एक कीट जाल का उपयोग कर उन्हें पकड़ने के लिए बेहतर है. हालांकि मुद्रांकन वी flavicepsके लिए उपयोगी है , वी shidai, और वी vulgaris, घोंसले से अन्य प्रजातियों के कार्यकर्ताओं मुद्रांकन प्रदर्शन व्यक्ति पर हमला कर सकते हैं. मामले में, इस चरण को छोड़ दें।
      3. घोंसला प्रवेश द्वार में सीधे एक प्रकाश चमक नेस्ट प्रवेश द्वार जिसमें घोंसला प्रवेश द्वार चलाता है यह निर्धारित करने के लिए। घोंसले के छेद के उन्मुखीकरण की पुष्टि करने के लिए एक उंगली का प्रयोग करें, जबकि धीरे घोंसले के चारों ओर से मिट्टी की खुदाई की।
    2. पूरे घोंसले के जोखिम के बाद
      1. जब पूरा घोंसला सामने आता है, तो एक कपड़ा फैलाएं और घोंसले के नीचे जमीन में भागने से wasps को रोकने के लिए इसके ऊपर घोंसला रखें।
      2. प्रयोगशाला में परिवहन के लिए एक लकड़ी (वाहक) बॉक्स में खोदे गए घोंसले को रखें (चित्र 3; तो, यह शाखाओं और अखबार के साथ कवर. यह बॉक्स में है, जबकि खुला घोंसले के शीर्ष छोड़ दें।
      3. 5 से 10 मिनट के लिए एक कपड़े पर ले जाने के बॉक्स प्लेस, जब तक wasps शांत हो जाते हैं.
      4. एक कीट जाल के साथ आसपास के क्षेत्र में किसी भी wasps ले लीजिए और घोंसले के साथ प्रयोगशाला के लिए उन्हें परिवहन।
        नोट: एक वैकल्पिक संग्रह प्रक्रिया के रूप में, यह खुदाई से पहले घोंसले में celluloid धुआं या diethyl ईथर fanning द्वारा घोंसले रहने वालों एनेस्थेटाइज.

Figure 3
चित्र 3: ले जाने बॉक्स. (ए) खेत में एकत्र घोंसले ले जाने के लिए बॉक्स। (ठ)बॉक्स के नीचे बांस का ग्रिड रखा जाता है। सही पर छवि में दो बक्से उल्टा कर रहे हैं. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

4. वेस्पुला पालन

  1. घोंसला बॉक्स की संरचना
    नोट: घोंसला बॉक्स लंबाई और चौड़ाई में 50 सेमी और वी shidai पालन के लिए ऊंचाई में 70 सेमी के आयाम ों के साथ लकड़ी से बना है (एक परिपक्व घोंसला जंगली में व्यास में लगभग 40 सेमी है).। प्रजातियों के घोंसले के आकार के अनुसार एक घोंसला बॉक्स बनाओ पालने के लिए।
    1. एक प्रवेश द्वार छेद के साथ घोंसले बॉक्स प्रदान करें (आमतौर पर बॉक्स के ऊपरी भाग में रखा) wasps चारा करने के लिए घोंसला छोड़ने के लिए अनुमति देने के लिए.
    2. घोंसले के बॉक्स के बारे में 1/3 मिट्टी के साथ भरें जैसे कि स्थान पर होने वाली जहां घोंसला एकत्र किया गया था.
    3. अन्य wasps द्वारा किसी भी घुसपैठ को रोकने के लिए घोंसले बॉक्स के प्रवेश द्वार पर एक तार जाल (1.5 सेमी2के एक जाल आकार के साथ) स्थापित करें (प्रेडेटर, जैसे Vespa mandarinia और Vespa simillimaके रूप में ).
    4. घोंसले के बक्से में लकड़ी की दो छड़ें रखें जो ले जाने वाले बॉक्स को सहन कर सकती हैं (चित्र 4)।

Figure 4
चित्र 4: प्रयोगशाला सेटअप. (ए) लंबी अवधि के अध्ययन के लिए उपयोग किए जाने वाले घोंसले के बॉक्स में ले जाने वाले बॉक्स की स्थापना करना। घोंसले के बक्से में ले जाने के बॉक्स रखने से पहले, ले जाने के बॉक्स के तल पर लकड़ी के बोर्ड को हटा दिया गया था, केवल अखबार छोड़ने के लिए घोंसले के नीचे कवर. (ख)एक तार लाइन से लटके खाद्य संसाधनों वाले नीड बक्से की एक श्रृंखला। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

  1. घोंसले के बक्से में ले जाने वाले बॉक्स का प्रत्यारोपण
    1. एकत्र किए गए घोंसलों में wasps पालन करते समय एक सूखी जगह में घोंसले बॉक्स रखें(यानी,कहीं बारिश के संपर्क में नहीं).
    2. ले जाने वाले बॉक्स के तल पर लकड़ी के बोर्ड को निकालें और लंबी अवधि के अध्ययन के लिए घोंसले के बक्से में रख दें (चित्र 4)।
      नोट: अक्सर, wasps ले जाने के बॉक्स के नीचे को कवर अखबार में छेद काट दिया होगा, और इसलिए, वहाँ छेद के माध्यम से भागने wasps द्वारा डंक होने का खतरा है. इसलिए, घोंसले को ट्रांसप्लांट करते समय सुरक्षात्मक कपड़े पहनें।
  2. wasps खिला
    1. मांस के विभिन्न प्रकार (स्किड, मीठे पानी की मछली, चिकन स्तन, या चिकन दिल) और घोंसले के बक्से से लगभग 3 मीटर पर शहद और पानी के 1:3 समाधान रखें।
    2. 1 दिन के भोजन की आवश्यकताओं के लिए पर्याप्त भोजन प्रदान करें। हर दिन ताजा भोजन को पूरा करें (Vespinae पुराने /

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Representative Results

इस अध्ययन का एक लक्ष्य यह निर्धारित करना था कि 0.05 से कम है जो सेल प्रति meconia की संख्या का एक SEM प्राप्त करने के लिए कितने नमूने प्राप्त करने के लिए आवश्यक हैं. इस अध्ययन में, एक कंघी के एक औसत सेल आकार के साथ lt;20 मिमी2 एक कार्यकर्ता कंघी के रूप में परिभाषित किया गया था, जबकि बड़े कंघी रानी कंघी के रूप में परिभाषित किया गया. मैं रानी कंघी और कार्यकर्ता कंघी के लिए कोशिकाओं की संख्या गिना (इस अध्ययन में, गिनती छह रानी कंघी और पांच वी shidai कालोनियों से छह कार्यकर्ता कंघी के बने थे). इन आंकड़ों से प्रति कंघी कोशिकाओं की वास्तविक संख्या का अनुमान बहिर्वेधन (सारणी 1) के माध्यम से लगाया गया था।

Id राज्य संग्रह दिनांक क्षेत्र (मिमी2) कोशिकाओं की अनुमानित संख्या (ENC) कोशिकाओं की वास्तविक संख्या (ANC) मेकोनियम की वास्तविक संख्या (ANM) किसी सेल में मेकोनियम की माध्य संख्या एएनएम /
WW-Kb01 जिंदा 18-अक्तूबर-16 27756.7 1599.9 1433 2430 1.70 1.52
WW-Kb02 जिंदा 18-अक्तूबर-16 4098 381.9 347 494 1.42 1.29
WW-Kb02 जिंदा 18-अक्तूबर-16 22439.3 1118.9 986 1317 1.34 1.18
WR-Ksb पतन 3-नवम्बर-16 19094.9 1098.6 1,181 974 0.82 0.89
WR-Ksc पतन 27-नवम्बर-16 38,933.40 2,198.70 2,455 4,321 1.76 1.96
WR-Kb05 पतन 29-नवम्बर-16 10970 860 763 1315 1.72 1.53
क्यूडब्ल्यू-केबी01 जिंदा 18-अक्तूबर-16 29186.2 1094.4 1095 759 0.69 0.69
क्यूडब्ल्यू-केबी01 जिंदा 18-अक्तूबर-16 36920.5 1361.6 1341 1075 0.80 0.79
क्यूडब्ल्यू-केबी02 जिंदा 18-अक्तूबर-16 37295.9 1047.2 1080 1068 0.99 1.02
क्यूआर-केएसबी पतन 3-नवम्बर-16 24811.2 1011.9 893 701 0.78 0.69
क्यूआर-केएससी पतन 27-नवम्बर-16 33352.8 1384.5 1241 1069 0.86 0.77
क्यूआर-केबी05 पतन 29-नवम्बर-16 25157.6 1071.4 922 572 0.62 1.97
WW - एक जंगली घोंसले से एक कार्यकर्ता कंघी, WR - एक पालन घोंसले से एक कार्यकर्ता कंघी, QW - एक जंगली घोंसले से एक रानी कंघी, QR - एक पीछा घोंसले से एक रानी कंघी. कोशिकाओं में जीवित - व्यवहार्य wasp लार्वा, संक्षिप्त - कोशिकाओं में कोई व्यवहार्य लार्वा.

तालिका 1: छह कार्यकर्ता कंघी और छह रानी कंघी में कोशिकाओं की वास्तविक और अनुमानित संख्या और कंघी प्रति meconia की संख्या. WW - एक जंगली घोंसले से एक कार्यकर्ता कंघी, WR - एक पालन घोंसले से एक कार्यकर्ता कंघी, QW - एक जंगली घोंसले से एक रानी कंघी, QR - एक पीछा घोंसले से एक रानी कंघी. कोशिकाओं में जीवित - व्यवहार्य wasp लार्वा, संक्षिप्त - कोशिकाओं में कोई व्यवहार्य लार्वा.

नमूना आकार और सेल प्रति meconia की संख्या के SEM के बीच संबंध का एक विश्लेषण का प्रदर्शन किया है कि नमूना आकार meconia की संख्या के आधार पर एक बूटस्ट्रैप दृष्टिकोण का उपयोग कर स्थापित किया जाना चाहिए (वास्तविक डेटा से). वास्तविक डेटा का उपयोग करना, प्रति सेल meconia की संख्या का मतलब और मानक विचलन (एसडी) की गणना की गई, प्रत्येक नमूना आकार के लिए 1,000 पर सेट नमूनों की संख्या के साथ (कोशिकाओं की संख्या की जांच की जा करने के लिए 1 से 500 थे; चित्र 5) . मैं नमूना पर डेटा से एक पुनरावृत्तीय निष्कर्षण के लिए अनुमति नहीं दी. प्रति कक्ष meconia की संख्या के लिए SEM वास्तविक डेटा के प्रत्येक सेट के लिए प्रत्येक नमूना आकार के लिए गणना की गई थी. उसके बाद, नमूना आकार जिस पर SEM 0.05 से कम था की जाँच की गई थी। सभी गणना सॉफ्टवेयर R.3.2.4 का उपयोग कर बनाया गया था। 19 इस विश्लेषण से पता चला कि SEM था ;lt;0.05 जब नमूना आकार 100 कोशिकाओं (दोनों कार्यकर्ता और रानी कंघी के लिए) था(चित्र 5) . इसलिए, निम्नलिखित परिणाम प्रति कंघी प्रति 100 कोशिकाओं meconia की संख्या की जांच पर आधारित हैं.

छह कामगार कंघी और छह रानी कंघी में कोशिकाओं की वास्तविक और अनुमानित संख्या तथा प्रति कंघी मेकोनिया की संख्या तालिका 1में दर्शायी गई है . कंघी क्षेत्र माप के आधार पर कार्यकर्ता कंघी में कोशिकाओं की संख्या का अनुमान, दोनों उच्च और सही गिनती से कम थे. कामगार कंघी की कोशिकाओं में मेकोनिया की औसत संख्या, जो उत्पादित श्रमिकों की संख्या का प्रतिनिधित्व करती है, अनुमानित लार्वा कोशिकाओं की संख्या से 1.96 गुना अधिक है जो कोशिकाओं की अनुमानित संख्या से 0.89 गुना कम है (सारणी 1)। रानी कंघी में, कोशिकाओं की वास्तविक संख्या अक्सर कोशिकाओं की अनुमानित संख्या से कम था. रानी कंघी में meconia की संख्या है, जो फिटनेस के एक घटक का प्रतिनिधित्व कर सकते हैं(यानी,संस्थापक रानी की प्रजनन सफलता का एक हिस्सा), कोशिकाओं की अनुमानित संख्या 0.53 से 1.02 गुना था.

सभी कोशिकाओं और meconia छह बेतरतीब ढंग से चयनित कार्यकर्ता कंघी और पांच घोंसले से छह बेतरतीब ढंग से चयनित रानी कंघी में गिना गया (तालिका 1). कामगार कंघी में गिने जाने वाले कोशिकाओं की कुल संख्या 7,165 थी, जबकि कामगार कंघी में गिने गए मेकोनिया की संख्या 10,851 थी। प्रति कंघी कोशिकाओं की औसत संख्या 1,194.2 थी - 720.3 (औसत ] एसडी), जबकि कार्यकर्ता कंघी में मेकोनिया की औसत संख्या 1,808.5 थी - 1,368.2. रानी कंघी में, सभी कोशिकाओं की कुल संख्या 6,572 थी, जबकि सभी meconia की संख्या 5,244 थी. रानी कंघी में प्रति कंघी कोशिकाओं की औसत संख्या 1,095.3 थी - 174.820, जबकि मेकोनिया की औसत संख्या 874.0 थी - 223.8. कामगार कोशिकाओं में मेकोनियम परतें शून्य से तीन तक होती थीं, जबकि रानी कोशिकाओं में या तो एक या कोई मेकोनियम परत होती थी।

Figure 5
चित्र 5: नमूना आकार और मानक त्रुटि (SE) meconia गणना की संख्या के सापेक्ष के बीच संबंध. (क) कामगार कंघी में प्रति सेल मेकोनिया। (ख) रानी कंघी में प्रति सेल Meconia. प्रत्येक वृत्त वास्तविक डेटा के साथ सिमुलेशन के माध्यम से प्राप्त सेल प्रति meconia की संख्या के सापेक्ष एक एसई दर्शाया गया है. रंग अंतर प्रत्येक नमूना घोंसले से डेटा का प्रतिनिधित्व करते हैं. कंघी WWkb02 (कार्यकर्ता कंघी) में सेल प्रति meconia की संख्या के लिए एसई अनुकरण 300 का एक नमूना आकार के साथ पूरा किया गया था क्योंकि कि कंघी केवल 347 कोशिकाओं था. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Discussion

मधुमक्खियों , चींटियों और वमों की कालोनी उत्पादकता का अनुमान पहले नीडों में श्रमिकों और कोशिकाओं की संख्या अथवा नीड3,9,10 के वजन सेआंकागया है . इस अध्ययन से पता चलता है कि meconia की संख्या का अनुमान उत्पादित व्यक्तियों की कुल संख्या का एक बेहतर अनुमान प्रदान करता है(यानी,कॉलोनी उत्पादकता का एक बेहतर सूचक). वास्तव में, यह पाया गया कि कामगार और रानी कंघी दोनों के लिए, मेकोनिया की संख्या 0.53 से 1.96 गुना कंघी में लार्वा कोशिकाओं की संख्या से होती है। इन निष्कर्षों से पता नहीं चल सकता है कि जब कंघी में कोशिकाओं की संख्या पर आधारित होता है तो उत्पादित कामगारों और रानियों की संख्या का निर्धारण कितना गलत हो सकता है। अधिक श्रम गहन होने के बावजूद, एक घोंसले में meconia की संख्या का आकलन करने के लिए कॉलोनी उत्पादकता का एक और अधिक सटीक मूल्यांकन की गारंटी लगता है. दूसरी तरफ, इस अध्ययन में यह मूल्यांकन नहीं किया गया कि मेकोनिया की संख्या कितनी सही है, जो पैदा किए गए लोगों की संख्या का प्रतिनिधित्व करती है।

इस कागज से पता चलता है कि एक वी shidai घोंसले के कितने कोशिकाओं कॉलोनी उत्पादकता का अनुमान लगाने के लिए जांच की जानी चाहिए, एक bootstrap सिमुलेशन दृष्टिकोण के परिणामों के आधार पर घोंसले में meconia की संख्या पर नमूना डेटा का उपयोग कर. इन परिणामों के आधार पर, यह दोनों कार्यकर्ता और रानी कोशिकाओं की कंघी प्रति 100 कोशिकाओं की जांच करने के लिए उपयुक्त होगा. meconia गिनती के लिए विधि भी एक घोंसले के लिए लागू किया जा सकता है के बाद यह गिर गया है(यानी,निष्क्रिय है), जो शोधकर्ताओं के लिए फायदेमंद हो सकता है: वेस्पिन wasp कालोनियों की प्रजनन अवधि काफी लंबाहै 8 और एक घोंसले का अध्ययन के बाद यह है ढह का मतलब है कि पूरे प्रजनन अवधि में उत्पादित वयस्कों की कुल संख्या का अनुमान लगाया जा सकता है. ऐसी कालोनियों को इकट्ठा करना भी आसान है।

वी शिदाईके घोंसले एकत्र करने के लिए , कुछ शोधकर्ताओं ने या तो चिह्नित (उदा., फ्लोरोसेंट पाउडर के साथ लेपित ) या अचिह्नित wasps21का पालन किया है . घोंसला स्थान विधि यहाँ प्रस्तुत (wasps खिला "झंडा" मांस) उनके घोंसले के लिए निम्नलिखित wasps की सुविधा. एक ही wasp अंततः transect के साथ चारा करने के लिए वापस आ जाएगी, क्योंकि एक ट्रैक wasp खो दिया है, क्योंकि यह दृष्टिकोण भी उपयोगी है. इस तने के लिए नए ध्वजांकित चारा प्रदान करें और इसे उस बिंदु पर ले जाएं जहां यह अंतिम बार खो गया था, इस प्रकार चेज़र को उस बिंदु से पीछा फिर से शुरू करने की अनुमति देता है (नेस्ट के करीब)। घोंसले में लाए गए कुछ झंडे घोंसले के प्रवेश द्वार पर उखाड़ दिए जाते हैं, जो जमीन के घोंसले खोजने में भी मदद करते हैं। हालांकि, यह विधि बरसात के दिनों के लिए उपयुक्त नहीं है क्योंकि मार्कर ों और पत्तियों से चिपके रहते हैं जब वे गीले हो जाते हैं। हालांकि पीछा करते हुए ध्वजांकित wasps वी shidaiके लिए उपयोगी है , वी flaviceps, और जापान में वी vulgaris, इस विधि Vespula rufa के लिए लागू नहीं किया जा सकता है क्योंकि इन wasps चारा करने के लिए आते हैं और ध्वजा नहीं पकड़ो. घोंसला स्थान विधि शायद कुछ Vespula wasps के लिए इस्तेमाल नहीं किया जा सकता है.

अधिक टिकाऊ आहार एक बढ़ती वैश्विक आबादी द्वारा की जरूरत है. इसके अलावा, खाद्य कीटों की मांग प्रतिदिन बढ़ जाती है। कई खाद्य कीड़े, जो स्थानीय रूप से और पारंपरिक रूप से दुनिया भर में भस्म किया जा रहा है, संयुक्त राष्ट्र के खाद्य और कृषि संगठन द्वारा पहचान की गई है21 भोजन पर काबू पाने के लिए एक आशाजनक वैकल्पिक प्रोटीन स्रोत के रूप में असुरक्षा दुनिया भर में. वेस्पुला के लार्वा और प्यूपा को पारंपरिक रूप से जापानकेपहाड़ी क्षेत्रों में भोजन के रूप में इस्तेमाल किया गया है, और इसलिए, उनका उपयोग दुनिया में कहीं और प्रोटीन का स्रोत प्रदान करने के लिए किया जा सकता है। इस अध्ययन में विकसित प्रोटोकॉल का सेट अन्य यलोजैकेट प्रजातियों के घोंसले लगाने के लिए लागू होने की संभावना है। इसलिए, इस पत्र में उल्लिखित प्रोटोकॉल एक खाद्य संसाधन के रूप में पीले रंग की जैकेट इकट्ठा करने और wasp व्यवहार का अध्ययन करने के लिए उपयोगी हो जाएगा।

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Disclosures

लेखक के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।

Acknowledgments

लेखक Katsuyuki Takahashi, हिरो Kobayashi, Fumihiro सातो, Daikichi Ogiso, Toshihiro Hayakawa, और Hisaki Imai उसे पारंपरिक wasp शिकार विधि शिक्षण के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं. लेखक ध्यान से पांडुलिपि proofreading के लिए केविन जे Loope और डेविड सेंटोरो के लिए विशेष धन्यवाद की पेशकश करना चाहते हैं. लेखक Masato अबे, Yasukazu Okada, Yuichiro Kobayashi, Masakazu Shimada, और कोजी Tsuchida उनकी चर्चा के लिए आभारी है. लेखक कॉलोनी उत्पादकता के मूल्यांकन के साथ उनकी तकनीकी सहायता के लिए Yuya Shimizu और Haruna Fuzika धन्यवाद देना चाहता है. लेखक वीडियो शूटिंग का समर्थन करने के लिए Tsukechi काले मधुमक्खी क्लब का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं. लेखक इस कागज के एक प्रारंभिक संस्करण पर अपनी टिप्पणी के लिए तीन गुमनाम समीक्षकों को धन्यवाद देना चाहता है. इस अध्ययन में भाग में Takeda विज्ञान फाउंडेशन, फ़ूजीवाड़ा प्राकृतिक इतिहास फाउंडेशन, विज्ञान के संवर्धन के लिए नागानो सोसायटी के वित्त पोषण, Shimonaka यादें फाउंडेशन, Takara Harmonist कोष, और ड्रीम परियोजना द्वारा भाग में समर्थित किया गया था UP, लिमिटेड पर आओ.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
cuttlefish Any fresh/ as a bait
dace Any fresh/ as a bait
chichken heart Any fresh/ as a bait
plastic bag (polyethylene) Any as a flag
bamboo skewer Any
industrial sewing thread FUJIX Ltd. King polyester, No.100
paint marker pen Mitsubishi pencil UNI, POSCA, PC5M
fishing rod ANY
carrying box made of wood
nest box made of wood

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References

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सामाजिक Wasp कालोनियों की उत्पादकता का मूल्यांकन (Vespinae) और पारंपरिक जापानी <em>Vespula</em> Wasp शिकार तकनीक के लिए एक परिचय
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Saga, T. Evaluation of the… More

Saga, T. Evaluation of the Productivity of Social Wasp Colonies (Vespinae) and an Introduction to the Traditional Japanese Vespula Wasp Hunting Technique. J. Vis. Exp. (151), e59044, doi:10.3791/59044 (2019).

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