Summary
वर्तमान प्रोटोकॉल एक स्व-निर्मित रिट्रैक्टर का उपयोग करके न्यूनतम इनवेसिव ट्रांसवर्स महाधमनी कसना (टीएसी) प्रक्रिया के साथ एक संशोधित और सरलीकृत तकनीक का वर्णन करता है। यह प्रक्रिया वेंटिलेटर या माइक्रोस्कोप के बिना आयोजित की जा सकती है और दबाव अधिभार का परिचय देती है, जिससे अंततः कार्डियक हाइपरट्रॉफी या दिल की विफलता होती है।
Abstract
ट्रांसवर्स महाधमनी कसना (टीएसी) माउस मॉडल में दबाव अधिभार के गठन के आधार पर दिल की विफलता और कार्डियक हाइपरट्रॉफी के बारे में अनुसंधान में अक्सर इस्तेमाल की जाने वाली सर्जरी है। इस प्रक्रिया की मुख्य चुनौती अनुप्रस्थ महाधमनी आर्क को स्पष्ट रूप से कल्पना करना और लक्ष्य पोत को ठीक से बैंड करना है। शास्त्रीय दृष्टिकोण अनुप्रस्थ महाधमनी आर्क को उजागर करने के लिए एक आंशिक थोराकोटॉमी करते हैं। हालांकि, यह एक ओपन-चेस्ट मॉडल है जो एक बड़े सर्जिकल आघात का कारण बनता है और सर्जरी के दौरान वेंटिलेटर की आवश्यकता होती है। अनावश्यक आघात को रोकने और संचालन प्रक्रिया को सरल बनाने के लिए, महाधमनी आर्क को उरोस्थि के समीपस्थ अनुपात के माध्यम से संपर्क किया जाता है, जो एक छोटे स्व-निर्मित रिट्रेक्टर का उपयोग करके लक्ष्य पोत तक पहुंचता है और बांधता है जिसमें एक स्नेयर होता है। यह प्रक्रिया फुफ्फुस गुहा में प्रवेश किए बिना आयोजित की जा सकती है और इसे वेंटिलेटर या माइक्रोसर्जिकल ऑपरेशन की आवश्यकता नहीं होती है, जो चूहों को शारीरिक श्वास पैटर्न के साथ छोड़ देता है, प्रक्रिया को सरल बनाता है, और ऑपरेशन के समय को काफी कम करता है। कम आक्रामक दृष्टिकोण और कम ऑपरेशन समय के कारण, चूहे कम तनाव प्रतिक्रियाओं से गुजर सकते हैं और तेजी से ठीक हो सकते हैं।
Introduction
दिल की विफलता एक जटिल नैदानिक लक्षण है जो बिगड़ा हुआ संरचना और वेंट्रिकुलर भरने या रक्त को बाहर निकालने के कार्य के परिणामस्वरूपहोता है। रोग चरण को मुख्य रूप से लक्षणों और शारीरिक गतिविधि की गंभीरता के आधार पर न्यूयॉर्क हार्ट एसोसिएशन फ़ंक्शन वर्गीकरण के माध्यम से परिभाषित कियागया है। 50% से अधिक इजेक्शन अंश वाले उन रोगियों के लिए, संरचनात्मक और / या कार्यात्मक असामान्यताओं ने संरक्षित इजेक्शन अंश (एचएफपीईएफ) 2 के साथ दिल की विफलता के निदान का समर्थन करने के लिए नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड्स उठाए। इस्केमिक हृदय रोग दिल की विफलता के कई ईटियोलॉजी के बीच एक प्रमुख कारण है। इस प्रकार, मायोकार्डियल रोधगलन मॉडल (जैसे स्थायी कोरोनरी बंधाव) का उपयोग अक्सर कार्डियक हाइपोपरफ्यूजन या इस्केमिया-रीपरफ्यूजन चोट 3,4 के बाद पैथोफिज़ियोलॉजी का अध्ययन करने के लिए किया जाता है। तीव्र मायोकार्डियल चोट के अलावा, उच्च रक्तचाप, मधुमेह, मोटापा और कार्डियोमायोपैथी के पारिवारिक इतिहास जैसे अन्य जोखिम कारक भी दिल की विफलता के विकास में योगदान करते हैं। मरीजों को स्टेज ए (दिल की विफलता के जोखिम में) पास करने और स्टेज बी (प्री-हार्ट फेल्योर) में प्रवेश करने के बाद, संरचनात्मकसंशोधन होता है। उदाहरण के लिए, उच्च रक्तचाप से ग्रस्त रोगी पहले अनुकूली बाएं वेंट्रिकल हाइपरट्रॉफी से गुजरते हैं, और फिर धीरे-धीरे दुर्भावनापूर्ण कार्डियक हाइपरट्रॉफी में विकसित होते हैं और पैथोलॉजिकल रीमॉडेलिंग5 के माध्यम से दिल की विफलता में पारगमन करते हैं।
विभिन्न कार्डियोवैस्कुलर बीमारियों के अंतिम चरण के रूप में, पुरानी दिल की विफलता का अध्ययनदशकों से किया गया है। दिल की विफलता अनुसंधान में कई माउस मॉडल का व्यापक रूप से उपयोग किया गया है, जिसमें दवा जलसेक (एंजियोटेंसिन II), चयापचय संबंधी विकार (मधुमेह या उच्च कैलोरी आहार), और महाधमनी कसना 7 शामिलहैं। इन मॉडलों में, एंजियोटेंसिन II छिड़काव विभिन्न अंग दुष्प्रभावों के साथ होता है, जैसे कि किडनी7। चयापचय संबंधी विकारों को प्रेरित करने के लिए आमतौर पर लंबे समय की आवश्यकता होती है। आरोही महाधमनी कसना को मानव रोग के लिए सीमित प्रासंगिकता मानाजाता है।
टीएसी एक विश्वसनीय मॉडल है जो आफ्टरलोड को बढ़ाता है और कार्डियक हाइपरट्रॉफी के साथ-साथ दिल की विफलता को प्रेरित करताहै। ओपन-चेस्ट टीएसी मॉडल को पहली बार रॉकमैन एट अल द्वारा वर्णित किया गया थाऔर दुनिया भर की कई प्रयोगशालाओं में इसका उपयोग किया गया था। हालांकि, यह शास्त्रीय टीएसी प्रक्रिया चूहों को एक बड़े आघात का कारण बनती है और उनके सामान्य व्यवहार को बदल देती है, जिसमें लंबे समय तक वसूली का समय लग सकता है और आगे के उपचार को परेशान कर सकताहै। अन्य संशोधित क्लोज्ड-चेस्ट टीएसी प्रक्रियाओं ने कुछ आक्रामक चरणों को कम किया लेकिन माइक्रोसर्जिकल कौशल या यांत्रिक वेंटिलेशन10,11 की आवश्यकता थी।
वर्तमान प्रोटोकॉल में उरोस्थि के ऊपरी किनारे के 3 मिमी मध्य रेखा चीरा के माध्यम से स्व-निर्मित रिट्रेक्टर का उपयोग करके महाधमनी आर्क के लिए न्यूनतम इनवेसिव दृष्टिकोण के साथ एक चरण-दर-चरण विधि का विवरण दिया गया है। इस मॉडल को माइक्रोसर्जिकल कौशल, यांत्रिक वेंटिलेशन, या पसलियों के माध्यम से काटने की आवश्यकता नहीं है, जिससे टीएसी सर्जरी करने के लिए एक तेज़, सर्जिकल आघात-सीमित, सरल, सस्ता तरीका प्रदान किया जाता है।
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Protocol
वर्तमान प्रोटोकॉल को टोंगजी अस्पताल, टोंगजी मेडिकल कॉलेज, हुआझोंग यूनिवर्सिटी ऑफ साइंस एंड टेक्नोलॉजी, वुहान, चीन की आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है। यह प्रक्रिया पुरुष वयस्क C57 / BL6 चूहों (>10 सप्ताह की उम्र) पर की जाती है। ऑपरेशन से पहले सभी सर्जिकल उपकरणों को ऑटोक्लेविंग द्वारा निष्फल किया गया था।
1. सर्जिकल उपकरण की तैयारी
- एक 5 एमएल सिरिंज तैयार करें और इसे कुंद करने के लिए सुई धारक के साथ सुई की नोक को काट लें।
- एक 27 ग्राम सुई तैयार करें और इसे सुई धारक के साथ कुंद करें। नेत्र कैंची से सुई की नोक काटना सुई को कुंद करने का एक वैकल्पिक तरीका है।
- 27 ग्राम सुई के सिरे को 90 ° झुकाएं।
नोट: इस सुई का उपयोग पोत कसना के लिए महाधमनी के साथ बांधने के लिए एक स्पेसर के रूप में किया जाएगा। - व्यावसायिक रूप से प्राप्त लोहे के तार (चिकित्सा ग्रेड, व्यास में 0.5 मिमी, सामग्री की तालिका देखें) का उपयोग करें और सुई के चारों ओर सुतली (चित्रा 1 ए)। सुई की कुंद नोक पर एक छोटा सा स्नेयर या लूप बनाएं (चित्रा 1 बी)।
नोट: यह पुन: प्रयोज्य उपकरण एक विशेष स्व-निर्मित रिट्रैक्टर के रूप में कार्य करता है और बाद के चरणों में महाधमनी के नीचे रेशम सीवन पारित करने की अनुमति देता है। - सर्जरी से पहले सभी सर्जिकल उपकरणों को बंद करने के लिए (ऊपर बनाए गए विशेष रिकॉलर सहित) को ऑटोक्लेव करें।
2. पशु तैयारी
- शरीर के वजन के अनुसार पेंटोबार्बिटल सोडियम समाधान (50 मिलीग्राम / किग्रा, सामग्री की तालिका देखें) के इंट्रापरिटोनियल इंजेक्शन के माध्यम से माउस को एनेस्थेटाइज करें। चमड़े के नीचे सर्जिकल क्षेत्र में स्थानीय रूप से 0.5% लिडोकेन के 100 μL इंजेक्ट करें।
- पुष्टि करें कि माउस के पैर की अंगुली को बल की नोक से दबाकर माउस पूरी तरह से एनेस्थेटाइज्ड है।
- संज्ञाहरण के तहत सूखापन को रोकने के लिए दोनों आंखों पर नेत्र मरहम लागू करें।
- डीपिलेटरी क्रीम या क्लिपर के साथ गले और ऊपरी छाती से बालों को हटा दें।
- आयोडीन के तीन वैकल्पिक स्क्रब और बाहर की ओर बढ़ने वाले संकेंद्रित सर्कल में 70% इथेनॉल के साथ बिना पैर वाले क्षेत्र को कीटाणुरहित करें।
- माउस को एक बाँझ ड्रेप से ढके हीटिंग पैड पर लापरवाह स्थिति में रखें, जिसका सिर ऑपरेटर की ओर इशारा करता है। चिपकने वाले टेप के साथ छोरों को ठीक करें और 4-0 सीवन के साथ छेदक (चित्रा 2 ए)।
- ऑपरेशन के दौरान शरीर के तापमान की निगरानी के लिए एक रेक्टल प्रोब डालें ( सामग्री की तालिका देखें)। पूरे ऑपरेशन के दौरान शरीर के तापमान को 37 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखें।
- बाँझ दस्ताने की एक जोड़ी पहनें।
नोट: एक बार बाँझ दस्ताने पहनने के बाद, अन्य असंक्रमित क्षेत्रों या वस्तुओं को न छुएं। - एक नए डिस्पोजेबल बाँझ ड्रेप में एक छेद (1-1.5 सेमी व्यास) को निष्फल नेत्र कैंची के साथ काटें। माउस के ऊपर बाँझ आवरण रखें और सुनिश्चित करें कि छेद के माध्यम से बिना बाल वाला ऑपरेटिंग फ़ील्ड दिखाई दे रहा है।
नोट: यह कदम ऑपरेटर को अन्य असंक्रमित क्षेत्रों को छूने से बचने की अनुमति देता है, जो सर्जरी के दौरान बाँझ स्थितियों को बनाए रखने में मदद करता है।
3. अनुप्रस्थ महाधमनी का कसना
- स्केलपेल ब्लेड के साथ सुप्रास्टर्नल नॉच (चित्रा 2 बी) के स्तर पर 1.5 सेमी ऊर्ध्वाधर त्वचा चीरा बनाएं। त्वचा के चीरे को उरोस्थि कोण के स्तर तक फैलाएं।
नोट: सुप्रास्टर्नल नॉच एक पायदान है जो मनुब्रियम स्टर्नी के ऊपरी किनारे पर स्थित है। यह एक सतह प्रतीक है जिसे माउस बालों को हटाने पर पता लगाया जा सकता है (चित्रा 2 बी)। उरोस्थि कोण मनुब्रियम स्टर्नी और कॉर्पोरेट स्टर्नी के बीच का जोड़ है। जब उरोस्थि उजागर होती है, तो यह कोस्टा सेकुंडा (चित्रा 2 सी) के समान स्तर पर उरोस्थि पर एक क्षैतिज सफेद रेखा के रूप में प्रस्तुत होता है। - सावधानी से त्वचा और सतही प्रावरणी को अलग करें और श्वासनली और समीपस्थ उरोस्थि को उजागर करें। ऊपरी किनारे से उरोस्थि कोण तक शुरू होने वाले उरोस्थि पर सावधानीपूर्वक 3-4 मिमी अनुदैर्ध्य मध्य रेखा चीरा लगाएं (चित्र 2 डी)।
नोट: कट स्टर्नल कोण से अधिक नहीं होना चाहिए, क्योंकि माउस में तीव्र न्यूमोथोरैक्स पैदा करने का खतरा है। - धीरे से उरोस्थि को बल के साथ उठाएं और इसके नीचे थाइमस और आर्कस महाधमनी। सावधानीपूर्वक सीधे बल का उपयोग करें और इसके आसपास के लक्ष्य पोत और ऊतकों को स्पष्ट रूप से विच्छेदित करें।
- पहले से निर्मित रिट्रैक्टर (चरण 1.4) को पकड़ें जिसमें उपयोगकर्ता के दाहिने हाथ के अंत में एक तार स्नेयर था।
- बाएं आम कैरोटिड धमनी और दाईं इननोमिनेट धमनी की उत्पत्ति के बीच महाधमनी के नीचे स्व-निर्मित रिट्रैक्टर के स्नेयर को सावधानीपूर्वक पास करें (चित्रा 2 ई)।
- अन्य उपकरणों के लिए दाहिने हाथ को छोड़ने के लिए स्व-निर्मित रिट्रैक्टर को बाएं हाथ में पास करें।
- दाहिने हाथ में सूक्ष्म चिमटी के साथ, अंत में स्नेयर के लूप के माध्यम से 7-0 रेशम सीवन पास करें और रिट्रेक्टर को बाहर निकालें। यह रेशम सीवन को आगे के बंधाव के लिए धमनी के चारों ओर छोड़ने की अनुमति देगा (चित्रा 2 एफ)।
नोट: कोमल रहें और महाधमनी आर्क को उसकी मूल स्थिति से बहुत अधिक न खींचें। - महाधमनी के समानांतर एक 27 जी सुई रखें और सुई और महाधमनी के चारों ओर सीवन बांधें (चित्रा 2 जी, एच)।
नोट: दिखावटी प्रक्रिया समान होनी चाहिए, सिवाय इसके कि कोई महाधमनी बंधाव नहीं है। - नेत्र बल के साथ 27 ग्राम सुई को पकड़ें और 27 जी सुई और महाधमनी से बंधे गाँठ को पकड़ने वाले एक अन्य बल। जल्दी से लेकिन धीरे से बंधाव से 27 जी सुई को बाहर निकालें (चित्रा 2 एच)।
नोट: गाँठ बहुत तंग नहीं होनी चाहिए, या सुई को बाहर निकालना आसान नहीं होगा। महाधमनी के फटने के मामले में सुई को बाहर निकालते समय सावधान रहें। - एक बाधित सीवन पैटर्न में 4-0 सिंथेटिक मोनोफिलामेंट सीवन के साथ त्वचा को सीवन करें (चित्रा 2 आई)।
4. पोस्टऑपरेटिव देखभाल
- माउस को गर्म पैड पर रखें ( सामग्री की तालिका देखें) और इसे पुनर्जीवित करने की प्रतीक्षा करें। आम तौर पर, माउस लगभग 60 मिनट में पुनर्जीवित होता है।
नोट: जानवर को तब तक लावारिस नहीं छोड़ा जाना चाहिए जब तक कि वह मुख्य उरोस्थि पुनरावृत्ति के लिए पर्याप्त चेतना प्राप्त नहीं कर लेता। - चमड़े के नीचे 0.5 एमएल गर्म खारा इंजेक्ट करें और जानवरों के द्रव होमियोस्टेसिस की निगरानी करें।
नोट: यह कदम जानवरों को निर्जलीकरण और हाइपोवोलेमिक परिसंचरण स्थिति से रोकता है। - 3 दिनों के लिए हर दिन घाव की सतह पर एरिथ्रोमाइसिन मलहम लागू करें।
- शल्य चिकित्सा के बाद के दर्द के उपचार के लिए, 1 मिलीग्राम / एल ब्यूप्रेनोर्फिन स्थानीय एनेस्थेटिक पैरेंट्रल को चीरा साइट पर प्रशासित करें ( सामग्री की तालिका देखें)।
- पोस्टऑपरेटिव रूप से, संक्रमण और हानि के संकेतों के लिए माउस की निगरानी करें (कुपोषण, झुकी हुई मुद्रा, और परेशान फर)।
नोट: सर्जरी से गुजरने वाले जानवरों को पूरी तरह से ठीक होने तक अन्य जानवरों की कंपनी में वापस नहीं किया जाता है।
5. अल्ट्रासाउंड इमेजिंग
- सर्जरी के 28 दिन बाद अल्ट्रा-साउंड इमेजिंग सिस्टम12,13 (24 मेगाहर्ट्ज, सामग्री की तालिका देखें) के माध्यम से रक्त प्रवाह वेग की गणना करके अनुप्रस्थ महाधमनी के सफल बंधाव की पुष्टि करें।
- 20% ऑक्सीजन-समृद्ध हवा में 4.5% आइसोफ्लुरेन के साथ जानवर को एनेस्थेटाइज करें और 20% ऑक्सीजन-समृद्ध हवा में 0.5% आइसोफ्लुरेन के साथ बनाए रखें।
- माउस को लापरवाह स्थिति में रखें और चिपकने वाले टेप के साथ इलेक्ट्रोड पर इसके छोरों को ठीक करें।
- डेपिलेटरी क्रीम का उपयोग करके, छाती के बालों को हटा दें और छाती पर एक अल्ट्रासोनिक युग्मन एजेंट लागू करें।
- जहां तक संभव हो मंच को बाईं ओर झुकाएं। प्रोब को ऊर्ध्वाधर स्थिति में रखते हुए, धीरे-धीरे इसे छाती पर दाईं पैरास्टर्नल लाइन के साथ कम करें, जिसमें नॉच जानवर की ठोड़ी की ओर इशारा करता है।
- उपकरण के बी मोड के तहत, एक्स और वाई-अक्ष को समायोजित करें जब तक कि महाधमनी चाप और कसना साइट स्पष्ट रूप से दिखाई न दे।
- पल्स वेव मोड पर स्विच करने के लिए पल्स वेव डॉप्लर बटन पर क्लिक करें।
- संकुचित साइट पर डैश्ड कर्सर नमूना वॉल्यूम बॉक्स डिस्टल समायोजित करें और उच्चतम वेग के साथ स्टेनोटिक जेट ढूंढें।
- महाधमनी प्रवाह के तरंग रूप को प्राप्त करने और चरम वेग को मापने के लिए पल्स वेव डॉपलर बटन पर फिर से क्लिक करें। तरंग पैटर्न के शिखर के अनुसार रक्त प्रवाह वेग की गणना करें (चित्रा 3 ए, बी)।
- इमेजर को बी मोड पर सेट करें। मंच को क्षैतिज स्थिति में रखें। प्रोब को बाईं पैरास्टर्नल लाइन पर 30° घुमाएं।
- एक छोटा अक्ष दृश्य प्राप्त करने के लिए X और Y-अक्ष समायोजित करें। संकेतक रेखा दिखाने के लिए एम मोड दबाएं और कार्डियक वॉल मोटाई, कक्ष आयाम और इजेक्शन अंश के बाद के माप के लिए छवि को सहेजने के लिए सिने स्टोर पर क्लिक करें।
नोट: इजेक्शन अंश की गणना के लिए सूत्र: 100% * ((LV Vol;d - LV Vol;s) / LV Vol;d)। कार्डियक आउटपुट की गणना के लिए सूत्र: स्ट्रोक वॉल्यूम * हृदय गति (पहले फ्रेम पर खींची गई) / 1000। अधिकांश इंडेक्स जैसे इजेक्शन अंश और कार्डियक आउटपुट को अल्ट्रासोनिक इमेजिंग सिस्टम के सॉफ्टवेयर के माध्यम से स्वचालित रूप से मापा जा सकता है। एलवी वॉल्यूम डी: बाएं वेंट्रिकल की डायस्टोलिक मात्रा। एलवी वॉल्यूम: बाएं वेंट्रिकल की सिस्टोलिक मात्रा।
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Representative Results
सफल टीएसी सर्जरी के बाद, अल्ट्रासाउंड इमेजिंग सिस्टम का उपयोग करके दबाव अधिभार का पता लगाया गया था। सर्जरी के चार सप्ताह बाद, चूहों में हृदय समारोह में कमी आई है। वर्तमान अध्ययन में, टीएसी सर्जरी की प्रभावकारिता को 4 सप्ताह के बाद टीएसी सर्जरी से गुजरने वाले चूहों के इजेक्शन अंश (ईएफ), फ्रैक्शनल शॉर्टिंग (एफएस), बाएं वेंट्रिकुलर मास (एलवी द्रव्यमान) और बाएं वेंट्रिकुलर आंतरिक व्यास (एलवीआईडी) के माध्यम से मान्य किया गया था। शाम चूहों की तुलना में 4 सप्ताह के बाद टीएसी चूहों में ईएफ काफी कम हो गया था (47% ± 10% बनाम 78% ± 4%, पी < 0.0001) (चित्रा 4 ए)। टीएसी चूहों (158.1 ± 50.5 बनाम 91.8 ± 21.7 मिलीग्राम, पी = 0.0226) में एलवी द्रव्यमान काफी ऊंचा था (चित्रा 4 बी)। टीएसी चूहों में एफएस काफी कम हो गया था (23 ± 5 बनाम 46% ± 3%, पी < 0.0001) (चित्रा 4 सी)। टीएसी चूहों (2.88 ± 0.39 बनाम 1.81 ± 0.52 मिमी, पी = 0.0044) में एलवीआईडी काफी ऊंचा था (चित्रा 4 डी)। डेटा टीएसी और शाम समूहों के लिए छह चूहों का प्रतिनिधित्व करता है। छोटी आक्रामक प्रक्रियाओं के कारण, जीवित रहने की दर अधिक है और मुख्य रूप से रक्तस्राव पर निर्भर है, जिसे कुशल कलाकार के लिए 5% से कम किया जा सकता है। जब पूरी तरह से महारत हासिल की जाती है, तो 4 सप्ताह के बाद सी 57बीएल / 6 जे चूहों में प्रस्तुत सामान्य जीवित रहने की दर 95% से अधिक होती है। शाम और टीएसी समूहों की तुलना करने के लिए एक अप्रकाशित टी-टेस्ट किया गया था। सभी डेटा को एसईएम (त्रुटि सलाखों) ± माध्य के रूप में प्रस्तुत किया जाता है।
चित्र 1: महाधमनी चाप के चारों ओर रेशम सीवन को पारित करने के लिए स्व-निर्मित स्नेयर युक्त। (बी) वापस लेने वाले का विवरण। तीर रेशम के गुजरने के लिए स्नेयर को इंगित करता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्र 2: टीएसी सर्जरी की छवियां। (ए) सुपाइन स्थिति माउस टेप और सीवन के साथ तय किया गया। (बी) बाँझ ड्रेप केवल सर्जिकल क्षेत्र को दर्शाता है। (सी) 1.5 सेमी ऊर्ध्वाधर त्वचा चीरा। लाल तीर एक उरोस्थि स्वर्गदूत को इंगित करता है। (डी) उरोस्थि पर किए गए अनुदैर्ध्य मध्य रेखा चीरा। (ई) महाधमनी के नीचे से गुजरने वाले स्व-निर्मित रिकॉलर के स्नेयर को दिखाने वाली छवि। (एफ) स्नेयर लूप से गुजरने वाली 7-0 रेशम सीवन को दिखाने वाली छवि। (G) एक 27 G सुई जिसे महाधमनी के समानांतर रखा गया था। (एच) 27 जी सुई के साथ महाधमनी का बंधाव। सफेद तीर एक बंधाव गाँठ को इंगित करता है। (I) 4-0 रेशम सीवन के साथ सीवन त्वचा। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 3: 4 सप्ताह के बाद शाम और टीएसी चूहों की अल्ट्रासाउंड इमेजिंग प्रणाली से प्रतिनिधि छवि। (ए) शाम महाधमनी आर्क की स्पंदित-तरंग डॉपलर इमेजिंग। (बी) टीएसी के बाद महाधमनी आर्क की स्पंदित-तरंग डॉपलर इमेजिंग। (सी) ईएफ, एलवी मास, दीवार मोटाई और एलवीआईडी की गणना करने वाले शाम माउस की एम-मोड छवि। (डी) ईएफ, एलवी मास, दीवार मोटाई और एलवीआईडी की गणना करने वाले टीएसी माउस की एम-मोड छवि। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 4: अल्ट्रासाउंड इमेजिंग सिस्टम के माध्यम से मापा गया हृदय समारोह। (ए) दो समूहों में चूहों का इजेक्शन अंश (ईएफ)। (बी) चूहों का बायां वेंट्रिकुलर द्रव्यमान (एलवी द्रव्यमान) दो समूहों में था। (सी) दो समूहों में चूहों का आंशिक छोटा होना (एफएस)। (डी) दो समूहों में चूहों के बाएं वेंट्रिकुलर आंतरिक व्यास (एलवीआईडी)। *p < 0.05, **p < 0.005, **p < 0.0005. डेटा प्रति समूह छह चूहों का प्रतिनिधित्व करता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
निरंतर दबाव अधिभार का प्रेरण धीरे-धीरे कार्डियक हाइपरट्रॉफी और दिल की विफलता का कारण बन सकता है। इस मॉडल का उपयोग दुनिया भर की कई प्रयोगशालाओं में 14,15,16 में किया गया है। प्रोटोकॉल ने एक बेहतर टीएसी विधि प्रदान की जिसे माइक्रोसर्जिकल कौशल या यांत्रिक वेंटिलेशन की आवश्यकता नहीं है।
इस प्रोटोकॉल में सबसे महत्वपूर्ण कदम महाधमनी चाप के नीचे रेशम सीवन पारित करना है। जब स्नेयर ने महाधमनी आर्क को हुक किया है, तो धमनी में अनावश्यक कर्षण को कम करने के लिए सभी चाल कोमल होनी चाहिए। इसके अलावा, स्पेसर को बाहर खींचते समय कठिनाई के मामले में महाधमनी के चारों ओर सीवन बहुत तंग नहीं होना चाहिए। ऑपरेशन के बाद, माउस को तेजी से ठीक करने के लिए प्रचुर मात्रा में भोजन और पानी भी महत्वपूर्ण है।
पिछली पांडुलिपियों ने टीएसी के लिए अन्य तरीके प्रदान किए हैं। ईचोर्न एट अल ने एक बंद छाती विधि प्रकाशित की जो अनुप्रस्थ महाधमनी10 को जोड़ती है। पूरी प्रक्रिया पसलियों को बरकरार रखने की अनुमति देती है, इस प्रकार बहुत कम आघात होता है। ज़ॉ एट अल ने फुफ्फुस गुहा17 में प्रवेश किए बिना एक टीएसी विधि प्रदान की। तवाकोली एट अल ने एक न्यूनतम इनवेसिव ट्रांसवर्स महाधमनी कसना प्रस्तुत किया जिसे इंटुबेटिंग और वेंटिलेशन11 की आवश्यकता नहीं है। उपरोक्त सभी तकनीकों के लिए माइक्रोसर्जिकल कौशल की आवश्यकता होती है। इसके अलावा, लाओ एट अल ने अवशोषित सीवन18 के साथ टीएसी मॉडल का उत्पादन करने के लिए एक विधि प्रदान की। इस अध्ययन में प्रोटोकॉल तेजी से (10 मिनट के भीतर) टीएसी सर्जरी करने का एक वैकल्पिक तरीका प्रदान करता है जिसे माइक्रोस्कोप के तहत संचालित करने की आवश्यकता नहीं होती है। सर्जिकल आघात को कम करने से चूहों को लाभ होता है और प्रयोग के दौरान भ्रामक कारकों को कम करता है। ओपन-चेस्ट मॉडल के विपरीत, यह मॉडल न्यूनतम इनवेसिव है और माउस की सामान्य श्वास गतिशीलता को प्रभावित नहीं करता है। जब पूरी तरह से महारत हासिल की जाती है, तो इस तकनीक की जीवित रहने की दर 95% से अधिक होती है। इसके अलावा, इसे यांत्रिक वेंटिलेशन और सूक्ष्म सर्जरी कौशल की आवश्यकता नहीं है; एक स्व-निर्मित पुन: प्रयोज्य वापसी सभी चाल करेगा, वेंटिलेशन 19 द्वारा प्रेरित प्रणालीगत भड़काऊप्रभावों से बचेगा। ये सभी एक साथ परिचालन प्रक्रिया को काफी सरल बनाते हैं।
इस तकनीक की कुछ सीमाएं हैं। आफ्टरलोड की तीव्र वृद्धि धमनी उच्च रक्तचाप की क्रमिक प्रगति को पूरी तरह से प्रतिबिंबित नहीं करती है। मल्टीफैक्टोरियल हार्ट फेल्योर माउस मॉडल और क्लिनिकल हार्ट फेल्योर रोगियों के बीच पैथोफिज़ियोलॉजी में विसंगतियों ने शोधकर्ताओं के बीच चिंताओं को बढ़ा दियाहै। चूहों में प्रस्तुत पैथोफिज़ियोलॉजी को पूरी तरह से मनुष्यों पर लागू नहीं किया जा सकता है।
अंत में, यह प्रोटोकॉल टीएसी का संचालन करने के लिए एक वैकल्पिक प्रक्रिया प्रदान करता है, जो चूहों में दिल की विफलता या कार्डियक हाइपरट्रॉफी को प्रेरित करते समय जांचकर्ताओं की सुविधा प्रदान कर सकता है।
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Disclosures
लेखकों ने घोषणा की कि हितों का कोई टकराव नहीं है।
Acknowledgments
यह काम चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (एनएसएफसी 81822002) द्वारा वित्त पोषित है। हम उन सभी सदस्यों को धन्यवाद देते हैं जिन्होंने इस काम में भाग लिया।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 4-0 nonabsorbable suture | Jinhuan | HM403 | Used for suturing the skin |
| 5 mL syringe | Haifuda Technology Co., Ltd. | BD-309628 | Used for making snare containing retractor |
| 7-0 nonabsorbable suture | Jinhuan | HM701 | Used for aorta ligation |
| Animal temperature monitor | Kaerwen | FT3400 | Used for monitoring body temperature |
| Buprenorphine | Sigma | B-044 | Used for post-surgical pain treatment |
| Depilatory cream | Veet | N/A | Used for remove body hair from the surgical area |
| Heating Pad | Xiaochuangxin | N/A | Used for maintaining body temperature |
| Ibuprofen | MCE | HY-78131 | Used for post-surgical pain treatment |
| Iron wire (0.5 mm) | Qing Yuan | Iron wire #26 | Used for making snare containing retractor |
| Microscopic tweezers | RWD | F12006-10 | Used for penetrating and separating the tissue to open operation space |
| Needle holder | RWD | F12005-10 | Used for pinching off the tip of gauge needle and blunting it |
| Ophthalmic forceps | RWD | F14012-10 | Used for holding skin and other tissues |
| Ophthalmic scissors | RWD | S11001-08 | Used for making sking incision of mouse |
| Pentobarbital sodium | Sigma | P3761 | Used for mouse anesthesia |
| Sterile operating mat | Hale & hearty | 211002 | Used for placing animal during surgery |
| Ultra-sound imaging system | Fujifilm visualsonics | vevo1100 | Used for measure the blood flow velocity, left ventricular wall thickness and ejection fraction, https://www.visualsonics.com/product/imaging-systems/vevo-1100 |
References
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