Summary
이 논문은 쥐에 있는 부분이성 골균 플랩 이식 프로토콜 및 중간 후속에 있는 그것의 잠재적인 결과를 제시합니다.
Abstract
혈관 화 복합 동종 이식 (VCA)는 복잡한 조직 결함 후 자가 외과 가능성없이 환자를위한 가장 진보 된 재건 옵션을 나타냅니다. 얼굴과 손 이식은 환자의 삶을 변화시켰으며, 새로운 미적 및 기능성 사회 기관을 제공합니다. 유망한 결과에도 불구하고 VCA는 평생 면역 억제 및 전염성 합병증으로 인해 여전히 실적이 저조합니다. 쥐는 면역 학적 경로 와 접목 거부 메커니즘을 조사 하는 생체 내 연구에 대 한 이상적인 동물 모델. 쥐는 또한 관류 및 냉동 보존 연구를 포함하여 새로운 복합 조직 이식 보존 기술에 널리 사용됩니다. 쥐에서 VCA에 사용 되는 모델 재현 해야 합니다., 신뢰할 수 있는, 낮은 수술 후 이환율과 사망률. 이종성 사지 이식 절차는 이 기준을 충족하고 치열 하 사지 이식 보다 수행 하기 쉽습니다. 설치류 미세 수술 모델을 마스터하려면 미세 수술 및 동물 관리에 대한 견고한 경험이 필요합니다. 본명에서 쥐에서 부분 이종요법 골염 플랩 이식의 신뢰할 수 있고 재현 가능한 모델을 보고, 수술 후 결과, 잠재적인 합병증의 예방 수단.
Introduction
지난 2년간 VCA는 얼굴1,상반두 절단2,음경3및 기타 복잡한 조직 결함4,5를포함하여 심각한 손상을 입은 환자를 위한 혁신적인 치료법으로 진화해 왔다. 그러나, 평생 면역 억제의 결과는 아직도 이 복잡한 재건 수술의 더 넓은 적용을 방해합니다. 기본 연구는 거부 방지 전략을 개선하는 데 중요합니다. VCA 보존 시간을 늘리는 것은 이식 물류를 개선하고 기증자 풀을 늘리는 데도 필수적입니다 (VCA 기증자는 피부 톤, 해부학 크기, 성별을 포함한 견고한 장기 기증자보다 더 많은 기준을 충족해야하므로). 이러한 맥락에서, 쥐 사지 이식은 동종 이식6,7,신규 내성 유도 프로토콜8,보존 연구9,10,11의면역 거부에 대한 연구에서 널리 사용된다. 따라서 이러한 VCA 모델은 VCA 번역 연구를 마스터하는 핵심 요소입니다.
골연액은8,12,13,14에서VCA를 연구하는 신뢰할 수 있는 모델로 문헌에서 기술되었다. 직교 전지 이식은 이식 기능의 장기 평가를 허용하지만, 수술 후 사망률 및 사망률14와관련된 시간이 많이 소요되는 절차이다. 대조적으로, 이성애 사지 이식 모형은 비 기능적이지만, VCA에 재현가능한 연구를 가능하게 합니다. 수술 후 결과는 쥐 VCA 이식 연구의 시작 전에 안정적으로 예상될 수 있습니다. 이 연구는 3 주 간의 후속 기간 동안 수술 및 수술 후 발생할 수있는 빈번한 가능한 결과와 합병증을 포함하는 쥐의 부분 이성토성 골다움증 플랩 이식 모델을보고합니다.
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Protocol
모든 동물은 실험실 동물의 관리 및 사용에 대한 NIH 가이드에 따라 인도적 치료를 받았습니다. 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC 프로토콜 2017N000184) 및 동물 관리 및 사용 검토 사무실 (ACURO)는 모든 동물 프로토콜을 승인했습니다. 근친 남성 루이스 쥐 (250-400 g) 모든 실험에 사용 되었다.
1. 수술
- 루이스 쥐를 이소플루란 흡입을 사용하여 마취한다. 유도 챔버에서 5% 이소플루란으로 마취를 유도하고 호흡 콘을 통해 1.5-3%의 이소플루란 흡입으로 마취를 유지한다.
- 생존 시술에 수술 전에 눈 윤활유를 적용하십시오. 수술 부위를 면도하고, 탈필 크림, 스크럽, 무균 커튼으로 커튼으로 치료합니다.
- 절개 전과 시술 중에 정기적으로 발가락 핀치 테스트를 통해 총 마취를 확인하십시오. 전체 절차 전반에 걸쳐 심장과 호흡 속도를 모니터링합니다. 모든 수술의 경우 멸균 기기, 소모품, 커튼 및 장갑을 사용하여 멸균 상태를 유지하십시오. 프로시저에 사용되는 계측기 목록은 재료 표를 참조하십시오.
2. 기증자 오른쪽 부분 뒷다리 조달
- 다리의 단면 세 번째에서 발목 위의 피부의 할례 절개를 합니다.
- 양극성 집게를 사용하여 포라이트 동맥의 사페누스 동맥과 말단 가지를 골격화하고 소생시킵니다. 위장골혈증, 솔레우스, 티비알리스 전방, 이두근 이두근이 노출될 때까지 이두근을 잘라냅니다.
- 오른쪽 잉게날 주름에 2.5cm 절개를 합니다. 잉게날 지방 패드를 해부하고 대퇴 혈관을 노출하기 위해 그것을 철회. 잉게인인대와 클램핑 포스프를 파악하여 잉게날 지방 패드를 disinal을 잡습니다.
참고: 잉구인 지방 패드는 부분 사지의 수확에 포함되어 있습니다. - 대퇴 혈관을 해부, 머피 가지를 개별화 (깊은 근육 담보 지점은 일반적으로 인기구 인대와 상복부 지점 사이의 중간에 위치), 8-0으로 ligate 나일론 넥타이.
- 27.5 G 바늘을 사용하여 음경 등쪽 정맥에 주입된 100 IU/kg 헤파린으로 기증자 쥐를 헤파리니즈합니다.
- 엉덩이 주위의 피부 절개를 완료합니다.
- 양극성 집게를 사용하여 이두근 여성스러움과 글루테우스 피상화 근육을 소작합니다. 중대퇴골 길이의 상시 신경을 코터리화하고 잘라냅니다. 대퇴골문장의 수준에서 대퇴골을 근접적으로 노출한다.
참고: 애드덕터와 사분면 근육은 조달에서 제외됩니다. 지명된 페디클이 유지됩니다. - 잉게인인의 수준에서 8/0 나일론 넥타이와 Ligate 대퇴골 혈관. 24 G 혈관 카테터를 삽입할 수 있도록 합자 바로 아래 대퇴 동맥에 동맥 절제술을 수행하고 팽창시키세요.
- 대퇴골의 전방을 드러내며 페디클 아래에 남은 근육을 cauterize하고 잘라냅니다.
- 골 커터를 사용하여 경골과 대퇴골을 각각 근접및 disismly(중간 길이)로 자른다.
- 부분 힌드레다리를 헤파린 식염수(100 IU/mL)로 2mL로 플러시하여 명확한 정맥 유출을 얻습니다. 미생물이송(그림 1)까지멸균 거즈에 얼음에 보관하십시오.
- 동물은 전신 마취하에 있는 동안, 동물이 생명의 흔적을 보이지 때까지 산기화에 의해 안락사를 수행 (호흡 움직임과 심장 박동없음).
그림 1: 쥐 부분 뒷다리 수확. 24 G 협심증은 대퇴 동맥에 삽입되어 이성균 미생물 혈관 전달을 준비합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
3. 받는 사람 수술
- 절개하기 전에 목 뒤쪽을 면도하고 buprenorphine 0.01-0.05 mg/kg을 피하로 투여하십시오. 가열 패드에 쥐를 척추 위치에 놓습니다.
- 오른쪽 잉구인 주름에 2.5cm 절개를 합니다. 잉게인 지방 패드를 해부하고 대퇴 혈관을 노출하기 위해 그것을 기울입니다. 후크를 사용하여 인내 인대와 클램핑 포스프를 철회하여 잉게날 지방 패드를 disinal지방 패드를 더 이상 유지합니다.
- 대퇴선박을 해부하고, 머피 가지를 개별화하고, 8/0 나일론 넥타이로 리게이트를 한다.
- 8/0 나일론 넥타이를 사용하여 상복부 선박 위에 두 선박을 분리합니다. 근사 클램프를 근교로 배치하고 혈관 끝을 팽창시; 헤파린 식염수로 헹구는 다.
- 엉덩이 위의 왼쪽 측면에 절개를하고, 잉게날 주름에 피하 터널피 포켓을 만듭니다.
참고: 절개는 동물이 정상적인 뒷다리 동작을 유지하도록 엉덩이의 운동 범위 이상으로 만들어집니다. 또한, 접목 삽입과 미세 혈관 전달 부위 사이의 분리 된 다리를 유지하면 접목의 더 나은 고정을 할 수 있습니다(도 2). - 미세 혈관 전달을 위한 피하 터널을 통해 부분 사지및 잉게인 지방 패드의 근접 부분을 놓습니다. 10/0 나일론 봉합사를 사용하여 정맥 및 동맥 해부학을 수행합니다. 근사 클램프를 모두 제거하고 사지의 부활을 관찰합니다. 각 해부학의 가관성을 평가하기 위해 두 선박에 "착유 테스트"를 수행합니다.
참고: 정맥 해부학에 8~9개의 봉합사가 필요하며, 동맥 해부학의 경우 평균 6봉합사가 필요합니다. - 이식된 사지의 내측에 세로 피부 절개를 하고 이식편을 삽입합니다. 이식편의 과도한 피부를 제거하고, 흡수성 4/0 봉합사를 사용하여 별도의 봉합사및 실행 봉합사로 상처를 닫습니다.
- 이식된 사지의 잉구지방 패드와 두 개의 분리된 흡수성 봉합사를 사용하여 수용자를 함께 봉합하고, 미세혈관 해부학의 마지막 검진 후 맨 끝에 있는 잉구 주름을 닫는다.
참고: 인구이날 지방 패드는 해부학 위에 지방의 보호 층을 추가하고 이식편과 페디클의 고정 된 위치를 보장하기 위해 단단히 봉합됩니다. 세심한 폐쇄는 상처 치유에 더 좋습니다. 또한 상처에서 잔류 출혈을 방지하고 자기 절단의 위험을 감소시다. - 양변 출혈의 양에 따라 식염수 1-3mL로 유체 손실을 피하로 보상합니다.
- 동물의 목에 엘리자베스 칼라를 놓고 피부에 2 개의 느슨한 봉합사를 바르고 올바른 위치에 유지합니다.
- 이소플루란 흡입을 중지하고, 완전히 의식하고 외래할 때까지 온난화 패드에 동물을 지속적으로 모니터링합니다.
그림 2: 골조의 발병 전에 perioperative 이미지. 약 1cm의 잇수다리는 잉게날 주름 절개와 엉덩이 위의 이식편 의 삽입 사이에 보존된다. 접목은 교량 아래에 배치되어 미세 혈관 전달을 위해 안정적으로 유지됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
4. 수술 후 치료
- 동물을 72시간 동안 매일 두 번 모니터링한 다음 수술 후 날(POD) 7일까지 매일 한 번, 일주일에 두 번 모니터링합니다.
참고: 모니터링은 동물 및 이식 상태(창백한 눈은 동물 통증, 비정상적인 이식 색상/온도의 지표로서 추가 유체, 포르피린 염색이 필요할 수 있음)에 맞게 조정되어야 하며, 수의사와 추가 주의를 기울여야 합니다. 단일 하우징은 접목에 손상을 피하기 위해 전체 연구 기간 동안 받는 쥐에 필요합니다. - IACUC 지침에 따라 부프레노르핀 및/또는 비스테로이드 항염증제 약물의 피하 주사로 진통을 수행하십시오.
- 접목을 평가하고 동일한 장치를 사용하여 사진과 함께 매일 신체 검사를 수행합니다.
참고: 이식편 피부에 제모 크림을 사용하면 이식의 피부 색을 더 잘 평가하는 데 도움이 됩니다.
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Representative Results
이 단일 연산자 연구에서, 30 개의 시너지 이종 부분 사지 이식이 수행되었다. 성공은 VCA 실패 또는 안락사를 요구하는 합병증의 부재로 수술 후 21일에 정의되었습니다. 접목의 정상적인 진화는 도 3로표현된다. 수령인의 부분 사지 조달 및 이식 개시에 대한 평균 기간은 각각 35 분과 105 분이었습니다. 평균 허혈 시간은 105 분이었다. 후속 기간 동안, 합병증의 두 가지 유형이 발생(표1)-조기 또는 늦게. 일부는 안락사를 필요로하고, 다른 사람들은 인양되었고, 모두 직원 수의사와 논의되었습니다(표 2). 이 연구는 설치류 미세 수술(보충 표 1)에서초보자를위한 저자의 경험과 조언을보고합니다.
그림 3: 연구가 끝날 때까지 이성토성 뒷다리 모델의 정상적인 진화. 모발 재성장은 수술 후 첫 주 동안 관찰됩니다. 2 주 후에 나타나는 상처 감소. 약어 : POD = 수술 후 날. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
회생 합병증 의 관리
동맥 또는 정맥 혈전증은 가장 흔한 perioperative 합병증입니다. 이를 극복하고 수술을 성공으로 전환하는 가장 중요한 팁은 조기 진단을 하는 것입니다. 이 합병증의 예방은 절개가 이루어지자마자 외과 의사의 마음에 있어야합니다. 기증자는 이식 동맥 허혈 의 앞에 헤파린 100 IU/kg 5 분의 IV 주입으로 헤파린되어야 합니다. 일단 수확되면, 이식편은 정맥 유출이 명확해질 때까지 헤파린 식염수(100 IU/mL)로 플러시되어야 합니다. 이 연구에서, perioperative 동맥 혈전증에서 일어났다 10% 케이스의.
출혈은 덜 빈번한 발생이며 이식 근육의 신중한 소생과 받는 사람 부위의 철저한 해부로 쉽게 완화됩니다. 출혈의 주요 원인은 동맥의 해부학 누출입니다. 이는 3분 이내에 단독으로 해결되어야 하며, 그렇지 않을 경우 누출된 해부학의 재클램핑 및 개정이 필요합니다. 케이스의 6.7%에서 일어난 마취 관련 합병증은 훈련되지 않은 microsurgeons와 더 빈번합니다. 이소플루란을 사용하는 것은 쥐를 마취시키는 신뢰할 수있는 방법이며 마취의 길이를 실시간으로 조정할 수 있습니다. 외과 의사는 기계를 올바르게 사용하고 유도 및 유지 보수 요법에 대한 지침을 따르고 수술 전반에 걸쳐 심장과 호흡 속도를 면밀히 모니터링하도록 훈련받아야합니다. 동물의 종, 나이 또는 무게에 따라 필요한 이소플루란의 양은 다를 수 있습니다. 예측할 수 없는 동물 손실은 드문 사건이며 일반적으로 마취 또는 외과 적 실수에 의해 설명되지 않습니다.
초기 합병증 (
VCA 실패는 미세 혈관 혈전증으로 인해 첫 수술 후 주 동안 발생할 수 있습니다 (정맥 혈전증은 동맥보다 더 빈번함). 사타구니 수준에서 perioperative pedicle inset은 매우 중요한 단계입니다. 쥐의 뒷다리를 움직이면 혈통에 미치는 영향을 모방하는 것이 중요합니다. 페디클은 너무 느슨하거나 너무 단단해서는 안됩니다. 집중적인 모니터링은 VCA 실패 진단이 이루어지는 즉시 부검을 수행해야 하므로 근본적인 요구 사항입니다. 부검 중, 페디클의 위치(꼬임 또는 장력) 및 혈전성 탄상모(백월 봉합사, 장루플랩)의 품질 분석은 다음 절차 중에 개선될 수 있는 것에 대한 많은 정보를 제공하므로 수술 외과 의사에 의해 수행되어야 한다. 정맥 혈전증은 POD5(그림 4)전에발생한 모든 경우의 20 %에서 초기 안락사의 원인이었다.
그림 4: 수술 후 정맥 혈전증. 피부는 파란색으로 나타나고 매일 어두워집니다. 약어 : POD = 수술 후 날. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
자가 절단 (또는 autophagia)은 비 민감 접목에서 심각한 관심사입니다. 그것은 종종 POD2와 POD7 사이에서 발생합니다. 접목 표면의 3분의 1 미만으로 제한되고 피부만에 관한 경우, 흡수성이 없는 봉합사를 이용한 외과적 신부및 봉합사는 직원 수의사(도5A-C)와논의될 수 있다. 예방은 POD7까지 목에 스티치된 E 칼라의 사용과 동물의 외과 적 상처에 혈액이나 지각을 청소하는 데 의존합니다. 반복된 자가또는 깊은 절단은 안락사(도5D)를필요로 한다.
그림 5: 비 민감 접목의 수술 후 자가 절단. (A-C) (A)POD2에서 자동 절단의 제한된 표면. (B)외과적으로 신부와 재봉; (C)POD21에서 측면. (D)동물의 안락사로 이어지는 접목의 여러 층의 심한 자가식. 약어 : POD = 수술 후 날. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
늦은 합병증 (>POD7)
덜 빈번하고 덜 치명적인, 이러한 합병증은 적절한 치료를 제공하기 위해 수의사 상담을 요구한다. 첫째, 뼈 노출은 일반적으로 3주 후 수술 후 초기 치유 후 이 모델에서 관찰될 수 있다. 예방은 신중한 뼈 절단 (부드러운 가장자리를 만드는 뼈 커터의 사용)을 기반으로합니다. 나중에 근육 위축을 차지 하면서 주위 근육으로 뼈 가장자리를 커버 하는 것이 도움이 됩니다. 동물이 일찍 발견되고 동물이 양호한 상태인 경우 외과 적 개정은 수의사와 논의 할 수 있습니다. 둘째, 진피 낭종은 2주 후에 수술 부위 주변에서 발생할 수있다(도 6). 그(것)들은 일반적으로 쥐의 또는 이식의 상태를 방해하지 않습니다, 그러나 피부에 누공하고 감염될 수 있습니다. 상처에 잔류 모발을 피하기 위해 이식 접목 삽입의 수술 부위를 세척하면 낭종의 생성을 방지합니다. 외과 배수에 대한 표시는 수의사와 함께 평가 될 수있다.
그림 6: 진피 낭종. 나타나는 진피낭종(A)POD14 후,(B)때로는 누공 앞에 피부 괴사 센터를 가진 다. 약어 : POD = 수술 후 날. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
| 복잡 | 용액 | 예방 | |
| 페리 수술 | 미세 혈관 혈전증 | 혈관을 헹구고 헤파린 식염수로 끝나는 후 해부학을 빠르게 다시 수행하여 좋은 흐름을 증명합니다. | 기증자를 헤파린화하고, 플랩을 플러시하고, 해부학 기술을 마스터하고, 적절한 악기와 봉합사를 사용합니다. |
| 출혈 | 근육에서 경우, 해부학에서 자간질과 3 분 이내에 자발적으로 중지하지. | 접목 수확 중 철저한 소생화 | |
| 마취 관련 사망 | 수의사 직원과 문제가 발생하는 문제를 논의합니다. | 마취 기계 및 perioperative 쥐 모니터링의 사용에 교육 | |
| 조기( |
미세 혈관 혈전증 | 혈전증의 원인을 밝히기 위해 초기 안락사와 부검 | 원인에 따라 다름 |
| 자동 절단 | 접목에 대한 첫 번째 이벤트 및 피상적 손상이 있는 경우 수의사와 외과 수리에 대해 논의합니다. | 포드-2에서 POD7까지의 E 칼라 | |
| 늦은 (>POD7) | 뼈 노출 | 수의사와 외과 적 개정에 대해 논의하십시오. | 뼈 커터로 뼈를 자르고 가장자리가 매끄럽게 하고 주변 근육으로 회복되며 나중에 근육 위축 (짧게 자르십시오)을 차지하십시오. |
| 진피 낭종 | 수의사와 외과 배수 및 항생제 치료에 대해 논의 | 물로 인셋 사이트를 씻으십시오. 수술 부위에 머리카락을 남기지 마십시오. |
표 1: 잠재적인 결과. 예방 및 솔루션.
연구 종료
이 모델에서 연구의 끝은 POD21에서 설정되었다; 동물은 CO2 질식 또는 황산으로 안락사되었다. 비기능성 이식편으로서, 근육 위축과 지방변성은 재관전의 부족의 결과로 관찰되었다. 피부와 근육의 생검은 조직학적 분석을 위해 저장됩니다. 안락사가 연구 종료 전에 수행되는 경우 혈관 혈통(배치, 가부장제)의 평가를 위해 잉구주름이 다시 열립니다.
| 직원 수의사와 상의하는 5가지 이유 |
| 1) 연구의 본질을 알리기 위해 연구가 시작되기 전에, 계획된 진통, 후속 전략 및 예상 된 결과 |
| 2) 연구 기간 동안 동물 상태를 개선하는 데 도움이 될 수있는 특별한 식단 또는 보충 영양소 |
| 3) 예기치 않은 마취 관련 사망 |
| 4) 동물 상태의 설명할 수 없는 악화 |
| 5) 안락사에 대한 구원 가능성 또는 표시를 평가하는 외과 합병증 |
표 2: 수의사에게 전화할 때. 직원과의 의사 소통은 생체 내 연구의 수행에 필수적입니다.
보충 표 1: "도스와 하지 마십시오." 젊은 미세 수술 연수생을위한 조언. 이 테이블을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
설치류의 정형소 사지 이식 모델은 문헌(15,16,17)에기재되어 있다. 그러나, 그들은 신경 수리가 필요, 근육 재부착, 그리고 대퇴골의 완벽한 골합성, 이는 매우 어려운 단계가 될 수 있습니다. 이러한 모델은 또한 설치류14에서더 높은 이환율 및 사망률과 연관되며, 특히 이식된 뒷다리의 정상적인 기능회복이 몇 달이 걸릴 수 있기 때문에 단기 후속 조치에서18개월이걸릴 수 있다. 그러나 성공시 이식 기능에 대한 장기적인 평가를 허용합니다. 이종외 사지 이식의 주요 제한은 이식편의 재관제 의 부족에 의해 유도된 근육 위축이다. 이전에 문헌에 발표된 바와 같이, 근육 섬유 부상은 5일 후 사멸19일이내에 발생할 수 있다. 이 한 달 후 상당한 근육 위축 및 지방 변성을 일으키는 원인이 됩니다., 3 주 이상 지속 하는 생체 내 연구에 대 한이 모델의 사용을 방지. 이러한 관점에서, 부분 이성애 골분엽박판 모델은 조직 보존에 대한 단기 연구에 가장적합합니다(10,조직 생명공학, 면역억제 전략20).
제안된 모형에서, 외과 및 수술 후 합병증은 모두 제한되고 microsurgical 연구원에 의해 쉽고 급속하게 해결될 수 있습니다. 우리는 그(것)들이 기본적인 미세 수술 과정을 수신했다는 것을 주어진 젊은 외과 의사를 위한 3-6 이식 후에 이 모형에서 성공을 달성할 수 있다는 것을 추정합니다. 또한 허혈 시간이 2시간 미만인 경우 3시간 이내에 단일 작업자가 수행할 수 있는 절차이기도 합니다. 이 모델은 또한 2개의 연산자가 수행할 수 있고, 미세혈관 해부학의 시간으로만 허혈 시간을 단축할 수 있다. 이 모델의 중요한 단계는 이식 이식 개시및 미세 혈관 혈전증을 일으키는 원인이 될 어떤 kinking 또는 긴장을 피하기 위하여 페디클의 좋은 배치를 보장하는 것입니다. 이러한 이유로, 대퇴선박의 해부는 기증자와 수령인에게 가능한 한 근접적이고 해부되어야 한다. 피부 혈관화는 피부 관류가 낮고 후속 피부 괴사를 일으킬 수있는 동맥 피부 천공기에 대한 전단 효과를 피하기 위해 접목 이목 이목이 변질 될 때까지 피부를 사지 주위에 감싸서 철저히 보존해야합니다.
문헌에서, 설치류 VCA 모형에 있는 합병증은 잘 보고되지 않습니다. 가능한 모든 결과에 대한 지식은 합병증을 예방하고 예측할 수 있어야 합니다. 이 연구는 직원 수의사와의 좋은 의사 소통의 필요성을 강조합니다. 쥐 취급 및 신체 검사에서 기술을 습득하는 것은 동물의 복지와 연구의 적절한 행동에 매우 중요합니다. 이 기술이 마스터되면 이 모델은 VCA 연구에 100%에 가까운 성공률을 기록할 수 있습니다. 비기능성 모델은 장기 평가에 적합하지 않지만, 전체 불일치 VCA 이식 또는 허혈 재관류 부상평가에 대한 면역학적 연구에서 조기 이식 평가에 큰 관심을 가지고 있습니다. 설명된 모델은 펀치 생검을 사용하여 반복적으로 샘플링할 수 있는 큰 피부 성분 및 근육 부피를 제공하여 여러 가지 조직학적 및 면역 학적 분석뿐만 아니라 이미징 평가기술(13)을생성한다. 이 정확한 프로토콜은 가능한 합병증이 예측되고 능동적으로 방지되면 감소된 이환율을 가진 쥐에 있는 재현가능하고 신뢰할 수 있는 VCA 모형을 제공합니다.
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Disclosures
저자는 공개가 없습니다.
Acknowledgments
이 작품은 상 No. 아래 의회 지시 의학 연구 프로그램을 통해 보건 담당 국방부 차관실에 의해 지원되었다. W81XWH-17-1-0680. 의견, 해석, 결론 및 권고사항은 저자의 의견이며 반드시 국방부의 승인을 받지는 않습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 24 GA angiocatheter | BD Insyte Autoguard | 381412 | |
| 4-0 suture Black monofilament non absorbable suture | Ethicon | 1667 | Used to suture the E-collar to the back of the neck |
| 4-0 suture Coated Vicryl Plus Antibacterial | Ethicon | VCP496 | |
| Adson Tissue Forceps, 11 cm, 1 x 2 Teeth with Tying Platform | ASSI | ASSI.ATK26426 | |
| Bipolar cords | ASSI | 228000C | |
| Black Polyamide Monofilament USP 10-0, 4 mm 3/8c | AROSurgical | T04A10N07-13 | Used to perform the microvascular anastomoses |
| Buprenorphine HCl | Pharmaceutical, Inc | 42023-179-01 | |
| Dilating Forceps | Fine science tools (FST) | 18131-12 | |
| Dissecting Scissors 15 cm, Round Handle 8 mm diameter, Straight Slender Tapered Blade 7 mm, Lipshultz Pattern | ASSI | ASSI.SAS15RVL | |
| Double Micro Clamps 5.5 x 1.5 mm | Fine science tools (FST) | 18040-22 | |
| Elizabethan collar | Braintree Scientific | EC-R1 | |
| Forceps 13.5 cm long, Flat Handle, 9 mm wide Straight Tips 0.1 mm diameter (x2) | ASSI | ASSI.JFL31 | |
| Halsey Micro Needle Holder | Fine science tools (FST) | 12500-12 | |
| Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 units/mL | BD PosiFlush | 306424 | |
| Isoflurane | Patterson Veterinary | 14043-704-06 | |
| Jewelers Bipolar Forceps Non Stick 11 cm, straight pointed tip, 0.25 mm tip diameter | ASSI | ASSI.BPNS11223 | |
| Lone Star Elastic Stays | CooperSurgical | 3314-8G | Used to retract the inguinal ligament for femoral vessels dissection |
| Lone Star Self-Retaining Retractors | CooperSurgical | 3301G | |
| Micro-Mosquito Hemostats | Fine science tools (FST) | 13010-12 | Used to retract the inguinal fat pad distally |
| Needle Holder, 15 cm Round Handle, 8 mm diameter, Superfine Curved Jaw 0.2 mm tip diameter, without lock | ASSI | ASSI.B1582 | |
| Nylon Suture Black Monolfilament 8-0, 6.5 mm 3/8c | Ethilon | 2808G | Used to ligate collateral branches on the femoral vessels |
| Offset Bone Nippers | Fine science tools (FST) | 16101-10 | |
| S&T Vascular Clamps 5.5 x 1.5 mm | Fine science tools (FST) | 00398-02 | |
| Walton scissors | Fine science tools (FST) | 14077-09 |
References
- Lanteiri, L., et al. Feasibility, reproducibility, risks and benefits of face transplantation: a prospective study of outcomes. American Journal of Transplantation. 11 (2), 367-378 (2011).
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