Summary

מיפוי מוח באמצעות מערך אלקטרודות גרפן

Published: October 20, 2023
doi:

Summary

אנו מציגים הליך מיפוי מוח מבוסס מערך גרפן כדי להפחית את הפולשנות ולשפר את הרזולוציה המרחבית-זמנית. אלקטרודות משטח מבוססות מערך גרפן מציגות תאימות ביולוגית ארוכת טווח, גמישות מכנית והתאמה למיפוי מוח במוח מפותל . פרוטוקול זה מאפשר לבנות צורות מרובות של מפות חושיות בו זמנית וברצף.

Abstract

מפות קורטיקליות מייצגות את הארגון המרחבי של תגובות עצביות תלויות מיקום לגירויים סנסומוטוריים בקליפת המוח, ומאפשרות חיזוי של התנהגויות רלוונטיות מבחינה פיזיולוגית. שיטות שונות, כגון אלקטרודות חודרות, אלקטרואנצפלוגרפיה, טומוגרפיה של פליטת פוזיטרונים, מגנטואנצפלוגרפיה והדמיית תהודה מגנטית תפקודית, שימשו להשגת מפות קליפת המוח. עם זאת, שיטות אלה מוגבלות על ידי רזולוציה מרחבית-זמנית ירודה, יחס אות לרעש נמוך (SNR), עלויות גבוהות ואי-תאימות ביולוגית או גורמות נזק פיזי למוח. מחקר זה מציע שיטת מיפוי סומטוסנסורי מבוססת מערך גרפן כתכונה של אלקטרוקורטיקוגרפיה המציעה תאימות ביולוגית מעולה, רזולוציה מרחבית-זמנית גבוהה, SNR רצוי ונזק מינימלי לרקמות, תוך התגברות על החסרונות של שיטות קודמות. מחקר זה הדגים את ההיתכנות של מערך אלקטרודות גרפן למיפוי סומטוסנסורי בחולדות. הפרוטוקול המוצג יכול להיות מיושם לא רק על קליפת המוח הסומטוסנסורית, אלא גם על קליפות אחרות כגון קליפת המוח השמיעתית, הראייתית והמוטורית, ומספק טכנולוגיה מתקדמת ליישום קליני.

Introduction

מפה קורטיקלית היא קבוצה של טלאים מקומיים המייצגים תכונות תגובה לגירויים סנסומוטוריים בקליפת המוח. הם היווצרות מרחבית של רשתות עצביות ומאפשרים חיזוי של תפיסה וקוגניציה. לכן, מפות קליפת המוח שימושיות בהערכת תגובות עצביות לגירויים חיצוניים ובעיבוד מידע סנסומוטורי 1,2,3,4. קיימות שיטות פולשניות ולא פולשניות למיפוי קליפת המוח. אחת השיטות הפולשניות הנפוצות ביותר כוללת שימוש באלקטרודות תוך קורטיקליות (או חודרות) למיפוי 5,6,7,8.

הערכת מפות קליפת המוח ברזולוציה גבוהה לפי דרישה באמצעות אלקטרודות חודרות נתקלה במספר מכשולים. השיטה מייגעת מכדי להשיג מפה הגונה ופולשנית מדי ליישום לשימוש קליני, ואוסרת על פיתוח נוסף. טכנולוגיות עדכניות יותר כגון אלקטרואנצפלוגרפיה (EEG), טומוגרפיית פליטת פוזיטרונים (PET), מגנטואנצפלוגרפיה (MEG) ודימות תהודה מגנטית תפקודי (fMRI) צברו פופולריות מכיוון שהן פחות פולשניות וניתנות לשחזור. עם זאת, בהתחשב בעלויות הגבוהות שלהם וברזולוציה גרועה, הם משמשים במספר מוגבל של מקרים 9,10,11. לאחרונה, אלקטרודות משטח גמישות עם אמינות אות מעולה משכו תשומת לב רבה. אלקטרודות משטח מבוססות גרפן מדגימות תאימות ביולוגית ארוכת טווח וגמישות מכנית, ומספקות הקלטות יציבות במוח מפותל 12,13,14,15,16. הקבוצה שלנו פיתחה לאחרונה מערך רב-ערוצי מבוסס גרפן להקלטה ברזולוציה גבוהה וגירוי עצבי ספציפי לאתר על פני קליפת המוח. טכנולוגיה זו מאפשרת לנו לעקוב אחר ייצוגים קליפת המוח של מידע חושי במשך תקופה ממושכת.

מאמר זה מתאר את השלבים הכרוכים ברכישת מפה מוחית של קליפת המוח הסומטוסנסורית באמצעות מערך רב-אלקטרודות גרפן בן 30 ערוצים. כדי למדוד את פעילות המוח, מערך אלקטרודות גרפן ממוקם על האזור התת-דוראלי של קליפת המוח, בעוד שהכף הקדמית, הגפה הקדמית, הכף האחורית, הגפה האחורית, תא המטען והשפם מגורים באמצעות מקל עץ. הפוטנציאלים הסומטוסנסוריים-מעוררים (SEPs) נרשמים עבור אזורים סומטוסנסוריים. פרוטוקול זה יכול להיות מיושם גם על אזורים אחרים במוח, כגון קליפת המוח השמיעתית, הראייתית והמוטורית.

Protocol

כל נהלי הטיפול בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של האוניברסיטה הלאומית אינצ’און (INU-ANIM-2017-08). 1. הכנת בעלי חיים לניתוח הערה: השתמש בעכברוש Sprague Dawley (בן 8-10 שבועות) ללא הטיית המין עבור ניסוי זה. מרדימים את החולדה עם 90 מ”ג/?…

Representative Results

פרוטוקול זה מתאר כיצד מערך רב ערוצי גרפן מותקן על פני השטח של המוח. המפה הסומטוסנסורית נבנתה על ידי רכישת תגובות עצביות לגירויים פיזיים וחישוב המשרעת של התגובה. איור 1 מראה את הסכמה של הניסוי הזה. איור 2A מציג את המאפיינים המבניים של מערך אלקטר…

Discussion

הפרוטוקול המוצג מספק תהליך מעמיק, שלב אחר שלב, המסביר כיצד לגשת ולמפות את התגובות הסומטוסנסוריות של חולדות באמצעות מערך אלקטרודות גרפן. הנתונים שנרכשו בפרוטוקול הם SEPs המספקים מידע סומטוסנסורי המקושר באופן סינפטי לכל חלק בגוף.

יש לשקול מספר היבטים של פרוטוקול זה. בעת שאיבת ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכה על ידי האוניברסיטה הלאומית אינצ’און (קואופרטיב בינלאומי) עבור סונגו יאנג.

Materials

1mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
3mL syringe KOREAVACCINE CORPORATION injecting the drug for anesthesia 
Bone rongeur Fine Science Tools 16220-14 remove the skull
connector Gbrain Connect graphene electrode to headstage
drill FALCON tool grind the skull
drill bits Osstem implant grind the skull
Graefe iris forceps slightly curved serrated vubu vudu-02-73010 remove the tissue from the skull or hold wiper
graphene multielectrode array Gbrain records signals from neuron
isoflurane Hana Pharm Corporation sacrifce the subject
ketamine yuhan corporation used for anesthesia
lidocaine(2%) Daihan pharmaceutical  local anesthetic
Matlab R2021b Mathworks Data analysis Software
mosquito hemostats Fine Science Tools 91309-12 fasten the scalp
ointment Alcon prevent eye from drying out 
povidone Green Pharmaceutical corporation disinfect the incision area
RHS 32ch Stim/Record headstage intan technologies M4032 connect connector to interface cable and contain intan RHS stim/amplifier chip
RHS 6-ft (1.8m) Stim SPI interface cable intan technologies M3206 connect graphene electrode to headstage
RHS Stim/Recording controller software intan technologies Data Acquisition Software
RHS stimulation/ Recording controller intan technologies M4200
saline JW Pharmaceutical
scalpel Hammacher HSB 805-03
stereotaxic instrument stoelting fasten the subject
sterile Hypodermic Needle KOREAVACCINE CORPORATION remove the dura mater
Steven Iris Tissue Forceps KASCO 50-2026 remove the dura mater
surgical blade no.11 FEATHER inscise the scalp
surgical sicssors Fine Science Tools 14090-09 inscise the scalp and remove the dura mater
wooden stick whisker stimulation
xylazine Bayer Korea used for anesthesia

References

  1. Leergaard, T. B., et al. Rat somatosensory cerebropontocerebellar pathways: spatial relationships of the somatotopic map of the primary somatosensory cortex are preserved in a three-dimensional clustered pontine map. Journal of Comparative Neurology. 422 (2), 246-266 (2000).
  2. Craner, S. L., Ray, R. H. Somatosensory cortex of the neonatal pig: I. Topographic organization of the primary somatosensory cortex (SI). Journal of Comparative Neurology. 306 (1), 24-38 (1991).
  3. Benison, A. M., Rector, D. M., Barth, D. S. Hemispheric mapping of secondary somatosensory cortex in the rat. Journal of Neurophysiology. 97 (1), 200-207 (2007).
  4. Lee, M., et al. Graphene-electrode array for brain map remodeling of the cortical surface. NPG Asia Materials. 13 (1), (2021).
  5. Yang, S. C., Weiner, B. D., Zhang, L. S., Cho, S. J., Bao, S. W. Homeostatic plasticity drives tinnitus perception in an animal model. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (36), 14974-14979 (2011).
  6. Yang, S., Zhang, L. S., Gibboni, R., Weiner, B., Bao, S. W. Impaired development and competitive refinement of the cortical frequency map in tumor necrosis factor-alpha-deficient mice. Cerebral Cortex. 24 (7), 1956-1965 (2014).
  7. Miyakawa, A., et al. Tinnitus correlates with downregulation of cortical glutamate decarboxylase 65 expression but not auditory cortical map reorganization. Journal of Neuroscience. 39 (50), 9989-10001 (2019).
  8. Yang, S., Su, W., Bao, S. Long-term, but not transient, threshold shifts alter the morphology and increase the excitability of cortical pyramidal neurons. Journal of Neurophysiology. 108 (6), 1567-1574 (2012).
  9. Beniczky, S., Schomer, D. L. Electroencephalography: basic biophysical and technological aspects important for clinical applications. Epileptic Disorders. 22 (6), 697-715 (2020).
  10. Kim, S. G., Richter, W., Uğurbil, K. Limitations of temporal resolution in functional MRI. Magnetic Resonance Medicine. 37 (4), 631-636 (1997).
  11. Cho, Z. H., et al. A fusion PET-MRI system with a high-resolution research tomograph-PET and ultra-high field 7.0 T-MRI for the molecular-genetic imaging of the brain. Proteomics. 8 (6), 1302-1323 (2008).
  12. Viventi, J., et al. Flexible, foldable, actively multiplexed, high-density electrode array for mapping brain activity in vivo. Nature Neuroscience. 14 (12), 1599-1605 (2011).
  13. Masvidal-Codina, E., et al. High-resolution mapping of infraslow cortical brain activity enabled by graphene microtransistors. Nature Materials. 18 (3), 280-288 (2019).
  14. Blaschke, B. M., et al. Mapping brain activity with flexible graphene micro-transistors. 2D Materials. 4 (2), 025040 (2017).
  15. Park, S. W., et al. Epidural electrotherapy for epilepsy. Small. 14 (30), 1801732 (2018).
  16. Lim, J., et al. Hybrid graphene electrode for the diagnosis and treatment of epilepsy in free-moving animal models. NPG Asia Materials. 15 (1), 7 (2023).
  17. Hermanns, H., et al. Molecular mechanisms of action of systemic lidocaine in acute and chronic pain: a narrative review. British Journal of Anaesthesia. 123 (3), 335-349 (2019).
  18. Tchoe, Y., et al. Human brain mapping with multithousand-channel PtNRGrids resolves spatiotemporal dynamics. Science Translational Medicine. 14 (628), (2022).
  19. Wilent, W. B., Contreras, D. Dynamics of excitation and inhibition underlying stimulus selectivity in rat somatosensory cortex. Nature Neuroscience. 8 (10), 1364-1370 (2005).
  20. Insanally, M. N., Köver, H., Kim, H., Bao, S. Feature-dependent sensitive periods in the development of complex sound representation. Journal of Neuroscience. 29 (17), 5456-5462 (2009).

Play Video

Cite This Article
Kim, D., Jeong, M., Kim, E., Kim, G., Na, J., Yang, S. Brain Mapping Using a Graphene Electrode Array. J. Vis. Exp. (200), e64910, doi:10.3791/64910 (2023).

View Video