Summary
Этот протокол описывает, как создать точную ламинэктомию для индукции стабильной трансекционной травмы спинного мозга в модели мыши, с минимальным побочным ущербом для исследования травмы спинного мозга.
Abstract
Повреждение спинного мозга (SCI) в значительной степени приводит к необратимой и постоянной потере функции, чаще всего в результате травмы. Несколько вариантов лечения, таких как методы трансплантации клеток, в настоящее время исследованы для преодоления изнурительных инвалидности, вытекающих из SCI. Большинство доклинических испытаний на животных проводятся в моделях грызунов SCI. В то время как крысы модели SCI были широко использованы, мыши модели получили меньше внимания, хотя мыши модели могут иметь значительные преимущества по сравнению с крысой моделей. Небольшой размер мышей приравнивается к более низким расходам на содержание животных, чем для крыс, и наличие многочисленных трансгенных моделей мыши выгодно для многих типов исследований. Индуцирование повторяемых и точных повреждений у животных является основной задачей для исследований SCI, которые у мелких грызунов требует высокой точности хирургии. Модель травмы трансекционного типа была широко используемой моделью травмы в течение последнего десятилетия для трансплантации на основе терапевтических исследований, однако стандартизированный метод для индуцирования полной трансекции типа травмы у мышей не существует. Мы разработали хирургический протокол для индуцирования полной травмы типа трансекции у мышей C57BL/6 на уровне грудного позвонка 10 (T10). Процедура использует небольшой кончик сверла вместо rongeurs точно удалить ламина, после чего тонкий лезвие с округлыми передний край используется для индуцирования перепись спинного мозга. Этот метод приводит к воспроизводимой трансекционной травмы типа у мелких грызунов с минимальным побочным повреждением мышц и костей и, следовательно, сводит к минимуму смешанные факторы, в частности, где поведенческие функциональные результаты анализируются.
Introduction
Повреждение спинного мозга (SCI) является сложной медицинской проблемой, которая приводит к радикальным изменениям в здоровье и образе жизни. Существует никакого лечения SCI, и патофизиология SCI не досконально понял. Модели Animal SCI, в частности модели грызунов, предлагают бесценный инструмент для испытания новых методов лечения, и были использованы для изучения SCI на протяжении десятилетий. На сегодняшний день более 72% доклинических исследований SCI использовали крысы модели, по сравнению с просто 16%, которые использовалимышей 1. Хотя крысы, из-за их больших размеров и тенденции к образованию полостей сродни человеческим SCIs, традиционно были предпочтительной моделью животных для изучения новых терапевтических подходов, мыши (в том числе многие трансгенные модели мыши) в настоящее время используются чаще для изучения клеточных и молекулярных механизмов SCI2. Модель мыши предлагает дополнительные преимущества с точки зрения более простой обработки, более быстрые репродуктивные ставки и более низкие затраты, чем крысы; мыши также демонстрируют высокую степень геномного сходства с людьми1,2,3. Основным недостатком мыши модель была определена как значительно меньший размер, который создает проблемы для хирургических вмешательств для создания и лечения травмспинного мозга 4,5.
Существует пробел в существующей литературе, что подчеркивает необходимость надежного и воспроизводимого хирургического протокола, чтобы вызвать стабильный SCI в модели мыши. Поэтому мы предоставляем новый и точный хирургический подход в этом протоколе для преодоления этих ограничений. Этот протокол содержит углубленные руководящие принципы, чтобы вызвать травму трансекции типа у мышей, так как этот тип травмы был признан наиболее подходящим для изучения регенеративных и дегенеративных измененийпосле травмы 6, а также нейропластичности, нервной схемы и тканевой инженерииподходы 7. Мы решили вызвать травму в нижней грудной области, так как грудной уровень SCI используется чаще всего в литературе1.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все процедуры были проведены с одобрения Комитета по этике животных Университета Гриффит (ESK/04/16 AEC и MSC/04/18 AEC) в соответствии с руководящими принципами Национального совета по здравоохранению и медицинским исследованиям Австралии.
1. Процедура настройки животных для операции
- Обезболить и стабилизировать животное.
- Используйте 8-10-недельную самку мышей C57BL/6. Используйте 5% изофлюран в 1 л/мин кислорода для индукции анестезии. Для поддержания анестезии используйте 1,5-2% изофлюрана в 1 л/мин кислорода. Подтвердите соответствующую анестезию, установив отсутствие болевого рефлекса в хвосте и задних лапах.
- Администрирование бупренорфина (0,03 мг/кг массы тела) для анальгезии и энрофлоксацина (10 мг/кг массы тела) для антибиотиков, подкожно в зависимости от массы тела. Мелоксикам (2 мг/кг массы тела) при необходимости может быть дан для длительной анальгезии.
- Держите температуру тела животного устойчивой при температуре 37 градусов по Цельсию с помощью грелки
- Бритье задней меха подвергать хирургической области над спинным позвоночником. Удалите бритый мех из хирургической области перед стерилизацией участка разреза. Стерилизовать бритую область стерильными ватными тампонами, пропитанными повиденовой йодной антисептической жидкостью и хирургическим спиртом.
- Лента лапы мыши в хирургической области, чтобы стабилизировать животное (Рисунок 1A). Поместите овальную штору окна над мышью(рисунок 1B).
2. Ламинэктомия
- Сделайте вертикальный разрез средней линии на уровне позвонков T10 с помощью хирургического скальпеля.
- Найдите спинной процесс позвонка Т10, чтобы определить место ламинэктомии. Тело позвонка лежит слегка черепной к кончику спинного процесса8 (см. Рисунок 2). Кончик лежит примерно в середине позвонка T118.
- Сделайте разрез длиной 2,5 см, чтобы позвоночник позвонка Т10 был примерно в середине длины разреза.
- Отражение кожи и втягиваться с ретракторами.
- Используйте прямые типсы, чтобы поднять кожу от основной фасции. Это создаст пространство для втягивателей, которые будут размещены; они будут держать хирургическое поле открытым.
- Выполните тупое вскрытие подкожной ткани и фасции, чтобы разоблачить спинные процессы.
- Используйте тупой край скальпеля, чтобы сделать небольшой разрез средней линии в подкожной ткани и основной фасции подвергать шипы позвонков T9-T11. Используйте тонкие миппы наконечника (не острые) для выполнения тупого вскрытия и отражают фасции.
- Разделите и разделите пара-колючие мышцы, чтобы разоблачить laminae.
- Используйте тупой кончик скальпеля, чтобы разделить мышцы спинного туловища и пара-спинные мышцы вдоль шипов позвонков T9-T11. Используйте тупые тонкие миппы кончика для выполнения тупого вскрытия мышц в слоях и подвергать laminae позвонков. Это должно свести к минимуму кровотечение.
ПРИМЕЧАНИЕ: Если есть какие-либо кровотечения, используйте разогретый солевой раствор (37 градусов по Цельсию) орошения и ватные тампоны, чтобы контролировать его и очистить кровь от хирургического поля. - Используйте те же типсы, чтобы сделать небольшие карманы вокруг поперечных процессов позвонка Т10. Используйте изогнутые щипцы для стабилизации тела позвонков T10, зацепив его зубцы под поперечными процессами, в созданных карманах(рисунок 1C).
- Тщательно промыть T10 laminae с теплым солевым раствором и аккуратно протрите чистой ватными тампонами, чтобы четко визуализировать костлявую поверхность. Убедитесь, что мышцы / связки вложения остаются вдоль поверхности на двусторонней основе.
- Используйте тупой кончик скальпеля, чтобы разделить мышцы спинного туловища и пара-спинные мышцы вдоль шипов позвонков T9-T11. Используйте тупые тонкие миппы кончика для выполнения тупого вскрытия мышц в слоях и подвергать laminae позвонков. Это должно свести к минимуму кровотечение.
- Используйте дрель с тонкой наконечником (диаметр 0,55 мм, длина 7 мм), чтобы разбить laminae на двусторонней основе.
- Используйте кончик сверла, чтобы проследить вертикальный путь от межпозвонкового пространства T9-T10 до межпозвонкового пространства T10-T11 вдоль обоих ламина T10, не включив дрель. Это делается для того, чтобы сверло не уловило ни однойткани (рисунок 1D).
- Теперь, включив сверло, медленно и осторожно выкапывайте вертикальную траншею на правой ламине позвонка Т10. Эта часть ламинэктомии должна создать точный хирургический дефект по всей толщине кости в прямой вертикальной линии. Поддерживайте сцепление с изогнутыми типсами, чтобы сохранить позвоночник стабильным.
- Убедитесь, что кончик сверла не проникает через кость и не повреждает спинной мозг. Повторите тот же процесс на левой стороне ламины, сохраняя позвоночник стабильным с изогнутыми типсами. Орошать теплым солевым раствором, чтобы смыть оставшиеся фрагменты костей.
- Поднимите и удалите заднюю часть нейронной арки(рисунок 1F).
- Используйте угловые тонкие тиски кончика, чтобы схватить спинной процесс и удалить весь спинной сегмент ламина, разделенный двусторонним бурением. Орошать и мазок снова, если есть какие-либо кровотечения, чтобы четко визуализировать спинной мозг подвергается под окном ламинэктомии(рисунок 1E).
3. Трансекция
- Индуцировать повреждение спинного мозга путем переливания открытого шнура с одним ломтиком лезвия.
- Используйте узкий, круглый резки краями лезвие нарезать шнур в центре окна ламинэктомии. Убедитесь, что подметать боковой углубления позвоночника, чтобы вызвать полную травму трансекции (Рисунок 1G).
- Подтвердите полноту травмы трансекции с помощью тупых тонких типсов наконечника и удалите все оставшиеся соединения на месте перепыления.
- Контроли кровотечения, если таковые имеются, прежде чем закрыть хирургические слои.
- Используйте теплый солевой раствор для орошения и очищения любых кровотечений, которые происходят от трансектированного шнура пней. Используйте ватный тампон, чтобы применить мягкое давление для достижения гемостаз, если это необходимо. Позаботьтесь о том, чтобы не сжимать спинной мозг.
4. Закрытие и немедленное послеоперационное лечение
- Принесите мышцы вместе и шов в слое.
- После того, как гемостаз достигается на месте перепыления, отпустите изогнутые типсы сцепление на позвонках T10. Принесите края расчлененных мышц вместе вдоль средней линии для достижения хорошего apposition.
- Шов мышц в слое с использованием 5-0 полиглактина 910 абсорбируемых швов. Убедитесь, что естественная кривизна позвоночника не вызывает никакого напряжения на линии шва или открыть швы, подвергая ламинэктомии сайта.
- Закрыть подкожные ткани и кожу.
- Используйте 5-0 неаспасаемых шелковых швов, чтобы закрыть разрез кожи. Убедитесь, что нет кровотечения, сгустки или мусор, оставшийся под кожей до закрытия. На этом этапе может потребоваться окончательное орошение теплым солевым раствором.
- Остановите анестезию. Наблюдайте за животным в течение 10-30 минут до выздоровления. На этот срок животное должно оставаться на грелке. Обеспечить гель для воды и гидратированных продуктов питания в клетке.
- Для послеоперационного ухода, включают бупренорфин (два раза в день), энрофлоксацин (один раз в день) в течение первых двух дней профилактически. Кроме того, вручную опорожняйте мочевой пузырь по крайней мере два раза в день, придерживаясь руководящих принципов комитета по этике животных.
ПРИМЕЧАНИЕ: животные в этом эксперименте были оценены два раза в день для их общего здоровья и благополучия, которые включали проверку на сохраняющиеся боли (дать дополнительные дозы бупренорфина) или инфекции (дополнительный энрофлоксацин), их питание и состояние гидратации (дать инъекционные жидкости при обезвоживании) и любые признаки аутотомии (обеспечить уход за ранами, если незначительные аутотомии). Настоятельно рекомендуется, чтобы эти аспекты послеоперационного ухода, включая решения об эвтаназии, определялись под руководством институционального комитета по этике животных.
5. Оценка модели травмы
- Установление потери двигательной функции.
- Оцените поведение мотора на раненых мышах 2, 7, 14, 21 и 28 дней после травмы в открытом поле с помощью шкалы басовой мыши (BMS) дляопределения потери функции 9 (Рисунок 3C-E).
- Гистологическое подтверждение травмы
- Урожай раненых спинного мозга с позвоночными колоннами после эвтаназии (сделано с углекислым газом в этом эксперименте, как это одобрено комитетом по этике животных).
- Исправить ткани на ночь погружения в 4% параформальдегида и decalcify костей путем лечения 20% этилена диамина тетраакетической кислоты (ЭДТА) в течение 3 недель, заменив свежие ЭДТА каждые 48 ч.
- Подготовьте наклейки шипы для крио-секции и разрежьте их на 30 секций толщиной в 30 мкм.
- Намонтировать секции на желатин покрытием стеклянные слайды для иммуно-окрашивания с анти-GFAP антител и Hoechst 33342.
- Изображение слайдов на флуоресцентноммикроскопе (рисунок 3A)и выполнить измерения размера травмы с помощью программного обеспечения анализа изображений (например, программное обеспечение для анализа Nikon - NIS Elements -Рисунок 3B).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Полученный метод, как по рисунку 1, включает в себя адекватную стабилизациюмыши (рисунок 1A) и хорошую визуализацию позвоночника и параспинознойткани (рисунок 1B). Спиновой процесс и ламина можно четко визуализировать с минимальным рассечением мышц и кровопотерей(рисунок 1С,выделенная зона). Тонкая наконечник бурения выполняется, как показано на рисунке 1D, чтобы создать окно ламинэктомии, как показано на прямоугольнике. Полученное окно ламинэктомии ясно и позволяет осуществлять прямую визуализацию и доступ к спинному мозгу(рисунок 1E, выделенная зона). Схематическая концепция этого процесса объясняется на рисунке 1F. Узкое лезвие трансекции может легко поместиться через дискретное окно ламинэктомии(рисунок 1G)и в плавном движении, полная травма типа трансекции может быть создана (Рисунок 1H-I). Таким образом, этот метод вызывает минимальное рассечение мышц, минимальное сопутствующей повреждение костей, и приводит к стабильной полной травмы типа трансекции с минимальной кровопотерей. Несмотря на индукцию тяжелых SCI у животных, хирургическая процедура и послеоперационный уход привели к высокой выживаемости животных. Все животные, о которых сообщалось для этой рукописи, пережили операцию на спинном мозге; и последующие операции нашей лаборатории привели к выживаемости в 99%.
Чтобы оценить, является ли этот метод для индуцирования трансекции типа SCI у мышей был воспроизводимым и последовательным, мы проанализировали повреждения спинного мозга с помощью гистологии / иммуногистохимии и поведенческих испытаний (n No 8 животных) (Рисунок 2). Иммунолабелирование против астроцитов маркера глиального фибриллярного кислого белка (GFAP) разграничило границу нетронутого спинного мозга, при этом местом повреждения является область между пнями шнура при просмотре с продольными секциями(рисунок 3A). На участке трансекции был индуцирован дефект последовательного размера со средним минимальным расстоянием 550,4 ± 17,3 мкм(рисунок 3B). Поведенческие данные развертывания Basso Mouse Scale (BMS)9 открытого полевого теста показали, что раненые мыши не проявляют движения задних конечностей после травмы(рисунок 3C). Это представлено счетом 0 на BMS на срок до 28 дней после травмы. Таким образом, протокол производит полную и надежную травму трансекционного типа, приводящую к полной потере функции ниже уровня травмы и не приводит к спонтанному разворотупаралича (рисунок 3D,E).
Рисунок 1: Ключевые шаги в протоколе травмы трансекции. (A)Настройка и стабилизация животных до операции. Схема и фотография с операции показаны. (B) Схема и фотография, показывающая разрез, втягивание втягивание и тупое вскрытие, чтобы разоблачить глубокие слои мышц. (C)Стабилизация позвоночника с типсами и обнажая ламина T10 позвонка. Прямоугольник на фотографии подчеркивает ламина и спинной процесс позвонка Т10. (D)Тонкая наконечник дрель для выполнения ламинэктомии. Прямоугольник на этой фотографии прослеживает окно ламинэктомии. (E)Полное окно ламинэктомии, выделенное прямоугольником, внутри которого хорошо виден спинной мозг. (F)Серия схематических рисунков, показывающих концепцию бурения для выполнения полной ламинэктомии, в поперечной ориентации. (G) Эта фотография изображает использование тонкого ножа поперечного лезвия для выполнения полной травмы типа трансекции, и в (H) полная травма видна внутри прямоугольника, как темно-красная поперечная линия через спинной мозг. (I)Схема показывает общий вид ламинэктомии и травмы сайта. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.
Рисунок 2: Схема объяснения позвонков ориентир идентификации для T10. Спинной процесс позвонка Т10 является одним из самых известных ориентиров, которые могут быть пальпированы на естественную кривизну грудного отдела позвоночника. На данный момент спинные процессы меняют морфологию так, что кончики спинных процессов cranial от точки T10 caudally, и кончики спинных процессов caudal от точки T10 черепно. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.
Рисунок 3: Представитель результаты трансекции типа травмы, вызванные в C57BL/6 мышей. (A)Продольная часть спинного мозга показывает полную травму трансекционного типа. Ткань была изображена на перевернутом микроскопе. Анти-GFAP иммунолабеллинга этикетки астроцитов (красный), а ядра помечены Hoechst 33342 (синий). Разрыв в увехе с использованием линейного измерения самой короткой точки составил 550 мкм. Шкала планки 200 мкм. IS - место травмы, IVD - межпозвоночный диск, СК - спинной мозг, ВБ - тело позвонка. (B)Размер травмы был измерен у 8 животных. Средний размер травмы составил 550,4 ± 17,3 мкм при максимальном уровне 577,8 мкм и минимум 525,4 мкм. (C) Моторное поведение забил на Basso Mouse Scale (BMS), который был 9 у всех мышей до травмы и оставался на 0 в течение 4 недель после травмы, что свидетельствует о полной потере двигательной функции ниже места травмы (n No 8 мышей). (D)Поход здоровой мыши до травмы. (E)Поход той же мыши после травмы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Этот метод вызывает полную травму типа трансекции на уровне T10 позвонков у мышей, что приводит к полной параплегии животного, ниже уровня травмы. В целом, этот метод приводит к минимальному кровотечению, незначительному сопутствующему повреждению и стабильной, воспроизводимой травме. По сравнению с ранее опубликованными методами трансекции безламинэктомии 10,этот метод предлагает преимущества с точки зрения прямой визуализации без манипулирования кривизной позвоночника, лучше контролировать полноту травмы, а также повышенную способность контролировать кровотечение и достичь гемостаз. Преимущество этого метода заключается в том, что протокол может быть изменен для использования на любых других уровнях позвонков, кроме T10, а также для выполнения других типов травм, таких как геми-секции, частичные спинные трансекции, спинные корневые авульсии, давка и ушибы.
Основным компонентом этого протокола является то, что он использует сверло с тонкой наконечником. Хотя использование сверла может потребовать высокого уровня квалификации и более обширной подготовки, он достигает чистой и полной ламинэктомии. Другим важным фактором является использование узколопастного ножа для трансекции, а не микро-ножницы. Это приводит к менее нежелательным побочным ущербом по сравнению с использованием ножниц. И наоборот, однако, если слишком много бокового давления оказывается, лезвие может привести к некоторым травмам позвонков тела. Описанный протокол может потребовать от хирурга выполнить некоторые устранения неполадок. Если ламинэктомия не выполняется должным образом, могут быть костные шпоры оставшиеся, которые могут ограничить доступ к ламинэктомии окно. Вставка одного из зубцов тонкой щипцы кончика может позволить хирургу, чтобы схватить и разорвать все оставшиеся костные шпоры. Тем не менее, необходимо позаботиться, чтобы не повредить открытый спинной мозг в этом процессе. Если ламинэктомия приводит к зубчатый край кости, бурение может быть выполнено снова, чтобы выпрямить поле ламинэктомии. Это может быть непрактично, если окно ламинэктомии уже достаточно широко, и в этом случае, трансекция должна быть выполнена без фальсификации с сайтом ламинэктомии.
Настоятельно рекомендуется, чтобы пользователи практикуют процедуры ламинэктомии по крайней мере 8-10 раз на соответствующем уровне позвоночника в трупном вскрытии до попытки в живой хирургии выживания. Несмотря на то, что методы проведения буровых работ и маневрирования просты, они могут потребовать от пользователей познакомиться с оборудованием. Здесь мы также предоставляем некоторые полезные советы, чтобы помочь с позвоночника и стабилизации рук во время процедуры бурения. Если пользователь правша, позвоночник должен быть стабилизирован с помощью изогнутых типсов левой рукой, так что миппы приближаются к позвоночнику из черепного аспекта. Это держит хвостовой аспект позвоночника ясно подходить с дрелью, состоявшейся в правой (или преобладающей) руке. Упражнение должно быть проведено с клещом сцепление между большим, указательным и средним пальцами. Рука должна быть хорошо поддерживается вдоль медиальной кромки запястья и протянутого пятого пальца. Сохранение руки полностью аддуктированы так, что локоть касается тела может помочь достичь лучшего контроля над сцеплением сверла во время практики. Буровое действие должно включать только движение на пальцах, держащих дрель, а не на запястье, не в отличие от использования пера для записи.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторов нечего раскрывать.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана Гриффит университета Международный студент (PhD) стипендию RR, Перри Креста Фонд Грант JE и JSJ, Клем Джонс Фонд Грант JSJ и JE, и комиссия по страхованию дорожно-транспортных происшествий Квинсленда грант JSJ и JE.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Baytril injectable 50 mg/mL, 50 mL | Provet | BAYT I | Post-operative care drug |
| Betadine 500 mL | Provet | BETA AS | Consumable |
| Castroviejo needle holder, locking | ProSciTech | T149C | Reusable |
| Ceramic zirconia blade, round with sharp sides, single edge, angled | ProSciTech | TXD101A-X | Reusable |
| Cotton swabs (5pcs) | Multigate | 21-893 | Consumable |
| Dremel Micro | DREMEL | 8050-N/18 | Cordless rotary tool |
| Dressing forceps fine | Multigate | 06-306 | Single use disposable |
| Drill bits | Kemmer Präzision | SM 32 M 0550 070 | Reusable |
| Dumont #7b forceps | Fine Science Tools | 11270-20 | Reusable |
| Dumont tweezers, style 5 | ProSciTech | T05-822 | Reusable |
| Fur trimmer | WAHL | WA9884-312 | Zero Overlap Hair Trimmer |
| Iris scissors, Ti, sharp tips, straight, 90mm | ProSciTech | TY-3032 | Reusable |
| Isoflurane isothesia NXT 250 | Provet | ISOF 00 HS | Anaesthetic agent |
| Colibri Retractor - 4cm | Fine Science Tools | 17000-04 | Reusable |
| Scalpel handle | ProSciTech | T133 | Reusable |
| Signature latex surgical gloves size 7.5 | Medline | MSG5475 | Consumable |
| Sodium Chloride 0.9% | STS | PHA19042005 | Consumable |
| Sterile Dressing Pack | Multigate | 08-709 | Single use disposable |
| Sterile Fluid Impervious Drape 60x60 cm | Multigate | 29-220 | Single use disposable |
| Surgical spirit 100 mL | Provet | # SURG SP | Consumable |
| Suture Material - SILK BLK 45CM 5/0 FS-2 | Johnson & Johnson Medical | 682G | Silk Suture |
| Suture Material - Vicryl 70CM 5-0 S/A FS-2 | Johnson & Johnson Medical | VCP421H | Vicryl Suture |
| Temgesic 0.3 mg in 1 mL, x 5 ampoules (class S8 drug) | Provet | TEMG I | Post-operative care drug |
References
- Sharif-Alhoseini, M., et al. Animal models of spinal cord injury: a systematic review. Spinal Cord. 55 (8), 714-721 (2017).
- Lee, D. H., Lee, J. K. Animal models of axon regeneration after spinal cord injury. Neuroscience Bulletin. 29 (4), 436-444 (2013).
- Sharif-Alhoseini, M., Rahimi-Movaghar, V. Topics in Paraplegia. Dionyssiotis, Y. , IntechOpen. (2014).
- Talac, R., et al. Animal models of spinal cord injury for evaluation of tissue engineering treatment strategies. Biomaterials. 25 (9), 1505-1510 (2004).
- Nakae, A., et al. The animal model of spinal cord injury as an experimental pain model. Journal of Biomedicine & Biotechnology. 2011, 939023 (2011).
- Kwon, B., Oxland, T., Tetzlaff, W. Animal models used in spinal cord regeneration research. Spine. 27, 1504-1510 (2002).
- Kundi, S., Bicknell, R., Ahmed, Z. Spinal cord injury: current mammalian models. American Journal of Neuroscience. (4), 1-12 (2013).
- Harrison, M., et al. Vertebral landmarks for the identification of spinal cord segments in the mouse. Neuroimage. 68, 22-29 (2013).
- Basso, D. M., et al. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
- Seitz, A., Aglow, E., Heber-Katz, E. Recovery from spinal cord injury: a new transection model in the C57Bl/6 mouse. Journal of Neuroscience Research. 67 (3), 337-345 (2002).
