Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

To-fartøj okklusion musemodel af Cerebral iskæmi-reperfusion

Published: March 1, 2019 doi: 10.3791/59078
Automatic Translation
*1,2,3,4,5, *6,7, 5
1Research Center of Translational Imaging, College of Medicine, Taipei Medical University, 2Radiogenomic Research Center, Taipei Medical University Hospital, Taipei Medical University, 3Department of Radiology, School of Medicine, College of Medicine, Taipei Medical University, 4Department of Medical Imaging, Taipei Medical University Hospital, Taipei Medical University, 5Department of Medical Research, Taipei Medical University Hospital, Taipei Medical University, 6Department of Surgery, School of Medicine, College of Medicine, Taipei Medical University, 7Division of General Surgery, Department of Surgery, Taipei Medical University Hospital
* These authors contributed equally

Summary

En musemodel af cerebral iskæmi-reperfusion er etableret for at undersøge Patofysiologi af slagtilfælde. Vi distalt ligate lige midt cerebral arterie og højre fælles halspulsåren og genoprette blodtilførslen efter 10 eller 40 min for iskæmi.

Abstract

I denne undersøgelse, er en midterste cerebral arterien (MCA) okklusion musemodel ansat til at studere cerebral iskæmi-reperfusion. En reproducerbar og pålidelig musemodel er nyttig for at undersøge Patofysiologi af cerebral iskæmi-reperfusion og fastlægge potentielle terapeutiske strategier for patienter med slagtilfælde. Variationer i anatomien af kredsen af Willis af C57BL/6 mus påvirker deres infarkt volumen efter cerebral-iskæmi-induceret skade. Undersøgelser har vist at distale MCA okklusion (MCAO) kan løse dette problem og resultere i en stabil infarkt størrelse. I denne undersøgelse etablerer vi en to-fartøj okklusion musemodel af cerebral iskæmi-reperfusion gennem afbrydelse af blodgennemstrømningen til de rigtige MCA. Vi distalt ligate rigtige MCA og højre fælles halspulsåren (CCA) og genoprette blodtilførslen efter en vis periode af iskæmi. Denne iskæmi-reperfusion skade inducerer en infarkt stabil størrelse og adfærdsmæssige underskud. Perifere immunceller infiltrere iskæmisk hjernen i perioden 24 h infiltration. Derudover er neuronal tabet i det kortikale område mindre for en længere reperfusion varighed. Derfor, denne to-fartøj okklusion model er velegnet til at undersøge immunrespons og neuronal opsving efter cerebral iskæmi i perioden reperfusion.

Introduction

Cerebral iskæmi-reperfusion musen model er en af de mest udbredte eksperimentelle metoder til undersøgelse af Patofysiologi af iskæmi-induceret hjerne skade1. Fordi cerebral iskæmi-reperfusion aktiveres perifere immunsystemet, perifere immunceller infiltrere iskæmisk hjernen og forårsage neuronal skade2. Således er en pålidelig og reproducerbar musemodel, der efterligner cerebral iskæmi-reperfusion skal forstå Patofysiologi af slagtilfælde.

C57BL/6J (B6) mus er den mest almindeligt anvendte stamme i slagtilfælde eksperimenter, fordi de kan nemt blive genetisk manipuleret. Der findes to fælles modeller MCAO/reperfusion, der efterligner betingelsen af cerebral iskæmi-reperfusion. Først er intraluminal glødetrådens model af proksimale MCAO, hvor en silicium-belagt glødetråden er ansat til intravascularly occlude blodgennemstrømningen i MCA; occluding glødetråden er efterfølgende fjernes for at genoprette blod flow3. En kort okklusion varighed resulterer i en læsion af subkortikale regionen, mens en længere okklusion varighed forårsager infarkter i kortikale og subkortikale områder. Den anden model er modellens ligatur af distale MCAO, som involverer ekstravaskulære ligatur af MCA og CCA at reducere blodgennemstrømningen gennem MCA, hvorefter blodtilførslen er genoprettet gennem fjernelse af sutur og aneurisme klip4. I denne model, en infarkt forårsaget i de kortikale områder, og dødeligheden er lav. Fordi ligatur af MCAO/reperfusion model kræver craniectomy at udsætte stedet, hvor den distale MCA, webstedet nemt kan bekræftes, og undersøge, om blodgennemstrømningen i de distale MCA afbrydes under proceduren er ligetil.

B6 mus udviser betydelige variationer i anatomi af deres circle of Willis; Dette kan påvirke infarkt lydstyrken efter cerebral iskæmi-reperfusion5,6,7. I øjeblikket, kan dette problem overvindes gennem ligatur af den distale MCA8. I denne undersøgelse etablerer vi en metode til at tilstoppe MCA blodgennemstrømningen og aktivering af reperfusion efter en forudbestemt periode af iskæmi. To-fartøj okklusion af cerebral iskæmi-reperfusion model inducerer forbigående iskæmi af MCA område gennem ligatur af lige distal MCA og rigtige CCA, med blodgennemstrømningen genoprettes efter en vis periode af iskæmi. Denne MCAO/reperfusion model inducerer en infarkt af stabil størrelse, hovedparten af hjerne-infiltrerer immunceller i iskæmisk hjernen og adfærdsmæssige underskud efter cerebral iskæmi – reperfusion4.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Brug udvalg af Academia Sinica og Taipei medicinske universitet i institutionelle dyrs pleje og godkendt denne protokol til anvendelsen af forsøgsdyr.

1. MCAO/reperfusion model

  1. Give musene med fri adgang til vand og chow indtil operationen.
  2. Autoklave den kirurgiske værktøjer og desinficere kirurgi tabel og udstyr med 70% ethanol. Bære en kirurgisk maske og sterile handsker. Bruge en tør perle sterilizer til plastikimplantater de kirurgiske værktøjer, hvis flere mus operationer vil blive gennemført i et eksperiment.
  3. Bedøver en 8 til 12 uger gamle mus (masse: 25-30 g) ved hjælp af 0,8% Kloral hydrat, via en intraperitoneal injektion. Sørg for den bedøvede mus ikke har en pedal refleks (som testet ved hjælp af en fast tå knivspids) efter anesthetization.
  4. Bruge vet salve til at forebygge øjet tørhed til musen, mens det er under anæstesi.
  5. Bruge en noninvasiv blodtryk system til at overvåge den mus blodtryk.
  6. Bruge en fysiologisk overvågningssystem til at overvåge sine rektal temperatur og arterielt blod gasser. Opretholde kropstemperaturen på 36,5 ± 0,5 ° C.
  7. Subkutant injicere musen med en profylaktisk antibiotikum (25 mg/kg cefazolin)8.
  8. Placere musen i den liggende stilling på den hede afrivningsblok.
  9. Bruge elektrisk trimming for at udsætte huden ved barbering musens pels på den ventrale halsregionen, samt i området mellem højre øje og højre øre.
  10. Bruge epilering creme til at fjerne skind fra muss krop og desinficere operationsstedet vekslende scrbus med povidione-jod og 70% ethanol.
  11. Brug iris saks til at skære en 1 cm lange midterlinjen indsnit i halsen.
  12. Bruge iris pincet skal omhyggeligt dissekere CCA gratis fra vagus nerver uden at forårsage fysisk skade.
  13. Brug 5-0 silke suturer for at isolere CCA.
  14. Gøre en 0,3 cm indsnit i hovedbunden ved midtpunktet mellem højre øje og højre øre.
  15. Brug microscissors til at skære temporalis musklen til at udsætte den zygomatic og squamosal knogle.
  16. Under en stereo dissekere mikroskop, skal du bruge en microdrill til at oprette en 2 mm-diameter hul direkte over højre distale MCA.
  17. Ligate stammen af højre distale MCA ved hjælp af en 10-0 sutur.
  18. Occlude højre CCA ved hjælp af en nontraumatic aneurisme klip.
  19. Efter 10 eller 40 min for iskæmi, fjerne aneurismet klip og sutur at genoprette blodtilførslen til MCA og CCA.
  20. Brug en sutur klip til at forsegle hud indsnittet på hovedet.
  21. Forsegle de cervikale hud indsnit ved hjælp af en enkelt sutur efterfulgt af lukning af halsen huden med sutur eller korte9.
  22. Subkutant injicere buprenorphin (0,1 mg/kg) for smertelindring9.
  23. Opretholde den mus kropstemperatur på 36,5 ± 0,5 ° C på den hede afrivningsblok, indtil det er fuldt tilbagebetalt fra anæstesi. Returnere ikke det dyr, der har gennemgået kirurgi til selskab med andre dyr, indtil det er fuldt tilbagebetalt. Efterlad ikke dyret uden opsyn indtil det genvinder tilstrækkelig bevidsthed.
  24. Placer musen ind i autoklaveres buret, så det kan frit adgang til vand og chow efter det fuldt ud har genvundet.

2. farvning med 2,3,5-triphenyltetrazolium chlorid

  1. Bedøver mus med 0,8% Kloral hydrat via en intraperitoneal injektion.
  2. Bruge drift saks til at halshugge dyret.
  3. Udsætte kraniet ved hjælp af iris saks til at gøre et snit i huden på hovedet.
  4. Brug drift saks til at skære den forreste af frontal knoglen.
  5. Brug iris saks til at skære kraniet langs den sagittal sutur.
  6. Brug en knogle rongeur til at skubbe til side den frontale og parietale knogler og udsætte hjernen.
  7. Bruge iris pincet til at dissekere hjernen.
  8. Bruge en mus hjernen matrix og barberblade få 2 mm koronale skiver.
  9. Pletten hjernen skiver i 10 minutter ved 37 ° C med 2% 2,3,5-triphenyltetrazolium chlorid (TTC) i 1 x fosfatbufferet saltopløsning.
  10. Skyl hjerne 2 x med 10% formalin.
  11. Løse hjerne i 10% formalin ved stuetemperatur i 24 timer.

3. måling af infarkt størrelse

  1. Arrangere sektioner på en ren plast slide og orientere sektioner fra rostralt til caudale.
  2. Scanne dias ved hjælp af en scanner. Placer en metrisk lineal og sørg for det er synlige i det scannede billede. Flip diaset og scanne bagsiden.
  3. Beregne området infarkt i hvert afsnit bruger ImageJ software.
    1. Åbn billedfilen og oprette skala for billedet.
    2. Bruge freehand udvalg for at vælge området infarkt.
    3. Bruge regioner af interesse (ROI) manager til at måle området af interesse.
  4. Sum infarkt områder for hvert afsnit og multiplicere resultatet af snittykkelse til at anslå den samlede infarkt volumen.

4. statistisk analyse

  1. Bruge GraphPad prisme 6 til at bestemme den statistiske signifikans med Student's t-test.
    Bemærk: Fejllinjer på bar grafer repræsenterer standard fejl af middelværdien (SEMs).
  2. Brug G * Power 3.1 til at beregne den passende stikprøvestørrelse og udføre en power analyse10.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Denne MCAO/reperfusion procedure produceret en kortikale infarkt omkring den rigtige MCA og forårsaget en adfærdsmæssige underskud. Forskellige grader af iskæmi-induceret infarkt volumen (figur 1AB) og neuronal tab (figur 1 cD) blev oprettet i hjernebarken i den rigtige MCA område gennem en stigning i ligatur varighed. Denne MCAO/reperfusion skade faldt dyrets bevægeapparatet aktivitet på 48 timer efter MCAO/reperfusion (figur 2). Hovedparten af perifere immunceller (CD45høj celler) infiltreret også iskæmisk hjernen (ipsilaterale halvkugle) efter den cerebral iskæmi-reperfusion (figur 3). Derudover vi sammenlignet denne to-fartøj okklusion model med MCAO model og fundet, at infarkt mængder af disse to modeller ikke var signifikant forskellige (figur 4). Dødeligheden var lav (< 5%) i to-fartøj okklusion musemodel af cerebral iskæmi-reperfusion. Vi udelukket mus fra yderligere analyser hvis overdreven blødning var sket under operationen. Når de kirurgiske procedurer blev korrekt fulgt, var antallet af dyr udelukkelse på grund af overdreven blødning fra craniectomy eller MCA mindre end 15%. Okklusion af højre MCA eller CCA alene ikke forårsage infarkt.

Figure 1
Figur 1: infarkt volumen og neuronal tab er positivt korreleret med længden af fartøjet okklusion. (A) repræsentative TTC pletter af hjernen skiver fra mus, 24 h efter MCAO/reperfusion. Varigheden af MCAO var 10 eller 40 min. vises Data er repræsentative for tre uafhængige forsøg. (B) kvantificering af infarkt volumen. Fejllinjer udgør SEMs; n = 8; p < 0,05. (C) MAP2 udtryk i B6 hjerner på 24 h efter MCAO/reperfusion blev bestemt ved hjælp af Immunhistokemi. MAP2-negative områder er omsluttet af en stiplet linje i det repræsentative billede af MAP2 farvning af afsnittet hjernen. (D) kvantificering af MAP2 negative område. MAP2-negative område (%) = ipsilaterale MAP2-negative område / kontralaterale halvkugle x 100; n = 3; * p < 0,05.

Figure 2
Figur 2: bevægeapparatet aktivitet faldt efter cerebral iskæmi-reperfusion. (A) bevægeapparatet aktivitet blev analyseret 48 timer efter MCAO/reperfusion. Varigheden af MCAO var 40 min. Data blev registreret i 60 min i en open-felt assay. Muss tracking afstande blev analyseret ved hjælp af CleverSys TopScan 1.0. Fingeret kontrolgruppen bestod af mus, der havde gennemgået kirurgi uden okklusion af MCA eller CCA. (B) kvantificering af afstanden flyttede ved humbug og MCAO/reperfusion mus. Dataene præsenteres som betyder ± SEM; n = 7; p < 0,05. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.

Figure 3
Figur 3: perifere immunceller infiltrere den iskæmiske halvkugle efter cerebral iskæmi-reperfusion. (A) hjerne-infiltrating immunceller (CD45høj celler) i den ipsilaterale og kontralaterale halvkugle på 24 h efter MCAO/reperfusion, blev analyseret af trykforøgelsesanlæg flowcytometri. Isolering af hjerne-infiltrerer immunceller er blevet beskrevet i en tidligere undersøgelse4. Varigheden af MCAO var 40 min. (B) kvantificering af hjerne-infiltrerer immunceller i den ipsilaterale og kontralaterale halvkugle på 24 h efter MCAO/reperfusion. Dataene præsenteres som betyder ± SEM; n = 4; p < 0,05.

Figure 4
Figur 4: infarkt volumen er ikke anderledes mellem MCAO- og MCAO/reperfusion-induceret skader. (A) repræsentative TTC pletter af hjernen skiver fra mus, 24 h efter MCAO. I gruppen MCAO eksperimentelle blev rigtige MCA permanent afkortet ved hjælp af en skib cauterizer, mens den rigtige CCA var forbigående forbundet til 40 min. I gruppen MCAO/reperfusion (MCAO/Rep) eksperimentelle var proceduren som beskrevet i afsnit 1 i protokollen. Varigheden af MCAO var 40 min. (B) kvantificering af infarkt volumen. Dataene præsenteres som betyder ± SEM; n = 7.

Table 1
Tabel 1: sammenligning af infarkt volumen og variation fra forskellige eksperimenter. Infarkt volumen var fast besluttet på 24 h efter MCAO/reperfusion fra tre uafhængige forsøg. Varigheden af MCAO var 40 min. SD = standardafvigelse; n = antallet af musene brugt pr. eksperiment.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

MCAO/reperfusion musen model er en dyremodel, almindeligvis ansat til at efterligne forbigående iskæmi i mennesker. Dette dyr model kan anvendes til transgene og knockout mus stammer at undersøge Patofysiologi af slagtilfælde. Flere trin i protokollen er især kritisk. (1) microdrill skal anvendes forsigtigt, når du opretter et hul i kraniet, med upassende handling nemt forårsager blødning fra MCA. (2) MCA bør ikke blive beskadiget, og blødning skal undgås før og efter ligatur procedure. Skader på MCA påvirker niveauet af reperfusion i iskæmisk hjernen7. MCA reperfusion status skal kontrolleres efter MCAO. Okklusion og restaurering af blodgennemstrømningen til MCA kan analyseres ved hjælp af en laser Doppler. (3) CCA bør ikke bløder under CCA isolation. (4) vagus nerven må ikke blive beskadiget under CCA isolation, fordi dette vil kunne øge infarkt størrelse og sandsynlighed for dødeligheden. (5) musen kropstemperatur bør opretholdes på 36,5 ± 0,5 ° C. Hypertermi øger infarkt størrelse og sandsynlighed for dødeligheden11. Hypotermi reducerer infarkt volumen efter cerebral iskæmi12.

Betydningen af denne MCAO/reperfusion model er, at det kan skabe meget reproducerbare kortikale infarkter og adfærdsmæssige underskud4. Sammenlignet med forskellige MCAO modeller, såsom det hypoksiske iskæmisk (H / jeg) slagtilfælde model som beskrevet i en tidligere undersøgelse8, denne to-fartøj okklusion model inducerer en relativt lille variation i infarkt volumen (variationskoefficienten varierede fra 0,11-0,17) (tabel 1). Alternative slagtilfælde modeller, såsom intraluminal glødetrådens model, kan resultere i en uforudsigelig infarkt volumen på grund af den usikre status af okklusion og reperfusion tilstanden efter kirurgi13. Sammenlignet med tre-skib MCAO model (ligatur af højre MCA og højre og venstre CCAs)14, indebærer den foreslåede model ligatur af kun to skibe (højre MCA og rigtige CCA) at opnå cerebral iskæmi. En kortere kirurgi tid er derfor påkrævet end i tre-skib MCAO model. Den største begrænsning af denne MCAO/reperfusion model er, at det kræver craniectomy at udføre MCA ligatur. En undersøgelse viste, at kraniotomi forårsager transcriptional ændringer i hjernen15. Derfor, en fingeret kontrol er forpligtet til at fastslå virkningerne af MCAO/reperfusion på genekspression.

Neuronal tab i det kortikale område er mindre når længere reperfusion varighed er ansat. Undersøgelser har vist, at området MAP2-negative er mindre efter 7 dage af reperfusion, sammenlignet med 2 dage af reperfusion4,16. Dog er herom opsving usandsynligt i en hjerne med iskæmi induceres ved en intraluminal monofilamenter model MCAO17,18. Derudover kan intraluminal monofilamenter model af MCAO opretholde infarkt størrelse i mindst 7 dage.

B6 mus har omfattende collateralization mellem den forreste cerebral arterie og MCA19. Når vi afkortet permanent MCA i iskæmisk hjernen, fandt vi, at infarkt volumen ikke var signifikant forskellig fra mus med en reperfused MCA på 24 h efter MCAO (figur 4). Vi foreslår derfor, at blodgennemstrømningen fra anterior cerebral arterie soeskende kan kompensere for iskæmi virkninger af MCA område, når den distale MCA er permanent tilstoppet.

I denne undersøgelse, to-fartøj MCAO/reperfusion model lavet en iskæmi-reperfusion skade og forårsaget perifere immunceller til at infiltrere iskæmisk hjernen. Denne model kan anvendes til at undersøge samspillet mellem hjernen og immunforsvaret. Det kan desuden bruges til at teste potentielle neuroprotectants eller narkotika, at modulerer immunrespons efter cerebral iskæmi-reperfusion.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har ikke noget at oplyse.

Acknowledgments

Dette arbejde blev støttet af Ministeriet for videnskab og teknologi, Taiwan (mest 106-2320-B-038-024, mest 105-2221-E-038-007-MY3 og mest 104-2320-B-424-001) og Taipei Medical University Hospital (107TMUH-SP-01). Dette håndskrift blev redigeret af Wallace akademiske redigering.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Bone rongeur Diener Friedman
Buprenorphine Sigma B-044
Cefazolin Sigma 1097603
Chloral hydrate Sigma C8383
Dissection microscope Nikon SMZ-745
Electric clippers Petpro
10% formalin Sigma F5304
Germinator dry bead sterilizer Braintree Scientific
Iris Forceps Karl Klappenecker 10 cm
Iris Scissors Diener 9 cm
Iris Scissors STR Karl Klappenecker 11 cm
Microdrill Stoelting FOREEDOM K.1070
Micro-scissors-Vannas HEISS H-4240 blade 7mm, 8 cm
Mouse brain matrix World Precision Instruments
Non-invasive blood pressure system Muromachi MK-2000ST
Operating Scissors STR Karl Klappenecker 14 cm
Physiological Monitoring System Harvard Apparatus
Razor blades Ever-Ready
Stoelting Rodent Warmers Stoelting 53810 Heating pad
Suture clip Stoelting
Tweezers IDEALTEK No.3
Vetbond 3M 15672 Surgical glue
10-0 suture UNIK NT0410
2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride Sigma T8877

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Woodruff, T. M., et al. Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke. Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11 (2011).
  2. Chamorro, A., et al. The immunology of acute stroke. Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).
  3. Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model. Journal of Visualized Experiments. (47), e2423 (2011).
  4. Lee, G. A., et al. Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury. Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).
  5. Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).
  6. Kitagawa, K., et al. Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).
  7. Wellons, J. C. 3rd, et al. A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia. Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).
  8. Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit. Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).
  9. Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion. Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).
  10. Wayman, C., et al. Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability. Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106 (2016).
  11. Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats. Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).
  12. Florian, B., et al. Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia. Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).
  13. Carmichael, S. T. Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose. NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).
  14. Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting. Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).
  15. Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain. Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).
  16. Tachibana, M., et al. Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons. Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).
  17. Gan, Y., et al. Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).
  18. Li, M., et al. Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).
  19. Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation. Circulation Research. 107 (4), (2010).

Tags

Medicin spørgsmål 145 cerebral iskæmi-reperfusion midt cerebral arterieokklusion 2,3,5-triphenyltetrazolium chlorid assay open-felt assay infarkt volumen ImageJ
To-fartøj okklusion musemodel af Cerebral iskæmi-reperfusion
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chen, C. Y., Chen, R. J., Lee, G. A. … More

Chen, C. Y., Chen, R. J., Lee, G. A. Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion. J. Vis. Exp. (145), e59078, doi:10.3791/59078 (2019).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter