Summary
Vi presenterer en EKG-protokoll som er teknisk enkel, billig, rask og rimelig hos små mus, og kan utføres med forbedret følsomhet. Vi foreslår denne metoden som en screening tilnærming for å studere farmakologiske midler, genetiske modifikasjoner, og sykdomsmodeller hos mus.
Abstract
Elektrokardiogrammet er et verdifullt verktøy for evaluering av hjerteledningssystemet. Dyreforskning har bidratt til å generere ny genetisk og farmakologisk informasjon om elektrokardiogrammet. Det har imidlertid vært utfordrende å gjøre elektrokardiogrammålinger hos små dyr in vivo, som mus. For dette formål brukte vi en elektrokardiogramregistreringsmetode hos bedøvede mus med mange fordeler: det er en teknisk enkel prosedyre, er billig, har kort måletid, og er rimelig, selv hos unge mus. Til tross for begrensningene ved bruk av anestesi, kan sammenligninger mellom kontroll og eksperimentelle grupper utføres med forbedret følsomhet. Vi behandlet mus med agonister og antagonister i det autonome nervesystemet for å bestemme gyldigheten av denne protokollen og sammenlignet våre resultater med tidligere rapporter. Vår EKG-protokoll oppdaget økte hjertefrekvenser og QTc-intervaller på behandling med atropin, reduserte hjertefrekvenser og QTc-intervaller etter carbacholbehandling, og høyere hjertefrekvenser og QTc-intervaller med isoprenalin, men noterte ingen endring i EKG-parametere ved administrering av propranolol. Disse resultatene støttes av tidligere rapporter, som bekrefter påliteligheten til denne EKG-protokollen. Dermed kan denne metoden brukes som en screening tilnærming til å gjøre EKG målinger som ellers ikke ville bli forsøkt på grunn av høye kostnader og tekniske problemer.
Introduction
Elektrokardiogrammet (EKG), en test som måler den elektriske aktiviteten til ens hjerteslag, er et verdifullt verktøy for evaluering av hjerteledningssystemet. Parameterne som måles av et EKG inkluderer hjertefrekvens, PR-intervall, QRS-varighet og QT-intervall. Kort sagt, PR-intervallet tilsvarer den tiden som kreves for en elektrisk impuls til å reise fra atriende sinusnode gjennom atrioventrikulær node til Purkinje-fibrene; QRS varighet er tiden for ventrikulær depolarisering å skje gjennom Purkinje-systemet og ventrikulær myokardi; og QT-intervall er varigheten av ventrikulær repolarisering.
EKG-opptak hos mus har hjulpet forskere med å undersøke hjertefunksjonen og bestemme de fysiologiske og patofysiologiske mekanismene for hjertefenotyper, som arytmi, atrieflimmer og hjertesvikt. De fleste kardiovaskulære forskning har involvert studier i genmodifiserte musemodeller. Det er ofte utfordrende å få meningsfulle data om EKG-opptak fra små mus som har blitt genetisk manipulert.
Det finnes flere metoder for å utføre EKG i mus1. Studier tyder på at EKG-opptak hos bevisste dyr foretrekkes fremfor bedøvede dyr når det er mulig, siden effekten av anestesi på hjertefunksjon har blitt godt etablert2. To protokoller som registrerer EKG hos bevisste mus er av note1. EKG-radiotelemetrisystemet er gullstandarden for kontinuerlig langsiktig overvåking av EKG hos bevisste mus1,,3. Til tross for deres styrke i å bli registrert i en bevisst tilstand, har radiotelemetri-koblet EKG-målinger flere begrensninger, inkludert de høye kostnadene for oppsett og for implantatet, kravet til en svært erfaren operatør, en stabiliseringsperiode på over 1 uke, behovet for store mus (> 20 g), og oppkjøp av bare en enkelt bly av EKG-opptak1. Et annet system som bruker pote-størrelse ledende elektroder innebygd i en plattform tillater EKG-opptak i bevisste mus uten anestesi ellerimplantater 1,4. Dette ikke-invasive systemet er en alternativ metode i situasjoner der radiotelemetrisystemer er utilgjengelige siden det har mange fordeler: ingen krav om kirurgisk behandling, ikke behov for anestesi, lave kostnader per mus (bare det første oppsettet er dyrt), kort tid for måling og rimelighet av nyfødte1,4. Den største ulempen med dette systemet er at det ikke er egnet for kontinuerlig langsiktig overvåking1.
Her introduserer vi en annen billig, enkel og rask EKG-opptaksmetode hos bedøvede mus og demonstrerer gyldigheten og følsomheten ved å utføre et EKG etter autonom blokade/stimulering av hjerteledningssystemet. Vi foreslår denne EKG-metoden for screening effekten av farmakologiske midler, genetiske modifikasjoner og sykdomsmodeller hos mus.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dyreprosedyrer ble godkjent av den lokale komiteen for omsorg og bruk av laboratoriedyr, Kyung Hee University (lisensnummer: KHUASP(SE)-18-108) og i samsvar med US National Institutes of Health Guide for omsorg og bruk av laboratoriedyr.
1. Eksperimentelle dyr
- Hold alle mus (39 mus, Balb/c, hann, 7\u20129 uker gammel) i et patogenfritt anlegg i henhold til veiledningen for omsorg og bruk av laboratoriedyr.
- Opprettholde musene på en 12 t lys / mørk syklus ved konstant temperatur med fri tilgang til mat og vann.
2. Utarbeidelse av bedøvelse
MERK: Tribromoetanol brukes over ketaminkombinasjoner og isofluran, basert på stabiliteten i hjertefrekvensen og reproduserbarheten av ekkokardiografi hos tribromoetanestesierte mus1,,5,6
- Lag en lagerløsning på 2,2,2-tribromoetanol i en konsentrasjon på 1 g per 1 ml tertiær amylalkohol. Varm ved 40\u201245 °C i 24 timer. Oppbevars ved 4 °C i 12 måneder.
- For arbeidsløsning fortynnes 0,5 ml lagerløsning i 19,5 ml saltvann (0,9 % NaCl) til 25 mg/ml. Varm ved 40\u201245 °C i 1 timer. Oppbevares ved 4 °C i 1 måned.
3. Oppsett av EKG-system
- Sørg for å sette opp systemet slik at det ikke er støy eller vibrasjon innen 2 m siden EKG-signaler i en mus er følsomme for miljøstøy og bevegelse.
- Klargjør maskinvareoppsettet: et datainnsamlingssystem, en bioforsterker og en datamaskin som er installert med en EKG-dataanalyseprogramvare.
- Koble datainnsamlingssystemet til strømnettet (AC) ved hjelp av strømkabelen.
- Koble datainnsamlingssystemet til datamaskinen ved hjelp av en USB-kabel.
- Koble signalutgangen på bakpanelet på bioforsterkeren til en analog inngang på frontpanelet på datainnsamlingssystemet ved hjelp av en kabel.
- Koble I2C-utgangen av datainnsamlingssystemet til I2C-inngangen til bioforsterkeren ved hjelp av I2C-kabelen.
- Koble den 3-d-årige bioforsterkerkabelen til 6-pinners inngangskontakten på frontpanelet på bioforsterkeren.
- Slå på datainnsamlingssystemet ved hjelp av bryteren på bakpanelet.
MERK: Kort sagt forsterkes signalene gjennom en bioforsterker og registreres ved hjelp av et datastyrt datainnsamlings- og analysesystem med følgende kanalinnstillinger: samplingsfrekvens på 2 k/s, rekkevidde på 20 mV og lavpassfilterinnstilling på 200 Hz.
- Åpne analyseprogrammet og sett det opp for EKG-datainnsamling.
- Gå til Oppsett | Kanalinnstillinger. Sett samplingsfrekvensen til 2 k/s. Sett området til 20 mV. Sett inngangsforsterkeren til 200 Hz lavpass.
- Gå til EKG-analyse | EKG-innstillinger. Velg "Mus" i innstillingene for forhåndsinnstilling for gjenkjenning og analyse.
- I Snitt-panelet velger du å sammenkoble N (f.eks. 4 slag eller 60 s) påfølgende hjertesykluser til et enkelt gjennomsnittlig signal for gjennomsnittlig visning og tabellvisning.
- I QTc-panelet velger du "Bazett"-metoden, som er definert som pulskorrigert verdi for QT-intervall: QTc = QT / (RR/100)0,5, RR-intervall = 60 / hjertefrekvens7.
4. EKG-måling
- Plasser en mus på en presisjonsskala og registrer vekten.
- Induser anestesi i musen ved intraperitoneal (i.p.) injeksjon av en arbeidsløsning av tribromoetanol (18 ml arbeidsløs oppløsning per kg kroppsvekt (f.w.)).
- Plasser en bedøvet mus i liggende stilling. Sørg for at musen er fullstendig bedøvet (mindre enn 2 min).
- Sett elektrodene med akupunkturnåler subkutuell inn i høyre og venstre forben og venstre baklimb i henhold til bly II EKG-ordningen og fest dem med tape (Figur 1). Sørg for at dybden og plasseringen av innsatte elektroder er konsistente gjennom forsøkene.
- Koble de andre endene av elektrodene ved å klikke dem inn i de tre snap-kontaktene i den andre enden av ledningene på den 3-drevne bioforsterkerkabelen.
- Injiser legemidler (dvs.) 3 min etter at anestetika er levert (figur 2).
- Begynn å registrere EKG 10 min etter injeksjon av anestetika. Når opptaket er fullført, bruk EKG-dataene fra 12 til 17 min etter injeksjon av anestetika for analyse.
- Fjern elektrodene forsiktig på slutten av EKG-opptaksøkten.
5. EKG-dataanalyse
- Gå til EKG-analyse | Gjennomsnittlig visning og sørg for at programvaren identifiserer starten og slutten av P-bølgen, QRS-komplekset og T-bølgen i individuelle slag. Om nødvendig er manuell korrigering av disse bølgene og intervallene mulig ved å flytte feilplasserte markører til de riktige posisjonene.
MERK: Som avbildet i figur 3A,strekker PR-intervallet seg over utbruddet av P-bølgen til QRS-komplekset (for det meste mangler Q-bølge i en mus EKG). QRS-varigheten strekker seg fra utbruddet av Q-bølgen (primært en R-bølge i en mus EKG) til slutten av S-bølgen. QT-intervallet består av utbruddet av Q-bølgen (for det meste R-bølgen i en mus EKG) til slutten av T-bølgen. Legg merke til kortere varighet og fravær av et Q-bølge- og ST-segment i mus-EKG i forhold til humantEKG 8. - Gå til EKG-analyse | Tabellvisning og velg de riktig identifiserte EKG-dataene ved å kontrollere individuelle slag i vinduet Gjennomsnittlig visning.
MERK: Figur 3 viser flere eksempler på faktiske EKG-signaler for mus. Figur 3A representerer et normalt wild-type signal som er riktig identifisert med hensyn til P-bølge, QRS-kompleks og T-bølge. Datastyrt utvalg av PQRS-bølger kan medføre feilaktige feilplasseringer, for eksempel i figur 3B et normalt wild-type signal som feilplasserer utbruddet av P-bølgen. I figur 3C et EKG-signal som forlagt slutten av QRS-komplekset, noe som resulterer i en overvurdering av QRS-varighet. I figur 3D et EKG-signal som forlagt slutten av QRS-komplekset, noe som resulterer i undervurdering av QRS-komplekset på grunn av tvetydig T-bølge og figur 3E et EKG-signal med en uidentifiserbar T-bølge. Uten utelukkelse eller manuelle rettelser kan PQRS-intervaller være over eller undervurderes. Pass på å velge EKG-signalene som er korrekt identifisert, og signalene som ikke går glipp av måltoppene. Slike tilfeller, inkludert B, C, D og E (figur 3),er derfor ekskludert ved nøyaktig estimering av EKG-parametere generelt. - Velg EKG-dataene av interesse for tabellvisning, og kopier/ lim dem inn i en regnearkfil.
6. Statistisk analyse
- Utfør den statistiske analysen ved hjelp av et statistikkprogram. Analyser dataene med de eksperimentelle forholdene blindet. Utfør Studentens t-testog Mann-Whitney U-test for 2-gruppesammenligninger. Tallene i hver figur indikerer antall mus som brukes for hver gruppe. Rapporter resultatene som gjennomsnitt ± SEM.
- Vurder forskjeller med p < 0,05 ved U-test for å være statistisk signifikant: *, p < 0,05; **, p < 0,01; og ***, p < 0,005 kontra respektive kontroller.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Farmakologiske eksperimenter
For å finne ut om vår ikke-invasive EKG-måling gjenspeiler påvirkningen av autonom modulasjon på hjerteledningssystemet, ble normale Balb/c-mus utfordret med agonister og antagonister i det autonome nervesystemet (ANS). Atropin og carbachol ble brukt til å påvirke parasympatisk autonom blokade og stimulering, mens propranolol og isoprenalin ble administrert for å fremkalle sympatisk autonom blokade og stimulering, henholdsvis9.
Hjertefrekvensen økte signifikant i atropin- (p < 0,05) og isoprenalinbehandlede mus (p < 0,05) og falt med karbachol (p < 0,005) sammenlignet med kjøretøy (kjøretøy, 391 ± 13 bpm versus atropine, 487 ± 15 bpm versus carbachol, 158 ± 7 bpm; kjøretøy, 382 ± 14 bpm versus isoplinerena, 548 ± 8 bpm; kjøretøy, 404 ± 25 bpm versus propranolol, 303 ± 16 bpm) (Figur 4). I tillegg økte QTc-intervallet i atropin- (p < 0,05) og isoprenalinbehandlede mus (p < 0,05) og redusert i karbacholbehandlede mus (p < 0,005) versus kjøretøy (kjøretøy, 46,5 ± 0,6 ms versus atropin, 51,1 ± 1,3 ms versus karbachol, 29,4 ± 1,0 ms; kjøretøy, 41,8 ± 1,2 ms versus isoprenalin, 57,5 ± 3,5 ms) (figur 4). Figur 5 viser representative kartvisninger og snittvisninger for EKG-signalene i atropin-, karbachol- og kjøretøybehandlede mus.
Figur 1: EKG-plassering.
Akupunktur nåle elektroder settes inn subkutously i henhold til bly II EKG ordningen (høyre og venstre forben og venstre hindlimb) og er festet med tape. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2: Anestesi- og narkotikabehandlingsordninger.
Tre minutter etter injeksjon av anestetika (f.eks. tribromoetanol), administrer legemidler (f.eks. atrotpin, karbachol, isoprenalin og propranolol; i.p.). Ti minutter etter at bedøvelsen er levert, begynner du å registrere EKG. Samle inn EKG-data fra 12\u201217 min etter injeksjon av anestetika. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3: Eksempler på EKG-signaler for mus.
(A) Et normalt wild-type signal som er riktig identifisert med hensyn til P-bølgen, QRS-komplekset og T-bølgen. (B)Et normalt wild-type signal som forlagt utbruddet av P-bølgen. (C)Et EKG-signal som feilplasserer enden av QRS-komplekset. (D)Et EKG-signal som feilplasserer enden av QRS-komplekset på grunn av en tvetydig T-bølge. (E)Et EKG-signal med en uidentifiserbar T-bølge. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4: EKG-målinger hos mus behandlet med agonister og antagonister i det autonome nervesystemet.
(A) Administrasjon av atropin (1 mg/kg) øker hjertefrekvensen og QTc-intervallet. (B) Carbachol (0,5 mg/kg) reduserer hjertefrekvensen og QTc-intervallet. (C) Isoprenalin (1 mg/kg) øker hjertefrekvensen og QTc-intervallet. (D) Propranolol (1 mg/kg) endrer ingen EKG-parametere. *, p < 0,05; , p < 0,005. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 5: Representative EKG-signaler av mus behandlet med agonister og antagonister i det parasympatiske nervesystemet.
(A) EKG-signaler av kjøretøybehandlet mus anskaffet fra kartvisninger og snittvisninger (et dataanalyseprogram). (B)Signaler fra atropinbehandlet mus. (C)Signaler fra karbacholbehandlet mus. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det er flere kritiske trinn i protokollen. Omgivelsene bør være fri for støy og vibrasjon. EKG-elektrodene må settes inn under huden stabilt og konsekvent hvorav innsettingstrinnet krever foreløpige eksperimenter til forskeren er teknisk erfaren. Videre bør bedøvelsen tilberedes og lagres riktig og brukes ved riktig dose. Til slutt bør PQRS-bølgene plasseres riktig i individuelle EKG-slag i Averaging View-vinduet.
Våre studier inkluderte testing av narkotika. Men hvis farmakologiske tester utelates, kan trinn 4.7 endres ved å starte opptaket 5 min etter injeksjon av anestetika, og EKG-dataene kan brukes fra 10 til 15 min. EKG-verdiene er relativt stabile over 15 min etter anestesi og har blitt replikert i samme mus 6 timer etter den første målingen5.
Autonom blokade og stimulering av legemidler fremkaller differensialresponser med hensyn til hjertefrekvens. Flere protokoller har blitt brukt i EKG-forskning. Basert på telemeterede EKG-opptak hos mus, atropin, isoprenalin, og propranolol ikke signifikant endre hjertefrekvensen, mens carbachol betydelig redusert det (villtype, 739 ± 33 bpm; atropin, 726 ± 5 bpm; carbachol, 205 ± 54 bpm; isoprenalin, 722 ± 32 bpm; propranolol, 560 ± 21 bpm)9. Basert på EKG-opptak fra det ikke-invasive systemet som bruker koduktive elektroder i potestørrelse som er innebygd i en plattform, økte atropin og isoprenalin signifikant hjertefrekvens hos mus (p < 0,05), mens propranolol ikke endret det (p = NS) (villtype, 706 ± 13 bpm; atropin, 727 ± 12 bpm; isoprenalin, 12 ± 2% økning versus kontroll; propranolol, 584 ± 53 bpm)4,10. Med dette ikke-invasive EKG-systemet, isoprenalin indusert ST segment depresjon4.
Overflate EKG-signaler (bly II via lem elektroder) ervervet under isofluran anestesi under høyoppløselig transthoracic ekkokardiografi (TTE) med et ultralydsystem11. EKG-registreringer fra TTE antydet at hjertefrekvensen økte 15 min etter administrering av atropin11. I likhet med vår protokoll, 6-bly EKG-opptak under anestesi med tribromoetanol ved hjelp av 5-nål elektroder (1 elektrode implantert subkutously i hvert lem og 1 plassert i precordial posisjon) som er koblet til et datainnsamlingssystem med et forsterkersett12. Med denne metoden, ved hjelp av 6-bly EKG, carbachol betydelig senket hjertefrekvens (p < 0,001) og økt QT intervall (p < 0,001), men propranolol ikke signifikant endre enten parameter (villtype, 395 ± 65 bpm; carbachol, 177 ± 36 bpm; propranolol, 351 ± 30 bpm)12. En annen rapport som gjorde 3-bly EKG målinger under anestesi med tribromoethanol viste at isoprenalin betydelig økt hjertefrekvens i villtype mus (p < 0,01) (vill-type, 422 ± 17 bpm; isoprenalin, 503 ± 27 bpm)13. 14 Totalt sett er hjertefrekvensen lavere i EKG-målinger under anestesi enn hos de i en bevisst mus. Forskjeller mellom kontroll- og legemiddelbehandlede grupper gjenspeiles godt i EKG-opptak under anestesi og av systemet som bruker kvernstørrelse ledende elektroder innebygd i en plattform, i en bevisst mus, fordi endringer i hjertefrekvens og QT-intervall oppdages ved behandling med atropin, carbachol og isoprenalin, men ikke propranolol alene10,11,12,13. I motsetning, telemetered EKG-opptak oppdage bare endringer i hjertefrekvensen med carbachol9.
Denne EKG-metoden under anestesi med tribromoethanol bemerker også forskjeller i hjertefrekvens og QTc-intervall på administrasjon med atropin, karbachol og isoprenalin, men ikke propranolol, noe som innebærer høy følsomhet. Her med autonome forstyrrelser viste vi endringer i hjertefrekvens og QTc-intervall. Videre har vi publisert et manuskript med vår EKG-metode som beskriver en endring i PR-intervall og en annen som adresserer endringer i QRS-varighet og QTc-intervall, som delvis støtter følsomheten i alle PQRS-bølger15,16.
Protokollen har mange fordeler som kan sammenlignes med den ikke-invasive metoden som gjør det mulig for EKG-opptak i en bevisst mus med elektroder i potestørrelse innebygd i en plattform. Den store begrensningen av vår protokoll er imidlertid bruk av bedøvelsesmidler som tribromoetanol. Tribromoetanol brukes over ketaminkombinasjoner og isofluran, basert på stabiliteten av hjertefrekvens og reproduserbarheten av ekkokardiografi i tribromoethanol-bedøvet mus1,5,6 Selv omEKG-opptak i et bevisst dyr foretrekkes for de under anestesi, variasjoner i sympatisk og parasympatisk tone, og relativt høy hjertefrekvens noen ganger gjøre målinger i bevisste mus mindre enn ideelt for alle anvendelser av ekkolardiografi6.
Samlet sett, til tross for sine begrensninger (f.eks. bruk av anestesi), har vår EKG-metode mange fordeler: (i) det er en teknisk enkel prosedyre som bare krever stabil innsetting av EKG-elektroder under huden, (ii) har lave eksperimentelle kostnader - utlegget er først og fremst for det første maskinvareoppsettet; (iii) har korte måletider på mindre enn 20 min per mus, og kan utføres på unge mus (> 15 g kroppsvekt, etter vår erfaring)16 og til og med nyfødte (postnatal dager 2\u20124)17. Dermed kan screening eksperimenter for narkotika og ulike typer mus (f.eks, genmodifiserte, sykdomsmodeller) utføres raskt og uten mye kostnad per mus, utgjør en pålitelig og sensitiv analyse og kan brukes som en ekstra støttedata utover telemetered EKG-opptak.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Ingen interessekonflikter, økonomiske eller på annen måte, er erklært av forfatterne.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av Basic Science Research Programs som administreres av National Research Foundation of Korea (NRF) (2015R1C1A2A01052419 og 2018R1D1A1B07042484).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2,2,2-tribromoethanol | Sigma-Aldrich | T48402-25G | anesthetics, Avertin |
| Animal | Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan | Balb/c mice, male, aged 7-9 weeks | |
| Atropine | Sigma-Aldrich | A0123 | parasympathetic antagonist |
| BioAmp | AD Instruments, Bella Vista, Australia | ML132 | bio amplifier |
| Carbachol | Sigma-Aldrich | C4382 | parasympathetic agonist |
| Electrodes with acupuncture needles | DongBang Acupuncture Inc., Sungnam, Korea | DB106 | 0.20 x 15 mm |
| Isoprenaline | Sigma-Aldrich | I2760 | sympathetic agonist |
| LabChart 8 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | data analysis software | |
| Mouse food | LabDiet, St. Louis, MO, USA | 5L79 | Mouse diet |
| PowerLab 2/28 | AD Instruments, Bella Vista, Australia | data acquisition system | |
| Propranolol | Sigma-Aldrich | P0884 | sympathetic antagonist |
| SPSS Statistics program | SPSS | SPSS 25.0 | statistics program |
References
- Ho, D., et al. Heart rate and electrocardiography monitoring in mice. Current Protocols in Mouse Biology. 1, 123-139 (2011).
- Vatner, S. F., Takagi, G., Asai, K., Shannon, R. P. Cardiovascular physiology in mice: Conscious measurements and effects of anesthesia. Cardiovascular Physiology in the Genetically Engineered Mouse. , 257-275 (2002).
- Cesarovic, N., Jirkof, P., Rettich, A., Arras, M. Implantation of radiotelemetry transmitters yielding data on ecg, heart rate, core body temperature and activity in free-moving laboratory mice. Journal of visualized experiments : JoVE. (57), (2011).
- Chu, V., et al. Method for non-invasively recording electrocardiograms in conscious mice. BMC Physiology. 1, 6 (2001).
- Kim, M. J., Lim, J. E., Oh, B. Validation of non-invasive method for electrocardiogram recording in mouse using lead ii. Biomedical Science Letters. 21, 135-143 (2015).
- Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross, J. Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice. American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 282 (6), 2134-2140 (2002).
- Mitchell, G. F., Jeron, A., Koren, G. Measurement of heart rate and q-t interval in the conscious mouse. The American Journal of Physiology. 274 (3), 747-751 (1998).
- Farraj, A. K., Hazari, M. S., Cascio, W. E. The utility of the small rodent electrocardiogram in toxicology. Toxicological sciences : an official journal of the Society of Toxicology. 121 (1), 11-30 (2011).
- Gehrmann, J., et al. Impaired parasympathetic heart rate control in mice with a reduction of functional g protein betagamma-subunits. American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 282 (2), 445-456 (2002).
- Chu, V., et al. Electrocardiographic findings in mdx mice: A cardiac phenotype of duchenne muscular dystrophy. Muscle & Nerve. 26 (4), 513-519 (2002).
- Merentie, M., et al. Mouse ecg findings in aging, with conduction system affecting drugs and in cardiac pathologies: Development and validation of ecg analysis algorithm in mice. Physiological Reports. 3 (12), (2015).
- Calvillo, L., et al. Propranolol prevents life-threatening arrhythmias in lqt3 transgenic mice: Implications for the clinical management of lqt3 patients. Heart Rhythm : the Official Journal of the Heart Rhythm Society. 11 (1), 126-132 (2014).
- Zhang, Y., et al. Acute atrial arrhythmogenicity and altered ca(2+) homeostasis in murine ryr2-p2328s hearts. Cardiovascular Research. 89 (4), 794-804 (2011).
- Kmecova, J., Klimas, J. Heart rate correction of the qt duration in rats. European Journal of Pharmacology. 641 (2-3), 187-192 (2010).
- Kim, H. O., et al. Garem1 regulates the pr interval on electrocardiograms. Journal of Human Genetics. 63 (3), 297-307 (2018).
- Nam, J. M., Lim, J. E., Ha, T. W., Oh, B., Kang, J. O. Cardiac-specific inactivation of prdm16 effects cardiac conduction abnormalities and cardiomyopathy-associated phenotypes. American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 318 (4), 764-777 (2020).
- Knollmann, B. C., et al. Isoproterenol exacerbates a long qt phenotype in kcnq1-deficient neonatal mice: Possible roles for human-like kcnq1 isoform 1 and slow delayed rectifier k+ current. The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 310 (1), 311-318 (2004).
