انتقال الخنازير الزراعية إلى الخنازير البحث باستخدام قائمة مرجعية معينة تليها بدء التدريب فوق - مبادرة صقل

Summary

يتم تحقيق صقل الدراسات porcine من خلال إدخال قائمة مرجعية موحدة والتدريب التعزيز الإيجابي باستخدام النقر. يدعم هذا العمل جمع العينات والقيام بالأعمال اليومية المتعلقة بالحيوانات.

Abstract

تنفيذ مبادرات 3R مهم. لصقل حياة الخنازير المختبرية، ركزنا على الفترة الزمنية قبل إدراج الحيوانات في التجارب. قمنا بتحسين القائمة المرجعية أثناء التطوير. باستخدام قائمة التحقق تم توثيق تقدم كل خنزير على حدة. وهذا يساعد القائمين على الرعاية بحيث لا تزال تركز على الإجراءات اللازمة للاختلاط الحيوانات والحد من التوتر والقلق على مستوى الحيوان. خلال هذه المرحلة ، تصبح الخنازير هادئة وجاهزة لبدء تدريب إضافي للنقر لزيادة الحد من الإجهاد خلال الفترة التجريبية. ستسمح الخنازير بسهولة بجمع مقاييس النتائج الأساسية دون التخدير أو التثبيت.

وينقسم البروتوكول إلى قسمين. أولا المرحلة الانتقالية التي تبدأ مع وصول الخنازير إلى منشأة البحوث. إدخال يعامل والاتصال أوثق تدريجيا إلى مقدمي الرعاية هي الخطوات الأولى. ثم، يقدم القائم بالأعمال إجراءات لتكون قادرة على لمس الرأس والعند، لتقليد مثل التلاعب الأذن لأخذ عينة دم أو هند للحصول على درجة حرارة المستقيم. يتم تأسيس أساس قوي في العلاقة بين الحيوان وتصريف الأعمال وهذا يقلل بسرعة من الإجهاد الذي تعبر عنه الخنازير بعد الوصول. ثانيا، يبدأ التدريب التعزيز الإيجابي لتعليم الحيوان كيفية تنفيذ مهام أكثر تعقيدا دون أن تصبح وشدد. يتم تقديم جهاز النقر كمعزز ثانوي.

ويبدو أن الوقت والهيكل والتعليم والاتصال الشامل هي أهم المعايير للنجاح في تطبيق هذا البروتوكول. بالإضافة إلى وجود الخنازير هادئة ومتوافقة، ومقدمي الرعاية التقرير أنهم يتمتعون التركيز يسمح لهم لإعطاء كل خنزير الفردية، إضافة إلى رضاهم الوظيفي العام. إن وجود مقدمي الرعاية مع التزام قوي ، والتركيز على التقدم في الانتقال ورفاه كل خنزير ، يعزز بالإضافة إلى ذلك ثقافة الرعاية في الوزارة.

Introduction

مبادئ 3Rs (استبدال والحد والصقل) التي ناقشها راسل و بورش في عام 1959 ، تشكل الأساس اليوم لمعايير أخلاقية عالية بشأن استخدام الحيوانات لأغراض تجريبية. وفي مرافق البحوث الطبية الحيوية التي تعمل في الدراسات الحيوانية المختبرية قبل السريرية، يجب الالتزام بمبدأ التحسين. "الصقل يعني أي انخفاض في حدوث أو شدة الإجراءات اللاإنسانية المطبقة على تلك الحيوانات التي لا يزال يتعين استخدامها"¹.

كما ينص تعريف معاصر على أن الصقل هو "دفع البحث في مجال رعاية الحيوان من خلال استغلال أحدث التقنيات الحية وتحسين فهم تأثير الرعاية الاجتماعية على النتائج العلمية"². وهذا يعني أن مبادرات التحسين اليوم ليست مهمة فقط لرفاه الحيوان في حد ذاتها، ولكنها مهمة أيضا لنوعية البحث حيث ستستفيد النتائج العلمية من هذه المبادرات ^3.

ومن مبادرات التحسين التي ينبغي النظر فيها الاختلاط بالحيوانات التجريبية وتدريبها. وقد يتم تدريبهم على أداء مهمة معينة، على سبيل المثال، خطوة على مقياس أو التصرف بهدوء أثناء سحب عينات الدم. وقد تكون بعض الأنواع أكثر استعدادا للتدريب من غيرها، وهذا يؤثر على تقليد تدريب أنواع الحيوانات المختبرية. تقليديا ، تم تدريب ال لعدة قرون على سبيل المثال ، من أجل استخدام الكلب في الصيد. هذه التقاليد التاريخية جعلت بالتأكيد تدريب ال في إعداد البحوث الطبية الحيوية أكثر مباشرة. جنبا إلى جنب مع الرئيسيات غير البشرية ، وقد نوقشت تدريب المختبرات ال ونفذت لبعض الوقت^4،5.

ومن الشائع بين هذين النوعين أنهما يحتلان مرتبة عالية على "النطاق الاجتماعي والحيواني". هذا المقياس يصنف الحيوانات وفقا لمكانها واستخدامها في المجتمع البشري ⁶. كما يحمل الترتيب العالي معها طلبا عاما كبيرا على معاملة الحيوانات بأكبر قدر ممكن من الإنسانية والحد من مستوى التوتر والقلق. القوارض، على النقيض من ال والرئيسيات غير البشرية، وضعت في الطرف السفلي من النطاق الاجتماعي والحيواني. ولم يتلقوا اهتماما ورعاية عامين مماثلين. تاريخيا تم التعامل معها بشكل أقل بشكل جيد - ويفترض أيضا بسبب قدرتها على نشر الأمراض التي تهدد الحياة. ومع ذلك ، خلال السنوات القليلة الماضية تم تنفيذ تدريب القوارض في بيئات البحوث قبل السريرية ، وهنا لم تمر الفوائد العلمية ذات الصلة دون أن يلاحظها أحد. يتم تدريب كل من الفئران والجرذان بشكل مثير للاهتمام بسهولة تامة ، كما يحد التدريب من استجابتهم للإجهاد وبالتالي يعزز النتائج العلمية^7و8.

الإبلاغ عن كيفية الاختلاط وتدريب الخنازير في بيئة الحيوانات المختبرية هو على حد علمنا نادرة⁹. على النطاق الاجتماعي والحيواني ، يتم وضع الخنازير بين ال والقوارض. نحن ندرك الأنواع في المقام الأول كمورد غذائي ، ولكن مع ذلك يتم استخدام عدد كبير من الخنازير أيضا في البحوث الطبية الحيوية. في الاتحاد الأوروبي وحده، تم استخدام ما يقرب من 75،000 خنزير سنويا لأغراض علمية في 2015-2017 ¹⁰. ويشمل هذا العدد خنازير المزرعة والخنازير المصغرة. وهناك تركيز متزايد على تحسين حياة هذه الحيوانات من خلال التدريب كإجراء للامتثال للمعايير 3. يمكن تدريب كل من الخنازير الزراعية والخنازير المصغرة في الواقع ^11،12، ولكن نقطة انطلاقها من حيث التنشئة الاجتماعية تختلف. يتم تربية الخنازير المصغرة للبحث والاختلاط خلال فترة حياتها المبكرة. يتم تربيتها لديها مزاج هادئ. يتم تربية خنازير المزرعة للاستهلاك وغالبا ما لا يتم اجتماعيا على الإطلاق. عادة ما يتم إيواء الخنازير النهائية لإنتاج اللحوم في الدنمارك في مجموعات عالية الكثافة من 15-25 خنزيرا حيث يتعين عليها التنافس للحصول على مركز في التسلسل الهرمي للقرود. مزاجهم يعكس تلك القدرة. وغالبا ما يتم إيواؤهم في مرافق مستقرة مع طابق محدد جزئيا للحد من عبء العمل من التلويث. لتحسين زيادة الوزن، يتم إطعامهم libitum الإعلانية من خلال الغذاء الآلي ونظم توصيل المياه. وبالتالي، فإن اتصالهم بعمال المزارع محدود وسيصبحون متوترين عند التعامل معهم. وهذا يطرح تحديات معينة عندما يتم نقل الحيوانات إلى منشأة بحثية. هنا رعاية الحيوان، وتربية، و3Rs تلعب دورا رئيسيا^13،14. من منظور بحثي، كل على حدة مهم للحصول على أفضل نتائج البحوث الممكنة. كما أن رفاهية الحيوانات مهمة لضمان اختلاف منخفض بين الحيوانات فيما يتعلق بالتوتر والقلق والخوف. ولهذه الأسباب، من المهم الانتباه إلى الانتقال من قطيع إلى فرد. عند الوصول ، تدخل الخنازير بيئة جديدة مع روائح جديدة ، وطعام جديد ، واتصال يومي مع القائمين على رعاية الحيوانات ، وغالبا ما تكون أيضا زملاء قلم جدد. بالنسبة للخنزير ، يمكن أن يكون التحول مرهقا للغاية ويتم الاعتراف بأهمية فترة التأقلم لعدة أيام في علم الحيوان المختبري^15.

من خلال هيكلة فترة التأقلم، أنشأنا ما نسميه "مرحلة انتقالية" باستخدام قائمة مرجعية منظمة خطوة بخطوة. وتضمن القائمة المرجعية حصول كل خنزير على اتصال كاف بالأعمال وتعلم كيفية السماح بالمناولة الأساسية للفحص وجمع العينات دون التعرض للإجهاد. ويمكن بعد ذلك القيام بعمل مستمر لتدريب الخنازير باستخدام التدريب التعزيز الإيجابي المستهدف لكل مشروع بحثي محدد^16،17. يتم استخدام النقر للإشارة إلى مكافأة الطعام عند تنفيذ الإجراء المطلوب. الجمع بين الخطوات من المرحلة الانتقالية مع تدريب النقر إضافية من الخنازير يعطي الحيوانات تسوية سلسة في منشأة البحوث. تصبح هادئة وسهلة التعامل معها ويمكن، مع القليل من الجهد، أن تدرس على الوقوف ساكنا لجمع عينة الدم على سبيل المثال. باستخدام هذا النوع من بروتوكول المناولة ، يتم استبدال التقنيات القديمة مثل التخدير للحيوانات أو الفخاخ. للتأكد من أن جميع الخنازير يتم التعامل معها بما فيه الكفاية يتم ملء قائمة مرجعية.

أصبح من المقبول على نطاق واسع أن الحيوانات لا تشعر في الواقع المشاعر الإيجابية والتركيز حتى عند العمل مع الحيوانات لا ينبغي أن يكون فقط على إزالة المشاعر السلبية ¹⁸. والدورة التدريبية مع القائم بالأعمال مثال على تجربة عاطفية إيجابية. انها ممتعة جدا للخنزير كما يتلقى يعامل والاهتمام. وإلى جانب الاستفادة من الحد من التعامل مع الإجهاد والسلوكيات المتعلقة بالخوف في المرفق ، وتدريب الحيوانات يوفر فرصة لإعطاء الحيوانات تجارب عاطفية إيجابية. إضافة تجارب إيجابية قد تتصدى لبعض التجارب السلبية التي تواجهها المختبر فيما يتعلق بالتجارب التي أجريت وبالتالي ستزيد من رفاهية الحيوان ^19،20.

في حين أن الخنازير تتمتع بوضوح الدورات التدريبية، والدورات في وقت واحد توفر للناظر فرصة لتعزيز السندات لكل خنزير الفردية. كونه راعي الحيوانات ، وأداء إجراءات مؤلمة ، مثل حقن الحيوانات ، هو جزء من المهمة. ومع ذلك ، فإن القدرة على تدريب الحيوانات وتحويل هذه الإجراءات إلى تجارب إيجابية أمر مجز في حد ذاته. يزيد من التزام القائمين على الرعاية ويلعب دورا رئيسيا في تعزيز ثقافة الرعاية في القسم^21و22و23.

تم إيواء الخنازير وفقا لسياسة رعاية الحيوان للمؤسسة، والتي تشير إلى التشريعات الوطنية بشأن تجارب الحيوانات والإسكان وتربية الحيوانات. يمكن تطبيق البروتوكول على الخنازير المططمة من أي عمر. 11 - من أجل وضع قائمة مرجعية انتقالية(الشكل 1)استخدم ما مجموعه 40 أنثى من الخنازير الزراعية (الدانمرك لاندراس - يوركشاير - دوروك) بوزن 35-80 كيلوغراما (الجدول 1). تم تخصيص الخنازير لمجموعة تعتمد على وقت وصولها. تم إيواء الخنازير في منشأة البحث المستقرة في الفترة من يناير إلى سبتمبر 2020. يتم تربية جميع خنازير المزرعة في مزرعة زرع تقليدية ويتم نقلها إلى مزرعة متعاونة عندما تزن حوالي 15 كجم. قبل أسبوعين على الأقل من إدراجها في دراسات البقاء على قيد الحياة، يتم نقل الخنازير إلى منشأة أبحاث الجامعة المستقرة. خلال الأسبوعين الأولين الانتقال من خنزير المزرعة إلى الحيوان البحثي يحدث. ويتكون البروتوكول من إجراءات غير ضارة وإيجابية، ومن ثم يمكن البدء به فورا كجزء من فترة التأقلم.

تم إيواء الخنازير واحدا تلو الآخر في أقلام قياس 3.4 -6.8 متر 2 على^أرضيات خرسانية صلبة والحصول على المياه عن طريق إمدادات المياه التلقائية. هناك حوض تغذية لكل خنزير وقسم واحد على الأقل من الانفصال إلى الأقلام المجاورة يسمح الاتصال خطم. عندما من المقرر أن تتلقى الخنازير تدخلات جراحية أو تزرع معدات، يتم إيواؤها بمفردها لتجنب لعق الزملاء القلم والعض في الجروح وسحب يزرع بها. مواد الفراش هي القش ويتم إثراء الحيوانات كذلك مع القش ولعب نشاط مختلفة مثل الحبل والكرات والدلاء وعصي المضغ المصنوعة من البلاستيك(الشكل 2).

وتأتي الحيوانات من قطيع مدرج في البرنامج الوطني لرصد الصحة لخنازير المزرعة، مما يعني أنه يتم فحصها بحثا عن سبعة مسببات أمراض²⁴ يمكن أن تؤثر على الخنازير في بيئة الإنتاج. يتم إجراء فحوصات عشوائية نصف سنوية القطيع الأبحاث استنادا إلى توصيات FELASA^25،26، بالإضافة إلى عينات من الخنازير التي تبرر التشخيص بسبب نتائج البحوث غير المتوقعة. وكانت بعض الخنازير المستخدمة في هذا المشروع من المصلين للمتلازمة التناسلية والتنفسية الخنزيرية؛ ومع ذلك، لم يظهر أي من الخنازير أي أعراض سريرية مطابقة للعدوى. وكانت جميع العينات التي تم تقييمها باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل سلبية، مما يؤكد أن الخنازير كانت في حالة صحية جيدة.

Protocol

وكانت الخنازير المستخدمة للتحقق من صحة البروتوكول جزءا من دراسات وافق عليها المجلس التجريبي الحيواني - وهو مؤسسة حكومية وطنية تقيم جميع التجارب الحيوانية في الدانمرك وتقرها. ويقوم المجلس بالاستعراض الأخلاقي على غرار الاستعراض الأخلاقي الذي تقوم به اللجنة الاستشارية المستقلة لأخلاقيات الأخلاقيات.

1. الوصول إلى مركز البحوث

1. أولا، غسل الخنازير في منطقة معينة للسماح بإجراء فحص بصري شامل. استخدم قائمة استبعاد لاستبعاد الخنازير المصابة بالجروح ، لدغات الأذن ، الخراجات ، العرج وما إلى ذلك ، لذلك يسمح فقط للحيوانات التي تبدو صحية سريريا بدخول المرفق.
2. بعد غسلها، قم بفرز الخنازير إلى مجموعات وفقا لعلامات اللون. تشير علامات اللون إلى الخنازير التي كانت زميلة قلم في المورد. هذا مهم لأن الخنازير سوف تقاتل من أجل إنشاء التسلسل الهرمي عندما يتم تقديمها إلى زملاء القلم الجديد. حفظها فرزها في مجموعات جنبا إلى جنب مع الخنازير أنهم على دراية بالفعل حدود هذا القتال إلى حد كبير.
3. ترك الخنازير دون عائق (إلا عندما يتم إطعامهم في فترة ما بعد الظهر) لبقية يوم الوصول لأنها يمكن أن تكون وشدد تماما بعد النقل.

2- الجزء الأول: المرحلة الانتقالية (الوقت المقدر 4-6 أيام)

ملاحظة: تبقى الخنازير في قلمها المنزلي أثناء الأنشطة التي يتم تنفيذها في المرحلة الانتقالية. نحن نستخدم نصف تفاحة لكل جلسة علاج. وسجل التقدم المحرز في كل خنزير الفردية في المرحلة الانتقالية التقدم المرجعية (الشكل 1 والملف التكميلي 1).

1. في اليومين المتتاليين بعد الوصول، قدم الحلويات.
   1. يعالج Tos عددا قليلا في كل مرة (نصف مجموع التفاح) في القلم مرتين يوميا للسماح للخنازير بالبحث عن الحلويات بمفردها والوقوف بهدوء خارج القلم. وبصرف النظر عن أن تصبح مألوفة مع يعامل، والهدف هو للحيوان لربط إيجابي علاج مع وجود تصريف الأعمال.
2. في اليوم الثالث والأيام المتعاقبة إدخال تعريف الخنزير مع "التعامل مع من قبل تصريف الأعمال". أدخل القلم أثناء التغذية.
   1. الجلوس على طول الذراع من الخنزير بينما هو الأكل (الشكل 3). مد يد بهدوء نحو الخنزير للمس ظهره. يجب أن تكون اللمسة أكثر من ثانيتين لحسابها على أنها ناجحة. إذا تراجع الخنزير عن الطعام، اسحب اليد ببطء.
   2. انتظر حتى يبدأ الحيوان في تناول الطعام وأداء العمل مرة أخرى. إذا تراجع الحيوان عن الطعام مرة أخرى ، فتوقف عن محاولة لمسه ولكن بقي داخل القلم بجوار الحوض الصغير (2-3 دقائق في المجموع للجلسة).
3. المضي قدما في إجراءات التعامل مع عندما يقبل الخنزير يجري لمسها على ظهره في حين أنه يأكل. الآن تحريك اليد حولها على ظهره في كلا الاتجاهين من الرأس والذيل.
   1. المس الرأس والأذنين إذا قبله الخنزير. إذا كان في أي وقت، الخنزير يتراجع عن العمل وقف العمل ولكن تبقى داخل القلم للمرة المتبقية (2-3 دقائق في المجموع للدورة). الأذن مهمة لأنها تمكن أخذ عينات الدم من القسطرة الوريدية في الأذن.
   2. ترتفع ببطء لتكون قادرة على لمس منطقة الذيل الذي هو المجال المهم الثاني. الوقوف والتحرك هو أكثر رعبا للخنزير، وهذا هو السبب في أن يتم تسجيل هذه الخطوة بشكل مستقل. عندما يقبل الخنزير لمس المنطقة والتلاعب بالذيل ، يمكن أخذ درجة حرارة المستقيم لدعم معظم بروتوكولات البحث.
4. لزيادة تعزيز الرابطة بين تصريف الأعمال والحيوان دخول القلم خلال جلستين وبصرف النظر عن أوقات التغذية. تقدم يعامل الخنزير (شريحة واحدة في وقت واحد) خلال جلستين (2-3 دقائق لكل منهما)، في حين يجلس في زاوية داخل القلم. في البداية، وإعطاء يعامل من ذراع ممدودة، ولكن تقليل المسافة تدريجيا حتى الخنزير يحتاج إلى الاقتراب للحصول على مكافأته.
5. المرحلة النهائية من المرحلة الانتقالية هي القدرة على لمس الخنزير في مناطق محددة من الجسم واستخدام عدد قليل فقط من يعامل للقيام بذلك. أدخل القلم بينما يقف تصريف الأعمال الثاني خارج القلم ويقدم علاجا أو اثنين للخنزير. مكافأة الخنزير لكونه هادئا والسماح للمس كما هو موضح، وفي الوقت نفسه أن تكون قادرة على الحفاظ على جميع الحوافر الأربعة على الأرض (وليس القفز على سياج القلم).

3. الجزء الثاني: بدء تدريب النقر

ملاحظة: بعد مرحلة الانتقال، الحيوانات جاهزة لبدء التدريب فوق. من المستحسن أن يتم إجراء التدريب في منطقة معينة لأنه يساعد الخنزير على إدراك أن دورة تدريبية على وشك البدء. العديد من الجلسات القصيرة على مدار اليوم أفضل من جلسة واحدة أطول.

1. خذ خنزير واحد في وقت واحد خارج قلم المنزل وإلى منطقة التدريب المخصصة. إذا كانت المنطقة المستخدمة جديدة على الخنزير ، فيجب أن تكون الجلسات الأولى بدون تدريب واستكشافية بدقة مع بعض الحلويات خلال حوالي 5-7 دقائق استكشاف لكل خنزير.
2. أعرض النقر يجلس أو يقف مع يعامل بعيدا عن متناول الخنزير. انقر عندما يظهر الخنزير الفائدة، وإعطاء علاج على الفور. القيام بذلك في تعاقب سريع في حين أن الخنزير يحافظ على الاهتمام. إذا فقد الخنزير اهتمامه، أوقف النقر والعلاج مؤقتا حتى يتصل الخنزير مرة أخرى. يجب ألا تزيد مدة هذه الجلسة عن 10 دقائق.
3. سوف يفهم الخنزير النقر بسرعة ، ولكن من المهم جعل الارتباط بين النقر والعلاج قويا جدا. كرر الخطوة بضع جلسات عمل في صف واحد لجعل الاقتران بين انقر فوق وعلاج قوي. اختبار إذا كان الخنزير يربط النقر مع علاج عن طريق النقر مرة واحدة وليس بعد ذلك مع علاج ورصد سلوك الخنزير عن كثب. إذا كان الخنزير ينظر حولنا تتوقع بفارغ الصبر علاج، والتدريب هو الكامل، إن لم يكن أداء بضع جلسات إضافية.
4. مرة واحدة هو معروف من قبل خنزير فوق، وإدخال عصا الهدف. عصا الهدف هي عصا مع منطقة ملحوظ على طرف واحد. عقد نهاية الهدف في ذروة خطم. في مرحلة ما، الخنزير سوف تلمس ذلك بدافع الفضول. انقر في الثانية جدا أن الخنزير يمس الهدف وإعطاء علاج.
5. تقديم الهدف مرة أخرى على الفور، وإذا لمست انقر مرة أخرى وإعطاء علاج. مواصلة التدريب الهدف حتى يفهم الخنزير أنه سيتم مكافأة للمس الهدف. نقل الهدف تدريجيا بعيدا حتى الخنزير لديه للتحرك أكثر للوصول إلى الهدف.
6. عندما يتبع الخنزير الهدف عندما يتم نقله حول إضافة تحديات إضافية عن طريق وضع الأشياء في منطقة التدريب ، لذلك يجب على الخنزير التركيز بشكل أكبر على مهمة العصا المستهدفة للحصول على مكافآته.

Representative Results

يسمح تطبيق المرحلة الانتقالية كما هو موضح في الجزء الأول من البروتوكول بإدخال خنازير المزرعة بسلاسة إلى مرفق الأبحاث. وجود الخنازير هادئة للعمل مع يخفف الأعمال اليومية وتمكن من الإجراءات البسيطة وأخذ عينة ليتم تنفيذها دون تخدير أو تثبيت.

لمتابعة تقدم الخنازير خلال المرحلة الانتقالية تم تطوير قائمة مرجعية (القائمة المرجعية 1) لوضع علامة على الوقت الذي تصل فيه الخنازير الفردية إلى خطوات محددة في انتقالها. ومن المقرر أن تدخل الخنازير في مشاريع بحثية في غضون أسبوعين من وصولها، وكان العدد الإجمالي للأيام هو الإجراء الذي تم اختياره لإظهار نجاح المرحلة الانتقالية.

واستنادا إلى القائمة المرجعية 1، اتبعت المرحلة الانتقالية ل 20 خنزيرا للتحقق من إمكانية انتقال الخنازير من خنازير المزرعة إلى الخنازير البحثية في غضون أسبوعين(الشكل 4). أكملت جميع الخنازير القائمة في غضون 12 يوما ، مما يدل على أن مجموعة الإطار الزمني كانت كافية.

تم تعديل القائمة المرجعية 1 استنادا إلى التجارب الأولى. تم تطوير قائمة مرجعية صارمة جديدة (القائمة المرجعية 2). ولتحسين عملية الانتقال وتوحيدها، كان التنقيح الرئيسي هو زيادة عدد الدورات اليومية والحد من مقدار الوقت الذي تقضيه كل دورة. وتبين مقارنة القائمة المرجعية أن الخنازير التي انتقلت باستخدام القائمة المرجعية 2 كان لها تقدم مماثل خلال الأيام الأولى من الانتقال، في حين تم التوصل إلى الخطوات اللاحقة بشكل أسرع. ويمكن الرؤية مقارنة بين استخدام القائمة المرجعية 1 وقائمة المراجعة 2 في الشكل 5.

بعد الانتهاء من المرحلة الانتقالية ستسمح الحيوانات بتدابير النتائج الأساسية مثل أخذ درجة الحرارة وفحص الجروح الجراحية. عندما يتم نقل خنزير (أنثى) للسماح بلمس منطقة الذيل يمكن جمع عينة البول باستخدام كيس فغر يوضع حول الأعضاء التناسلية الخارجية ولكن تحت فتحة الحمل(الشكل 6).

مثال آخر على نتيجة البيانات التي يمكن جمعها هو عينة الدم. في منشأتنا نضع في كثير من الأحيان قسطرة وريدية في وريد الأذن أثناء الجراحة. بعد التعافي ، يمكن استخدام القسطرة لإدارة الدواء لتقليل عدد الحقن العضلية ، وأخذ عينات دم متعددة لدعم المشروع وتقييم عودة الخنزير إلى علم وظائف الأعضاء الطبيعي (الشكل 7).

وبالانتقال من المرحلة الانتقالية، سيبني تدريب النقر على المرحلة الانتقالية للسماح بمزيد من الفوائد أثناء المناولة والحصول على بيانات النتائج. تدريب الخنازير على اتباع عصا الهدف سيسمح للناظر لنقل الخنزير على سبيل المثال على مقياس لرصد وزن الجسم (الشكل 8) أو في صندوق النقل (الشكل 9) إذا الخنازير تحتاج إلى نقلها إلى عملية جراحية أو منشأة التصوير. لمشروع واحد، تم تدريب الخنازير على الوقوف ساكنا في حين كان يعطى الدواء في العينين(الشكل 10).

عند بدء التدريب فوق يصبح من الواضح أن كل خنزير فريدة من نوعها وأنها تستجيب بشكل مختلف للتدريب. وخلال التدريب، يعترف بذلك، ويتم استيعاب الدورات التدريبية وفقا لذلك. تحتاج بعض الخنازير إلى ضعفين أو ثلاثة أضعاف عدد الدورات التدريبية لتعلم نفس المهمة ، والتي يمكن أن تكون إشكالية إذا كانت هناك مهام معينة تحتاج إلى تعلم في نقاط زمنية محددة لدعم مشروع البحث.

بيانات الحيوانات	قائمة المراجعة 1 (n =20)	قائمة التحقق المحدثة (n=20)
جنس	خنزير محلي (سوس سكروفا domesticus)	خنزير محلي (سوس سكروفا domesticus)
ربى	(الدنمارك لاندراس x يوركشاير) × دوروك	(الدنمارك لاندراس x يوركشاير) × دوروك
جنس	أنثى	أنثى
ثقل	35-80 كجم (متوسط 47,5 كجم)	40-80 كجم (متوسط 62,5 كجم)
عمر	10-22 أسابيع	10-22 أسابيع

الجدول 1: الخصائص الأساسية للخنازير المستخدمة لتقييم قوائم التحقق.

الشكل 1: قائمة مرجعية المرحلة الانتقالية. وكما هو موضح، فإن العديد من الأنشطة تجري في نفس اليوم ولكن على فترات زمنية مختلفة. تتم الخطوات 3-5 أثناء التغذية بينما تتم الخطوتان 1-2 و6-7 في نقاط زمنية محددة خلال النهار. لاحظ أنه يجب إجراء كل جلسة خلال الوقت المشار إليه في أعلى القائمة المرجعية ولكن يستغرق فقط حوالي دقيقتين لتنفيذ كل خنزير. تشير المربعات المظللة إلى أن المهمة غير مطلوب تنفيذها. يمكن العثور على قائمة الاختيار الكاملة في الملف التكميلي 1. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2: بعض الإثراء المستخدم في القسم يرجى الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 3: توضيح موقف القائم بالرعاية أثناء الخطوتين 2-2 و 2-3 من البروتوكول. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 4: الجدول الزمني للمرحلة الانتقالية باستخدام القائمة المرجعية 1. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 5: تطور المرحلة الانتقالية. مؤامرة مبعثرة تظهر تطور المرحلة الانتقالية باستخدام القائمة المرجعية 1 ( ) مقارنة بقائمة المراجعة 2 (Ο). كل قطعة تطابق الملاحظة لخنزير واحد. يتم الإشارة إلى المتوسط و SD بواسطة أشرطة الخطأ. محور y هو عدد الأيام. على المحور س تتم الإشارة إلى الخطوات كما يلي: 1; التفاح من اليد. 2; المس الخنزير أثناء التغذية. 3; المس الجزء الخلفي والذيل أثناء التغذية. 4; لمس الخلفي والذيل في حين يعطي يعامل. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 6: جمع عينة البول عن طريق كيس الفغر الموضوع حول الأعضاء التناسلية الخارجية أثناء التغذية. الخنزير لا يزال هادئا خلال العملية ولا يأخذ أي إشعار من كيس الفغر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 7: التعاطي الوريدي أثناء التغذية بعد مرحلة الانتقال. يمكن للناظر الجلوس على مقربة من الحيوان والتركيز على غرس الدواء بشكل صحيح. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 8: يخطو على نطاق باستخدام عصا الهدف. الخنزير حريصة على اتباع عصا الهدف بسبب التدريب تعزيز إيجابية. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 9: بعد الهدف عصا في قفص النقل. هذا الإجراء مفيد إذا كان الخنزير بحاجة إلى نقله إلى مرفق التصوير على سبيل المثال. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 10: خنزير تدريب لوضع رأسه في حامل والوقوف حتى الطب يمكن أن تعطى في العينين دون التخدير. بعد إعطاء الدواء ، يستريح الخنزير على رأسه على حامله ويمكن إجراء فحص بصري للعين. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الملف التكميلي 1. الرجاء الضغط هنا لتحميل هذا الملف. قائمة التحقق الكاملة من مراحل الانتقال جاهزة للطباعة. لاحظ أن تغيير حقل تاريخ الوصول يؤثر على التواريخ في الورقة.

Discussion

تنفيذ بروتوكول يتضمن الجزء الأول ، مرحلة انتقالية المرجعية والجزء الثاني ، برنامج تدريب النقر على التوالي هو نجاح مؤكد. وقد وفرت مقدمة واستخدام قائمة مرجعية مفصلة وسيلة لتحسين إدخال الخنازير إلى مرفق البحوث. وعلاوة على ذلك، فإن المرحلة الانتقالية المنظمة تخلق أساسا أفضل لتدريب الخنازير قبل إدراجها في المشاريع البحثية. لقد كانت مفاجأة إيجابية أن نلاحظ أن التزام القائمين على تصريف الأعمال بالعمل يزداد وأن المشاعر الإيجابية التي تواجهها الخنازير تنعكس في سلوكهم اليومي.

كان وصول الخنازير الجديدة والانتقال السلس إلى خنزير الأبحاث مجالا للتركيز منذ فترة طويلة ولكن كان من الصعب إدخال تغييرات. ولخلق نظرة عامة على العمل والفوائد التي تعود عليه، تقرر استخدام قائمة مرجعية لرصد فعالية الخطوات ذات الأولوية. وفي القائمة المرجعية 1، استندت الخطوات إلى إجراءات يتوقع أن يكون لها أكبر الأثر على الانتقال. تم تسجيل وتقييم انتقال 20 خنزيرا باستخدام القائمة المرجعية 1. ثم تم تعديل القائمة للقضاء على المشاكل التي واجهتها. وتتعلق هذه الخطوات في معظمها بسوء الفهم وعدم اتساق الإبلاغ. وتمثلت إحدى الخطوات الحاسمة في تفسير كل خطوة وما هي الإجراءات التي تنطوي عليها هذه الخطوة. ومن ثم، تم وضع وصف لكل خطوة وتعديل القائمة المرجعية لتكون أكثر سهولة. تمت إزالة خطوة واحدة لتبسيط التمييز بين النجاح والفشل عند لمس الخنزير. لتوضيح ما إذا كان قد تم تنفيذ الخطوة أم لا مربع اختيار للإشارة إلى ما إذا كان قد تم تنفيذ الخطوة ( ) تمت إضافتها بالإضافة إلى مربع يذكر ما إذا كان الخنزير قد نفذ الإجراء (+) أو رفض تنفيذ الإجراء (÷). ولدعم التعديلات، خصص وقت إضافي لتدريب استخدام القائمة المرجعية 2. وقد جرت هذه المناقشة في مجموعات بهدف مناقشة كل خطوة والاتفاق على معايير النجاح. وفيما يتعلق بالتنفيذ العملي، أثيرت مسائل هامة. على سبيل المثال ، عندما يتم استخدام الخنازير لمقدمي الرعاية ويعامل ، فإنها يمكن أن تكون تدخلية جدا والتي يمكن أن تكون مخيفة وحتى خطرة على القائمين على الرعاية. وكتعديلات أخيرة، زاد عدد الجلسات مع كل خنزير بينما انخفض الوقت الذي يقضيه في كل دورة.

لتقييم القائمة المرجعية 2، تم تضمين 20 خنزيرا. وبيانات الخطوة 4 مفقودة بالنسبة لثلاثة خنازير، بسبب سوء الاتصال بين الطبيب البيطري والقائم بالأعمال، وتؤكد الحاجة إلى الاتصال. ويقدر الوقت المستخدم يوميا أن يكون هو نفسه، ولكن الخنازير إكمال المرحلة الانتقالية في أيام أقل. بعد تحديد فترات زمنية معينة خلال النهار حيث الخطوات اللازمة لتنفيذها يتطلب تغيير في بعض الروتين اليومي. وبالإضافة إلى الوقت الإجمالي اللازم لإعداد وتنفيذ الخطوات، كان هذا أكبر قيد في التنفيذ. وتتضمن قوائم الاختيار 7 خطوات لكل منها، ولكن نظرا لتعديل القائمة، خفضت المقارنة في الشكل 3 إلى أربع خطوات قابلة للمقارنة. إن تنفيذ هيكل شامل خلال المرحلة الانتقالية يخلق الوعي ويجعل مبادرة التحسين أولوية في منشأة بحثية مزدحمة.

وقد مكن تنفيذ قائمة مرجعية منظمة من تقييم التباين بين الخنازير الفردية. كان من المثير للاهتمام أن نلاحظ أنه بالنسبة لبعض الخنازير ، كان عدد الأيام حتى يفهموا العلاج أعلى في كثير من الأحيان مقارنة بإكمال الخطوات المتعلقة باللمس من قبل القائم بالأعمال. وثمة ملاحظة أخرى مثيرة للاهتمام هي حدوث تغيير مفاجئ إلى حد ما في الرغبة في أن يلمسها أحد. جلسة واحدة ، كان الخنزير يتراجع على الفور ، وفي الجلسة التالية بعد ساعات قليلة فقط سيسمح الخنزير باللمس لفترات طويلة (أكثر من دقيقة في كل مرة).

ولزيادة إعداد الخنازير للمشاريع البحثية، يبدأ التدريب الإيجابي على التعزيز بعد المرحلة الانتقالية. يوصى ببرنامج تدريب النقر. وهو يسمح للعديد من القائمين على الرعاية في نوبات للمشاركة في تدريب الحيوانات. استخدام النقر يخفف من التحول بين مقدمي الرعاية لأن إشارة المكافأة لا تزال هي نفسها. عندما يبدأ التدريب فوق يصبح من الواضح أن كل خنزير فريدة من نوعها ويستجيب للتدريب بشكل مختلف. في غضون بضع جلسات ، ومع ذلك ، فإن جميع الحيوانات حريصة على المشاركة في الدورات التدريبية والتمتع الكامل بالوقت الذي يقضيه مع القائم بالأعمال. يتيح تدريب Clicker للخنازير مهاما محددة فيما يتعلق بمشاريع البحث التي سيتم تنفيذها دون استخدام القوة. كما أنه يقلل من التباين بين الحيوانات الذي شوهد في بعض المشاريع مثل تحليلات المشي. كما يمكن أن يكون عونا كبيرا في الأعمال اليومية، على سبيل المثال عندما يتم نقل الخنزير داخل منشأة البحث أو يتم وزنه. خطوة حاسمة في التدريب فوق هو مستوى الثقة بين خنزير وتصريف الأعمال عندما يتم تقديم clicker. الخنزير يحتاج إلى الثقة في تصريف الأعمال لأنها تحتاج إلى الاقتراب ولكن لا تزال تركز على هذه المهمة بدلا من تصريف الأعمال. خطوة حاسمة أخرى هي اختيار علاج. يجب على الحيوان أن ينظر إليه على أنه مكافأة. أحيانا نأتي عبر خنزير لا يجد التفاح لذيذ ونحن ثم مبادلة التفاح مع على سبيل المثال قطعة من التاريخ أو الخوخ. من المهم النظر في المخاطر الناجمة عن العمل مع الخنازير الكبيرة ، خاصة عندما يكونون متحمسين في بيئة التدريب. لديهم لدغة قوية ، ويمكنهم القفز في محاولة للوصول إلى يعامل في نقاط زمنية غير متوقعة. لمواجهة هذه المخاطر، والنظر في استخدام عصا الهدف لتوجيه الانتباه بعيدا عن المدرب، والحفاظ على يعامل بوضوح بعيدا عن متناول اليد، والعمل في جلسات قصيرة، وعدم نفاد يعامل.

وقد جلب العمل مع الانتقال والتدريب المركز للخنازير معه حماسا متزايدا من الموظفين المؤقتين. 11 - وكان التعليم في مجال التدريب الإيجابي على التعزيز أولوية، مما أدى إلى أن مقدمي الرعاية يتمتعون بالتزام أقوى بمشاريع البحوث. إن إشراك القائمين على الرعاية في التخطيط العملي للمشاريع الجديدة في الحوار مع الباحث والموظفين البيطريين يمكن القائمين على الرعاية من تقديم اقتراحات مؤهلة حول كيفية دعم التدريب لنتائج البحث ورعاية الحيوان. جمع المزيد من البيانات من كل خنزير دون التسبب في ضرر هو واحد من حجر الزاوية في 3Rs. وقد أدت الاجتماعات الأسبوعية التي تركز على الانتقال والتدريب إلى زيادة التركيز على كل خنزير على حدة وتعزيز ثقافة الرعاية في الإدارة. رؤية الخنازير عندما تكون على وشك بدء دورة تدريبية مجزية في حد ذاتها ، والسلوك أكثر مما يوحي بأن الخنازير تتمتع الدورات. عند التخطيط لتدريب الخنازير لمشاريع محددة، ضع في اعتبارك أن الخنازير ستدخل في حالة من الإثارة عندما تتعرف على إجراءات التدريب. وتشمل الأفكار التي يمكن التصدي لها ما يلي: إذا كان ذلك ممكنا، لا تدريب حيث يتم جمع العينات. حتى إذا كنت تخطط للقيام عينات الدم في القلم المنزل، في محاولة للقيام التدريب في مكان آخر. ستعرف الخنازير روتينها اليومي ، لذلك تخطط لأخذ عينات في النقاط الزمنية التي لا يتم فيها إجراء التدريب عادة إذا أمكن. عندما يكون التدريب حيث يجب جمع العينات، دع الخنزير يستكشف المنطقة لعدد محدد من الدقائق في كل مرة، قبل البدء في التدريب أو بروتوكول جمع البيانات.

لقد كان وضع هيكل لمرحلة انتقالنا مبادرة إيجابية شاملة. ومن الواضح أن الحد من إجهاد الخنازير بعد وقت قصير من وصولها والانتقال السريع إلى وجود الخنازير التي تتمتع بصحبة القائمين على الرعاية بدلا من الصراخ حول الأقلام أمر واضح. لقد شهدنا تحولا في الموظفين من وجهة نظر حيث رأوا فقط عملا إضافيا ، لدرجة أنهم يرون فوائد نقل الخنازير باستخدام القائمة المرجعية. البروتوكول لديه إمكانات تطبيق هائلة ويمكن تطبيقها كأداة هامة في كل مجموعة تقريبا التي تنطوي على الخنازير البحوث. ونحن نستخدمها الآن للانتقال كل من الخنازير الزراعية والخنازير الصغيرة وتهدف إلى تنفيذ التدريب فوق أبعد من ذلك في المشاريع المتعلقة مثل علوم القلب والأوعية الدموية، وعلم الأعصاب وطب العيون. وقد أثيرت المواقف العامة وثقافة الرعاية في القسم وهناك رغبة وحرص لدفع هذه التجارب الجديدة إلى مزيد من دمج البحوث ورعاية الحيوان بشكل مستمر وتطبيق 3Rs.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Wrap, e-power, blå, 7,5cm	E-vet A/S, Ole Rømers Vej 26 A, DK-6100 Haderslev	203165B	Adhesive wrap used to wrap around the end of a stick to make a target stick. It is an advantage that it can be changed as it will get dirty quite quickly.
Apples	Varius	Uknown	Used as treats
Klikker (Clicker)	E-vet A/S, Ole Rømers Vej 26 A, DK-6100 Haderslev	TX2289	Clicker used in training