Summary
यह पेपर चूहों में एक आंशिक हेट्रोटोपिक ऑस्टियोमोक्यूटेनियस फ्लैप प्रत्यारोपण प्रोटोकॉल और मध्यावधि अनुवर्ती में इसके संभावित परिणामों को प्रस्तुत करता है।
Abstract
एक जटिल ऊतक दोष के बाद ऑटोलॉगस सर्जिकल संभावनाओं के बिना रोगियों के लिए संवहनी समग्र एलोट्रांसप्लांपेशन (वीसीए) सबसे उन्नत पुनर्निर्माण विकल्प का प्रतिनिधित्व करते हैं। चेहरा और हाथ प्रत्यारोपण विकृत रोगियों के जीवन बदल गया है, उंहें एक नया सौंदर्य और कार्यात्मक सामाजिक अंग दे रही है । आशाजनक परिणामों के बावजूद, वीसीए अभी भी जीवन भर इम्यूनोसप्रेसियन कॉमोर्बिडिटीज और संक्रामक जटिलताओं के कारण कम प्रदर्शन कर रहा है। चूहा इम्यूनोलॉजिकल रास्तों और भ्रष्टाचार अस्वीकृति तंत्र की जांच करने वाले वीवो अध्ययनों में एक आदर्श पशु मॉडल है। चूहों का उपयोग उपन्यास समग्र ऊतक भ्रष्टाचार संरक्षण तकनीकों में भी व्यापक रूप से किया जाता है, जिसमें परफ्यूजन और क्रायोप्रिजर्वेशन अध्ययन शामिल हैं। चूहों में वीसीए के लिए उपयोग किए जाने वाले मॉडल कम पोस्टऑपरेटिव रुग्णता और मृत्यु दर के साथ प्रजनन योग्य, विश्वसनीय और कुशल होने चाहिए। हेट्रोटोपिक अंग प्रत्यारोपण प्रक्रियाएं इन मानदंडों को पूरा करती हैं और ऑर्थोटोपिक अंग प्रत्यारोपण की तुलना में प्रदर्शन करना आसान होता है। माहिर कृंतक माइक्रोसर्जिकल मॉडल को माइक्रोसर्जरी और पशु देखभाल में ठोस अनुभव की आवश्यकता होती है। यहां चूहों में आंशिक हेट्रोटोपिक ऑस्टियोकुटेनियस फ्लैप प्रत्यारोपण, पश्चात परिणामों और संभावित जटिलताओं की रोकथाम के साधनों का एक विश्वसनीय और प्रजनन योग्य मॉडल बताया गया है।
Introduction
पिछले दो दशकों में, वीसीए उन रोगियों के लिए एक क्रांतिकारी उपचार के रूप में विकसित हुआ है जो चेहरे1, ऊपरी अंग विच्छेदन2,लिंग3और अन्य जटिल ऊतक दोष4,5सहित गंभीर विरूपण झेलते हैं। हालांकि, जीवन भर इम्यूनोसप्रेसेशन के परिणाम अभी भी इन जटिल पुनर्निर्माण सर्जरी के व्यापक अनुप्रयोग में बाधा डालते हैं। बुनियादी अनुसंधान विरोधी अस्वीकृति रणनीतियों में सुधार करने के लिए महत्वपूर्ण है । VCA संरक्षण समय बढ़ाने के लिए भी प्रत्यारोपण रसद में सुधार और दाता पूल में वृद्धि आवश्यक है (के रूप में VCA दाताओं त्वचा टोन, शारीरिक आकार, लिंग सहित ठोस अंग दाताओं की तुलना में अधिक मापदंड को पूरा करना चाहिए) । इस संदर्भ में, एलोग्राफ्ट 6 , 7 , उपन्यास सहिष्णुता प्रेरण प्रोटोकॉल8,और संरक्षण अध्ययन9,10,11की प्रतिरक्षा अस्वीकृति पर अध्ययन में चूहे अंग प्रत्यारोपण का व्यापक रूप से उपयोग कियाजाताहै। इसलिए, ये वीसीए मॉडल वीसीए ट्रांसलेशनल रिसर्च के लिए मास्टर करने के लिए एक प्रमुख तत्व हैं।
साहित्य में 8 , 12 , 13,14चूहों में वीसीए का अध्ययन करने के लिए ओस्टियोमोक्यूटेनियसफ्लैप्सको विश्वसनीय मॉडल के रूप में वर्णित किया गया है । यद्यपि ऑर्थोटोपिक पूरे अंग प्रत्यारोपण भ्रष्टाचार समारोह के दीर्घकालिक मूल्यांकन के लिए अनुमति देते हैं, यह उच्च पश्चात रुग्णता और मृत्यु दर14से जुड़ी एक समय लेने वाली प्रक्रिया है। इसके विपरीत, हेट्रोटोपिक अंग प्रत्यारोपण मॉडल गैर-कार्यात्मक हैं, लेकिन वीसीए पर प्रजनन योग्य अध्ययन सक्षम करते हैं। पोस्टऑपरेटिव परिणामों को चूहा वीसीए प्रत्यारोपण अध्ययन शुरू होने से पहले मज़बूती से प्रत्याशित किया जा सकता है। इस अध्ययन में चूहे में एक आंशिक हेट्रोटोपिक ऑस्टियोमोक्यूटेनियस फ्लैप प्रत्यारोपण मॉडल की रिपोर्ट की गई है जिसमें लगातार संभावित परिणाम और जटिलताएं शामिल हैं जो तीन सप्ताह की अनुवर्ती अवधि के दौरान अंतर-ऑपरेटिव और पश्चात रूप से उत्पन्न हो सकती हैं।
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Protocol
सभी जानवरों की देखभाल और प्रयोगशाला जानवरों के उपयोग के लिए NIH गाइड के अनुसार मानवीय देखभाल प्राप्त की । इंस्टीट्यूशनल एनिमल केयर एंड यूज कमेटी (IACUC-प्रोटोकॉल 2017N000184) और एनिमल केयर एंड यूज रिव्यू ऑफिस (ACURO) ने सभी एनिमल प्रोटोकॉल को मंजूरी दी । इनस्ल नर लुईस चूहों (250-400 ग्राम) का उपयोग सभी प्रयोगों के लिए किया गया था।
1. सर्जरी
- आइसोफ्लुनेलैन साँस लेना का उपयोग कर लुईस चूहों एनेस्थेटाइज। इंडक्शन कक्ष में 5% आइसोफ्लुन के साथ संज्ञाहरण को प्रेरित करें, और श्वास कोन के माध्यम से 1.5-3% आइसोफलुने इनहेलेशन के साथ संज्ञाहरण बनाए रखें।
- जीवित रहने की प्रक्रियाओं में सर्जरी से पहले आंख स्नेहक लागू करें। सर्जिकल साइट दाढ़ी, डिपिलेटरी क्रीम, स्क्रब, और बाँझ पर्दे के साथ कपड़ा के साथ इलाज।
- चीरा से पहले और प्रक्रिया के दौरान नियमित रूप से एक अंगुली चुटकी परीक्षण के साथ कुल संज्ञाहरण की पुष्टि करें। पूरी प्रक्रिया में दिल और श्वसन दरों की निगरानी करें। सभी सर्जरी के लिए, बाँझ उपकरणों, आपूर्ति, पर्दे, और दस्ताने का उपयोग करके बाँझ स्थितियों को बनाए रखें। प्रक्रियाओं के लिए उपयोग किए जाने वाले उपकरणों की सूची के लिए सामग्री की तालिका देखें।
2. डोनर राइट आंशिक हिंडलिम्ब प्रोक्योरमेंट
- पैर के डिस्टल थर्ड में टखने के ऊपर त्वचा का परिवर्ती चीरा करें।
- सैफेनस धमनी और द्विध्रुवी संदंश का उपयोग करके पॉपलाइटल धमनी की टर्मिनल शाखा को कंकाल और कोटराइज करें। टिबियल हड्डी के उजागर होने तक गैस्ट्रोकनेमियस, सोलियस, टिबिलिस पूर्ववर्ती, और बाइसेप्स फेमोरिस मांसपेशियों को कॉटरिज़ और काट दें।
- सही इंगिनल क्रीज पर 2.5 सेमी चीरा बनाएं। इंगिनल फैट पैड को काटना और फेमोरल जहाजों को बेनकाब करने के लिए इसे अलग से वापस लेना। इंगिनल फैट पैड कोस्टिनल फैट पैड कोस्टिनल होल्ड करने के लिए इंजिनियल स्नायु और क्लैंपिंग संदंश को समझने के लिए फिशहुक रिट्रैक्टर का उपयोग करें।
नोट: इंगिनल फैट पैड आंशिक अंग की फसल में शामिल है। - फेमोरल जहाजों को विच्छेदन करें, मर्फी शाखाओं को व्यक्तिगत करें (गहरी पेशी जमानत शाखाएं आमतौर पर इंगिनल स्नायु और एपिगैस्ट्रिक शाखा के बीच आधे रास्ते में स्थित होती हैं), और 8-0 के साथ लिगेट करें नायलॉन संबंध।
- 100 आईयू/किलो हेपरिन के साथ दाता चूहे को हेपरिनाइज करें, जो 27.5 जी सुई का उपयोग करके लिंग पृष्ठीय नस में इंजेक्ट किया जाता है।
- कूल्हे के चारों ओर त्वचा चीरा पूरा करें।
- बाइसेप्स फेमोरिस और ग्लूटस सतही मांसपेशियों को बाइपोलर संदंश का उपयोग करके कॉटेरेइज़ करें। मध्य फीमर लंबाई में स्केराइज और सियाटिक तंत्रिका को काटें। पीछे के नारी शिखर के स्तर पर फीमर को बारीकी से बेनकाब करें।
नोट: Adductor और quadriceps मांसपेशियों खरीद से बाहर छोड़ दिया जाता है । इनोमिनेट पेडिकल संरक्षित है। - इंगिनल स्नायु के स्तर पर 8/0 नायलॉन संबंधों के साथ लिगेट फेमोरल जहाजों। लिगेचर के ठीक नीचे फेमोरल धमनी पर एक धमनी प्रदर्शन करें और 24 जी एंजियो-कैथेटर के सम्मिलन के लिए अनुमति देने के लिए डिलेट करें।
- कॉटरिज़ और पेडीकल के नीचे शेष मांसपेशी में कटौती, फीमर के पूर्वकाल पक्ष को उजागर।
- क्रमशः (मध्य लंबाई) के रूप में समीपस्थ और distally के रूप में एक हड्डी कटर का उपयोग कर टिबिया और फीमर काटें।
- एक स्पष्ट शिराझ बहिर्वाह प्राप्त करने के लिए हेपरिन खारा (100 आईयू/एमएल) के 2 एमएल के साथ आंशिक हिंडलिब फ्लश करें। माइक्रोवैस्कुलर ट्रांसफर(चित्रा 1)तक एक बाँझ धुंध में बर्फ पर स्टोर करें।
- जबकि जानवर सामान्य संज्ञाहरण के तहत है, जब तक कि जानवर जीवन का कोई संकेत नहीं दिखाता है (कोई श्वसन आंदोलन और कोई दिल की धड़कन नहीं) तक एक्साइनिंग द्वारा इच्छामृत्यु करें।
चित्रा 1:चूहा आंशिक हिंडलम्ब काटा। हेट्रोटोपिक माइक्रोवैस्कुलर ट्रांसफर के लिए तैयार फेमोरल धमनी में 24 जी एंजियोकथ डाला जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
3. प्राप्तकर्ता सर्जरी
- चीरा से पहले, गर्दन के पीछे दाढ़ी, और buprenorphine 0.01-0.05 मिलीग्राम/किलोग्राम चमड़े के नीचे प्रशासन । चूहे को हीटिंग पैड पर एक रीढ़ की स्थिति में रखें।
- सही इंजिनियल क्रीज में 2.5 सेमी चीरा बनाएं। इंजिनियल फैट पैड को विच्छेदन करें और फेमोरल जहाजों को बेनकाब करने के लिए इसे अलग-अलग झुकाएं। इंगिनल फैट पैड को जिला रूप से पकड़ने के लिए इंगिनल स्नायु और क्लैंपिंग संदंश को वापस लेने के लिए एक हुक का उपयोग करें।
- फीमोरल जहाजों को विच्छेदन करें, मर्फी शाखाओं को व्यक्तिगत करें, और 8/0 नायलॉन संबंधों के साथ लिगेट करें।
- 8/0 नायलॉन संबंधों का उपयोग कर एपिगैस्ट्रिक जहाजों के ऊपर दोनों जहाजों Ligate । लगभग क्लैंप को समीपस्थ और डिलेट पोत समाप्त होता है; हेपरिन खारा के साथ कुल्ला।
- कूल्हे के ऊपर बाईं पार्श्व पर एक चीरा बनाएं, और इंगिनल क्रीज के लिए एक चमड़े के नीचे सुरंग के साथ एक चमड़े के नीचे की जेब बनाएं।
नोट: इनसेट चीरा कूल्हे की गति की सीमा से ऊपर किया जाता है ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि जानवर एक सामान्य हिंडलिम्ब गति रखता है। इसके अतिरिक्त, भ्रष्टाचार इनसेट और माइक्रोवैस्कुलर ट्रांसफर साइट के बीच एक क्यूटनीस पुल रखते हुए भ्रष्टाचार के बेहतर निर्धारण(चित्र 2)के लिए अनुमति देता है। - आंशिक अंग के समीपस्थ भाग और सूक्ष्मवैस्कुलर हस्तांतरण के लिए चमड़े के नीचे सुरंग के माध्यम से इंजिनियल फैट पैड रखें। 10/0 नायलॉन टांके का उपयोग कर शिरा और धमनी एनास्टोमोस प्रदर्शन करें। दोनों सन्निकटन क्लैंप निकालें, और अंग के पुनर्वैस्कुलराइजेशन का निरीक्षण करें। प्रत्येक एनास्टोमोसिस की स्थिति का आकलन करने के लिए दोनों जहाजों पर "मिल्किंग टेस्ट" करें।
नोट: आठ से नौ टांके आमतौर पर शिरस एनास्टोमोसिस के लिए आवश्यक हैं, धमनी एनास्टोमोसिस के लिए औसतन 6 टांके। - प्रत्यारोपित अंग के मध्याढि़या पक्ष पर एक देशांतर त्वचा चीरा बनाओ, और भ्रष्टाचार डालें। भ्रष्टाचार की अतिरिक्त त्वचा को हटा दें, और अवशोषित 4/0 टांके का उपयोग करके अलग टांके और एक चल रहे टांके के साथ घाव को बंद करें।
- सीवन एक साथ प्रत्यारोपित अंग के इंजिनियल फैट पैड और प्राप्तकर्ता दो अलग-अलग शोषक टांके का उपयोग करते हैं, और माइक्रोवैस्कुलर एनास्टोमोस के अंतिम चेकअप के बाद अंत में इंगिनल क्रीज को बंद कर देते हैं।
नोट: इंजिनियल फैट पैड को एनास्टोमोस के ऊपर वसा की एक सुरक्षात्मक परत जोड़ने और भ्रष्टाचार और उसके पेडिकल की सुरक्षित स्थिति सुनिश्चित करने के लिए कसकर सुस्त किया जाता है। घाव भरने के लिए एक सावधानीपूर्वक बंद करना बेहतर है; यह घाव से अवशिष्ट रक्तस्राव को भी रोकता है और आत्म-विकृति के जोखिम को कम करता है। - पेरिऑपरेटिव रक्तस्राव की मात्रा के अनुसार खारे के 1-3 एमएल के साथ तरल पदार्थ के नुकसान की भरपाई करें।
- जानवर की गर्दन के चारों ओर एक एलिजाबेथ कॉलर रखें, और इसे सही स्थिति में बनाए रखने के लिए त्वचा पर 2 ढीले टांके लगाएं।
- आइसोफ्लुने इनहेलेशन बंद करो, और पूरी तरह से होश में और आंचल तक एक वार्मिंग पैड पर लगातार जानवर की निगरानी।
चित्रा 2:ऑस्टियोमोक्यूटेनियस अंग के इनसेट से पहले पेरिऑपरेटिव छवि। लगभग 1 सेमी का एक कटनीस पुल इंगिनल क्रीज चीरा और कूल्हे के ऊपर भ्रष्टाचार के इनसेट के बीच संरक्षित है। भ्रष्टाचार पुल के नीचे रखा गया है, यह माइक्रोवैस्कुलर हस्तांतरण के लिए स्थिर बनाए रखने । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
4. पश्चात देखभाल
- 72 घंटे के लिए दैनिक दो बार जानवर की निगरानी करें, फिर एक बार दैनिक जब तक पश्चात दिन (पीओडी) 7, और फिर प्रति सप्ताह दो बार।
नोट: निगरानी पशु और भ्रष्टाचार की स्थिति के लिए समायोजित किया जाना चाहिए (पीली आंखों पूरक तरल पदार्थ की आवश्यकता हो सकती है, पशु दर्द का एक संकेतक के रूप में porphyrin धुंधला, असामान्य भ्रष्टाचार रंग/ भ्रष्टाचार को किसी भी नुकसान से बचने के लिए पूरे अध्ययन अवधि के दौरान प्राप्तकर्ता चूहों के लिए एकल आवास की आवश्यकता होती है। - आईएसीयूसी दिशानिर्देशों के अनुसार बुप्रेनोरफिन और/या गैर-स्टेरॉयड विरोधी भड़काऊ दवा के चमड़े के नीचे इंजेक्शन के साथ एनाल्जेसिया का प्रदर्शन करें ।
- भ्रष्टाचार का मूल्यांकन करें, और एक ही डिवाइस का उपयोग करके चित्रों के साथ दैनिक शारीरिक परीक्षा करें।
नोट: भ्रष्टाचार की त्वचा पर बाल हटाने क्रीम का उपयोग बेहतर प्रत्यारोपण की त्वचा के रंग का आकलन करने के लिए उपयोगी है ।
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Representative Results
इस एकल ऑपरेटर अध्ययन में, 30 सिनेजेनिक हेट्रोटोपिक आंशिक अंग प्रत्यारोपण किए गए थे। सफलता VCA विफलता या इच्छामृत्यु की आवश्यकता जटिलताओं की अनुपस्थिति के रूप में पश्चात दिन 21 पर परिभाषित किया गया था । भ्रष्टाचार के सामान्य विकास का प्रतिनिधित्व चित्र 3में किया जाता है । प्राप्तकर्ता में आंशिक अंग खरीद और भ्रष्टाचार इनसेट के लिए औसत अवधि क्रमशः 35 और 105 मिनट थी; मतलब इस्केमिया समय 105 मिनट था। अनुवर्ती कार्रवाई के दौरान, दो प्रकार की जटिलताएं हुईं(तालिका 1)-जल्दी या देर से। कुछ आवश्यक इच्छामृत्यु, दूसरों को बचाया गया, सभी कर्मचारियों पशु चिकित्सकों(तालिका 2)के साथ चर्चा की गई । यह अध्ययन कृंतक माइक्रोसर्जरी(अनुपूरक तालिका 1)में शुरुआती लोगों के लिए लेखकों के अनुभव और सलाह की रिपोर्ट करता है।
चित्र 3:अध्ययन के अंत तक हेट्रोटोपिक हिंडलिम्ब मॉडल का सामान्य विकास। बाल पुनर्विकास पहले पश्चात सप्ताह के दौरान मनाया जाता है; 2 सप्ताह के बाद क्यूटेनियस रिऐक्शन दिखाई देता है। संक्षिप्त नाम: POD = पश्चात दिन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
पेरिऑपरेटिव जटिलताओं का प्रबंधन
धमनी या वेनस थ्रोम्बोसिस सबसे आम पेरिऑपरेटिव जटिलता है। इस पर काबू पाने और सर्जरी को सफल बनाने के लिए सबसे महत्वपूर्ण टिप एक प्रारंभिक निदान करना है, यानी, एनास्टोमोस सर्जिकल साइट को बंद करने से पहले फ्लैप रंग/रक्तस्राव और आवर्ती पैटेंसी टेस्ट की निरंतर निगरानी मौलिक है। इस जटिलता का निवारण सर्जन के मन में होना चाहिए जैसे ही कोई चीरा लगाया जाता है। दाता को भ्रष्टाचार धमनी इस्केमिया से पहले हेपरिन १०० आईयू/किलो 5 मिनट के चतुर्थ इंजेक्शन के साथ हेपरिनाइज्ड किया जाना चाहिए । एक बार काटा, भ्रष्टाचार हेपरिन खारा (१०० IU/mL) के साथ निकाल दिया जाना चाहिए जब तक शिराय बहिर्वाह स्पष्ट है । इस अध्ययन में, पेरिऑपरेटिव धमनी थ्रोम्बोसिस 10% मामलों में हुआ।
रक्तस्राव एक कम लगातार घटना है और भ्रष्टाचार की मांसपेशियों के सतर्क कोटराइजेशन और प्राप्तकर्ता साइट के एक गहन विच्छेदन के साथ आसानी से कम हो जाता है। रक्तस्राव का प्राथमिक कारण धमनी में एनास्टोमोटिक रिसाव है। यह 3 मिनट के भीतर खुद से हल करना चाहिए, या यदि नहीं, तो लीक एनास्टोमोसिस का पुनः क्लैंपिंग और संशोधन आवश्यक है। संज्ञाहरण से संबंधित जटिलताओं, जो मामलों के 6.7% में हुई, अप्रशिक्षित माइक्रोसर्जन के साथ अधिक बार कर रहे हैं। आइसोफ्लुन का उपयोग चूहों को एनेस्थेटाइज करने का एक विश्वसनीय तरीका है, और संज्ञाहरण की लंबाई को वास्तविक समय में समायोजित किया जा सकता है। सर्जन को मशीन का सही ढंग से उपयोग करने, प्रेरण और रखरखाव आहार के लिए दिशानिर्देशों का पालन करने और पूरे ऑपरेशन में दिल और श्वसन दरों की बारीकी से निगरानी करने के लिए प्रशिक्षित किया जाना चाहिए। जानवर की प्रजातियों, उम्र या वजन के आधार पर, आवश्यक आइसोफ्लुन की मात्रा भिन्न हो सकती है। अप्रत्याशित पशु हानि एक दुर्लभ घटना है और आमतौर पर एक संवेदनाहारी या सर्जिकल गलतियों द्वारा समझाया नहीं जाता है।
प्रारंभिक जटिलताओं (
वीसीए विफलता माइक्रोवैस्कुलर थ्रोम्बोसिस (धमनी की तुलना में अधिक बार वेनस थ्रोम्बोसिस) के कारण पहले पश्चात सप्ताह के दौरान हो सकती है। कमर के स्तर पर पेरिऑपरेटिव पेडीकल इनसेट एक बहुत ही महत्वपूर्ण कदम है। पेडीकल पर आंदोलन के प्रभाव की नकल करने के लिए चूहे के हिंडलिब को स्थानांतरित करना महत्वपूर्ण है; पेडीकल कभी भी बहुत ढीला नहीं होना चाहिए और न ही बहुत तंग होना चाहिए। गहन निगरानी एक मौलिक आवश्यकता है, क्योंकि वीसीए विफलता निदान के रूप में जल्द ही नेक्रॉप्सी किया जाना चाहिए। नेक्रॉप्सी के दौरान, पेडीकल (किंकिंग या तनाव) की स्थिति और थ्रोम्बोस्ड एनास्टोमोसिस (बैक वॉल सीवन, इंट्राल्यूमिनल फ्लैप) की गुणवत्ता का विश्लेषण अगली प्रक्रिया के दौरान क्या सुधार किया जा सकता है और इस प्रकार, ऑपरेटिंग सर्जन द्वारा किया जाना चाहिए। वेनस थ्रोम्बोसिस 20% मामलों में जल्दी इच्छामृत्यु का एक कारण था, जो सभी POD5(चित्रा 4)से पहले हुआ था।
चित्र 4:पश्चात शील वेनस थ्रोम्बोसिस। त्वचा नीली दिखाई देती है और हर दिन गहरा हो जाती है। संक्षिप्त नाम: POD = पश्चात दिन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
आत्म-विकृति (या ऑटोफैगिया) गैर-संवेदी ग्राफ्ट में एक गंभीर चिंता का विषय है; यह अक्सर POD2 और POD7 के बीच होता है। यदि भ्रष्टाचार की सतह के एक तिहाई से भी कम तक सीमित है और केवल त्वचा के विषय में, शल्य चिकित्सा debridement और टांके गैर अवशोषित टांके का उपयोग कर स्टाफपशुचिकित्सा (चित्रा 5A-सी)के साथ चर्चा की जा सकतीहै। रोकथाम POD7 तक गर्दन पर सिले ई-कॉलर के उपयोग और जानवर के सर्जिकल घावों पर किसी भी रक्त या पपड़ी की सफाई पर निर्भर करती है। बार-बार ऑटोफैगिया या गहरे विकृति के लिए इच्छामृत्यु(चित्रा 5डी) कीआवश्यकता होती है।
चित्र 5:गैर-संवेदी भ्रष्टाचार का पश्चात आत्म-विकृति। (ए-सी) ऑटो विकृति की सीमित सतह(A)POD2। (ख)शल्य चिकित्सा debrided और फिर से sutured; (ग)POD21 पर पहलू । (घ)भ्रष्टाचार की कई परतों की गंभीर ऑटोफैगिया जिससे जानवर की इच्छामृत्यु हो सकती है । संक्षिप्त नाम: POD = पश्चात दिन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
देर से जटिलताओं (>POD7)
कम लगातार और कम घातक, इन जटिलताओं पर्याप्त उपचार प्रदान करने के लिए पशुचिकित्सा परामर्श की मांग । सबसे पहले, हड्डी जोखिम इस मॉडल में देखा जा सकता है, आमतौर पर तीसरे सप्ताह के बाद आपरेशन पर प्रारंभिक उपचार के बाद । रोकथाम सावधान हड्डी काटने (चिकनी किनारों बनाने हड्डी कटर का उपयोग) पर आधारित है; बाद में मांसपेशियों शोष के लिए लेखांकन करते हुए आसपास की मांसपेशियों के साथ हड्डी किनारों को कवर करना सहायक है। यदि जल्दी पता चला और जानवर अच्छी स्थिति में है, तो शल्य चिकित्सा संशोधन पशुचिकित्सा के साथ चर्चा की जा सकती है। दूसरा, डर्मल अल्सर दो सप्ताह(चित्र 6)के बाद शल्य चिकित्सा साइट के आसपास हो सकता है । वे आमतौर पर चूहे या भ्रष्टाचार की स्थिति में हस्तक्षेप नहीं करते हैं, लेकिन त्वचा पर फिस्टुलाइज कर सकते हैं और संक्रमित हो सकते हैं। घाव में किसी भी अवशिष्ट बालों से बचने के लिए भ्रष्टाचार इनसेट की शल्य चिकित्सा साइट धोना पुटी के निर्माण को रोकता है। सर्जिकल जल निकासी के लिए संकेत पशुचिकित्सा के साथ मूल्यांकन किया जा सकता है।
चित्रा 6:डर्मल अल्सर। कभी-कभी पोड14केबाद,(बी)फिस्टुला से पहले एक कटनीस नेिगलित केंद्र के साथ दिखाई देने वाले डर्मल अल्सर। संक्षिप्त नाम: POD = पश्चात दिन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
| फंस | घोल | रोकथाम | |
| पेरी-ऑपरेटिव | माइक्रोवैस्कुलर थ्रोम्बोसिस | पोत को धोने के बाद एनास्टोमोसिस को फिर से करें हेपरिन खारा के साथ समाप्त होता है और अच्छे प्रवाह को प्रमाणित करता है। | दाता को हेपरिनाइज करें, फ्लैप फ्लश करें, एनास्टोमोसिस तकनीक में महारत हासिल करें, और पर्याप्त उपकरणों और सीवन का उपयोग करें। |
| रक्तस्राव | मांसपेशियों से यदि काटराइज करें, तो एनास्टोमोसिस से पीछा करें और 3 मिनट के भीतर अनायास नहीं रुकें। | भ्रष्टाचार फसल के दौरान पूरी तरह से कॉटराइजेशन | |
| एनेस्थीसिया से संबंधित मौत | पशु चिकित्सक कर्मचारियों के साथ सामना करना पड़ा समस्या पर चर्चा करें । | संज्ञाहरण मशीन और पेरिऑपरेटिव चूहा निगरानी के उपयोग में प्रशिक्षण | |
| जल्दी ( |
माइक्रोवैस्कुलर थ्रोम्बोसिस | थ्रोम्बोसिस के कारण को प्रकट करने के लिए जल्दी इच्छामृत्यु और नेक्रॉप्सी | कारण पर निर्भर करता है |
| ऑटो विकृति | यदि पहली घटना और भ्रष्टाचार को सतही क्षति होती है तो पशु चिकित्सक के साथ सर्जिकल मरम्मत पर चर्चा करें। | पीओडी-2 से POD7 तक ई-कॉलर | |
| देर से (>POD7) | हड्डी एक्सपोजर | पशु चिकित्सक के साथ शल्य चिकित्सा संशोधन पर चर्चा करें। | हड्डी कटर के साथ हड्डी काटें, सुनिश्चित करें कि किनारे चिकनी है, आसपास की मांसपेशियों के साथ ठीक हो, बाद में मांसपेशियों शोष के लिए खाते (कम कटौती) । |
| डर्मल सिस्ट | पशु चिकित्सक के साथ सर्जिकल जल निकासी और एंटीबायोटिक उपचार पर चर्चा | इनसेट साइट को पानी से धोएं; सर्जिकल साइट में किसी भी बाल छोड़ने से बचें। |
तालिका 1: संभावित परिणाम। रोकथाम और समाधान।
अध्ययन का अंत
इस मॉडल में अध्ययन का अंत POD21 पर स्थापित किया गया था; जानवरों को सीओ2 श्वासावरोध या एक्सान्गुइनेशन का उपयोग करके इच्छामृत्यु दी गई थी। एक गैर-कार्यात्मक भ्रष्टाचार के रूप में, मांसपेशियों में शोष और फैटी डिजनरेशन को पुनर्नर्वेशन की कमी के परिणाम के रूप में देखा गया था। त्वचा और मांसपेशियों की बायोप्सी हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण के लिए बचाई जाती हैं। यदि अध्ययन के अंत से पहले इच्छामृत्यु की जाती है तो वैस्कुलर पेडिकल (प्लेसमेंट, पैटेंसी) के मूल्यांकन के लिए इंगिनल क्रीज को फिर से खोला जाता है।
| स्टाफ पशुचिकित्सा परामर्श के लिए पांच कारण |
| 1) अध्ययन की शुरुआत से पहले उसे अपने अध्ययन की प्रकृति के बारे में सूचित करने के लिए, योजना बनाई analgesia, और अनुवर्ती रणनीतियों और अपेक्षित परिणाम |
| 2) विशेष आहार या पूरक पोषक तत्व जो अध्ययन के दौरान जानवरों की स्थिति में सुधार करने में मदद कर सकते हैं |
| 3) अप्रत्याशित संज्ञाहरण से संबंधित मौत |
| 4) जानवरों की स्थिति की स्थिति को अनसमझाया जा रहा है |
| 5) शल्य चिकित्सा जटिलता बचाव संभावनाओं या इच्छामृत्यु के लिए संकेत का आकलन करने के लिए |
तालिका 2: पशु चिकित्सक को कब कॉल करें। वीवो अध्ययन में एक के संचालन के लिए कर्मचारियों के साथ संचार आवश्यक है।
अनुपूरक तालिका 1: "डॉस एंड डो न करें। युवा माइक्रोसर्जिकल प्रशिक्षुओं के लिए सलाह। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें ।
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Discussion
कृंतक में ऑर्थोटोपिक अंग प्रत्यारोपण मॉडल का वर्णन साहित्य में किया गया है15,16,17. हालांकि, उन्हें तंत्रिका मरम्मत, मांसपेशियों के पुनर्attachment और फीमर के एक आदर्श ऑस्टियोसिंथेसिस की आवश्यकता होती है, जो एक बहुत ही कठिन कदम हो सकता है। ये मॉडल कृंतक14में उच्च रुग्णता और मृत्यु दर से भी जुड़े हुए हैं, खासकर अल्पावधि अनुवर्ती में क्योंकि प्रत्यारोपित हिंडलिब के सामान्य कार्य की वसूली में कई महीने लग सकते हैं18। हालांकि, वे सफलता के मामले में भ्रष्टाचार समारोह के दीर्घकालिक आकलन के लिए अनुमति देते हैं । हेट्रोटोपिक अंग प्रत्यारोपण में मुख्य सीमा भ्रष्टाचार के पुनर्नर्वेशन की कमी से प्रेरित मांसपेशियों की शोष है। जैसा कि पहले साहित्य में प्रकाशित किया गया था, मांसपेशियों में फाइबर की चोटें पांच दिनों के बाद19के रूप में हो सकती हैं। यह एक महीने के बाद महत्वपूर्ण मांसपेशियों शोष और फैटी अध: पतन का कारण बनता है, तीन सप्ताह से अधिक समय तक चलने वाले वीवो अध्ययनों में इस मॉडल के उपयोग को रोकता है। इस दृष्टिकोण से, आंशिक हेट्रोटोपिक ऑस्टियोमोक्यूटेनियस फ्लैप मॉडल ऊतक संरक्षण10,ऊतक बायोइंजीनियरिंग, और इम्यूनोसप्रेसेशन रणनीतियों20पर अल्पकालिक अध्ययनों के लिए सबसे अच्छे हैं।
प्रस्तावित मॉडल में, शल्य चिकित्सा और पश्चात दोनों जटिलताएं सीमित हैं और एक माइक्रोसर्जिकल शोधकर्ता द्वारा आसानी से और तेजी से संबोधित किया जा सकता है। हमारा अनुमान है कि एक युवा सर्जन के लिए 3-6 प्रत्यारोपण के बाद इस मॉडल में सफलता प्राप्त की जा सकती है, यह देखते हुए कि उन्हें बुनियादी माइक्रोसर्जरी पाठ्यक्रम प्राप्त हुए हैं । यह भी एक प्रक्रिया है कि एक ऑपरेटर द्वारा 2 घंटे से नीचे एक इस्केमिया समय के साथ 3 घंटे से भी कम समय में किया जा सकता है । इस मॉडल को दो ऑपरेटरों द्वारा भी किया जा सकता है, जो केवल माइक्रोवैस्कुलर एनास्टोमोस के समय के लिए इस्केमिया समय को छोटा करता है। इस मॉडल में महत्वपूर्ण कदम भ्रष्टाचार इनसेट है और किसी भी किंकिंग या तनाव से बचने के लिए पेडीकल का अच्छा प्लेसमेंट सुनिश्चित करना है जो माइक्रोवैस्कुलर थ्रोम्बोसिस का कारण बनेगा। इस कारण से, ऊर्ध्वाधर जहाजों के विच्छेदन को क्रमशः दाता और प्राप्तकर्ता में यथासंभव समीपस्थ और धंतिय रूप से आगे बढ़ना चाहिए। त्वचा को धमनी त्वचा पर छिद्रकों पर किसी भी बाल काटने के प्रभाव से बचने के लिए भ्रष्टाचार पुनर्संक्रमण तक अंग के चारों ओर लिपटे हुए त्वचा को अच्छी तरह से संरक्षित किया जाना चाहिए, जो कम त्वचा परफ्यूजन और बाद में त्वचा परिगलन का कारण बन सकता है।
साहित्य में, कृंतक वीसीए मॉडल में जटिलताओं की अच्छी तरह से रिपोर्ट नहीं की गई है। जटिलताओं को रोकने और आशा करने में सक्षम होने के लिए हर संभव परिणाम का ज्ञान आवश्यक है। इस अध्ययन में स्टाफ पशुचिकित्सा के साथ अच्छे संचार की आवश्यकता पर जोर दिया गया है । चूहा हैंडलिंग और शारीरिक परीक्षा में कौशल प्राप्त करना जानवर की भलाई और अध्ययन के उचित संचालन के लिए महत्वपूर्ण है। एक बार इस तकनीक में महारत हासिल है, इस मॉडल को 100% के करीब सफलता दर के साथ वीसीए अनुसंधान के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। हालांकि गैर कार्यात्मक मॉडल दीर्घकालिक मूल्यांकन के लिए अनुकूल नहीं हैं, वे पूर्ण बेमेल VCA प्रत्यारोपण या इस्केमिया-reperpersion चोटों के मूल्यांकन पर प्रतिरक्षा अनुसंधान में प्रारंभिक भ्रष्टाचार के आकलन के लिए बहुत रुचि रखते हैं । वर्णित मॉडल एक बड़ा त्वचा घटक और मांसपेशियों की मात्रा प्रदान करता है जिसे पंच बायोप्सी का उपयोग करके बार-बार नमूना दिया जा सकता है, जिससे कई हिस्टोलॉजिकल और इम्यूनोलॉजिकल परखें पैदा की जा सकती हैं और साथ ही इमेजिंग मूल्यांकन तकनीक13। यह सटीक प्रोटोकॉल संभावित जटिलताओं की कल्पना और सक्रिय रूप से रोके जाने के बाद कम रुग्णता के साथ चूहों में एक प्रजनन योग्य और विश्वसनीय वीसीए मॉडल प्रदान करता है।
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Disclosures
लेखकों के पास कोई खुलासे नहीं हैं ।
Acknowledgments
इस काम के पुरस्कार नहीं के तहत कांग्रेस के निर्देशित चिकित्सा अनुसंधान कार्यक्रम के माध्यम से स्वास्थ्य मामलों के लिए रक्षा के सहायक सचिव के कार्यालय द्वारा समर्थित किया गया था । W81XWH-17-1-0680 । राय, व्याख्याओं, निष्कर्ष, और सिफारिशों लेखकों के उन हैं और जरूरी रक्षा विभाग द्वारा समर्थन नहीं कर रहे हैं।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 24 GA angiocatheter | BD Insyte Autoguard | 381412 | |
| 4-0 suture Black monofilament non absorbable suture | Ethicon | 1667 | Used to suture the E-collar to the back of the neck |
| 4-0 suture Coated Vicryl Plus Antibacterial | Ethicon | VCP496 | |
| Adson Tissue Forceps, 11 cm, 1 x 2 Teeth with Tying Platform | ASSI | ASSI.ATK26426 | |
| Bipolar cords | ASSI | 228000C | |
| Black Polyamide Monofilament USP 10-0, 4 mm 3/8c | AROSurgical | T04A10N07-13 | Used to perform the microvascular anastomoses |
| Buprenorphine HCl | Pharmaceutical, Inc | 42023-179-01 | |
| Dilating Forceps | Fine science tools (FST) | 18131-12 | |
| Dissecting Scissors 15 cm, Round Handle 8 mm diameter, Straight Slender Tapered Blade 7 mm, Lipshultz Pattern | ASSI | ASSI.SAS15RVL | |
| Double Micro Clamps 5.5 x 1.5 mm | Fine science tools (FST) | 18040-22 | |
| Elizabethan collar | Braintree Scientific | EC-R1 | |
| Forceps 13.5 cm long, Flat Handle, 9 mm wide Straight Tips 0.1 mm diameter (x2) | ASSI | ASSI.JFL31 | |
| Halsey Micro Needle Holder | Fine science tools (FST) | 12500-12 | |
| Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 units/mL | BD PosiFlush | 306424 | |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 14043-704-06 | |
| Jewelers Bipolar Forceps Non Stick 11 cm, straight pointed tip, 0.25 mm tip diameter | ASSI | ASSI.BPNS11223 | |
| Lone Star Elastic Stays | CooperSurgical | 3314-8G | Used to retract the inguinal ligament for femoral vessels dissection |
| Lone Star Self-Retaining Retractors | CooperSurgical | 3301G | |
| Micro-Mosquito Hemostats | Fine science tools (FST) | 13010-12 | Used to retract the inguinal fat pad distally |
| Needle Holder, 15 cm Round Handle, 8 mm diameter, Superfine Curved Jaw 0.2 mm tip diameter, without lock | ASSI | ASSI.B1582 | |
| Nylon Suture Black Monolfilament 8-0, 6.5 mm 3/8c | Ethilon | 2808G | Used to ligate collateral branches on the femoral vessels |
| Offset Bone Nippers | Fine science tools (FST) | 16101-10 | |
| S&T Vascular Clamps 5.5 x 1.5 mm | Fine science tools (FST) | 00398-02 | |
| Walton scissors | Fine science tools (FST) | 14077-09 |
References
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