Summary
نحن نصف تقنية النوبات البطانة في الأرانب حديثي الولادة بعد القسطرة المريء مع أنبوب المعدة.
Abstract
الأرنب حديث الولادة هو نموذج حيواني مفيد لمختلف الأمراض والإجراءات. إدارة مجرى الهواء من الأرنب معقدة بسبب خصائصها التشريحية، والتي هي أكثر تعقيدا في حالة الوليد. من الطرق المختلفة لإدارة مجرى الهواء المتقدمة، التنابيب البطانية هو أقل عدوانية من استئصال القصبة الهوائية، وأكثر جدوى من الإدارة فوق الغلوتيك نظرا لعدم وجود الأجهزة فوق الغلوتيك من هذا الحجم الصغير. كما التصور glottis المباشر من الصعب جدا في الحيوانات بهذا الحجم، يتم تقديم هذا النموذج الاحتضان الأعمى كبديل فعال، وخاصة بالنسبة للتجارب التي تتطلب تخديرا مطولا. باستخدام هذه الطريقة، قمنا بإجراء عمليات النوبات الأعمى مع نسبة نجاح 90٪.
Introduction
التشريح الغريب للجهاز التنفسي الأرنب يجعل الاحتضان الرغوية معقدة. تجويف الفم عميق وضيق مع مجموعة محدودة من فتح الفم ولسان كبير نسبيا، مما يجعل التصور المباشر للحنجرة صعبة حتى مع استخدام منظارالحنجرة 1،2. وعلاوة على ذلك، فإن الاحتضان من الأرانب الوليدة، التي هي 10-20 مرات أصغر من الكبار، هو أكثر من إجراء الصعبة. بالإضافة إلى هذه الخصائص التشريحية، الأرانب عرضة للحنجرة الثانوية للتلاعب في مجرى الهواء.
وقد وصفت العديد من تقنيات الاحتضان في الأدب، مثل الإرهاق القصبي الحنجرة الحنجرة، الإرهاق الأعمى، الإرهاق منظار، الاحتضان الرجعي، الإرهاق المنظار، التشنج داخل المنظار، استئصال القصبة الهوائية والتهوية الجهاز فوق الجلوجة3،4،5،6،7،8،9. وقد نفذت جميع هذه التقنيات بنجاح في الأرانب الكبار; ومع ذلك، هناك عدد قليل من المنشورات المتعلقة إدارة مجرى الهواء المتقدمة في أرنب الوليد10. تصف إحدى الدراسات إجراء عمليات استئصال القصبة الهوائية في الحيوانات في هذا العصر لتقييم ميكانيكا التنفس وحجم الرئة ، على الرغم من أن هذه تقنية عدوانية ولا رجعة فيها11. وقد ثبت أن هذه الطريقة للانبيب البطاية لتكون وسيلة فعالة ومنخفضة التكلفة لإدارة مجرى الهواء في الأرانب حديثي الولادة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تمت الموافقة على إجراء التنبيب الموضح أدناه من قبل لجنة الرعاية والاستخدام الحيوانية المؤسسية لجامعة برشلونة (CEEA 180/19)
1- الإعداد التجريبي
- الحصول على المواد التالية: 2 مم قطر بولي فينيل كلوريد (PVC) أنبوب endotracheal، 6 الفرنسية (الأب) أنبوب التغذية البولي يوريثين، شقة واسعة وعريضة تشريح ملقط ومواد التشحيم العقيمة (الشكل 1).
- خلال عمليات النوباض والجراحة ، والحفاظ على الظروف العقيمة.
2. التخدير
- تخدير الحيوان مع 5 ملغ / كغ xylazine و 25 ملغ / كغ الكيتامين تطبيقها معا في العضل في اطالي vastus من رباعيات الفخذ. ويمكن أيضاً استخدام ناهضات ألفا-2 مثل dexmedetomidine بدلاً من الزيلازين.
- السماح 3-5 دقائق للأدوية للوصول إلى تأثير.
- Readminister الجرعة نفسها حتى يتحقق التخدير العميق (دواسة سلبية، ردود الفعل بالببرال والقرنية). من الناحية المثالية، فإن الأرنب الحفاظ على التنفس التلقائي حتى النوب.
3. النوبات التناسخية الرغوية
- وضع الأرنب على بطانية حرارية في 37 درجة مئوية. وضع الحيوان في إعادة شغل الظهر مع الرأس في فرط التمليس. محاذاة الرأس على التوالي وخط الوسط ممكن. قد يكون من المفيد أن تحقق 45 درجة على الأقل من التمديد(الشكل 2)لفة طولها أربعة سنتيمترات مصنوعة من شاش معقمة وضعت في منطقة الظهر من الرقبة.
- استخدام ملقط تشريح تلميح شقة وواسعة لفتح تجويف الفم ما يقرب من سنتيمتر واحد واسعة. استخدام ملقط مع نهاية حادة وواسعة لتجنب صدمة الفم.
- قياس المسافة بين الفم ومنطقة المعدة (الضلع الأول). إدخال مشحم 6 الفرنسية (الأب) البولي يوريثين أنبوب المعدة إلى علامة قبل قياس ( الشكل3-4).
- نقل أنبوب التغذية إلى اليسار وإصلاح مع شريط لاصق إلى المجال الجراحي.
- إدخال 2 مم قطر أنبوب ENDOTRACHEal PVC، مغطاة زيوت التشحيم المعقمة إلى علامة 3 سم.
- إذا كانت هناك أي صعوبات في تقدم الأنبوب، نقله تماما و reattempt حتى يتم تحقيق انزلاق سلس. خطر الصدمة على الحنجرة وeglottis كبيرة مع محاولات النوبه المتعددة. إصلاح أنبوب مع شريط لاصق إلى المجال الجراحي ( الشكل5-6).
- توصيل أنبوب الإنتروتراشال إلى جهاز التنفس الصناعي مع الإعدادات التالية: حجم المد والجزر - 10 مل / كجم؛ معدل التنفس: 40 نفسا / دقيقة؛ فيو2 100٪، ا. ا.
- تأكيد الموضع الصحيح للأنبوب عن طريق الكشف عن CO2 في الهواء الزفير (ETCO2)، التصور المباشر للتوسع الصدري والضبابية للأنبوب. رصد الحيوان بواسطة أكسدة النبض والرئتين يمكن أن يكون مفيدا أيضا (الشكل 7).
- في ختام التجربة، استخدم بروتوكول القتل الرحيم الموحد الذي يتكون من إعطاء الوريد من pentobarbital 120-240 ملغ/كغ. جرعات تكرار حتى يتم تحقيق توقف التنفس, الغياب منعكس وsystole.
ملاحظة: في التجارب الجراحية، الحيوان على قيد الحياة أثناء عملية التهوية وأخيرا هو القتل الرحيم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
في المختبر، يتم تنفيذ هذه التقنية من قبل الموظفين الطبيين ذوي الخبرة في التجارب مع الأرانب نيوزيلندا والخبرة في إدارة مجرى الهواء للأطفال. وقد تم إجراء هذا الإجراء من قبل محقق واحد في 10 مع معدل نجاح عالمي قدره 90٪. في السابق، كان باحث آخر قد مارس تحسين كل من موقف الحيوان وطول التثبيت الأنبوب الصحيح. لم يتم تنبيب أي من الحيوانات في المريء. محاولة واحدة فقط (10٪) فشل بسبب حجم صغير للغاية من الحيوان (الجدول 1). بمجرد ممارسة النوب الأعمى ، يتم تحقيق النجاح في المحاولة الأولى في معظم الحالات ، حتى لو تم إجراء الإجراء من قبل موظفين لم يتدربوا سابقًا على إدارة مجرى الهواء الأرنبي. حققنا نسبة نجاح النوبات بنسبة 100٪ في محاولة واحدة أو اثنتين في الحيوانات التي تزن ما يعادل أو يزيد على 120 غرام.
الشكل 1: المواد اللازمة للتجربة: ملقط تشريح, أنبوب التغذية, أنبوب بطانة, مواد التشحيم المعقمة.
الشكل 2: موقف الحيوان قبل التنبيب: إعادة شغل الوظائف الظهرية وفرط التموضع المعتدل.
الشكل 3: فتح الفم مع ملقط تشريح. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 4: يتم إدخال أنبوب التغذية في المعدة.
الشكل 5-6:يتم إدخال أنبوب البطاية 3 سم بشكل أعمى وثابت، جنبا إلى جنب مع أنبوب التغذية، إلى المجال الجراحي.
الشكل 6: أنبوب الغدد الترارخية الثابتة وأنبوب التغذية.
الشكل 7: الحيوان متصل بجهاز التنفس الصناعي.
| رقم الحيوان | الوزن (ز) | النجاح | محاولات | الموت |
| 1 | 150 | + | 1 | - |
| 2 | 125 | + | 2 | - |
| 3 | 180 | + | 1 | - |
| 4 | 210 | + | 1 | - |
| 5 | 120 | + | 2 | - |
| 6 | 140 | + | 2 | - |
| 7 | 200 | + | 1 | - |
| 8 | 190 | + | 1 | - |
| 9 | 180 | + | 1 | - |
| 10 | 110 | - | 3 | + |
| مجموع | 160.5 | 90% | 1.5 | 10% |
الجدول 1: ميزات عينة الحيوان ومحاولات الانتبيب البطانة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
وتستخدم على نطاق واسع الأرانب في التجارب على الحيوانات نظرا لتوافرها، وارتفاع معدل الإنجاب مع أوقات قصيرة بين الأجيال، وسهولة التعاملمع 2. في مركزنا، نستخدم 5-7 أيام الأرانب نيوزيلندا القديمة(Oryctolagus cuniculus)كنموذج حديثي الولادة لدراسة التداعيات العصبية للجراحة خارجcorporeal على الدماغ النامية. ونتيجة لذلك، نستخدم الإجراءات التي تتطلب تخديرًا عميقًا ويجب أن نستخدم النوبات الدوتروراخية لفترات من الوقت تصل إلى ساعة.
في الأرنب البالغ، تم وصف العديد من تقنيات إدارة مجرى الهواء، وعادة في سياق العمليات الجراحية. عندما حاولنا استقراء هذه التقنيات إلى مجموعات الأرانب ، نشأت العديد من المشاكل. الأرانب تزن ما بين 110 و 210 غراما ولها أقصى نطاق فتح الفم 1 سم. هذه الخصائص تجعل التصور المباشر للحنجرة صعبة ومعقدة للعثور على مواد بالمنظار صغيرة بما فيه الكفاية. وثمة خيار آخر هو موضح في الأدب هو وضع منظار في تجويف الفم واستخدامه كدليل لإدخال أنبوب PVC7. في الأرانب حديثي الولادة ، كل من وجود اللسان وصغر حجم الفم يجعل التصور المباشر للglottis صعب. وبالإضافة إلى ذلك، لا توجد أجهزة فوق غلوتيك ذات أبعاد كافية لحديثي الولادة.
بسبب الظروف المذكورة أعلاه ، هناك آليتان أساسيتان لتأمين مجرى الهواء للأرانب الصغيرة جدًا: استئصال القصبة الهوائية والانتبيب الأعمى. استئصال القصبة الهوائية هو نهج الغازية التي تم استخدامها في كل من الأرانب الكبار وحديثي الولادة10,12. لديها ميزة التصور القصبي المباشر، مما يسمح الإجرائي لتحديد الموقع الدقيق للأنبوب endotracheal. ومع ذلك ، هناك خطر كبير من المضاعفات الميكانيكية والعدوى في منطقة الشق ، بالإضافة إلى انخفاض معدل بقاء الحيوانات بمجرد الانتهاء من الإجراءات13. المنظار / النوبات الناوب هو الأسلوب الذي من شأنه أن يسمح للتصور المباشر دون جراحة5. خيار آخر لمنع صدمة الحنجرة هو استخدام قناع الوجه ضيق المناسب، الذي لديه بعض العيوب الإضافية مثل التهوية دون الأمثل وخلع المعدة.
في المختبر، يتم استخدام النوبات العمياء لإدارة الخطوط الجوية الأرانب حديثي الولادة. وقد وصفت هذه الطريقة في أرنب الكبار كتقنية مجدية مع ارتفاع مؤشر النجاح6. في التجارب الأولية، حاولنا تنفيذ هذه التقنية دون انسداد في الجهاز الهضمي. وكانت النتيجة ارتفاع معدل إدخال أنبوب البطاية في المريء. مع إدخال أنبوب المعدة قبل النوب، ومع ذلك، تم تحقيق الاحتضان الناجح في 90٪ من الحالات. فيما يتعلق بحجم أنبوب البطانة، حاولنا في البداية استخدام القسطرة الوريدية الطرفية يصل قطرها إلى 14، ومراقبة الصعوبات في كل من الإدراج (صلابة أكبر) والتهوية (قطر صغير جدا وصعوبة في الاتصال بجهاز التنفس الصناعي). في تجربتنا، واستخدام أنابيب endotracheal الداخلية قطرها 2 مم التي أدخلت إلى عمق لا يزيد عن 3 سم كان الأكثر فعالية في تهوية الأرانب الصغيرة، كما هو مبين في القيم الصحيحة gasometric و ETCO2. في حين أن التنبيب في الأرانب الكبار يتطلب عموما فرط توسيع الرأس إلى زاوية 90 درجة أساسا إلى السطح الأفقي للطاولة، كنا قادرين على إجراء الإجراء مع تمديد الرأس خفيفة فقط.
أحد العناصر الهامة التي يجب مراعاتها عند إجراء هذا الإجراء هو الطبيعة القابلة للتفتيت من القصبة الهوائية الأرنب حديثي الولادة. حفظ هذا هو العقل، ونحن نقدم أنبوب قبل مشحم ببطء وبعناية لتجنب ثقب القصبة الهوائية. نوصي بعدم إدخال الأنبوب إلى أبعد من 3 سم ، حيث تبين أن هذا هو الطول الأمثل أثناء محاولات الممارسة ، ووقف الاحتضان إذا واجه الإجرائي أي مقاومة ؛ في هذه الحالة، فمن الأفضل لإزالة أنبوب والبدء من جديد. لقد شهدنا حالة واحدة من ثقب القصبة الهوائية المحتمل في أصغر في الفوج.
القيد الرئيسي لهذه التقنية هو صعوبة في الكشف عن الموضع الصحيح للأنبوب البطانة مرة واحدة أدخلت. في تجربتنا، تقدم الجهاز دون مقاومة، والكشف عن ETCOالمناسبة 2،والضباب من أنبوب وتصور التوسع الصدري أثناء التهوية، فضلا عن الحفاظ على علامات حيوية كانت كافية لتأكيد ملاءمة الإجراء في جميع الحالات. في بعض المواضيع التجريبية، أجريت سحّات الشرايين أثناء التهوية التي تظهر مستويات كافية من تركيز ثاني أكسيد الكربون والأكسجين. بالإضافة إلى ذلك ، على الرغم من أن تحليل الهيستوبات لم يتم إجراؤه ، فقد وصفت الأدبيات المنشورة سابقًا الإصابة المخاطية في القصبة الهوائية في غياب التغييرات السريرية الثانوية إلى الاحتضان14.
في الختام ، فإن نموذج النوبات في الأرانب حديثي الولادة التي وصفناها هو تقنية سريعة تستخدم الإمدادات الأساسية وتسمح بالتهوية الفعالة. ونحن نعتقد أن هذه التقنية يمكن إدراجها في الأسلحة من إدارة مجرى الهواء من الأرانب حديثي الولادة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.
Acknowledgments
وقد تم دعم هذا العمل من خلال منح من معهد سالود كارلوس الثالث [PFIS2017-0224]، و"بيكا روزا" من إسباوسيداد دي كويدادوس إنتينسيفوس بيدياتريكوس وبرنامج فاندربيلت للعلماء الطبيين.
ولم يشارك مقدمو مشروع القرار في جمع البيانات أو تحليلها أو تفسيرها.
نود أن نشكر إيزابيل سالاس على المساعدة التي قدمتها في المختبر الحيواني والسيد كارليس فابريغا والسيدة جيما فرنانديز أسينسيو من فريق التقنية السمعية والبصرية من مستشفى سانت جوان دي ديو على الدعم التقني الذي قدماه في تسجيل الفيديو وإنتاجه.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 2 mm diameter Polyvinyl Chloride (PVC) endotracheal tube | Vygon | 520.20 | |
| 6 French polyurethane feeding tube | Vygon | 310.06 | |
| Anesthesia (Ketamine and Xylazine) | |||
| Multiparameter monitor Intellivue MP5 | Phillips | ||
| Plain and wide tip dissection forceps | LensforVision | AK005 | |
| Sterile lubricant (Silkospray) | Rush | ||
| Ventilator Servo 900c | Maquet |
References
- Gilroy, B. A. Endotracheal intubation of rabbits and rodents. Journal of the American Veterinary Medical Association. 179 (11), 1295 (1981).
- Graham, J.
- Fick, T. E., Schalm, S. W. A simple technique for endotracheal intubation in rabbits. Laboratory Animals. 21 (3), 265-266 (1987).
- Conlon, K. C., et al. Atraumatic endotracheal intubation in small rabbits. Laboratory Animal Science. 40 (2), 221-222 (1990).
- Johnson, D. H. Endoscopic intubation of exotic companion mammals. The Veterinary Clinics of North America. Exotic Animal Practice. 13 (2), 273-289 (2010).
- Falcão, S. C., et al. Technique of blind tracheal intubation in rabbits (Oryctolagus cuniculi) supported by previous maneuver of esophageal cannulization. Acta Cirurgica Brasileira. 26 (5), 352-356 (2011).
- Miura, H., et al.
- Thompson, K. L., et al. Endotracheal Intubation of Rabbits Using a Polypropylene Guide Catheter. Journal of Visualized Experiments. (129), (2017).
- Comolli, J., et al. Comparison of endoscopic endotracheal intubation and the v-gel supraglottic airway device for spontaneously ventilating New Zealand white rabbits undergoing ovariohysterectomy. Veterinary Record. , 1-8 (2020).
- Hua, S., et al. Effects of different ventilation strategies on lung injury in newborn rabbits. Pediatric Pulmonology. 47 (11), 1103-1112 (2012).
- Kitchen, M. J., et al. The role of lung inflation and sodium transport in airway liquid clearance during lung aeration in newborn rabbits. Pediatric Research. 73 (4-1), 443-449 (2012).
- Boon, M. S., et al. Tubeless tracheotomy for survival airway surgery in the leporine model. The Laryngoscope. 125 (3), 680-684 (2015).
- Dion, G. R., et al. Morbidity and mortality associated with preclinical tracheostomy models. The Laryngoscope. 128 (2), 68-71 (2018).
- Phaneuf, L. R., et al. Tracheal injury after endotracheal intubation and anesthesia in rabbits. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 45 (6), 67-72 (2006).
