Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

Et justerbart HD-bildesystem for atferdsstudier av drosophila voksne

Published: June 8, 2021 doi: 10.3791/62533
* These authors contributed equally

Summary

Denne protokollen beskriver hvordan du lager et enkelt voksen Drosophila atferd observasjonskammer, og hvordan du tar HD-fotografier / videoer av morfologien eller oppførselen til forskjellige typer fruktfluer i observasjonskammeret gjennom relativt enkle og rimelige metoder.

Abstract

Drosophila melanogaster er en veldig kraftig modell innen biologisk forskning, men en dårlig modell for fotografering eller videografi. Dette dokumentet beskriver en enkel, men effektiv metode for å observere og dokumentere oppførselen eller morfologien til fluer. Fluer ble plassert i et gjennomskinnelig observasjonskammer c.a. Ø15 x 5 mm (ingen mat inni) eller Ø15 x 12 mm (med et 8 mm høyt stykke mat inni). Etter å ha dekket med et ultrafiolett (UV)/klart filter med høy lysoverføring, ble kammeret plassert under et 5-50x zoom stereomikroskop, og mini lysemitterende diode (LED) videolys ble plassert på begge sider av mikroskopet for å belyse kammeret for å oppnå ensartet, myk, lys og nesten skyggefritt lys. Deretter ble et kompakt digitalt kamera med 3-5x optisk zoom, som kan ta opp 1080 P HD-video eller høyere oppløsning (med en bildefrekvens på ≥30 fps), koblet til mikroskopets okular gjennom en brakett, og fotografier eller videoer ble tatt gjennom okularet. Ved å justere zoomknappen på zoom stereomikroskopet, var det veldig enkelt å spore fluene og ta panorama- eller detaljerte nærbilder etter behov, mens kameraet tok opp alt under mikroskopet. Fordi fluene kan holde seg i hvilken som helst posisjon i kammeret, kan de observeres og registreres fra alle retninger. Bildene eller videoene som er tatt er av god bildekvalitet. Denne metoden kan brukes både til vitenskapelig forskning og undervisning.

Introduction

Drosophila melanogaster er en fremragende modell innen biologisk forskning; Det er imidlertid en dårlig modell for fotografering eller videografi, da den er for liten for et kamera eller et videokamera og for stort for et sammensatt mikroskop1. Til tross for utmerket forskning beskrevet i litteraturen, har de fleste studier bare gitt uskarpe, uklare bilder, i stedet for klare og skarpe fotografier med klare detaljer som illustrerer flyatferden som beskrives. Videre, selv om flyatferd har blitt grundig studert (f.eks. frieri og slåssing), har de fleste av disse papirene brukt illustrasjoner for å forklare sin forskning for leserne.

Denne artikkelen beskriver en enkel og økonomisk tilnærming. Ved hjelp av denne metoden kan ikke bare de forskjellige oppførselene til Drosophila observeres, men også alle detaljene som kan observeres under et stereozoommikroskop, kan registreres tydelig og skarpt. Selvfølgelig kan denne metoden også brukes til å registrere morfologien til fluer, som når de går inn i en søvn- eller halvsøvntilstand, lar den stasjonære modellen brukeren ta et fotografi eller en stabel med fotografier med forskjellige fokusfly for å få en utvidet dybde på feltfoto. Disse metodene kan realiseres uten komplisert teknologi og dyrt utstyr eller til og med suverene manuelle ferdigheter.

Videokomponenten i denne artikkelen viser videoer av flere typiske oppførsel av fluer. Formålet med å vise disse videoene er todelt: den ene er å la publikum få vite hva som kan fanges og presentere bildekvaliteten oppnådd ved hjelp av denne metoden; den andre er å la nye studenter som er interessert i Drosophila, men så langt ikke har hatt mulighet til å faktisk observere oppførselen til fluer, forstå oppførselen til fluer (for eksempel frieri, slåssing) gjennom disse klare videoene i stedet for illustrasjoner eller uskarpe bilder.

Ekstra video: Fruit Fly Behavior: Klikk her for å laste ned denne filen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1. Bygging av observasjons-/dokumentasjonssystemet

MERK: Materialene som trengs for å konstruere flyvirkemåten som observerer/dokumenterer systemet, vises i figur 1, og det ferdige systemet vises i figur 2. Protokollen for å konstruere systemet og hvordan du bruker det er beskrevet nedenfor.

  1. Lag en fly behavior observation chamber (FBOC).
    1. Få en liten, gjennomsiktig (ikke gjennomsiktig) beholder for å lage en FBOC med størrelsesdiameter (Ø) 15 mm x 20 mm. Bruk en gjennomskinnelig plastflaskehette av størrelse ~ Ø17 mm x 22 mm for å lage en FBOC, eller kutt en seksjon på ~ 17 mm fra den tykke enden av en 5 ml pipettespiss for å lage en FBOC.
    2. Hell 1% agar inn i FBOC for å justere dybden. Hvis mat må plasseres i FBOC (se for tilberedningsmetoden for maten), hell agaren for å få en dybde på 12 mm. Hvis mat ikke trenger å plasseres i FBOC, hell agaren til en dybde på 5 mm for å spore hvor fruktfluer befinner seg lettere.
    3. Hvis du bruker en pipettespiss til å lage en FBOC, plasserer du den avskårne pipettespissdelen i en Ø35 mm eller en Ø60 mm Petri-tallerken. Hell 1% agargelen i Petri-parabolen til en tykkelse på ~ 5 mm, vent på at agaren størkner og forsegle bunnen av FBOC. Hell deretter agargelen inn i FBOC til ønsket tykkelse.
  2. Lag en FBOC-base ved å bore et ~ 10 mm dypt hull i midten av et stykke av et 60 mm x 60 mm x 15 mm etylaminskumark med samme diameter som FBOC. Sett FBOC inn i hullet.
    MERK: FBOC-basen holder FBOC stabil og forhindrer at den velter og letter BEVEGELSEN AV FBOC for å spore fluene under observasjon og videografi.
  3. Lag flymat, om nødvendig, med gjær medium2, kunstig diett3, eller ren sukrose / glukose (bruk 1% agar som gellingmiddel), avhengig av formålet med observasjon.
    1. For å visuelt avgjøre om fluer fôrer og øker kontrasten mellom fluer og deres miljø, legg til matfargestoffer (se materialtabellen) til maten til en endelig konsentrasjon på 12,5 mg / 100 ml.
      MERK: Fluens underliv endrer farge umiddelbart etter fôring.
    2. Hell den tilberedte maten i en Petri-tallerken i en høyde på 8 mm. Etter størkning, bruk et barberblad for å kutte ut et stykke mat av størrelse 8 mm x 4 mm x 8 mm, og legg det på et stykke plast (for eksempel godteriinnpakning).
    3. Klipp maten i en firkantet pyramide eller firkantet frustumpyramide, som vist i figur 3, for å tillate observasjon og registrering av flyadferd fra forskjellige vinkler når fluene lander på maten tilfeldig. Bruk plasten under maten er å hindre fargestoffet i maten fra å spre seg inn i agaren i FBOC. Bruk pinsett til å plassere maten i midten av FBOC.
  4. I noen atferdsobservasjoner, sørg for at fluene sultes på forhånd. Hell 1% agargel (1 g agar / 100 ml vann, 600 μL propionsyre) i en ren tom flaske til en tykkelse på 1-2 cm, og plasser ved romtemperatur i 1-2 timer. Overfør fluer til flasken og plasser ved 25 °C i ≥36 timer.
    MERK: Fluer kan absorbere vann fra agargelen, så det er ikke nødvendig å legge til vann fra tid til annen4,5.
  5. Overfør en eller flere fluer til FBOC ved hjelp av en aspirator. Hvis det er vanskelig å bruke en aspirator, kan du slappe av og inaktivere fluene i knust is, sortere dem på en ispakke og overføre dem til FBOC som beskrevet tidligere6.
    MERK: Bruken av frysing letter i stor grad overføringen av fluer; de avkjølte fluene kan gjenvinne bevisstheten innen 1 min, mye raskere enn de bedøvet med CO2. Selv om kjøling kan ha skadelige effekter på oppførselen til fluer, for eksempel økt kopieringsventetid for fluer fra 5 min7 til 40 min8, endrer det ikke flyadferd (for eksempel frieriadferd). Derfor kan kjølemetoden brukes til å overføre fluer til generell observasjon (for eksempel undervisningseksperimenter) og videografi. Men hvis observasjonene skal brukes i en vitenskapelig rapport, anbefales det sterkt å ikke utsette fluene for anestesi.
  6. Etter å ha overført fluene til FBOC, dekk den med et 30-40 mm UV / fjernt filter for kameraet for å danne et FBOC-kompleks (Figur 4). Plasser FBOC-komplekset under stereomikroskopet for observasjon.
    MERK: For å få klare og skarpe bilder anbefales det på det sterkeste å bruke UV/klart filter av høy kvalitet med høy lysoverføring (>98 %) og redusert bluss. Se noen forslag som er beskrevet tidligere9,10; selv om det ikke er nødvendig å kjøpe dyre filtre, unngå å dekke FBOC med glass som lokket på en Petri-tallerken.
  7. Belyse FBOC. Monter mini LED-videolysene for å blinke hot shoe mount-stativer og plasser dem på venstre og høyre side av FBOC (Figur 2). Slå på LED-lysene, og sett lysstyrken til 100% og fargetemperaturen til 5000-5600 K.
    MERK: Mini LED-videolysene med dimmbart lys, 5600 K fargetemperatur kan gi jevn, lys, nesten skyggefri belysning. Ved hjelp av den øverste lyskilden som følger med stereomikroskopet, ga led-ringlysbelysningen eller fiberoptisk belysning ikke tilfredsstillende resultater. Det er best å bruke kontinuerlig strømforsyning (transformatorer) for LED-videolys.
  8. Observasjon og videografi av flyadferd
    1. Slå på LED-videolysene, og juster stereozoommikroskopet til kanten av FBOC tydelig kan sees med det blotte øye. Flytt FBOC til midten av synsfeltet.
    2. Fest klemmen på universalteleskopets digitale kameraadapter til et okular på stereomikroskopet, og fest deretter et kompakt digitalt kamera til adapteren på en sikker måte ved vekselvis å dreie kameraets monteringsskrue og kamerafesteskrue (figur 2).
    3. Slå på det digitale kameraet, og vri på de horisontale/vertikale finjusteringsknappene til FBOC-kanten tydelig vises midt i det lyse sirkulære synsfeltet på kameraets LCD-skjerm. Drei funksjonshjulet til blenderprioritert automodus, trykk fokus på multivelgeren, velg Makro nærbilde, og trykk deretter OK . Flytt zoombryteren fra vidvinkelenden til telefotoenden, og zoom inn i det sirkulære bildet til den sentrale delen fyller hele LCD-skjermen. Trykk på Filmopptak-knappen for å starte innspillingen (trykk på knappen igjen for å avslutte innspillingen).
      MERK: Hvis bildet er for mørkt eller for lyst, trykker du på siden av kontrollhjulet nær ikonet for eksponeringskompensasjon (figur 1), og dreier på skiven for å endre eksponeringsverdien (EV) som kameraet foreslo for å oppnå ønsket effekt. Positive elbiler gjør bildet lysere, og negative elbiler gjør bildet mørkere. Bildet må være ensartet, lyst, uten vignettering.
    4. Drei fokusknappen på mikroskopet til fluene i FBOC er godt synlige. Velg flyvirkemåten av interesse for observasjon eller videoopptak. Vri zoomknappen for å zoome inn og ut for å oppnå ønsket forstørrelse for observasjon eller videoopptak.
      MERK: Denne metoden for å ta bilder under mikroskopet gjennom okularene gjelder for alle mikroskoper med okularer. Hvis du vil ta bilder av eksperimentelle resultater, bruker du et kamera som kan ta bilder i RAW-format, siden RAW-bildefiler er å foretrekke fremfor JPEG-filer. Bruk kameraets LCD-skjerm som skjerm for å observere oppførselen til fruktfluer, og sørg for at stereozoommikroskopet har minst 5-50x zoom.

2. Protokoller for observasjon og videografi av flyadferd

  1. Forbereder fluene
    1. Kultur fluene på maismelmediet ved 25 °C med 60 % fuktighet og en lys-/mørk syklus på 12 timer. Samle fluer innen 6 dager etter klekking for observasjon (unntatt frieri og kampadferd).
      MERK: Her var mediet sammensatt av 1000 ml vann, 105 g maismel, 75 g sukrose, 15 g agar, 40 g gjærpulver, 28 ml 10% metylparaben (m/v i 95% etanol) og 6,25 ml propionsyre.
  2. Gjenvinne bevissthet fra anestesi ved å kjøle seg ned
    1. Kjøl fluene som beskrevet tidligere. 6 Overfør Drosophila fra isboksen til FBOC ved hjelp av pinsett. Ta opp flyprosessen fra inaktivitet til normal holdning på video.
  3. Fly søvn, fôring, utskillelse og sosial atferd
    1. Sult flyr i 36 timer. Overfør 4-6 fruktfluer til FBOC med farget mat. Observer og ta opp flyatferd på video.
      MERK: Fluer som forblir ubevegelige i mer enn 5 minutter, viser søvnatferd11. Drosophila kan sove på mat eller på en vertikal FBOC-vegg (kroppen er vinkelrett på observasjonskammerveggen). Selv om kroppen ikke beveger seg når du sover, kan magen ses på som bølgende. Fôringsadferd manifesteres når flyet strekker ut sin proboscis, beveger seg på maten mens den stadig suger, og magen blir blå. Under gruppefôring eller andre aktiviteter strekker fruktfluer føttene for å berøre kroppene til andre fruktfluer på en vennlig måte. Dette er en sosial oppførsel.
  4. Fly grooming oppførsel
    1. Kjøl fluene som beskrevet6. Kast de frosne fluene i agarpulver, og rull for å dekke dem med agarpulver. Overfør fluene til FBOC. Observer og registrer grooming oppførsel.
      MERK: Når fruktfluen gjenvinner bevisstheten fra frysingen, vil den raskt riste av seg agarpulveret fra kroppen og rense hver del av kroppen med bena12,13. Grooming oppførsel kan også ses under fôring, frieri og annen oppførsel.
  5. Fly frieri og kampadferd
    1. Samle kvinnelige og mannlige fluer som beskrevet tidligere7. For å observere frieriadferden til fluer, plasser en kvinnelig flue og en mann flyr inn i FBOC for å observere og registrere 6 frieri (vellykket og mislykket) oppførsel.
    2. For å observere kampadferden til fluer, plasser to menn i FBOC. Observer og registrer deres oppførsel av å skyve og skyve hverandre.
  6. Fly egglegging oppførsel
    1. Forbered kvinnelige fluer som beskrevet tidligere5. Overfør 4 kvinnelige fluer til FBOC med mat.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Ta bilder gjennom et UV-filter for klare og skarpe bilder
Utfør et enkelt eksperiment for å observere forskjellen mellom et UV-filter og vanlig glass i laboratoriet. Ta et fluekultur hetteglass, fjern proppen, plasser den under et stereo dissekeringsmikroskop, og dekk det (vekselvis) med et UV-filter og et Petri-parabolens lokk. Bildene som er tatt i disse to tilfellene, vises i figur 5. Bildet tatt gjennom UV-filteret er klart og skarpt, veldig likt fotografiet som er tatt når kulturhettene ikke er dekket. Kvaliteten på bildet tatt gjennom glasset på Petri-parabolen er svært dårlig selv når fokuset er nøyaktig. Vanlig glass (eller akrylplate) er ikke belagt, den høyeste overføringen er 92%14,15, og det klare / UV-filteret med flerlagsbelegg har en lysoverføring på 98-99%.

Bildet som er tatt gjennom vanlig glass (eller akrylark) er derfor ikke så klart som bildet som er tatt gjennom det klare/UV-filteret. En annen viktig feil i vanlig glass, som lokket på en laboratorierett, er den ujevne overflaten. Det kan ses i figur 5 at på grunn av ujevnheten i glassoverflaten er en del av bildet klart og delvis uskarpt. Derfor bør klare/UV-filtre brukes i stedet for å bruke vanlige glass- eller akrylplater for å dekke FBOC. UV-filteret som ble brukt i denne protokollen (figur 5), var billig (~$10), umerket og lysoverføringen ukjent. Med andre ord, selv om det er et billig UV-filter, kan bildet som er tatt gjennom det være mye klarere og skarpere enn det som er fanget gjennom vanlig glass.

God kvalitet uten dyrt utstyr
Flyvirkemåte ble tatt opp med et kamera som bare er for JPEG, med en betydelig mindre sensor (1/2,3").). Videooppløsning er 1920 x 1080 piksler (ved 30 frames per second, fps); kvaliteten på filmen er tilfredsstillende. Et billig UV-filter ble brukt til å dekke FBOC, og stereozoommikroskopet var umerket. Kostnaden for LED-lyset (f.eks. GODOX ledet-p120) var omtrent $ 70 for to pakker (se materialtabellen). Med andre ord var utstyret som ble brukt veldig økonomisk; Imidlertid er videokvaliteten god, og viser tydelig panoramaet over noen oppførsel av fluer, for eksempel frieri og kamp, og detaljene i noen atferd, for eksempel oviposisjon og utskillelse. Med andre ord, selv om det er et billig UV-filter, kan bildet som er tatt gjennom det være klarere og skarpere enn det som er fanget gjennom vanlig glass.

Figur 6 er et bilde tatt fra videoopptaket som viser detaljene for hver del av flykroppen. Åpenbart vil bruken av et kamera og et stereomikroskop med bedre bildekvalitet gi videoer eller fotografier med høyere bildekvalitet. Hvis kameraet har en bildefrekvens på ≥60 bps med god bildekvalitet, kan langt flere detaljer fanges opp i større klarhet i atferd med mye action eller bevegelse. En annen fordel med dette systemet er at fordi kameraet er koblet til et zoom stereomikroskop, er det veldig enkelt å skyte fra panorama til nærbilder ved hjelp av zoomsystemet.

Allround innspilling
Observasjon og videografi gjøres vanligvis fra toppen; Men som fluer kan holde seg på hvilken som helst del av FBOC: den vertikale FBOC-veggen, den skrånende matoverflaten og til og med UV-filteret (med magen vendt oppover), og kroppene deres er vinkelrett på disse overflatene, deres oppførsel kan observeres og dokumenteres fra flere visningsvinkler. For eksempel kan det tydelig ses i figur 7 at den kvinnelige fluen stadig gnir ovipositoren med bakbenene under prosessen med å legge egg. Denne detaljen av eggleggingsadferd kan ikke ses tydelig fra siden5.

Figure 1
Figur 1: Fotografisk utstyr og annet tilbehør som brukes til å konstruere flyatferdsobservasjons- og dokumentasjonssystem. Forkortelse: LED = lysdiode. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 2
Figur 2: Drosophila atferd observasjons- og opptakssystem. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 3
Figur 3: Illustrasjon av størrelsen og formen på maten. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 4
Figur 4: Illustrasjon av FBOC-komplekset. Forkortelse: FBOC = observasjonskammer for flyatferd. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 5
Figur 5: Sammenligning mellom fotografiene tatt gjennom UV-filteret, gjennom lokket på laboratoriet Petri-tallerkenen, og tatt direkte uten deksel. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 6
Figur 6: Et bilde tatt fra videoopptaket. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Figure 7
Figur 7: Et uvanlig perspektiv for å observere eggleggingsatferden til fruktfluer. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Lys er selve kjernen i fotografering og videografi og er den avgjørende faktoren for å skaffe bilder av høy kvalitet16. Her ble to LED-videolys med justerbar lysstyrke og fargetemperatur brukt som belysningsapparater, og et gjennomsiktig materiale ble valgt for å lage FBOC. LED-lyspanelene på begge sider ga nok lysstyrke, og det gjennomsiktige materialet myknet og spredt lys, og til slutt produserte jevnt, mykt og sterkt lys for å belyse fluene i FBOC, uten å produsere ubehagelige overeksponerte eller undereksponerte områder. Den ideelle belysningen kan oppnås uten sofistikert og dyrt belysningsutstyr. Her hadde UV/clear-filteret svært høy lysoverføring og lav refleksjon for å dekke FBOC, og lystapet er svært lite. Disse tiltakene sørget for klare og skarpe bilder.

Vi koblet et digitalt kamera til okularet til stereozoommikroskopet gjennom en brakett og tok bilder eller videoer gjennom okularet. Alle bilder som kunne observeres under mikroskopet kunne tas opp. Ved å rotere fokuseringsknappen og løfte mikroskopet, var det veldig enkelt å spore fluene i FBOC's smale rom og zoome inn eller ut etter behov for å registrere lokale detaljer eller generell dynamikk, som ikke kan oppnås ved å bruke en videoopptaker eller kamera for direkte videografi av FBOC. Samtidig kan kameraet velges i henhold til kravene til bildekvalitet. Faktisk kan et digitalt kamera kobles til et hvilket som helst mikroskop med et okular gjennom en brakett. Den tilsvarende forfatteren av denne artikkelen har vellykket registrert eksperimentelle resultater på denne måten i mange år.

Det kompakte digitale kameraet som brukes til å registrere oppførselen til fruktfluer, må ha 3-5x optisk zoom (digital zoom bør ikke brukes til videoopptak). Telefotoenden av disse kameraene (~ 100 mm brennvidde) brukes til å forstørre bildet i midten av synsfeltet til hele skjermen, slik at det endelige bildet som er oppnådd er et hyggelig bilde uten vignettering rundt det. Hvis et kamera bare har et vidvinkelobjektiv med fast fokus, eller et optisk zoomobjektiv over 7x, vil det være mer eller mindre ubehagelig vignettering rundt det innspilte bildet. Verken digitale reflekskameraer med én linse eller videokameraer er egnet for metoden som er beskrevet i denne artikkelen. Kameraet må kunne spille inn video med en oppløsning på minst 1080 P ved 30 bps. Hvis kameraet ikke kan drives av kontinuerlig strøm, må flere reservebatterier kjøpes for utskifting når som helst.

Fluene kan stå på et fly i alle vinkler, kroppene deres er vinkelrett på denne overflaten. Selv når de sover, kan de stå ubevegelig på den vertikale kulturflaskeveggen. Derfor, når du tar bilder fra topp til bunn, så lenge vi gir dem et fly i riktig vinkel, kan oppførselen til fruktfluen observeres og fotograferes i alle retninger, uten å måtte skyte sin oppførsel fra siden av en FBOC. Dette er årsaken til den firkantede matpyramiddesignen.

I dette systemet kan imidlertid ikke kameraet fokusere og låse fluene og skyte automatisk når de beveger seg over rammen. Eksperimentet må alltid bruke fokus- og zoomfunksjonene til stereomikroskopet for å spore fluene for opptak. Det er av denne grunn at diameteren på FBOC skal være liten, og dybden på FBOC skal være grunn, slik at eksperimentet raskt kan spore de bevegelige fruktfluene. Noen virkemåter må kanskje registreres i mørket17,18. Denne artikkelen diskuterer ikke disse aspektene av flyadferd.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne har ingenting å avsløre.

Acknowledgments

Vi takker professor Li Xiangdong og fotograf Mr. Cheng Jing for nyttige diskusjoner og forslag. Dette arbeidet ble støttet av Exploratory Project (20200101) fra Life Science Experimental Teaching Demonstration Center ved China Agricultural University.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
compact camera, Nikon P310 Nikon 3-5x optical zoom, cam record 1080 P HD video
ethylamine foam 60 mm x 60 mm x 15 mm
Food Blue No 1 CAS 3844-45-9
mini LED lights and transformer GODOX LED-P120 have 5000-5600 K color temperature
small container (e.g. bottle cap) about Ø 15 mm x 20 mm
UV / Clear filter high-quality UV/Clear filter with high transmittance, 30-40 mm
zoom stereo microscope 5-50x zoom

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Chyb, S., Gompel, N. Atlas of Drosophila morphology: Wild-type and classical mutants. , Academic Press. (2013).
  2. Yang, D. Carnivory in the larvae of Drosophila melanogaster and other Drosophila species. Scientific Reports. 8, 15484 (2018).
  3. Piper, M. D., et al. A holidic medium for Drosophila melanogaster. Nature Methods. 11, 100-105 (2014).
  4. Shiraiwa, T., Carlson, J. R. Proboscis extension response (PER) assay in Drosophila. Journal of visualized experiments : JoVE. (3), e193 (2007).
  5. Yang, C. -H., Belawat, P., Hafen, E., Jan, L. Y., Jan, Y. -N. Drosophila egg-laying site selection as a system to study simple decision-making processes. Science. 319 (5870), 1679-1683 (2008).
  6. Yang, D. Simple homemade tools to handle fruit flies-Drosophila melanogaster. Journal Of Visualized Experiments: JoVE. (149), e59613 (2019).
  7. Nichols, C. D., Becnel, J., Pandey, U. B. Methods to assay Drosophila behavior. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (61), e3795 (2012).
  8. Barron, A. B. Anesthetizing Drosophila for behavioural studies. Journal of Insect Physiology. 46 (4), 439-442 (2000).
  9. Cicala, R. My not quite complete protective filter article. , Available from: https://www.lensrentals.com/blog/2017/06/the-comprehensive-ranking-of-the-major-uv-filters-on-the-market (2017).
  10. Carnathan, B. UV and clear lens protection filters review. , Available from: https://www.the-digital-picture.com/Reviews/UV-and-Clear-Lens-Protection-Filters.aspx (2013).
  11. Shaw, P. J., Cirelli, C., Greenspan, R. J., Tononi, G. Correlates of sleep and waking in Drosophila melanogaster. Science. 287 (5459), 1834-1837 (2000).
  12. Barradale, F., Sinha, K., Lebestky, T. Quantification of Drosophila grooming behavior. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (125), e55231 (2017).
  13. Szebenyi, A. L. Cleaning behaviour in Drosophila melanogaster. Animal Behaviour. 17 (4), 641-651 (1969).
  14. Arkema Inc. Plexiglas : optical and transmission characteristics. , Available from: https://www.plexiglas.com/export/sites/plexiglas/.content/medias/downloads/sheet-docs/plexiglas-optical-and-transmission-characteristics.pdf (2000).
  15. Fluegel, A. Calculation of the light reflection and transmission. , Available from: https://www.glassproperties.com/reflection/ (2007).
  16. Hunter, F., Biver, S., Fuqua, P. Light science & magic: an introduction to photographic Lighting. , Routledge. (2015).
  17. Hendricks, J. C., et al. Rest in Drosophila is a sleep-like state. Neuron. 25 (1), 129-138 (2000).
  18. Rieger, D., et al. The fruit fly Drosophila melangaster favors dim light and times its activity peaks to early dawn and late dusk. Journal of Biological Rhythms. 22 (5), 387-399 (2007).

Tags

Atferd Utgave 172 Atferd voksen Drosophila observasjons- og opptakssystem
Et justerbart HD-bildesystem for <em>atferdsstudier av drosophila</em> voksne
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Li, T., Weng, Y., Yang, D. AnMore

Li, T., Weng, Y., Yang, D. An Adjustable High-Definition Imaging System for Behavioral Studies of Drosophila Adults. J. Vis. Exp. (172), e62533, doi:10.3791/62533 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter