Vi introduserer en indre rørtilnærming til mansjetten teknikk for mus cervical heterotopisk hjertetransplantasjon for å hjelpe evert fartøyet over mansjetten. Vi fant at samarbeid mellom to erfarne kirurger markert forkorter operasjonstiden.
Murine hjertetransplantasjon har blitt utført i mer enn 40 år. Med fremskritt i mikrokirurgi har visse nye teknikker blitt brukt til å forbedre kirurgisk effektivitet. I laboratoriet vårt har vi optimalisert mansjettteknikken med to store trinn. Først brukte vi den indre rørteknikken til å sette inn et midlertidig indre rør i den ytre halsvenen og halspulsåren for å lette eversjon av fartøyet over mansjetten. For det andre utførte vi fullstendig heterotopisk hjertetransplantasjon gjennom samarbeid mellom to erfarne kirurger. Disse endringene reduserte effektivt driftstiden til 25 minutter, med en suksessrate på 95%. I denne rapporten beskriver vi disse prosedyrene i detalj og gir en ekstra video. Vi tror at denne rapporten om forbedret mansjettteknikk vil gi praktisk veiledning for murine heterotopisk hjertetransplantasjon og vil forbedre nytten av denne musemodellen for grunnleggende forskning.
Etableringen av mus heterotopisk hjertetransplantasjon gjennom ende-til-ende anastomose i magen i 1973 var en viktig milepæl i grunnleggende transplantasjon immunologi forskning1. Denne modellen ga et viktig og gyldig verktøy for å analysere mekanismene for iskemi reperfusjon skade2, immunologisk avvisning, ogtoleranse 3,4. Imidlertid kan den komplekse og tidkrevende naturen til operasjonen samt potensialet for infeksjoner føre til alvorlige perioperative abdominal adhesjoner og inflammatoriske reaksjoner, noe som resulterer i lav effektivitet for heterotopisk hjertetransplantasjonsmodell.
Den cervikale heterotopisk hjertetransplantasjon teknikken ble først beskrevet av Chen i 19915. I denne modellen er mottakerens ytre halsvene anastomosed til lungearterien i transplantatet og halspulsåren er anastomosed til den stigende aorta. De viktigste fordelene med denne metoden er bekvemmeligheten av overvåking og reduksjon av traumer til mottakeren. I samme år beskrev Matsuura en forbedret teknikk, hvor slutten av den ytre halsvenen og halspulsåren ble everted over en Teflon mansjett og festet med en circumferential silke ligatur6. Noen forskere festet også mansjetten til høyre lungearterie i donorhjertet før du setter mansjetten inn i mottakerens ytrehalsvene 7. Så langt har mansjettteknikken blitt mye brukt i ulike vaskulære pedikletransplantasjonsmodeller, inkludert de for lunge8,lever9og nyre10 transplantasjon.
Til dags dato er det flere vanskeligheter forbundet med mansjetten teknikk. For eksempel er halspulsåren vanskelig å evert over mansjetten på grunn av den ekstra elastisiteten, noe som resulterer i at vevet vender bakover. Derfor kan ekstra praksis og en mikrokirurgisk dilator være nødvendig for å fullføre dette trinnet. I tillegg kan livmorhalskarpreparatet ta opptil 25 minutter.
For å løse disse problemene introduserer vi den indre rørteknikken, som er basert på mansjettens teknikk og inkluderer å feste mansjetten på den ytre halsvenen og halspulsåren ved hjelp av et indre rør for å hjelpe til med eversjon av karveggen. I tillegg, med enkel trening, reduseres mottakerforberedelsen til 15, 5 minutter. Denne teknikken reduserer kompleksiteten i operasjonen og krever ikke ekstra praksis eller bruk av en vaskulær dilator. Det kan brukes i all transplantasjon immunforskning, spesielt for å verifisere tredjeparts immuntoleranse der mottakeren mottar to hjerte allografts, en i magen og den andre i nakken11. Vi anbefaler også samarbeid mellom to dyktige kirurger for å etablere denne modellen, med en kirurg som forbereder mottakerdyret og den andre høsting og implantering av donorhjertet. Slikt samarbeid kan forkorte operasjonstiden til 25 minutter. Ved hjelp av denne optimaliserte prosedyren har vi etablert syngeneic, allogen12,13,14,15,16,17,18,19og xenogeneiske mus hjertetransplantasjon modeller20.
Begrunnelsen for utviklingen av den indre rørteknikken var å redusere operasjonstiden for etablering av en mus hjertetransplantasjon modell med høy suksessrate. Optimalisering av cervical hjertetransplantasjon modell letter oppkjøpet av høy suksessrater i en kort periode med kirurgi tid sammenlignet med den tradisjonelle sutur og mansjett teknikk21. Videre kan samarbeidsmodellen ytterligere redusere den varme iskemiske tiden til donorhjertet sammenlignet med operasjoner utført med en enkelt operatør.
Mus hjertetransplantasjoner modeller er viktige verktøy for transplantasjon immunologi forskning, som verktøy og materialer for å evaluere immunmekanismer av denne modellen og et stort antall genmodifiserte mus er tilgjengelig. Mikrokirurgiske tekniske utfordringer, som fartøysys og eversjon, har imidlertid begrenset den utbredte bruken. I den foreliggende studien har vi undersøkt visse kjernetekniske utfordringer ved murine hjertetransplantasjon og har fått gode resultater. Et kritisk trinn i protokollen innsettin…
The authors have nothing to disclose.
Dette arbeidet ble støttet av Fujian Provincial Health Education Joint Research Project (WKJ2016-2-20), National Natural Science Foundation of China (81771271 og 81800664), National Key R & D Program of China (2018YFA0108304) og Education and Scientific Research Project for unge og middelaldrende lærere i Fujian-provinsen (JAT170714), Natural Science Foundation of Hunan Province of China (2019JJ50842) og Huxiang Young Talents of Hunan Province (2019RS2013).
Artery cuff | Self-made | Polyamide tube. diameter: 0.55 mm,length: 1.0 mm | |
Artery inner tube | Self-made | Polyamide tube. Diameter: 0.28mm | |
Micro curved forceps | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | WA3050 | 1/8 arc, 0.3-mm tip without a hook |
Micro needle holders | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | WA2050 | 0.2-mm tip |
Micro scissors | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | WA1050 | Straight, blade length: 10 mm |
Micro straight forceps | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | WA3060 | 0.15-mm tip without a hook |
Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps | Scanlan International Inc | 1001-531 | Clamping pressure 20–25 grams |
Vein cuff | Self-made | Polyamide tube. diameter: 0.9 mm,length: 1.2 mm | |
Vein inner tube | Self-made | Polyamide tube. Diameter: 0.6 mm |