Monitoreo de actina desmontaje con la Microscopía de Time-lapse

Summary

Protocol

1. Construir una cámara de flujo como se muestra en el video. Asegúrese de que el sello de parafina es escaso y el uso de cubreobjetos se lavan.
2. Incubar actina agente fijador en la cámara para '10.5.
3. Bloquear no específicas sitios de unión sobre el cubreobjetos con una proteína de bloqueo.
4. Actina polimeriza dentro de la cámara de flujo en G-actina en la polimerización de amortiguamiento.
5. Lavado de actina polimerizada por el flujo en exceso de tampón.