Summary
Текущий ВИЧ-1 стратегии подавляют жизненного цикла вируса, но не эффективно уничтожить инфекцию. Здесь мы показываем, что инженерии рекомбиназы может эффективно акцизного вопросы борьбы с ВИЧ-1 провирусной ДНК из генома инфицированных клеток.
Abstract
ВИЧ-1 интегрирует в хромосому хозяина зараженной клетки и сохраняется до тех провируса окружении длинных концевых повторов. Существующие стратегии лечения в первую очередь цель вируса ферментов или вирус слияния клеток, подавляя жизненного цикла вируса без искоренения инфекции. С интегрированным провируса не мишенью для этих подходов, новых устойчивых штаммов ВИЧ-1 может появиться. Здесь мы сообщаем, что разработаны рекомбиназы Tre (см. Молекулярная эволюция Tre рекомбиназы Бухгольц Ф., Института Макса Планка по клеточной биологии и генетики, Дрезден) эффективно акцизов вопросы борьбы с ВИЧ-1 провирусной ДНК из генома инфицированных клеток. Мы выпустили loxLTR содержащие вирусные pseudotypes и инфицированных клеток HeLa изучить вопрос о Tre рекомбиназы может акцизных провируса из генома ВИЧ-1-инфицированных человеческих клеток. Вирусной частицы-рилизинг-клеточная линия была клонирована и трансфицированных плазмидой выражения Tre или с родительской переносчиками болезней. Деятельности рекомбиназы и вирусных производства были контролировать. Все анализы показали эффективное удаление провируса из инфицированных клеток без видимых цитотоксических эффектов. Эти результаты служат доказательством принципа, что можно развиваться рекомбиназы непосредственно для ВИЧ-1 LTR и что это рекомбиназы способна иссечения ВИЧ-1 провируса из генома ВИЧ-1-инфицированных человеческих клеток.
Перед инженерии рекомбиназы мог войти лечебных средств, однако, существенные препятствия должны быть преодолены. Среди наиболее важных вопросов, с которыми мы сталкиваемся, являются эффективной и безопасной доставки клеток-мишеней и отсутствие побочных эффектов.
Protocol
Пожалуйста, просмотрите похожие видео озаглавленный Принципы сайт-специфического рекомбиназы (SSR) технологии и молекулярной эволюции рекомбиназы Tre для получения дополнительной информации о конкретных участков рекомбинации и инженерных сайт-специфичности рекомбиназы ферментов.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
