Summary
Описана простая конструкция тележки, построенная для выполнения исследовательской эхокардиографии у мини-пигов, стоящих в сознании, а также рекомендации по строительству, методы обучения и репрезентативные ультразвуковые изображения.
Abstract
Эхокардиография использует ультразвуковые волны для неинвазивной оценки структуры и функции сердца и является стандартом лечения для оценки и мониторинга сердца. Миниатюрная свинья, или минипиг, все чаще используется в качестве модели сердечных заболеваний в медицинских исследованиях. Свиней, как известно, трудно сдерживать и безопасно обращаться, и, следовательно, исследовательская эхокардиография у этого вида почти всегда проводится под наркозом или тяжелой седацией. Анестетики и седативные средства повсеместно влияют на сердечно-сосудистую функцию и могут вызывать снижение сердечного выброса и артериального давления, увеличение или уменьшение частоты сердечных сокращений и системного сосудистого сопротивления, изменения электрического ритма и изменение коронарного кровотока. Таким образом, седативная или анестезированная эхокардиография может неточно отображать прогрессирование сердечных заболеваний на моделях крупных животных, тем самым ограничивая трансляционную ценность этих важных исследований. В этой статье описывается новое устройство, которое позволяет проводить эхокардиографию в бодрствующем состоянии у мини-пигов. Кроме того, описаны методы дрессировки, используемые для обучения свиней переносить эту безболезненную и неинвазивную процедуру без необходимости использования гемодинамических анестетиков. Эхокардиография в состоянии бодрствования представляет собой безопасный и осуществимый способ проведения наиболее распространенного теста мониторинга сердца у мини-пиг для сердечно-сосудистых исследований.
Introduction
Сердечная недостаточность является растущим бременем для медицинских учреждений в Соединенных Штатах и за рубежом, с распространенностью во всем мире 38 миллионов пациентов1. В 2020 году около 19 миллионов смертей во всем мире были связаны с сердечно-сосудистыми заболеваниями, что на 18,7% больше, чем в 2010году2. Развитие новой терапии медленно догоняет эту тревожную тенденцию. Таким образом, сердечная недостаточность является важнейшей областью исследований, и важность высокоточных инструментов для фиксации развития и прогрессирования заболевания невозможно переоценить.
Эхокардиография в настоящее время является наиболее клинически важным инструментом для неинвазивного измерения прогрессирования сердечных заболеваний, но в моделях исследований на крупных животных ее может быть сложно внедрить3. Эхокардиография использует ультразвуковые волны для оценки структуры и функции сердца и является стандартом лечения в клинических условиях для оценки и мониторинга сердца4. Доклинические модели сердечных заболеваний на крупных животных, таких как свиньи, играют решающую роль в переводе фундаментальной науки на разработку сердечно-сосудистой терапии5. Из этого следует, что перевод эхокардиографии на модели крупных животных при разработке этих терапевтических средств является важной частью этого важного начинания.
Свиньи являются одним из нескольких видов, обычно используемых в качестве крупных животных моделей ишемии, перегрузки давлением и быстрого моделирования сердечной недостаточности 5,6. Свиньи особенно важны в доклинических исследованиях, поскольку нейрогормональные компенсаторные механизмы и ремоделирование сердца близко отражают патофизиологию человека 6,7. Совсем недавно миниатюрные свиньи, или минипиги, продемонстрировали перспективность в качестве модели множественных сопутствующих заболеваний сердечных заболеваний, при этом ожирение, гипертония, гиперхолестеринемия и диабет надежно приводят к сердечной дисфункции и ремоделированию 8,9.
Безопасное выполнение эхокардиографии у большинства крупных животных требует тяжелой седации или общей анестезии. Однако все обезболивающие и седативные препараты угнетают сердечную функцию дозозависимым образом10,11. Анестетики и седативные средства могут вызывать снижение сердечного выброса и артериального давления, увеличение или уменьшение частоты сердечных сокращений и системного сосудистого сопротивления, изменения электрического ритма и изменение коронарного кровотока12. В большинстве случаев анестетики снижают симпатический тонус, уменьшая венозный возврат и снижая артериальное давление13. Важно отметить, что анестетики также влияют на эхокардиографические параметры, усложняя интерпретацию этого исследования при мониторинге сердечных заболеваний на животных моделях14. Эхокардиография в сознании является наиболее близким представлением нативной сердечной функции.
Здесь описано удерживающее устройство для свиней, которое легко принимается бодрствующими минипигами, которое может быть использовано для базового эхокардиографического мониторинга без необходимости введения гемодинамически изменяющих анестетиков.
Protocol
Строительство и использование тележки для эхокардиографии проводились в соответствии со стандартами обращения с животными и их дрессировки Институционального комитета по уходу за животными и их использованию Университета штата Юта.
1. Соображения по созданию тележки эхокардиографии
- Постройте устройство, обеспечивающее доступ к окнам эхокардиографии латерального и вентрального стоя.
- Используйте тележку с высокими боками, спереди и сзади, чтобы свиньи не могли взобраться или выпрыгнуть во время эхокардиографии.
- Используйте регулируемую по длине и ширине тележку для размещения свиней разных размеров и возрастов; Однако в научных исследованиях, в которых все свиньи имеют одинаковый размер, породу и возраст, в этом может не быть необходимости.
- Приобретите нескользящую рампу для монтажа и демонтажа тележки. Свиньи предпочитают идти вперед, поэтому спешиваться назад нежелательно. В этом примере была использована съемная рампа, так что ее можно было отсоединить с одного конца после монтажа тележки, а затем переместить на другой конец тележки для демонтажа.
- Используйте тележку на колесах с фиксирующими колесами, так как это позволяет перемещать приспособление из хранилища в комнату для животных.
- Чтобы соответствовать стандартам очистки и дезинфекции вивария, используйте пластик, металл и резину.
- Наконец, включите съемную кормушку в передней части тележки, чтобы отвлечь свиней во время эхокардиографии.
2. Технические характеристики тележки
ПРИМЕЧАНИЕ: Свиньи, использованные в нашем исследовании, были миниатюрными свиньями Юкатана и Геттингена в возрасте 5-10 месяцев, и, следовательно, наша тележка была построена с учетом этого размера.
- Хотя аналогичную конструкцию можно построить с нуля, чтобы уменьшить часть строительных работ, начните с готовой сверхмощной тележки (рис. 1). Рекомендуется блокировка колес.
- Отпилите и снимите переднюю и заднюю часть тележки и замените воротами, изготовленными из трубы из ПВХ и звеньев цепи. Используйте материал из звеньев цепи для подвешивания кормушки с помощью крючков или карабинов (рис. 2). При удалении передней и задней части целостность и прочность удержания пластика снижаются, поэтому для более крупных и тяжелых свиней укрепляйте металлическими прутьями на нижней стороне полок тележки.
- Создайте отверстие на верхнем этаже тележки, достаточно большое, чтобы пройти рука, держащая ультразвуковой датчик. Сохраните пластиковую крышку, прикрепленную к верхней части отверстия, которую можно снять для доступа к субксифоидной эхокардиографии, как только свиньи благополучно встанут в тележку (рис. 3).
- В качестве индивидуальной подгонки используйте алюминиевый приклад (например, квадратную трубу, стержень и листовой металл) для создания металлической рампы для монтажа/демонтажа с усилениями для крепления к модифицированной тележке в определенных точках крепления. Добавьте съемную резиновую прокладку для захвата с помощью болтов и люверсов (рис. 4).
- Создайте шарнирный механизм для боковых ворот с простыми штифтами, используемыми для сужения зоны стояния свиньи для улучшения удержания (рис. 5). Это обеспечивает плотное прилегание свиньи к тележке и гарантирует, что свиньи будут удерживаться в направлении вперед без возможности развернуться.
3. Приучение минипигов стоять в тележке
- Свиньи должны быть обучены есть из кормушки в течение длительного периода времени, подниматься по пандусу и спускаться по пандусу.
- Наполнение кормушки замороженным лакомством продлевает время стояния свиней. Используйте такие комбинации, как сок, напиток-заменитель пищи или йогурт с хлопьями и стандартным чау-чау, печеньем и/или фруктовыми батончиками. Заморозьте эти комбинации вместе, чтобы создать долговечные кормушки для замороженных лакомств (рис. 6). Другой вариант, который следует рассмотреть, - это отказаться от обычной еды животного и вместо этого кормить его в кормушке в тележке в период эхокардиографии.
- Прежде чем научить свиней есть замороженные лакомства в хитроумной штуковине, поставьте на землю кормушки для замороженных лакомств, поощряя признание кормушки как ценного лакомства.
- Приучайте свиней принимать стоячие эхокардиограммы в течение 5-7 дней, по одной тренировке в день. Для этого выполните следующие действия.
- Познакомьте свиней с тележкой, окружив тележку ценными лакомствами (печеньем или хлопьями) на 1-2 дня.
- Познакомьте свиней с пандусом на 1-2 дня, разместив ценные лакомства вдоль пандуса и предоставив дополнительные награды, когда свиньи поднимаются по пандусу.
- Позвольте свиньям стоять на тележке, не задействуя боковые ограничители или ворота (которые могут вызвать страх), и обеспечьте замороженные кормушки для лакомств у передних ворот на 2-3 дня. В течение последних 1-2 дней, пока свиньи едят из кормушек, поместите ультразвуковой датчик с ультразвуковым гелем на свиней, чтобы приучить их к ощущению контакта с зондом.
- После такого режима дрессировки свиньи легко позволят закрыть ограничители и ворота, а также провести ультразвуковое исследование для получения эхокардиографии.
4. Получение изображения
- Получите изображения в тележке эхокардиографии, которая позволяет позиционировать зонд в следующих положениях, как описано ниже.
- Сделайте снимки через боковые стороны тележки справа и слева от подмышечных впадин. Эти положения используются для получения правой и левой парастернальных плоскостей изображения.
- Сделайте снимки через пол тележки в субксифоидную область, чтобы получить апикальные виды.
- Делайте снимки как для B-режима, так и для M-режима из этих положений стоя.
- О процедуре имитации записи эха в бодрствовании см. Видео 1. На видео животное представлено куклой-минипигом в натуральную величину, скованной, как настоящий мини-пиг, с ограниченным пространством для перемещения в тележке. Также показано лучшее окно доступа и расположение регистрирующего датчика эхокардиографии.
Representative Results
Здесь представлены репрезентативные изображения, полученные у минипига Юкатана в возрасте около 8 месяцев. Животное никогда не получало седативных препаратов и наслаждалось кормом или замороженными кормушками во время съемки.
Тележка эхокардиографии в первую очередь полезна для получения простых изображений для расчета объемов камеры левого желудочка и фракции выброса (EF) из изображений и видео B-режима или M-режима. Более чувствительная визуализация, такая как визуализация сосудов или допплерография тканей, может оказаться слишком сложной с этим методом, поскольку бодрствующие свиньи сохраняют ограниченную подвижность, а временные рамки визуализации ограничены продолжительностью кормления.
В лаборатории используется прикроватный ультразвуковой аппарат без возможности последующего анализа изображений. Таким образом, видео и неподвижные изображения требуют обработки с использованием программного обеспечения для редактирования и измерения с использованием программного обеспечения для научного анализа изображений.
Через боковые стороны тележки были получены изображения поперечного обзора с короткой осью поперечного обзора (рис. 7), которые использовались для анализа внутреннего диаметра левого желудочка в систоле и диастоле (LVIDs и LVIDd соответственно) и последующего расчета фракции выброса (EF), где EF = (EDV - ESV)/EDV × 100% (EDV: конечный диастолический объем; ESV: конечный систолический объем) на основе объемов, рассчитанных по формуле Тейхгольца (объем = 7D3/[2,4 + D]) (D: линейный диаметр LV)15. Репрезентативные данные, полученные в результате четырех сканирований в М-режиме, полученных от двух мини-пигов, включены в таблицу 1, а также данные, полученные в результате сканирования в М-режиме, записанные у тех же животных во время сеансов седативного эхо. Как и ожидалось, EF, генерируемый в ходе седативных эхо-сеансов, как правило, был ниже, чем EF в сознательном эхо-сеансе.
Изображения B-режима парастернального длинноосного вида также были получены с боков тележки (рис. 8). Метод длины области для вычисления EF был использован с этими изображениямиB-режима 16. Во-первых, EDV левого желудочка рассчитывали по длине большой оси левого желудочка в конце диастолического периода и площади камеры по формуле EDV = (0,85 × площадь2)/длина. ЭСВ левого желудочка рассчитывали таким же образом с использованием систолических измерений. Затем фракция выброса рассчитывалась как EF = (EDV - ESV)/EDV × 100%. Репрезентативные данные, полученные в результате восьми сканирований в B-режиме, полученных от двух мини-пигов, включены в таблицу 2. Для сравнения также включены данные, полученные в результате сканирования B-режима, записанного у тех же животных во время сеансов седативного эха. Используя изображения B-режима, EF, генерируемые седативными и сознательными эхо-сессиями, были тесно сопоставлены друг с другом (таблица 2).
Рисунок 1: Вид сбоку на тележку эхокардиографии. Тележка для эхокардиографии построена с использованием готовой сверхмощной тележки. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Вид на голову тележки эхокардиографии. Передняя и задняя части готовой тележки заменены распашными воротами из трубы ПВХ и звена цепи (А), в которой также размещается подвесное кормушка (В). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 3: Вид сверху на тележку эхокардиографии. На верхнем этаже тележки создается отверстие для пропуска руки, держащей ультразвуковой датчик. Пластиковая накладка предназначена для безопасного монтажа и демонтажа тележки. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 4: Алюминиевая рампа. Алюминиевая рампа прикреплена к передней или задней части тележки, а съемная резиновая набивка добавлена для захвата с помощью болтов и люверсов. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 5: Боковые ворота. Для боковых ворот созданы петли со штифтами, обеспечивающими более точный размер и фиксацию. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 6: Угощения для сеансов сознательного эха .Комбинации сока, напитка-заменителя пищи или йогурта в сочетании с хлопьями и стандартным чау-чау, печеньем и/или фруктовыми батончиками замораживаются для создания долговечных замороженных кормушек. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 7: Репрезентативное сканирование в М-режиме, полученное от находящегося в сознании животного. Анализ образцов изображений для расчета фракции выброса левого желудочка из М-режима. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 8: Репрезентативное сканирование B-режима, полученное от находящегося в сознании животного. Анализ образцов изображений для расчета фракции выброса левого желудочка по данным визуализации в B-режиме. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
| Средний ± SD | LVIDd (см) | LVIDs (см) | EF (%) |
| Сознательное эхо (N = 4/2) | 3.8 ± 0.5 | 2.5 ± 0.5 | 64,3 ± 5,4 |
| Седативное эхо (N = 4/2) | 3.9 ± 0.2 | 3.0 ± 0.0 | 48,5 ± 7,9 |
| EF, фракция выброса; SD, стандартное отклонение. | |||
| N = 4 эхо-сканирования, полученные от двух животных | |||
Таблица 1: Сравнение параметров, полученных из изображений М-режима, записанных у седативных мини-пигов, по сравнению с сознательными мини-пигами, ограниченными в тележке.
| LV-MALd (см) | LV-MALs (см) | LV-CAd (см2) | LV-CA (см2) | EF (%) | |
| Сознательное эхо (N = 8/2) | 5.8 ± 0.8 | 4.5 ± 0.6 | 18.6 ± 5.0 | 10.7 ± 2.8 | 57,3 ± 5,2 |
| Седативное эхо (N = 8/2) | 5.9 ± 0.5 | 4.8 ± 0.4 | 21.8 ± 2.7 | 13.1 ± 2.4 | 55.3 ± 9.0 |
| ЛЖ-МАЛ, длина большой оси левого желудочка; ЛЖ-ЦА, область камеры левого желудочка; | |||||
| EF, фракция выброса; SD, стандартное отклонение. Эхосканирование N=8, полученное от 2 животных | |||||
Таблица 2: Сравнение параметров, полученных из изображений B-режима, записанных у седативных мини-пигов, по сравнению с мини-пигами, находящимися в сознании, ограниченными в тележке.
Видео 1: Имитация записи эхокардиограммы в бодрствовании, выполненная на кукле-минипиге в натуральную величину с использованием тележки для эхокардиографии. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить это видео.
Discussion
Тележка для эхокардиографии представляет собой легко воспроизводимый метод мониторинга структуры и функции сердца в важной модели исследования сердца, минипиге. Новизна тележки заключается в возможности захвата эхокардиографических изображений без самой большой оговорки: необходимости использования анестетиков или седативных средств, которые изменяют сердечную функцию животных и изменяют сами измерения, используемые для оценки эффектов сердечной терапии. Кроме того, тележка безопасна, недорога и удобна для дрессировки свиней.
Авторы сначала определили желаемые характеристики тележки, а затем тесно сотрудничали с плотником для разработки продукта. Стандартные методы дрессировки с положительным подкреплением были простыми и быстрыми, чтобы научить свиней бесстрашно принимать тележку и использовать ее. С помощью практики УЗИ авторы смогли быстро найти и записать стандартные плоскости двумерной эхокардиографии для последующей обработки. Во время этих стоячих эхокардиограмм седативные средства или анестетики никогда не вводились, и, следовательно, видео и изображения были репрезентативными для бодрствующей сердечной функции.
Создание тележки для эхокардиографии относительно просто для опытного плотника или разнорабочего после определения ключевых особенностей, важных для исследовательской группы (например, регулируемость размера, высота или точки доступа ультразвукового датчика). В процессе строительства характеристики тележки могут быть изменены в соответствии с потребностями отдельных лабораторий. Материалы в основном недорогие, и создание тележки может сэкономить на стоимости выполнения эхокардиограмм с использованием обычно используемых седативных средств и анестетиков.
Ограничения техники включали движение и ограниченные временные рамки для получения изображений. В то время как тележка могла быть отрегулирована до различных размеров, чтобы удерживать свиней, и хотя животные не могли поворачиваться и могли двигаться только на несколько дюймов в каждом направлении, животные все еще были способны двигаться в пределах тележки. Налобные ворота, желоб или стойка, такие как те, которые используются с сельскохозяйственными животными, потенциально могут обеспечить лучшую сдержанность при дополнительной подготовке. Точно так же успешная визуализация основывалась на том, что животные отвлекались на корм или замороженные лакомства во время эхокардиограммы. Как правило, это позволяло получить примерно 15 минут изображения, чего не всегда было достаточно для получения всех желаемых изображений. Возможность легко заменить кормушку или добавить корм, в то время как животное оставалось сдержанным, может иметь длительную продолжительность визуализации. Наконец, из-за обоих вышеперечисленных ограничений более чувствительные методы визуализации, такие как тканевая допплерография, оказалось трудно выполнить в стоячей эхокардиографии.
В других экспериментальных моделях свиней часто используются неанестезирующие методы обработки, такие как коммерчески доступная стропаПанепинто 17. Тем не менее, авторы сочли технику стропы более громоздкой для дрессировки свиней, и стропа не обеспечивала ультразвуковому аппарату доступ к плоскостям визуализации, необходимым для эхокардиографии. Другие потенциальные применения эхокардиографии могут включать другие безболезненные процедуры, такие как УЗИ брюшной полости, наблюдение за поражениями кожи или получение образцов крови из сосудистого порта. Авторы часто используют тележку, чтобы легко удерживать свиней для выполнения электрокардиограмм и программирования кардиостимуляторов, например.
В заключение, описанная техника эхокардиографии в сознании проста в выполнении и ценна для получения базовой ультразвуковой визуализации сердца без сердечно-сосудистой депрессии, типичной для использования анестетика или седативного средства. Этот метод может быть использован для сравнения анестезированных изображений с изображениями бодрствования у крупных животных или для повседневного мониторинга прогрессирования сердечных заболеваний в ценной доклинической трансляционной модели сердечных заболеваний и недостаточности свиней.
Disclosures
У авторов нет финансовых конфликтов интересов, которые можно было бы раскрыть.
Acknowledgments
Финансирование этого исследования включает NIH-T32 (T.H.), R01HL133286 (TT.H.), R01HL094414 (R.M.S.), R01HL138577 (R.M.S.), R01HL159983 и R21AG074593 (R.M.S. и TT.H.). Мы выражаем благодарность всем членам исследовательской группы, вспомогательным исследователям и сотрудникам Института сердечно-сосудистых исследований и обучения Норы Эклс Харрисон и сравнительной медицины при Университете штата Юта. Мы также хотели бы выразить нашу признательность доктору Джозефу Палатинусу, доктору медицинских наук, за его ценное обучение и помощь в эхокардиографии.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Access Ramp | N/A - shop built | 58" L x 18" W. Rise of 19" not to exceed 22.5 degree angle. | Any removable aluminum ramp with capacity to hold weight of pigs |
| Fence Feeder with Clips | DuraFlex | E011772 | Feed trough with clips for hanging on chain link, used for frozen treats or feed to distract pigs during echocardiography |
| Heavy Duty Utility Cart | Baxter Medical Equipment & Supplies | Cart # unk / 45x25x33"; Pipes, sch 40 PVC | Made of heavy plastic, with three shelves |
| Image Analysis Software | Image J FIJI | https://imagej.net/software/fiji/ | Free scientific image analysis software |
| Lumify Ultrasound with S4-1 Phased Array Transducer | Philips | FUS6884 | Handheld bedside ultrasound with cardiac probe, used with a tablet device and proprietary software |
| Video Editing Software | Adobe Premiere Pro 2022 | https://www.adobe.com/products/premiere.html | Commen software part of Adobe Creative Cloud. |
References
- Braunwald, E. The war against heart failure: The Lancet lecture. Lancet. 385, 812-824 (2015).
- Tsao, C. W., Aday, A. W., Almarzooq, Z. I., et al. Heart disease and stroke statistics - 2022 Update: A report from the American Heart Association. Circulation. 145 (5), e153-e639 (2022).
- Billig, S., et al. Transesophageal echocardiography in swine: evaluation of left and right ventricular structure, function, and myocardial work. International Journal of Cardiovascular Imaging. 37 (3), 835-846 (2021).
- Boon, J. A. Veterinary Echocardiography., 2nd edition. , Wiley-Blackwell. West. Sussex, UK. (2011).
- Silva, K. A. S., Emter, C. A. Large animal models of heart failure: A translational bridge to clinical success. Journal of the American College of Cardiology: Basic to Translational Science. 5 (8), 840-856 (2020).
- Pilz, P. M., et al. Large and small animal models of heart failure with reduced ejection fraction. Circulation Research. 130 (12), 1888-1905 (2022).
- Paslawska, U., et al. Normal electrocardiographic and echocardiographic (M-mode and two-dimensional) values in Polish Landrace pigs. Acta Veterinaria Scandinavica. 56 (1), 54 (2014).
- Sharp, T. E., et al. Novel Gottingen miniswine model of heart failure with preserved ejection fraction integrating multiple comorbidities. Journal of the American College of Cardiology: Basic to Translational Science. 6 (2), 154-170 (2021).
- Olver, T. D., et al. Western diet-fed, aortic-banded Ossabaw swine: A preclinical model of cardio-metabolic heart failure. Journal of the American College of Cardiology: Basic to Translational Science. 4 (3), 404-421 (2019).
- Merin, R. G. Effect of anesthetic drugs on myocardial performance in man. Annual Review of Medicine. 28, 75-83 (1977).
- El Mourad, M. B., Shaaban, A. E., El Sharkawy, S. I., Afandy, M. E. Effects of propofol, dexmedetomidine, or ketofol on respiratory and hemodynamic profiles in cardiac patients undergoing transesophageal echocardiography: A prospective randomized study. Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 35 (9), 2743-2750 (2021).
- Stoelting, R. K., Hillier, S. C. Handbook of Pharmacology & Physiology in Anesthetic Practice., 2nd edition. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. (2006).
- Kristensen, S. D., et al. ESC/ESA Guidelines on non-cardiac surgery: Cardiovascular assessment and management: The Joint Task Force on non-cardiac surgery: Cardiovascular assessment and management of the European Society of Cardiology (ESC) and the European Society of Anaesthesiology (ESA). European Heart Journal. 35 (35), 2383-2431 (2014).
- Roth, D. M., Swaney, J. S., Dalton, N. D., Gilpin, E. A., Ross Jr, J. Impact of anesthesia on cardiac function during echocardiography in mice. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 282 (6), H2134-H2140 (2002).
- Chengode, S. Left ventricular global systolic function assessment by echocardiography. Annals of Cardiac Anaesthesia. 19 (Suppl 1), S26-S34 (2016).
- Cacciapuoti, F. Echocardiographic evaluation of ejection fraction: 3DE versus 2DE and M-Mode. Heart Views. 9 (2), 71-79 (2008).
- Yang, H., Galang, K. G., Gallegos, A., Ma, B. W., Isseroff, R. R. Sling training with positive reinforcement to facilitate porcine wound studies. JID Innovations. 1 (2), 100016 (2021).
