Summary
Den nåværende protokollen beskriver en detaljert, sanntids NIR-II fluorescensavbildningsoperasjon av en mus ved hjelp av en NIR-II optikkbildeenhet.
Abstract
Som en fremvoksende bildebehandlingsteknologi har nær-infrarød II (NIR-II, 1000-1700 nm) fluorescensavbildning betydelig potensial i det biomedisinske feltet på grunn av sin høye følsomhet, dype vevspenetrasjon og overlegen avbildning med romlig og tidsmessig oppløsning. Metoden for å lette implementeringen av NIR-II fluorescensavbildning for noen presserende nødvendige felt, som medisinsk vitenskap og farmasi, har imidlertid forvirret relevante forskere. Denne protokollen beskriver i detalj konstruksjons- og bioimaging-applikasjonene til en NIR-II fluorescensmolekylær sonde, HLY1, med et D-A-D (donor-acceptor-donor) skjelett. HLY1 viste gode optiske egenskaper og biokompatibilitet. Videre ble NIR-II vaskulær og tumoravbildning hos mus utført ved hjelp av en NIR-II optikkavbildningsenhet. Sanntids høyoppløselige NIR-II fluorescensbilder ble samlet inn for å veilede påvisning av svulster og vaskulære sykdommer. Fra sondeforberedelse til datainnsamling forbedres bildekvaliteten kraftig, og autentisiteten til NIR-II molekylære sonder for dataregistrering i intravital avbildning sikres.
Introduction
Fluorescensavbildning er det mest brukte molekylære bildebehandlingsverktøyet i grunnforskning, og brukes også ofte til å veilede kirurgisk tumorreseksjon i klinikker1. Det essensielle prinsippet om fluorescensavbildning er å bruke et kamera for å motta fluorescens som sendes ut av en laser etter bestråling av prøver (vev, organer, etc.) 2. Prosessen er fullført i løpet av få millisekunder3. Fluorescensavbildningsbølgelengdene kan deles inn i ultrafiolett (200-400 nm), synlig region (400-700 nm), nær-infrarød I (NIR-I, 700-900 nm) og nær-infrarød II (NIR-II, 1000-1700 nm) 4,5,6. Fordi de endogene molekylene som hemoglobin, melanin, deoksyhemoglobin og bilirubin i biologisk vev har sterk absorpsjon og en spredningseffekt på lyset i synlige områder, blir lysets penetrasjon og følsomhet sterkt redusert, og fluorescensavbildningen i synlige lysbølgelengder påvirkes negativt 7,8,9.
NIR-II fluorescensavbildning har lav fotonabsorpsjon og spredning, høy bildehastighet og høy bildekontrast (eller følsomhet)10,11. Etter hvert som fluorescensbølgelengden øker, reduseres absorpsjonen og spredningen av fluorescens i biologisk vev gradvis, og autofluorescensen i NIR-II-regionen er ekstremt lav12. Dermed øker NIR-II-vinduet signifikant penetrasjonsdybden til vev og oppnår en høyere oppløsning og signal-støy-forhold13,14,15. NIR-II-vinduet kan videre deles inn i NIR-IIa (1300-1400 nm) og NIR-lIb (1500-1700 nm) vinduer16. Hittil har flere milepæl NIR-II-materialer blitt rapportert, inkludert uorganisk materiale enkeltveggede karbonnanorør, sjeldne jordartnanopartikler, kvanteprikker og halvlederpolymernanopartikler av organisk materiale, småmolekylære fargestoffer, aggregeringsinduserte selvlysende materialer, etc. 1,17,18,19,20,21,22. Uorganiske nanomaterialer akkumuleres lett i leveren, milten osv., og har potensiell langvarig biotoksisitet23. Organisk småmolekylfluorofor har fordelene med rask metabolisme, lav toksisitet, enkel modifikasjon og en klar struktur, som er den mest lovende sonden for klinisk bruk24.
NIR-II optikkavbildningssystem er også en kritisk komponent i fluorescens bioimaging fordi det effektivt kan samle NIR-II fluorescenssignaler fra NIR-II-sonden, og dermed gjengi presise funksjonelle, anatomiske og molekylære bilder25,26. NIR-II bildebehandlingssystemet består hovedsakelig av kortbølge infrarøde kameraer, langpassfiltre (LP), lasere og dataprosessorer. In vivo NIR-II fluorescerende avbildning regnes som en av de mest gjennomførbare bildebehandlingsmetodene for å belyse mekanismene for sykdommer og livets natur27,28,29. NIR-II bildebehandlingsteknologi har blitt mye brukt i biomedisinske felt som kreftcelledeteksjon, dynamisk bildebehandling, in vivo målrettet sporing og målrettet terapi, spesielt innen onkologisk forskning30,31. Men med tanke på de høye tekniske kravene til NIR-II bildebehandlingsteknologi på bildeprober og instrumenter, pusler og begrenser den også den praktiske bruken av forskere på ulike felt. Derfor blir utarbeidelsen av NIR-II bildeprober og anvendelsene av NIR-II-avbildning introdusert i detalj i denne artikkelen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Dyreforsøk for NIR-II bildestudier ble utført ved Animal Experiment Center of Wuhan University, som har blitt tildelt International Association for Experimental Animal Care (AALAC). Alle dyreforsøk ble utført i henhold til China Animal Welfare Commission Guidelines for the Care and Use of Experimental Animals og godkjent av Animal Care and Use Committee (IACUC) ved Animal Experimental Center of Wuhan University.
Kvinnelige BALB/c nakenmus (~20 g) ved 6 ukers alder ble brukt i denne studien.
1. NIR-II avbildningsklargjøring
- Plasser kommersielt tilgjengelig svart papp (se materialfortegnelse) i midten av beholderen. Deretter plasserer du prøven på toppen av den svarte pappen, slik at prøven er i midten av bæreren (et trinn plassert i bildeenheten).
MERK: Sammenlignet med hvit papp har svart papp mindre bakgrunnsforstyrrelser under NIR-II-avbildning. - Velg et passende filter basert på bølgelengden til NIR-II-sonden. Trykk på lang (>2 s) for å kontrollere boksområdet (for eksempel 900 LP) som tilsvarer filtermodellen i skjermgrensesnittet når systemet flytter filteret inn i den optiske bildebanen.
- Trykk lenge på plattformen opp på berøringsskjermgrensesnittet til bærekonsollens kontrollområde slik at bæreren konsollerer opp; Trykk plattformen langt ned slik at bæremaskinen trøster seg ned.
- Juster plattformhøyden til "0 mm" (høydejustering) og bruk automatisk fokusering for å gjøre NIR-II-bildet klart.
2. Syntese av NIR-II fargestoff (HLY1)
- Vei råmaterialene som kreves for synteseeksperimentet. Sørg for at de ikke forverres.
- Tilsett forbindelse 1 (200 mg, 0,18 mmol), PdCl 2(dppf)2 CH2 Cl2 (28 mg, 0,04 mmol), N-fenyl-N-(4-(4,4,5,5-tetrametyl-1,3,2-dioksaborolan-2-yl)fenyl)naftalen-2-amin (170 mg, 0,4 mmol) og K2CO3(46 mg, 0,34 mmol) til tetrahydrofuran (THF) oppløsning i en 25 ml rundbunnskolbe. Rør blandingen i 4 timer ved 75 °C under N2 atmosfæren (figur 1A).
MERK: For synteseprosedyren av forbindelse 1 og N-fenyl-N-(4-(4,4,5,5-tetrametyl-1,3,2-dioksaborolan-2-yl)fenyl)naftalen-2-amin, se Li et al21. De kjemiske strukturene er vist i figur 1A. - Etter avkjøling til omgivelsestemperatur, slukk reaksjonen med destillert (DI) vann (80 ml), og ekstraher blandingen med DCM (diklormetan) /H2O (30 ml) (tre ganger). Rens råproduktet ved kolonnekromatografi 16 (petroleter: DCM =10 : 1) for å gjøre HLY1 til et grønt fast stoff (78 mg, 30% utbytte).
- Plasser fargestoffet HLY1 under beskyttelse av nitrogen i kjøleskapet for senere bruk. Dette kan lagres i opptil 6 måneder.
3. Fremstilling av vann-suspensible nanoprobe
- Vei HLY1 (1 mg) og amfipatiske innkapslingsmaterialer, 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-fosfoetanolamin-N-[amino (polyetylenglykol)-2k (DSPE-PEG2k, 10 mg; se materialtabell).
- Forbered HLY1 prikker20 ved å bruke DSPE-PEG2k som en innkapslingsmatrise (nanoprecipitation metode12) (figur 1C). Oppløs HLY1 i THF (1 ml) og legg sakte inn i et beger som inneholder DSPE-PEG2k vandig løsning (9 ml) med sonikering ved 25 ° C. Fjern deretter THF fra blandingen ved dialyse20.
- Konsentrer ovennevnte oppløsning sentrifugal med ultrafiltrering 18 (7100 x g i10 minutter) og legg den deretter i et kjøleskap på 4 °C for fremtidig bruk. Dette kan lagres i opptil 1 måned.
MERK: Den vandige nanosondeoppløsningen lastet av DSPE-PEG2k skal lagres over 0 ° C og brukes så snart som mulig.
4. Konstruksjon av tumorbærende mus
- Kultur 4T1 mus brystkreftceller (4T1) i Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM), supplert med 10% (v / v) føtal bovint serum (FBS) og 1% (v / v) penicillin-streptomycin (se materialtabell), og opprettholdes i en fuktet inkubator med 5% CO2 ved 37 ° C.
- For NIR-II fluorescerende bildeeksperiment, dyrkning 4T1-celler (5 x 107) i 24 timer, fordøyes med trypsin (1 ml) og vask to ganger med serumfri DMEM (4 ml).
- Bedøv musene ved behandling med isofluran (2%). Bekreft tilstrekkelig bedøvelse ved å stimulere tærne eller sålene på føttene til musene, og observer om musene reagerer. Hvis det ikke er noen respons, betyr det at anestesien er tilstrekkelig32.
- Deretter injiserer 4T1-celleblandingen i musene ved hjelp av en insulininjeksjonsnål gjennom subkutan injeksjon (100 μL).
MERK: NIR-II bildebehandlingsstudier ble utført ~ 2 uker etter inokulering, da svulsten hadde vokst til et volum på ~ 100 mm3. Før NIR-II tumoravbildning, vennligst bekreft tumorstørrelsen. Tumorstørrelsen ble estimert av en elektronisk verniertykkelse for denne studien11.
5. In vivo NIR-II fluorescensavbildning
- Bedøv musene ved å behandle med isofluran (2%) og utfør NIR-II-avbildning av hele kroppen av musene ved hjelp av et optisk NIR-II bildesystem (se materialtabell).
MERK: Vær oppmerksom på doseringen av bedøvelse for å unngå musdød. Vanligvis varer anestesi i 5-10 minutter. Stimuler tærne eller fotsålene til musene, og observer om musene reagerer. Hvis det ikke er noe svar, betyr det at anestesien er tilstrekkelig. - Ta en oppløsning av HLY1 dots (0,8 mg / ml, 200 μL). Injiser HLY1-prikkene intravenøst i de bedøvede musene, og 3 minutter senere, utfør NIR-II fluorescensavbildning av blodkarene i hele kroppen av mus ved hjelp av et NIR-II-bildesystem. Fokuser videre på musens hode for å samle hjernens vaskulære bildebehandling.
MERK: Bruk rene eksperimentelle hansker under avbildning, noe som vil bidra til å få rene NIR-II-bilder. - Samle bildene 5 minutter etter injeksjon av HLY1-punkter i mus, og behandle dataene ved hjelp av ImageJ-programvare. Instrumentparametrene til det optiske NIR-II-bildesystemet er 90 mW/cm2 (808 nm laser).
- Når forsøket er fullført, avlives dyrene etter institusjonelt godkjente protokoller.
MERK: For denne studien ble dyrene avlivet ved å utsette dem for overflødig isofluran32.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Den fluorescerende intensiteten og lysstyrken til vannopphengbare HLY1-punkter ble bestemt av et NIR-II bildebehandlingsinstrument. Den fluorescerende intensiteten av HLY1 i 90% fwTHF / H2O-blandingen var fem ganger den i THF-løsningen, noe som indikerte en fremtredende AIE-funksjon av HLY1 (figur 1B). Videre sendte HLY1-punkter sterke fluorescerende signaler under et 1,500 nm LP-filter, noe som viser at HLY1-punkter kan brukes til NIR-IIb-avbildning (figur 1D). Maksimal absorpsjon og maksimal utslippsbølgelengde for HLY1-punkter var henholdsvis 740 nm og 1,040 nm (figur 2A). Videre ble den hydrodynamiske størrelsen på HLY1-punkter bestemt til å være 145 nm ved dynamisk lysspredning (DLS) (figur 2B). HLY1-prikker (0,2 ml, 0,8 mg/ml) ble administrert til normale Balb/c-mus via haleveneinjeksjon for vaskulær avbildning (tilleggsfigur 1). Mikrokarene i baklemmen ble identifisert tydelig under et 1 500 nm LP-filter (figur 3B). I tillegg ble cerebrale kar også tydelig identifisert under et 1,500 nm LP-filter (figur 3A). NIR-II-avbildningsytelsen til HLY1-prikkene i 4T1-tumorbærende mus ble også evaluert gjennom NIR-II-bildesystemet. HLY1 prikker (0,2 ml, 0,8 mg/ml) ble intravenøst injisert i 4T1 mus gjennom halevenen. 4T1-svulsten hos de tumorbærende musene var godt synlig ved NIR-II-avbildning (figur 3C), noe som indikerer EPR-effekten av HLY1-prikker. Alle disse resultatene tyder på at HLY1-prikker er en lys NIR-II fluorescenssonde, som er anvendelig for vaskulær og tumoravbildning.
Figur 1: Syntese av fargestoffmolekyler og fremstilling av vannopphengbare sonder. (A) Den syntetiske banen til HLY1 (a: Pd(dppf)Cl2CH2Cl2,K2CO 3, 75 °C). (B) NIR-II-bildene av HLY1 i THF og 90% fw THF / H 2 O (1,000 nm LP,2ms). (C) Et skjematisk diagram over utarbeidelsen av HLY1-prikker. (D) NIR-IIb fluorescerende intensitet av HLY1 prikker i vandig løsning (1,500 nm LP, 200 ms). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: De optiske egenskapene og hydrodynamisk størrelse av HLY1 punkter. (A) Absorpsjons- og utslippsspektra av HLY1-prikker i vandig løsning. (B) DLS av HLY1 prikker. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 3: NIR-II fluorescensavbildning med HLY1-punkter. (A) Hjernevaskulær avbildning hos mus (1,500 nm LP, 300 ms eksponeringstid). Skala bar: 2 cm. (B) Helkropps vaskulær avbildning hos mus (1,500 nm LP, 300 ms). (C) 4T1 tumoravbildning (1,250 nm LP, 30 ms). Skala bar: 1 cm. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Tilleggsfigur 1: NIR-II bildeoppsett. (A) Skjematisk diagram over injeksjon av HLY1 prikker i mus. (B) Fotografiet av NIR-II-avbildningsenheten. Klikk her for å laste ned denne filen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
NIR-I fluorescerende avbildning kan til en viss grad brukes til tumor- og vaskulær avbildning, men på grunn av den begrensede maksimale utslippsbølgelengden til NIR-I-fluoroforer (<900 nm), resulterer det i dårlig vevspenetrasjon og tumorsignalbakgrunnsforhold33,34. Dårlig og lav bildeoppløsning kan føre til avvik mellom utfallet av tilbakemeldingsbehandlingen og den faktiske terapeutiske effekten. I tillegg har de fleste NIR-I-fluoroforer dårlig optisk stabilitet og ekstremt rask metabolisme, noe som resulterer i ustabilitet i avbildningsprosessen. På grunn av lav vevspenetrasjon og ustabilitet av NIR-I fluoroforer, er applikasjonen i tumor og vaskulær avbildning sterkt begrenset35. Sammenlignet med NIR-I-lys har NIR-II fluorescensavbildning fordelene med betydelig redusert fotonspredning og absorpsjon, lavere vevsautofluorescens, sterkere kroppsvevspenetrasjon og bedre bildeoppløsning36.
Denne artikkelen beskriver et lyst AIE-fargestoff basert på et D-A-D-skjelett, som har utmerket stabilitet. En effektiv nanoprecipitation metode ble benyttet for å forberede en nanoprobe for multi-purpose bioimaging, inkludert vaskulære sykdommer og tumor imaging. Det høye kvanteutbyttet i den vandige løsningen skyldes de selvlysende egenskapene indusert ved aggregering, som kan oppnå HD-NIR-II-avbildning med lav dose og høy biosikkerhet. Lysstyrken til NIR-II-sonden og vannløseligheten bestemmer kvaliteten på avbildningen. I tillegg, når du injiserer en sonde i en mus, er det nødvendig å unngå å lekke sonden inn i musens hale, noe som påvirker nøyaktigheten av bilderesultatene. Den nåværende administrasjonsmetoden er bare begrenset til intravenøs injeksjon, og kan ikke bruke flere injeksjonsmetoder, som er en begrensning av dagens metode. I tillegg kan NIR-II nanoprobe av denne metoden bare akkumuleres til målet ved passiv målretting, og kan ikke identifisere spesifikke mål ved aktiv målretting.
I prosessen med å implementere NIR-II-avbildning er driften av NIR-II-enheten også viktig for oppkjøpet av bilder. For å oppnå høyoppløselig vaskulær avbildning, må InGaAs-kameraet være fokusert på musen og plassert nær musen, noe som gjør det enkelt å observere de små blodkarene. For tumoravbildning må sonder effektivt akkumuleres i svulsten, og NIR-II-fluorescens skal utstråles av sonder som akkumuleres i svulsten, og effektivt skille grensen mellom svulsten og det omkringliggende vevet. På grunn av den høye følsomheten til NIR-II fluorescensavbildning, kan bilder observeres dynamisk under avbildning, noe som mangler i mange andre bildebehandlingsteknikker.
I denne studien introduseres utarbeidelsen av en fluorescerende sonde. Samtidig realiseres høyoppløselig vaskulær og tumoravbildning av en NIR-II fluorescerende nanoprobe, som gir en nøyaktig og effektiv metode for påvisning av vaskulære sykdommer og kreft.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingenting å avsløre.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble delvis støttet av tilskudd fra NSFC (82273796, 82111530209), Special Funds for Guiding Local Science and Technology Development of Central Government (XZ202202YD0021C, XZ202102YD0033C, XZ202001YD0028C), Hubei Province Scientific and Technical Innovation Key Project (2020BAB058), de grunnleggende forskningsfondene for de sentrale universitetene og Tibet autonome region COVID-19 forebyggings- og kontrollprogrammer for vitenskap og teknologiutvikling.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anhydrous pyridine | Perimed | 110-86-1 | |
| Anhydrous sodium sulfate | China national medicines Co.,Ltd | SY006376 | |
| Black cardboard | Suzhou Yingrui Optical Technology Co., Ltd | AO00158 | |
| Column chromatography | Energy Chemical | E080498 | |
| Diphenylphosphine palladium dichloride | Sigma-Aldrich | B2161-1g | |
| DSPE-PEG2000 | Ponsure | PS-E1 | |
| Dulbecco's modified eagle medium | Gibco | 8121587 | |
| EGTA | Biofroxx | EZ6789D115 | |
| Fetal bovine serum | Gibco | 2166090RP | |
| Isoflurane | GLPBIO | GC45487-1 | |
| K2CO3 | Macklin | P816305-5g | |
| N. N '- dimethylformamide | China national medicines Co.,Ltd | 02-12-1968 | |
| NIR-II imaging instrument | Suzhou Yingrui Optical Technology Co., Ltd | 16011109 | |
| N-sulfenanilide | Enerry chemical | 1250030-5g | |
| PdCl2(dppf)2CH2Cl2 | TCI | B2064-1g | |
| penicillin-streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
| Tetrahydrofuran | China national medicines Co.,Ltd | M005197 | |
| Tetratriphenylphosphine palladium | Immochem | 1021232-5g | |
| Tetratriphenylphosphine palladium | Sigma-Aldrich | 1021232-5g | |
| Tributyltin chloride | Immochem | QH004335 | |
| Trimethylchlorosilane | China national medicines Co.,Ltd | 40060560 |
References
- Liu, Y., et al. Versatile types of inorganic/organic NIR-IIa/IIb fluorophores: from strategic design toward molecular imaging and theranostics. Chemical Reviews. 122 (1), 209-268 (2022).
- Zhou, H., et al. Mn-loaded apolactoferrin dots for in vivo MRI and NIR-II cancer imaging. Journal of Materials Chemistry C. 7 (31), 9448-9454 (2019).
- Zhang, F., Tang, B. Z. Near-infrared luminescent probes for bioimaging and biosensing. Chemical Science. 12 (10), 3377-3378 (2021).
- Yao, C., et al. A bright, renal-clearable NIR-II brush macromolecular probe with long blood circulation time for kidney disease bioimaging. Angewandte Chemie International Edition. 61 (5), 202114273 (2022).
- Gao, S., et al. Molecular engineering of near-infrared-II photosensitizers with steric-hindrance effect for image-guided cancer photodynamic therapy. Advanced Functional Materials. 31 (14), 2008356 (2021).
- Ding, F., Fan, Y., Sun, Y., Zhang, F. Beyond 1000 nm emission wavelength: recent advances in organic and inorganic emitters for deep-tissue molecular imaging. Advanced Healthcare Materials. 8 (14), 1900260 (2019).
- Yang, Y., Zhang, F. Molecular fluorophores for in vivo bioimaging in the second near-infrared window. European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (9), 3226-3246 (2022).
- Ding, B., et al. Polymethine thiopyrylium fluorophores with absorption beyond 1000 nm for biological imaging in the second near-infrared subwindow. Journal of Medicinal Chemistry. 62 (4), 2049-2059 (2019).
- Cheng, X., et al. Novel diketopyrrolopyrrole Nir-Ii fluorophores and Ddr inhibitors for in vivo chemo-photodynamic therapy of osteosarcoma. Chemical Engineering Journal. , 136929 (2022).
- Yang, Y., et al. Nir-Ii chemiluminescence molecular sensor for in vivo high-contrast inflammation imaging. Angewandte Chemie International Edition. 59 (42), 18380-18385 (2020).
- Liu, Y., et al. A second near-infrared Ru(Ii) polypyridyl complex for synergistic chemo-photothermal therapy. Journal of Medicinal Chemistry. 65 (3), 2225-2237 (2022).
- Xu, Y., et al. Long wavelength-emissive Ru(Ii) metallacycle-based photosensitizer assisting in vivo bacterial diagnosis and antibacterial treatment. Proceedings of the National Academy of Sciences. 119 (32), 2209904119 (2022).
- Xu, Y., et al. Construction of emissive Ruthenium(II) metallacycle over 1000 nm wavelength for in vivo biomedical applications. Nature Communications. 13 (1), 2009 (2022).
- Wang, S., Li, B., Zhang, F. Molecular fluorophores for deep-tissue bioimaging. ACS Central Science. 6 (8), 1302-1316 (2020).
- Sun, Y., Sun, P., Li, Z., Qu, L., Guo, W. Natural flavylium-inspired far-red to NIR-II dyes and their applications as fluorescent probes for biomedical sensing. Chemical Society Reviews. 51 (16), 7170-7205 (2022).
- Shen, H., et al. Rational design of NIR-II AIEgens with ultrahigh quantum yields for photo- and chemiluminescence imaging. Journal of the American Chemical Society. 144 (33), 15391-15402 (2022).
- Mu, J., et al. The chemistry of organic contrast agents in the NIR-II window. Angewandte Chemie International Edition. 61 (14), 202114722 (2022).
- Lu, S., et al. NIR-II fluorescence/photoacoustic imaging of ovarian cancer and peritoneal metastasis. Nano Research. 15 (10), 9183-9191 (2022).
- Liu, Y., et al. Novel Cd-Mof NIR-II fluorophores for gastric ulcer imaging. Chinese Chemical Letters. 32 (10), 3061-3065 (2021).
- Lin, J., et al. Novel near-infrared II aggregation-induced emission dots for in vivo bioimaging. Chemical Science. 10 (4), 1219-1226 (2018).
- Li, Y., et al. Small-molecule fluorophores for near-infrared IIb imaging and image-guided therapy of vascular diseases. CCS Chemistry. 4 (12), 3735-3750 (2022).
- Li, Y., et al. Novel NIR-II organic fluorophores for bioimaging beyond 1550 nm. Chemical Science. 11 (10), 2621-2626 (2020).
- Li, Y., et al. Organic NIR-II dyes with ultralong circulation persistence for image-guided delivery and therapy. Journal of Controlled Release. 342, 157-169 (2022).
- Li, Y., et al. Self-assembled NIR-II fluorophores with ultralong blood circulation for cancer imaging and image-guided surgery. Journal of Medicinal Chemistry. 65 (3), 2078-2090 (2022).
- Li, Q., et al. Novel small-molecule fluorophores for in vivo NIR-IIa and NIR-IIb imaging. Chemical Communications. 56 (22), 3289-3292 (2020).
- Li, J., et al. Recent advances in the development of NIR-II organic emitters for biomedicine. Coordination Chemistry Reviews. 415, 213318 (2020).
- Li, J., et al. long-fluorescence-lifetime dyes for deep-near-infrared bioimaging. Journal of the American Chemical Society. 144 (31), 14351-14362 (2022).
- Li, C., Chen, G., Zhang, Y., Wu, F., Wang, Q. Advanced fluorescence imaging technology in the near-infrared-II window for biomedical applications. Journal of the American Chemical Society. 142 (35), 14789-14804 (2020).
- Li, B., Lin, J., Huang, P., Chen, X. Near-infrared probes for luminescence lifetime imaging. Nanotheranostics. 6 (1), 91-102 (2022).
- Lei, Z., Zhang, F. Molecular engineering of NIR-II fluorophores for improved biomedical detection. Angewandte Chemie International Edition. 60 (30), 16294-16308 (2021).
- He, S., Song, J., Qu, J., Cheng, Z. Crucial breakthrough of second near-infrared biological window fluorophores: design and synthesis toward multimodal imaging and theranostics. Chemical Society Reviews. 47 (12), 4258-4278 (2018).
- Guo, P., et al. Standardized rat coronary ring preparation and real-time recording of dynamic tension changes along vessel diameter. Journal of Visualized Experiments. (184), e64121 (2022).
- Wang, X., et al. Salidroside, a phenyl ethanol glycoside from rhodiola crenulata, orchestrates hypoxic mitochondrial dynamics homeostasis by stimulating Sirt1/P53/Drp1 signaling. Journal of Ethnopharmacology. 293, 115278 (2022).
- Ji, A., et al. Acceptor engineering for NIR-II dyes with high photochemical and biomedical performance. Nature Communications. 13 (1), 3815 (2022).
- Hou, Y., et al. Salidroside intensifies mitochondrial function of CoCl2-damaged Ht22 cells by stimulating Pi3k-Akt-Mapk signaling pathway. Phytomedicine. , (2022).
- Jiang, Y., Pu, K. Molecular probes for autofluorescence-free optical imaging. Chemical Reviews. 121 (21), 13086-13131 (2021).
