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Biology

Mycobacteria의 Electroporation

Published: May 23, 2008 doi: 10.3791/761

Summary

Mycobacterial 병원성 전략이 제대로 이해 남아있다. 대부분의 종의 느린 성장 속도, 세포 벽 뚫리지 자연과 병원균 작업의 위험이 연구 mycobacteria 어렵게하고 이러한 생물 우리의 가난한 이해하기위한 대부분 책임이 있습니다. 이 비디오에서 우리는 DNA의 항목을 허용하는 간단한 높은 전기 충격을 쓰는 세포를 포함 electroporation의 기술을 보여줄 것입니다. 그것은 mycobacterial 세포에 DNA를 도입을 위해 가장 널리 사용되는 방법입니다.

Abstract

고효율 변환 mycobacteria 연구의 주요 제한 사항입니다. 속 Mycobacterium는 변환하기 어려울 수 있으며, 이것은 주로 두께와 밀랍 세포 벽에 의해 발생하지만, 대부분의 분자 기법과 같은 대장균 및 바실러스 subtilis와 같은 먼 관련 종족에 대한 개발되어있다는 사실에 의해 복합이다. 이러한 장애물에도 불구하고, mycobacterial plasmids가 확인되었습니다 많은 mycobacterial 종의 유전자 변형은 지금 설명하고 있습니다. mycobacteria에 DNA를 도입하는 가장 성공적인 방법은 electroporation입니다. 많은 매개 변수는 성공적인 변화에 기여하는, 이들은 종 / 변형, 변형 DNA의 특성, 사용되는 선택 마커, 성장 매체와 electroporation 펄스에 대한 조건이 포함됩니다. 모두 느린 - 빠른 재배자 변환을위한 최적의 방법은 여기에 자세한 내용 있습니다. 다른 mycobacterial 종족에 대한 다양한 선택 마커로 변환 효율이보고됩니다.

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미생물학 제 15 스프링거 프로토콜 Mycobacteria Electroporation 세균 변환 변환 효율 박테리아 결핵 M. Smegmatis 스프링거 프로토콜
Mycobacteria의 Electroporation
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Cite this Article

Goude, R., Parish, T.More

Goude, R., Parish, T. Electroporation of Mycobacteria. J. Vis. Exp. (15), e761, doi:10.3791/761 (2008).

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