Summary
Questo protocollo descrive come creare una laminectomia precisa per l'induzione di lesioni stabili del midollo spinale di tipo transezione nel modello del topo, con danni collaterali minimi per la ricerca sulle lesioni del midollo spinale.
Abstract
La lesione del midollo spinale (SCI) porta in gran parte a una perdita irreversibile e permanente della funzione, più comunemente a causa di un trauma. Diverse opzioni di trattamento, come i metodi di trapianto di cellule, sono in fase di ricerca per superare le disabilità debilitanti derivanti dallo SCI. La maggior parte degli studi precli clinici sugli animali sono condotti in modelli di roditori di SCI. Mentre i modelli di ratti SCI sono stati ampiamente utilizzati, i modelli di topi hanno ricevuto meno attenzione, anche se i modelli di topi possono avere vantaggi significativi rispetto ai modelli di ratti. Le piccole dimensioni dei topi equivalgono a costi di manutenzione degli animali inferiori a quelli dei ratti e la disponibilità di numerosi modelli di topi transgenici è vantaggiosa per molti tipi di studi. Indurre lesioni ripetibili e precise negli animali è la sfida principale per la ricerca SCI, che nei piccoli roditori richiede un intervento chirurgico ad alta precisione. Il modello di lesione di tipo trasezione è stato un modello di lesione comunemente usato nell'ultimo decennio per la ricerca terapeutica basata sui trapianti, tuttavia non esiste un metodo standardizzato per indurre una lesione completa del tipo di transezione nei topi. Abbiamo sviluppato un protocollo chirurgico per indurre una lesione completa del tipo di trasezione nei topi C57BL/6 a livello vertebrale toracico 10 (T10). La procedura utilizza un piccolo trapano a punta al posto dei rongeurs per rimuovere con precisione la lamina, dopo di che viene utilizzata una lama sottile con tagliente arrotondato per indurre la transezione del midollo spinale. Questo metodo porta a lesioni riproducibili di tipo trasezione nei piccoli roditori con danni muscolari e ossei collaterali minimi e quindi riduce al minimo i fattori confondenti, in particolare dove vengono analizzati i risultati funzionali comportamentali.
Introduction
La lesione del midollo spinale (SCI) è un problema medico complesso che si traduce in drastici cambiamenti nella salute e nello stile di vita. Non esiste una cura per SCI e la fisiopatologia di SCI non è compresa a fondo. I modelli Animal SCI, in particolare i modelli di roditori, offrono uno strumento inestimabile per la sperimentazione di nuovi trattamenti e sono stati utilizzati per esplorare SCI per decenni. Ad oggi, oltre il 72% degli studi SCI preclitici ha utilizzato modelli di ratto, rispetto a un solo 16% che ha utilizzato topi1. Sebbene i ratti, a causa delle loro maggiori dimensioni e della tendenza a formare cavità simili alle SIC umane, siano stati tradizionalmente gli animali modello preferiti per lo studio di nuovi approcci terapeutici, i topi (compresi molti modelli di topi transgenici) sono ora utilizzati più frequentemente per studiare i meccanismi cellulari e molecolari dello SCI2. Il modello di topo offre ulteriori vantaggi in termini di una manipolazione più semplice, tassi riproduttivi più rapidi e costi inferiori rispetto ai ratti; i topi mostrano anche un alto grado di somiglianza genomica conl'uomo 1,2,3. Il principale svantaggio del modello di topo è stato identificato come la dimensione significativamente più piccola che crea sfide per gli interventi chirurgici per la creazione e il trattamento delle lesioni del midollospinale 4,5.
C'è una lacuna nella letteratura esistente che evidenzia la necessità di un protocollo chirurgico robusto e riproducibile per indurre SCI stabile nel modello di mouse. Pertanto, forniamo un approccio chirurgico nuovo e preciso in questo protocollo per superare questi limiti. Questo protocollo fornisce linee guida approfondite per indurre una lesione di tipo transezione nei topi, poiché questo tipo di lesione è stato riconosciuto come il più appropriato per studiare i cambiamenti rigenerativi e degenerativi a seguito di unalesione 6,nonché la neuroplasticità, i circuiti neurali e l'ingegneria tissutalesi avvicinano a 7. Abbiamo scelto di indurre la lesione nella regione toracica inferiore, poiché il livello toracico SCI è usato più comunemente nella letteratura1.
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Protocol
Tutte le procedure sono state eseguite con l'approvazione del Griffith University Animal Ethics Committee (ESK/04/16 AEC e MSC/04/18 AEC) sotto le linee guida del National Health and Medical Research Council of Australia.
1. Procedura di set-up animale per l'intervento chirurgico
- Anestetizza e stabilizza l'animale.
- Utilizzare topi C57BL/6 femmina di 8-10 settimane. Utilizzare il 5% di isoflurane in 1 L/min di ossigeno per l'induzione dell'anestesia. Per il mantenimento dell'anestesia, utilizzare l'1,5-2% di isoflurane in 1 L/min di ossigeno. Confermare un'anestesia appropriata stabilendo una mancanza di riflesso del dolore nella coda e nelle zampe posteriori.
- Somministrare buprenorfina (0,03 mg/kg di peso corporeo) per l'analgesia e l'enrofloxacina (10 mg/kg di peso corporeo) per la copertura antibiotica, per via sottocutanea in base al peso corporeo. Meloxicam (2 mg/kg di peso corporeo) può essere somministrato per l'analgesia a lungo termine, se necessario.
- Mantenere costante la temperatura corporea dell'animale a 37 °C con un riscaldante
- Radere la pelliccia posteriore per esporre l'area chirurgica sulla colonna vertebrale dorsale. Rimuovere la pelliccia rasata dall'area chirurgica prima di sterilizzare il sito di incisione. Sterilizzare l'area rasata con tamponi di cotone sterili imbevuti di liquido antisettico di iodio povidone e spirito chirurgico.
- Rastremare le zampe del topo nell'area chirurgica per stabilizzare l'animale (Figura 1A). Posizionare un drappo della finestra ovale sul mouse (Figura 1B).
2. Laminectomia
- Effettuare un'incisione verticale della linea mediana a livello vertebrale T10 utilizzando un bisturi chirurgico.
- Individuare il processo spinoso della vertebra T10 per determinare il sito della laminectomia. Il corpo della vertebra si trova leggermente cranica alla punta del processo spinoso8 (vedi figura 2). La punta poggia approssimativamente al punto centrale della vertebra T118.
- Rendere l'incisione lunga ~ 2,5 cm, in modo che la colonna vertebrale della vertebra T10 sia approssimativamente al centro della lunghezza dell'incisione.
- Riflettere la pelle e ritrarre con i retrattiri.
- Utilizzare le forcep dritte per sollevare la pelle dalla fascia sottostante. Ciò creerà spazio per i retrattiri da posizionare; questi manterranno aperto il campo chirurgico.
- Eseguire la dissezione smussata del tessuto sottocutaneo e della fascia per esporre i processi spinosi.
- Usa il bordo smussato del bisturi per fare una piccola incisione della linea mediana nel tessuto sottocutaneo e nella fascia sottostante per esporre le spine delle vertebre T9-T11. Utilizzare le flesse a punta fine (non affilate) per eseguire la dissezione smussata e riflettere la fascia.
- Dividere e separare i muscoli para-spinosi per esporre le laminae.
- Usa la punta smussata del bisturi per dividere i muscoli del tronco dorsale e i muscoli para-spinosi lungo le spine delle vertebre T9-T11. Utilizzare le forcep smussate della punta fine per eseguire la dissezione smussata dei muscoli a strati ed esporre le laminae delle vertebre. Questo dovrebbe ridurre al minimo qualsiasi sanguinamento.
NOTA: In caso di sanguinamento, utilizzare l'irrigazione salina riscaldata (37 °C) e tamponi di cotone per controllarla e cancellare il sangue dal campo chirurgico. - Usa le stesse forcep per creare piccole tasche intorno ai processi trasversali della vertebra T10. Utilizzare le pinzì curve per stabilizzare il corpo vertebrale T10 agganciando le sue sporgenze sotto i processi trasversali, nelle tasche create (Figura 1C).
- Risciacquare accuratamente le lamina T10 con salina calda e pulire delicatamente con tamponi di cotone per visualizzare chiaramente la superficie ossea. Assicurarsi che nessun attacco muscolare / legamento rimanga lungo la superficie bilateralmente.
- Usa la punta smussata del bisturi per dividere i muscoli del tronco dorsale e i muscoli para-spinosi lungo le spine delle vertebre T9-T11. Utilizzare le forcep smussate della punta fine per eseguire la dissezione smussata dei muscoli a strati ed esporre le laminae delle vertebre. Questo dovrebbe ridurre al minimo qualsiasi sanguinamento.
- Utilizzare un trapano con punta fine (0,55 mm di diametro, 7 mm di lunghezza) per rompere le lamina a livello bilaterale.
- Utilizzate la punta del trapano per tracciare un percorso verticale dallo spazio intervertebrale T9-T10 allo spazio intervertebrale T10-T11 lungo entrambe le lamina T10, senza accendere il trapano. Questo per garantire che la punta di perforazione non catturi alcun tessuto (Figura 1D).
- Ora accendendo il trapano, scavare lentamente e con cura una trincea verticale sulla lamina destra della vertebra T10. Questa parte della laminectomia dovrebbe creare un difetto chirurgico preciso per tutto lo spessore dell'osso in linea verticale retta. Mantenere la presa con le pinze curve per mantenere stabile la vertebra.
- Assicurarsi che la punta del trapano non penetri attraverso l'osso e ferisa il midollo spinale. Ripetere lo stesso processo sul lato sinistro della lamina, mantenendo stabile la vertebra con le forcep curve. Irrigare con soluzione salina calda per lavare via eventuali frammenti ossei rimanenti.
- Sollevare e rimuovere la parte posteriore dell'arco neurale (Figura 1F).
- Utilizzare le pinze angolate a punta fine per afferrare il processo spinoso e rimuovere l'intero segmento dorsale delle lamina separate dalla perforazione bilaterale. Irrigare e tamponare di nuovo in caso di sanguinamento, per visualizzare chiaramente il midollo spinale esposto sotto la finestra della laminectomia (Figura 1E).
3. Transezione
- Indurre la lesione del midollo spinale per trasezione del cordone esposto con una singola fetta della lama.
- Utilizzare la lama stretta e rotonda tagliente per tagliare il cavo al centro della finestra della laminectomia. Assicurarsi di spazzare i recessi laterale della colonna vertebrale per indurre una lesione completa della trasezione (Figura 1G).
- Confermare la completezza della lesione di trasezione utilizzando le forcep della punta fine smussata e rimuovere eventuali connessioni rimanenti nel sito di trasezione.
- Controllare l'eventualità del sanguinamento, prima di chiudere gli strati chirurgici.
- Utilizzare la salina calda per irrigare e cancellare qualsiasi sanguinamento che si verifica dai ceppi del cordone transetto. Utilizzare un batuffolo di cotone per applicare una pressione delicata per ottenere l'emostasi, se necessario. Fare attenzione a non comprimere il midollo spinale.
4. Chiusura e cure post-operatorie immediate
- Riunisci i muscoli e sutura a strati.
- Una volta raggiunta l'emostasi nel sito di trasezione, rilasciare l'impugnatura delle pinze curve sulle vertebre T10. Riunire i bordi dei muscoli sezionati lungo la linea mediana per ottenere una buona apposizione.
- Suturare i muscoli in uno strato usando 5-0 poliglactina 910 suture assorbibili. Assicurarsi che la curvatura naturale della colonna vertebrale non causi alcuna tensione sulla linea di sutura o apra le suture, esponendo il sito di laminectomia.
- Chiudere il tessuto sottocutaneo e la pelle.
- Utilizzare 5-0 suture di seta non assorbibili per chiudere l'incisione cutanea. Assicurarsi che non vi siano sanguinamenti, coaguli o detriti che rimangono sotto la pelle prima della chiusura. Un'irrigazione finale con salina calda può essere necessaria in questa fase.
- Ferma l'anestesia. Osservare l'animale per 10-30 minuti fino al recupero. L'animale dovrebbe rimanere sulla pastiglia riscaldante per questa durata. Fornire gel d'acqua e cibo idratato nella gabbia.
- Per le cure post-operatorie, includere la buprenorfina (due volte al giorno), l'enrofloxacina (una volta al giorno) per i primi due giorni profilatticamente. Inoltre, svuotare manualmente la vescica almeno due volte al giorno, aderendo alle linee guida del comitato etico animale.
NOTA: Gli animali in questo esperimento sono stati valutati due volte al giorno per la loro salute generale e il loro benessere, che includeva il controllo del dolore persistente (per somminittare dosi aggiuntive di buprenorfina) o infezione (enrofloxacina aggiuntiva), il loro stato di nutrizione e idratazione (dare liquidi iniettabili se disidratati) e qualsiasi segno di autotomia (fornire cure alle ferite se autotomia minore). Si raccomanda vivamente che questi aspetti dell'assistenza post-operatoria, comprese le decisioni sull'eutanasia, debbano essere determinati con la guida del comitato istituzionale per l'etica animale.
5. Valutazione del modello di lesione
- Stabilire la perdita della funzione motoria.
- Valutare il comportamento motorio sui topi feriti 2, 7, 14, 21 e 28 giorni dopo l'infortunio in un campo aperto utilizzando la scala del topo basso (BMS) per determinare la perdita dellafunzione 9 (Figura 3C–E).
- Conferma istologica dell'infortunio
- Raccogliere il midollo spinale ferito con le colonne vertebrali dopo l'eutanasia (fatto con anidride carbonica in questo esperimento, come approvato dal comitato etico animale).
- Fissare il tessuto mediante immersione notturna in paraformaldeide al 4% e decalcificare le ossa mediante trattamento con acido tetraacetico al 20% di etilene diammina (EDTA) per 3 settimane, sostituendo l'EDTA fresco ogni 48 ore.
- Preparare le spine decalcificate per la criosezione e tagliarle in sezioni spesse 30 μm.
- Montare le sezioni su vetri rivestiti di gelatina per la colorazione immuno con anticorpi anti-GFAP e Hoechst 33342.
- Immagini le diapositive su un microscopio fluorescente (Figura 3A) ed esegui misurazioni delle dimensioni delle lesioni utilizzando un software di analisi delle immagini (ad esempio, software di analisi Nikon - ELEMENTI NIS [Figura 3B]).
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Representative Results
Il metodo risultante, illustrato nella figura 1, comporta un'adeguata stabilizzazione del topo (Figura 1A) e una buona visualizzazione della colonna vertebrale e del tessuto paraspinoso (Figura 1B). Il processo spinoso e le laminae possono essere chiaramente visualizzati con una dissezione muscolare minima e perdita di sangue(Figura 1C,zona evidenziata). La foratura della punta fine viene eseguita come illustrato nella figura 1D, per creare una finestra di laminectomia, come mostrato dal rettangolo. La finestra di laminectomia risultante è chiara e consente la visualizzazione diretta e l'accesso al midollo spinale (Figura 1E, zona evidenziata). Il concetto schematico di questo processo è illustrato nella figura 1F. La lama di trasezione stretta può facilmente adattarsi attraverso la finestra discreta della laminectomia (Figura 1G) e in un movimento di scorrimento liscio, è possibile creare una lesione completa del tipo di transezione (Figura 1H-I). Pertanto, questo metodo causa una dissezione muscolare minima, un danno osseo collaterale minimo e si traduce in una lesione stabile completa del tipo di transezione con una minima perdita di sangue. Nonostante l'induzione di sci grave negli animali, la procedura chirurgica e le cure post-operatorie hanno portato ad alti tassi di sopravvivenza degli animali. Tutti gli animali riportati per questo manoscritto sopravvissero alla chirurgia del midollo spinale; e successivi interventi chirurgici da parte del nostro laboratorio hanno portato a un tasso di sopravvivenza di >99%.
Per valutare se questo metodo per indurre sci di tipo trasezione nei topi fosse riproducibile e coerente, abbiamo analizzato il midollo spinale ferito utilizzando istologia/immunoistochimica e test comportamentali (n = 8 animali) (Figura 2). L'immunoetichettatura contro la proteina acida fibrillare gliale marcatore astrocite (GFAP) ha delimitato il confine del midollo spinale intatto, con il sito della lesione che è la regione tra i ceppi del cordone ombelicale se visto con sezioni longitudinali(Figura 3A). Un difetto di dimensioni costanti è stato indotto nel sito di trasezione, con una distanza media minima di 550,4 ± 17,3 μm (Figura 3B). I dati comportamentali che distribuiscono il Basso Mouse Scale (BMS)9 di un test a campo aperto hanno mostrato che i topi feriti non mostrano alcun movimento degli arti posteriori dopo la lesione (Figura 3C). Questo è rappresentato da un punteggio di 0 sul BMS per un massimo di 28 giorni dopo l'infortunio. Pertanto, il protocollo produce lesioni complete e affidabili del tipo di trasezione con conseguente perdita completa della funzione al di sotto del livello di lesione e non porta all'inversione spontanea della paralisi(figura 3D,E).
Figura 1: Passaggi chiave del protocollo sulle lesioni da trasezione. (A) Sistemazione e stabilizzazione degli animali prima dell'intervento chirurgico. Schematica e fotografia dell'intervento chirurgico sono entrambi mostrati. (B) Schema e fotografia che mostrano incisione, posizionamento del riavvolgitore e dissezione smussata per esporre gli strati muscolari profondi. (C) Stabilizzazione della colonna vertebrale con flessori ed esposizione di lamina di vertebre T10. Il rettangolo nella fotografia evidenzia laminae e processo spinoso della vertebra T10. (D) Trapano a punta fine per eseguire la laminectomia. Il rettangolo di questa fotografia traccia la finestra della laminectomia. (E) Finestra completa della laminectomia evidenziata dal rettangolo, all'interno della quale il midollo spinale è chiaramente visibile. (F) Serie di disegni schematici che mostrano il concetto di foratura per eseguire una laminectomia completa, con orientamento trasversale. (G) Questa fotografia descrive l'uso di un coltello a trasezione a lama fine per eseguire la lesione completa del tipo di trasezione, e in (H) la lesione completa è visibile all'interno del rettangolo, come una linea trasversale rosso scuro attraverso il midollo spinale. (I) Schema che mostra la visione d'insieme del sito di laminectomia e lesioni. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 2: Schema che spiega l'identificazione del punto di riferimento vertebrale per T10. Il processo spinoso della vertebra T10 è uno dei punti di riferimento più importanti che possono essere palpati alla curvatura naturale della colonna toracica. A questo punto i processi spinosi cambiano la morfologia in modo che le punte dei processi spinosi cranici dal punto T10 caudally, e le punte dei processi spinosi caudale dal punto T10 cranialmente. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 3: Risultati rappresentativi della lesione del tipo di trasezione indotta nei topi C57BL/6. (A) Una sezione longitudinale del midollo spinale rivela la lesione completa del tipo di trasezione. Il tessuto è stato immaginato su un microscopio invertito. Etichette immunoetichettanti anti-GFAP astrociti (rosso) mentre i nuclei sono etichettati con Hoechst 33342 (blu). Lo spazio di lesione utilizzando una misurazione lineare del punto più breve era di 550 μm. Barra di scala = 200 μm. IS = sito di lesione, IVD = disco intervertebrale, SC = midollo spinale, VB = corpo vertebrale. (B) La dimensione della lesione è stata misurata in 8 animali. La dimensione media della lesione era di 550,4 ± 17,3 μm con un massimo di 577,8 μm e un comportamento motorio minimo di 525,4 μm. (C) segnati su Basso Mouse Scale (BMS), che era di 9 in tutti i topi prima della lesione ed è rimasto a 0 per 4 settimane dopo l'infortunio, indicando una completa perdita della funzione motoria al di sotto del sito di lesione (n = 8 topi). (D) Andatura di un topo sano prima della lesione. (E) Andatura dello stesso topo dopo l'infortunio. Clicca qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
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Discussion
Questo metodo induce una lesione completa del tipo di trasezione a livello vertebrale T10 nei topi, che si traduce in una paraplegia completa dell'animale, al di sotto del livello di lesione. Nel complesso, questo metodo si traduce in sanguinamento minimo, danni collaterali trascurabili e una lesione stabile e riproducibile. Rispetto ai metodi di trasezione precedentemente pubblicati senza laminectomia10, questo metodo offre i vantaggi in termini di visualizzazione diretta senza manipolare la curvatura della colonna vertebrale, un migliore controllo sulla completezza della lesione e una maggiore capacità di controllare il sanguinamento e ottenere l'emostasi. Il vantaggio di questo metodo è che il protocollo può essere modificato per l'uso a qualsiasi altro livello vertebrale diverso da T10, nonché per eseguire altri tipi di lesioni come emi-sezioni, trasezioni dorsali parziali, avulsioni dorsali, schiacciamento e contusioni.
Un componente importante di questo protocollo è che utilizza l'uso di un trapano a punta fine. Mentre l'uso del trapano può richiedere un alto livello di abilità e un allenamento più ampio, raggiunge una laminectomia pulita e completa. Un altro fattore cruciale è l'uso di un coltello a lama stretta per la trasezione, invece di micro-forbici. Ciò si traduce in un danno collaterale meno indesiderato rispetto all'uso delle forbici. Al contrario, tuttavia, se viene esercitata troppa pressione laterale, la lama può causare qualche lesione al corpo vertebrale. Il protocollo descritto potrebbe richiedere al chirurgo di eseguire alcuni problemi. Se la laminectomia non viene eseguita correttamente, potrebbero rimanere speroni ossei, che possono limitare l'accesso alla finestra della laminectomia. L'inserimento di uno dei punti delle pini sottili può consentire al chirurgo di afferrare e rompere gli speroni ossei rimanenti. Tuttavia, occorre fare attenzione a non ferire il midollo spinale esposto nel processo. Se la laminectomia provoca un bordo osseo frastagliato, la perforazione può essere eseguita di nuovo per raddrizzare il margine di laminectomia. Questo può essere poco pratico se la finestra di laminectomia è già abbastanza ampia, nel qual caso, la transezione deve essere eseguita senza manomettere il sito di laminectomia.
Si raccomanda vivamente agli utenti di praticare le procedure di laminectomia almeno 8-10 volte al livello spinale pertinente in una dissezione cadaverica prima di tentare in un intervento chirurgico di sopravvivenza vivo. Sebbene le tecniche di tenuta e manovra del trapano siano semplici, potrebbero richiedere agli utenti di familiarizzare con l'attrezzatura. Qui, forniamo anche alcuni consigli utili per aiutare con la stabilizzazione della colonna vertebrale e della mano durante la procedura di perforazione. Se l'utente è destrorso, la colonna vertebrale deve essere stabilizzata utilizzando le forcep curve con la mano sinistra in modo che le forcep si avvicinino alla colonna vertebrale dall'aspetto cranicio. Ciò mantiene l'aspetto caudale della colonna vertebrale chiaro per avvicinarsi con il trapano tenuto nella mano destra (o predominante). Il trapano deve essere tenuto con una presa a tenaglia tra pollice, indice e dita medie. La mano dovrebbe essere ben sostenuta lungo il bordo mediale del polso e il quinto dito teso. Mantenere il braccio completamente adduced in modo che il gomito tocchi il corpo può aiutare a ottenere un migliore controllo sull'impugnatura del trapano durante l'allenamento. L'azione di foratura dovrebbe coinvolgere solo il movimento alle dita che tengono il trapano e non al polso, non diversamente dall'uso di una penna per la scrittura.
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Disclosures
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Acknowledgments
Questo lavoro è stato supportato da uno stipendio per studenti internazionali (PhD) della Griffith University a RR, una borsa di studio della Perry Cross Foundation a JE e JSJ, una sovvenzione della Fondazione Clem Jones a JSJ e JE e una sovvenzione della Motor Accident Insurance Commission of Queensland a JSJ e JE.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Baytril injectable 50 mg/mL, 50 mL | Provet | BAYT I | Post-operative care drug |
| Betadine 500 mL | Provet | BETA AS | Consumable |
| Castroviejo needle holder, locking | ProSciTech | T149C | Reusable |
| Ceramic zirconia blade, round with sharp sides, single edge, angled | ProSciTech | TXD101A-X | Reusable |
| Cotton swabs (5pcs) | Multigate | 21-893 | Consumable |
| Dremel Micro | DREMEL | 8050-N/18 | Cordless rotary tool |
| Dressing forceps fine | Multigate | 06-306 | Single use disposable |
| Drill bits | Kemmer Präzision | SM 32 M 0550 070 | Reusable |
| Dumont #7b forceps | Fine Science Tools | 11270-20 | Reusable |
| Dumont tweezers, style 5 | ProSciTech | T05-822 | Reusable |
| Fur trimmer | WAHL | WA9884-312 | Zero Overlap Hair Trimmer |
| Iris scissors, Ti, sharp tips, straight, 90mm | ProSciTech | TY-3032 | Reusable |
| Isoflurane isothesia NXT 250 | Provet | ISOF 00 HS | Anaesthetic agent |
| Colibri Retractor - 4cm | Fine Science Tools | 17000-04 | Reusable |
| Scalpel handle | ProSciTech | T133 | Reusable |
| Signature latex surgical gloves size 7.5 | Medline | MSG5475 | Consumable |
| Sodium Chloride 0.9% | STS | PHA19042005 | Consumable |
| Sterile Dressing Pack | Multigate | 08-709 | Single use disposable |
| Sterile Fluid Impervious Drape 60x60 cm | Multigate | 29-220 | Single use disposable |
| Surgical spirit 100 mL | Provet | # SURG SP | Consumable |
| Suture Material - SILK BLK 45CM 5/0 FS-2 | Johnson & Johnson Medical | 682G | Silk Suture |
| Suture Material - Vicryl 70CM 5-0 S/A FS-2 | Johnson & Johnson Medical | VCP421H | Vicryl Suture |
| Temgesic 0.3 mg in 1 mL, x 5 ampoules (class S8 drug) | Provet | TEMG I | Post-operative care drug |
References
- Sharif-Alhoseini, M., et al. Animal models of spinal cord injury: a systematic review. Spinal Cord. 55 (8), 714-721 (2017).
- Lee, D. H., Lee, J. K. Animal models of axon regeneration after spinal cord injury. Neuroscience Bulletin. 29 (4), 436-444 (2013).
- Sharif-Alhoseini, M., Rahimi-Movaghar, V. Topics in Paraplegia. Dionyssiotis, Y. , IntechOpen. (2014).
- Talac, R., et al. Animal models of spinal cord injury for evaluation of tissue engineering treatment strategies. Biomaterials. 25 (9), 1505-1510 (2004).
- Nakae, A., et al. The animal model of spinal cord injury as an experimental pain model. Journal of Biomedicine & Biotechnology. 2011, 939023 (2011).
- Kwon, B., Oxland, T., Tetzlaff, W. Animal models used in spinal cord regeneration research. Spine. 27, 1504-1510 (2002).
- Kundi, S., Bicknell, R., Ahmed, Z. Spinal cord injury: current mammalian models. American Journal of Neuroscience. (4), 1-12 (2013).
- Harrison, M., et al. Vertebral landmarks for the identification of spinal cord segments in the mouse. Neuroimage. 68, 22-29 (2013).
- Basso, D. M., et al. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
- Seitz, A., Aglow, E., Heber-Katz, E. Recovery from spinal cord injury: a new transection model in the C57Bl/6 mouse. Journal of Neuroscience Research. 67 (3), 337-345 (2002).
