Summary
환자 유래 제노이식(PDX) 모델과 이식 가능한 유전자 조작 마우스 모델은 인체 질환을 충실히 재구성하고 기본 및 번역 형 유방암 연구를 위한 선호 모델입니다. 여기서, 종양 생물학을 연구하고 약물 반응을 평가하기 위해 유방 지방 패드로 유방 종양 단편을 정형전으로 이식하는 방법이 설명된다.
Abstract
종양 이질성 및 치료 반응을 충실하게 재구성하는 전임상 모델은 번역형 유방암 연구에 매우 중요합니다. 불멸의 세포주성장은 쉽게 성장하고 유전적으로 분자 메커니즘을 연구하기 위하여 수정합니다, 그러나 세포 배양에서 선택적인 압력은 수시로 시간이 지남에 유전과 후성적인 변경으로 이끌어 냅니다. 환자 유래 이종이식(PDX) 모델은 인간 유방 종양의 이질성 및 약물 반응을 충실하게 재구성합니다. PDX 모델은 유방 종양 생물학 및 약물 반응의 조사를 용이하게 하는 직교 이식 후에 상대적으로 짧은 대기 시간을 전시합니다. 이식 가능한 유전자 조작 마우스 모델은 유방 종양 면역의 연구를 허용합니다. 현재 프로토콜은 유방 지방 패드로 유방 종양 단편을 정형 전적으로 이식하는 방법을 설명하고 약물 치료에 이어. 이 전임상 모형은 유방 종양 생물학, 약 반응, biomarker 발견 및 약 저항의 기계장치를 조사하기 위하여 귀중한 접근을 제공합니다.
Introduction
대부분의 유방암 사망은 종래의 치료법1,2에내성이 있는 재발성 질환으로 간주될 수 있다. 유방암의 종양 간 및 종양 이질성은 치료 저항에 기여합니다. 더욱이, 종양 이질성은 정확한 예후에 영향을 미칠 수 있고 질병 관리에도전할수 있다3,4. 반응의 예측 바이오마커의 식별은 유방암 환자의 임상 결과를 크게 향상시킬 것입니다. 대부분의 유방암 유형은 면역 요법에 반응하지 않을 가능성이 있는 면역학적으로 '감기' 종양이지만 면역 체크포인트 억제제는 임상 시험2,5에서약속을 보여주었습니다. 예를 들어, 단계 III 예심은 질병없는 생존 (DFS) 및 nab-paclitaxel과 결합된 아테졸리주맙 (PD-L1에 대한 단일 클론 항체)이 ≥1% PD-L1 염색6을가진 종양에서 혼자 nab-paclitaxel와 비교하여 전반적인 생존 혜택을 제공할 수 있다는 예비 증거를 보여주었다. 면역 요법에 유방 종양을 민감하게 하는 치료법의 개발은 치료 요법에 혁명을 일으킬 것입니다.
인간 유방암 이질성 및 약물 반응을 충실하게 재구성하는 전임상 모델은 종양 생물학을 연구하고 표적 치료를 위한 잠재적인 바이오마커를 식별하는 데 매우 중요합니다. 불멸의 세포주는 이러한 세포주 성장하기 쉽고 분자 메커니즘을 연구하기 위해 유전적으로 수정하기 쉽기 때문에 유방암 연구에 널리 사용됩니다. 그러나, 시험관내 장기 세포 배양으로부터의 선택적 압력으로 인해, 유전적 드리프트는 시간이 지남에 따라 발생할 수 있으며 유방암 세포주는 1차 유방종양의수차와 구별되는 세포주별 게놈 변화를 월아닐 수 있다7,8,9.
환자 유래 이종이식(PDX) 종양 청크는 인간 질환의 이질성을 회수할 수 있으며, 조직학적및 면역학적으로기원10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20, 20,21, 22 ,23,24,25,26,27,28, 29. 중요하게도, PDX 모델은 연공서학, 전사, 프로테아메 및 게놈분석10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20, 21,22에 의해 입증된 바와 같이 여러 이식에 걸쳐 전형적으로 안정되어있습니다. ,23,24,25,26,27,28, 29. PDX 모델은 임상적으로 관찰된 것과 비교하여 치료 반응을 나타내며,10,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24, 25,26,27,28,29. 에스트로겐 수용체 양성(ER+),프로게스테론 수용체 양성(PR+),표피 성장 인자 2 양성(ERBB2+,HER2+)및 삼중 음성 유방암(TNBC) PDX 모델을 위한 PDX 모델이 확립되었으며, 내분비, 화학요법 및 표적 요법을 테스트할 수 있는 우수한 플랫폼을 제공한다. 그러나, 현재 PDX 모델의 한 가지 주요 주의 사항은 마우스에 기능성 면역 계통의 부족이다.
Trp53 homozygous null, cMyc, Wnt1, PyMT, 또는 Her2 과발현 모델과 같은 유전자 조작 마우스 모델 (GEMM)은 그대로 면역 계통의 맥락에서 자발적인 종양 개시, 진행 및 전이에 대한 연구를 허용합니다. 그러나, 종양 대기 시간이 길어지므로여러 팔(30,31)으로전임상 시험을 수행하기가 어렵다. 그러나 GEMM은 합성 숙주에게 이식하여 인간 종양32,33,34,35,36,37,38,39,40,41,42,43,44, 44, 45,45, 46,47,48,49,50,51,52, 53,54,55. 예를 들어, p53-null BALB/c 마우스로부터의 유방 상피는 1차 종양을 형성하기 위해 신디사이진 야생형 수신자 마우스의 클리어지방 패드로 이식되어56,57로추가이식될 수 있다. p53-null 종양은 인간 종양의 다른 특수형을 재구성했습니다.
PDX 모델과 이식 가능한 GEMM의 조합은 유방 종양 생물학, 약물 반응 및 항 종양 면역을 조사하기 위한 귀중한 전임상 도구를 제공합니다. 현재 프로토콜에서, PDX 및 GEMM 종양 단편의 정형소 이식 방법이 마우스 유방 지방 패드로 설명된다. 이러한 모델은 직렬 통로에 적합하며 일반적으로 안정적인 표현형을 유지합니다. 시간이 지남에 따라 항로에 걸쳐 유전 적 드리프트 또는 이질성의 손실의 위험을 완화하기 위해, 여러 조직 단편은 시간이 지남에 따라 생물학적 또는 형태학적 변화가 관찰되는 경우에 후속 이식을 위한 각 통로에서 냉동 보존된다29,58.
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Protocol
동물을 사용하는 모든 프로토콜은 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)에 의해 검토되고 승인되었습니다. 종양 파편, 약 1-2 mm3 크기, 베일러 의과 대학에서 환자 파생 된 제노 이식 및 고급 생체 모델 코어에서 얻은 유리냉동 주식에서.
1. 이식을 위한 극저온 보존 유방 종양 단편의 준비
- 액체 질소에서 37°C 수조로 종양 단편으로 극저온을 전달합니다.
- 해동 하는 동안 가끔 부드러운 영화와 극저온을 자극.
- 조직이 해동 된 후, 수조에서 극저온을 꺼내 부드러운 반전으로 섞습니다.
- 극저온의 바깥쪽을 건조하고 70%에탄올로 스프레이하세요. 생물 안전 후드로 옮기.
- 해동된 종양 조직을 15mL 원추형 튜브로 옮기고 10mL의 콜드 덜벡코의 수정된 이글 배지(DMEM)로 채우한다. 튜브를 반전시켜 잘 섞어보십시오. 조직 파편이 튜브 의 바닥에 정착하도록 허용합니다.
- 초퍼를 흡인하고 차가운 DMEM의 10 mL에서 재중단. 튜브를 반전시켜 잘 섞어보십시오. 조직 파편이 튜브 의 바닥에 정착하도록 허용합니다.
- 초퍼를 흡인하고 차가운 DMEM의 10 mL에서 재중단. 튜브를 얼음 위에 놓습니다.
참고 : 조직은 이식 할 준비가되어 있습니다.
2. 이식을 위한 신선한 유방 종양의 수집 및 준비
- 유방 종양 베어링 마우스를 안락사시하십시오.
참고: PDX 숙주 SCID/베이지, NSG 또는 NRG 여성 마우스는 현재 연구에서 3-5주 동안 여성 Balb/c 마우스가 사용될 수 있다. - 안락사 마우스의 종양 부위를 70%에탄올로 분사한다.
참고: 극저온 저장 또는 이식을 위한 종양 단편의 오염을 일으키는 원인이 될 수 있는 종양 견본을 가진 머리를 피하십시오. - 종양을 둘러싼 피부를 꼬집고 들어 올리기 위해 톱니 모양의 집게를 사용하여 가위를 사용하여 절개를 짧게 만듭니다.
- 종양을 가위로 피부에서 분리하여 전체 종양을 숙주 마우스로부터 해부합니다. 종양의 외부 표면에서 남은 마우스 지방 패드 조직을 잘라냅니다. 감기 DMEM의 5 mL로 채워진 15 mL 원추형 관에 종양을 놓습니다.
참고: 더 큰 종양은 괴사 코어를 포함할 가능성이 있기 때문에 최대 1cm 직경의 종양을 사용하십시오. - 생물 안전 후드에서 해부된 종양을 건조를 방지하기에 충분한 DMEM을 함유한 멸균 10cm 페트리 접시로 옮기.
- 무균 조건하에서 메스 또는 블레이드로 종양을 1mm3 조각으로 자른다.
참고: 메스 또는 블레이드는 사용하기 전에 최소 20분 동안 생물 안전 후드의 UV 아래에 노출되어야 합니다. - 종양 단편을 감기 DMEM으로 채워진 15 mL 원추형 튜브로 이송합니다. 튜브를 얼음 위에 놓습니다.
참고 : 조직은 이식 할 준비가되어 있습니다. 단계 2.4에서 해부된 종양 단편은, 1) 단백질 및 RNA/DNA 추출을 위한 액체 질소에서 냉동스냅, 2) 헤마톡시린과 에신(H&E) 및 면역히스토케미칼(IHC) 분석 또는 3)에 대한 4% 파라포름데히드(PFA) 또는 10% 중성 완충포포체(NBF)로 고정된 1.25mL 동결 매체(10% 디메실알)에서 냉동 40% DMEM 및 50% 태아 소 혈청 [FBS]) -80°C 냉동고에서 하룻밤 동안 천천히 동결한 다음 장기 저장을 위해 액체 질소로 이송한다.
3. 수술을 위해 동물을 준비
- 동물 통증 관리를 위해, 피하 부프레노르핀 지속 방출을 피하 60 분 전에 1 mg /kg의 용량으로 또는 진통제 커버리지의 72 h에 대한 기관의 가이드를 따르십시오.
- 무균 수술에 대한 제도적 지침에 따라 수술 스위트 를 설정합니다.
- 이소플루란 마취기계의 유도챔버에서 4주된 암컷을 ~11.25mL/h의 속도로 마취한다. 마우스를 절차 영역으로 옮기고, 멸균(실리콘 고무) 수술 보드에 전달하여 작은 안면 마스크를 통해 마취를 받게 됩니다. 마우스를 등에 대고 다리를 자연스러운 자세로 테이프로 놓습니다.
참고: SCID/베이지, NSG 또는 NRG는 PDX에 사용되며 Balb/c는 GEMM 이식 모델에 사용됩니다. - 안과 연고를 눈에 바르면 건조를 방지하십시오.
- 발가락 핀치에 의해 적절한 수준의 감착을 확인합니다.
참고: 동물의 반응/움직임은 동물이 충분히 마취되고 수술을 받을 준비가 되어 있음을 나타냅니다. - 하복부, 특히 수술이 일어나는 네 번째 젖꼭지 주위 의 부위에 마우스를 면도하십시오.
- 원형 운동을 사용하여 수술 부위의 중심에서 시작하여 포비도네 요오드 수술 스크럽으로 바깥 쪽 가장자리를 향해 작업한 다음 70 %의 이소 프로필 에탄올 패드로 포비도네 요오드를 제거하십시오. 두 번 더 반복합니다.
4. 종양 단편을 네 번째 (잉구이날) 유방 지방 패드로 이식
- 절개 부위를 제외한 동물의 몸을 덮기 위해 멸균 수술 커튼을 사용하십시오.
참고: 절개를 하기 전에 발가락 핀치에 의한 적절한 수준의 침전수준을 확인합니다. - 톱니 모양의 집게를 사용하여 #4 젖꼭지에서 피부를 들어 올립니다.
- 무딘 면을 아래로, 머리쪽으로 #4 젖꼭지에서 짧은 (약 1cm), 기생 절개를 만들기 위해 가위를 사용합니다.
- 면 기울어진 어플리케이터를 사용하여 절개 측의 복막과 피부를 분리합니다.
- 절개 의 측면측면을 잡고있는 동안, 부드럽게 같은 면봉을 사용하여 피부에서 #4 매머 지방 패드를 벗깁니다.
- 지방 패드가 분리되면 동물의 몸에 27 G 바늘로 피부를 고정하십시오.
- 내인성 마우스 유방 상피의 지방 패드를 지울 필요가 있는 경우 다음 단계를 수행한다.
- 톱니모양 의 집게를 사용하여 지방 패드를 몸에서 부드럽게 확장하고 동맥의 주요 혈관의 교차점 아래에 있는 잉구인 림프절을 찾습니다(집게가 동맥을 들고 있는 곳 가까이).
- 조심스럽게 림프절과 삼각형 영역을 형성하는 네 번째와 다섯 번째 지방 패드에 합류 지방에 혈관을 소작.
참고: 이 단계의 산소 공급원을 일시적으로 끕니다. - 마이크로 해부 가위를 사용하여 각 소작 혈관을 한 번에 하나씩 잘라냅니다 (각 절단 후 출혈이 없도록) 림프절을 포함하는 지방 패드의 섹션이 제거 될 때까지.
- "지워진" 지방 패드 조직을 폐기하십시오.
- 무딘 분리 집게를 사용하여 네 번째 유방 지방 패드를 잡습니다. 다른 한편으로, 각진 미세 포셉의 닫힌 끝을 나머지 용기 위에 있는 지방 패드의 중앙에 삽입하고 복막 벽에 가깝게 삽입한다. 집게를 천천히 열어 작은 주머니를 만듭니다. 지방 패드에서 각진 미세 한 집게를 제거합니다.
- 각진 미세 한 집게를 사용 하 여, 종양 조각의 조각을 가지고 주머니에 삽입.
- 천천히 집게 팁을 열어 종양 조각을 지방 패드 포켓으로 방출합니다.
- 각진 미세 한 집게를 조심스럽게 철회하십시오.
참고: 주머니를 보면, 집게를 인출할 때 종양 조각이 유방 지방 패드의 주머니에 남아 있음을 확인합니다. 종양은 과잉 종양 조직이 실험 또는 은행에 필요할 때 두 가지 반대 지방 패드로 이식 될 수 있습니다. 양면 이식을 가진 동물은 반대로 종양 사이 알려진 상호 작용 때문에 처리 연구 결과를 위해 추천되지 않습니다. 또는, 트로카 장치는 이식 과정에 사용될 수 있다. - 절개 기저에서 시작하여 발톱과 톱니 모양의 집게를 사용하여 양쪽의 피부를 수집합니다. 양면을 함께 가져와 서서감 클립 적용을 위해 피부를 준비합니다. 절개 가장자리를 발톱 집게로 말리고 가장자리를 함께 꼬집어 상단의 연속 표면을 형성합니다.
- 톱니 모양의 집게와 함께 양면을 잡고 상처 클립 어플리케이터를 사용하여 절개 중앙에 상처 클립을 배치합니다. 필요한 경우, 조직을 닫고 고정시키기 위해 절개 끝에 조직 접착제를 적용하십시오.
- 동물을 온난한 표면에 있는 깨끗한 케이지에 넣습니다. 출혈, 퇴적의 징후 및 수술 후 기간 동안 통증을 모니터링하십시오. 동물은 수술 후 몇 분 이내에 위로 이동하고 있어야합니다.
- 수술 후 최소 3일 동안 동물의 절개 부위와 전반적인 건강에 주의를 기울이는 다. 통증 관리를 위한 제도적 지침을 따르십시오.
- 다음 이식을 계속하기 전에 유리 구슬 소독기에 10 s의 수술 도구를 청소하십시오. 사용하기 전에 도구가 식을 때까지 기다립니다.
- 모든 마우스가 이식될 때까지 4.1-4.15 단계를 반복합니다.
참고: 에스트로겐 보충은 ER+ 종양에 필요하며, 이는 물 또는 느린 방출펠릿(59)을통해 공급될 수 있다.
5. 약물 치료에 대한 반응으로 종양 성장 모니터링
참고: 확립된 이식 가능한 PDX와 p53-null 종양의 만져볼 수 있는 종양은 본질적인 종양 성장 속도에 따라 수술 후 개발하는 데 2주에서 8주 사이가 걸립니다.
- 일주일에 두 번 캘리퍼를 사용하여 2 차원으로 종양을 측정합니다. 수식을 사용하여 볼륨을 계산합니다.
종양 부피 (mm3)= W2 x L /2
여기서 W는 폭이고 L은 종양의 길이입니다. - 종양 부피가 150-300mm3에도달하면 약물 치료를 시작합니다.
참고: 약물의 특성에 따라 경구 관증 또는 복막 주사가 약물을 전달하는 데 사용될 수 있다. - 종양 샘플을 수집하고 다양한 목적을 위해 IHC 염색60,단백질 및 RNA/DNA 격리 및 면역 페노티핑61을 수행한다. 혈액을 수집하고 면역 phenotyping을 수행하거나 약동 / 약학 연구에 사용합니다.
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Representative Results
도 1은 직교 이식의장비(도 1A)및 주요 절차(도1B)를나타낸다. 도 2는 이식된 PDX 종양(MC1)의 특성화를 나타낸다. MC1 모델의 종양 단편(1mm3)은SCID/베이지 마우스의 #4 지방 패드로 이식되었다. 한 달 후, 평균 종양 크기는 약 350mm3에도달했다. 종양 부피는 1개월 동안 일주일에 두 번 모니터링되었다. 일반적으로 우리는 1mm3 종양 단편이식(도 2A)로약 2 주 에서 8 주 동안 다양한 PDX 또는 GEMM에 대한 만져볼 수있는 종양을 얻습니다. 종양 샘플은 형태학 및 신호 분석을 위해 수집될 수있다(도 2B−D). H&E 염색은병리학(도 2B)을분석하기 위해 수행되었다. IHC는 특정 세포 계보(케라틴 19(K19), 상피 세포, 도 2C),세포 상태(Ki67, 증식, 도2D)또는 관심의 신호 분자에 대한 마커를 모니터링하는 데 사용되었다.
그림 1: 수술 기술을 보여주는 회로도. (A)직교 이식에 필요한 수술 장비. (B)종양 트렁크 이식을 위한 유방 지방 패드의 노출을 보여주는 대표적인 영상. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2: 이식된 종양의 특성화. (A)캘리퍼에 의해 측정된 종양 성장의 대표적인 운동. 종양 부피 (mm3)= W 2 x L/2 (W = 너비 및 L = 길이). (B)MC1 PDX의 병리학을 보여주는 H&E 염색. IHC는 MC1 PDX에서 상피 마커 케라틴 19(C)및 증식 메이커 Ki67(D)을보여줍니다. 스케일 바 = 20 μm, 배율 = 40배. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
동물에 걸쳐 종양 성장의 변이를 줄이기 위해, 이식을 위한 1 mm3 단편으로 종양 조직을 절단하는 것이 중요합니다. 연조직을 성장하는 모델은 작업하기가 어렵고 종양 단편은 약간 더 커야합니다 (1-2 mm3). 매머 지방 패드 포켓에 조직을 배치 할 때이 여러 작은 종양 이나 이상한 모양의 종양귀착될 것이기 때문에 여러 조각으로 조직을 분할하지 않도록주의하십시오.
또한, 약물 치료 연구에 사용될 동물을 이식하기 위해 신선한 종양을 사용하십시오. 냉동 보존에서 조직을 이식하면 더 가변적인 테이크 속도와 약간 느린 성장 운동학을 얻을 수 있습니다. 종양이 냉동 보존 물질에서 성장하면, 두 번째 이식 생성은 그 모형을 위한 전형적인 테이크 비율 및 성장 운동학을 산출할 것입니다. 또한 이식을 위해 가벼운 괴사또는 가벼운 괴사가없는 종양을 사용하십시오. 대부분의 모델의 경우 400-600mm3의크기 범위가 될 것입니다. 명백한 괴사 심을 관찰하는 경우에, 이식을 위해 종양의 외부 층에서 조직을 사용하고 괴사 부위를 사용하지 마십시오. 종양 조직을 얼음위에 유지하고 건조로부터 보호하는 것이 중요합니다.
다른 마이크로환경을 가진 주변 또는 종양 코어로부터 유래되었을 수 있는 GEMM로부터 종양 청크 간의 가변성을 감소시키기 위해, 대체 방법은 종양 모델에 따라 약 5,000-30,000세포를 매머 지방 패드로 이식하는 1차 세포 현탁액을 제조하고 이식하는 것이다. 한정 콜라게나아제 소화는 DMEM/F12에서 1 mg/mL 타입 I 콜라게나아제로 수행되며, 125rpm에서 회전하는 37°C에서 2h에 대한 첨가제 없이 수행됩니다. 유방 종양 세포는 3 개의 짧은 원심 분리 단계에 의해 농축 될 수있다. 간략하게, 세포 현탁액을 15mL 원심관으로 옮기고 원심분리기는 7s에 450 x g로 옮긴다. 1x 덜벡코의 인산완충식염(DPBS)의 10mL에서 상류체를 흡인하고 재중단한다. 펄스 원심분리를 두 번 더 반복합니다. 이렇게 하면 청크 간의 차이를 임의화하는 데 도움이 됩니다.
정상적인 유방 상피의 이식은 내인성 마우스 상피의 존재에서 형태학적으로 정상적이고 기능적인 덕트 트리를 재생하지 않습니다. 62가자라기 위해서는 정상적인 상피 이식에 대한 내인성 마우스 상피(클리어링)를 제거할 필요가 있다. 그러나, 신가소 조직은 그대로 내생 마우스 상피의 존재에도 성장할 수 있다. 그러나 이것은 반드시 그러한 억제 신호가 존재하지 않는다는 것을 의미하지는 않습니다. 유방 지방 패드 클리어링은 이식 된 물질과의 내인성 마우스 유방 상피의 상호 작용을 금지하는 특정 실험 프로토콜에 필요합니다. 또한, 내인성 상피는 게놈, 전사 및 프로테아메 분석과 같은 일부 다운스트림 분석을 복잡하게 만들 수 있다.
PDX 모델 및 이식 가능한 GEMM은 임상 아류형의 이질성과 인간 유방암의 약물 치료에 대한 반응을 충실하게 재구성할 수 있다. 중요한 것은, 이 모형은 이식하고 일련 통로의 한정된 수 도중 안정한 표현형을 유지하기 쉽습니다. 종양 성장은 캘리퍼로 쉽게 측정 할 수 있습니다. PDX 모델과 이식 가능한 GEMM의 한 가지 주의 사항은 이러한 모델이 종양 개시의 초기 단계를 되풀이하지 않는다는 것입니다. 또한 PDX 모델은 기능성 면역 계통과 종양의 상호 작용이 결여되어 있다. 이 전임상 모형은 유방암 생물학을 공부하고 약 반응을 평가하기 위하여 귀중한 시스템을 제공합니다. 각 종양 모델에 대한 유전체 및 프로테오믹 정보와 약물 반응을 결합하면 반응 예측 및 치료 내성 메커니즘에 대한 바이오마커의 식별을 용이하게 할 것이다. 이러한 유형의 데이터는 환자 결과를 개선하기 위해 화학 요법 또는 면역 요법과 함께 단독으로 사용할 수 있는 새로운 표적 치료법으로 이어질 수 있습니다.
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Disclosures
MTL은 StemMed, Ltd.의 제한된 파트너의 창립자이자 일반 파트너인 StemMed Holdings의 설립자이자 매니저입니다. MTL은 트카르디 테라피의 창립자이자 주식 보유자이며, 주식회사 LED는 StemMed, Ltd.의 보상 직원입니다.
Acknowledgments
이 작품은 건강의 국가 학회에 의해 지원되었다 (R37CA228304 및 R01HL146642 Xi 첸, CA148761 제프리 M. 로젠), 미국 국방부 (W81XWH-19-1-0524 → Xi Chen), W81XWH-19-1-0035 ~ 샹동 Lv), 미국 암 학회(RSG-18-181-01-TBE to Xi Chen), 텍사스 암 예방 및 연구 연구소(RR150009 CPRIT) 베일러 의과 대학의 환자 파생 제노이식 및 고급 생체 모델 코어 (RP170691 CPRIT 코어 시설 상 및 NCI-CA125123 P30 암 센터 지원 보조금의 자금 지원).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1 mg/mL Buprenorphine-SR | ZooPharm (via BCM veterinarians) | Sterile | |
| 26G syringe | BD | 148232E | Sterile |
| Betadine Scrub | Fisher | 19-027132 | |
| Cotton Swabs | VWR International Laboratory | 89031-272 | Sterile |
| DMEM | Fisher | MT 10-013-CM | Sterile |
| Electric shaver | Oster | 78005-050 | |
| Glass beads sterilizer (Germinator) | Roboz Surgical Store | DS-401 | |
| Lubricant ophthalmic ointment | Akorn Animal Health | 17478-062-35 | |
| Micro Dissecting Forceps; Serrated, Angular (regular forceps) | Roboz Surgical Store | RS-5139 | Sterile |
| Micro Dissecting Spring Scissors (fat pad cutter) | Roboz Surgical Store | RS-5658BT | Sterile |
| Micro Forceps (tissue placing forceps) | Roboz Surgical Store | RS-5069 | Sterile |
| Petri Dish | Fisher | 08-757- 100D | Sterile |
| Sterile drape | Sai Infusion Technology | PSS-SD1 | Sterile |
| Surgery scissors | Roboz Surgical Store | RS-5960 | Sterile |
| Tissue Forceps (claw forceps) | Roboz Surgical Store | RS-5158 | Sterile |
| Wound clip applier | BD Autoclip Wound System | 01-804 | Sterile |
| Wound clip remover | BD Autoclip Wound System | 01-804-15 | Sterile |
| Wound clips | BD Autoclip Wound System | 01-804-5 | Sterile |
References
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