Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Интервью: ВИЧ-1 провирусной Иссечение ДНК Использование Evolved рекомбиназы

doi: 10.3791/793 Published: June 16, 2008

Summary

Текущий ВИЧ-1 стратегии подавляют жизненного цикла вируса, но не эффективно уничтожить инфекцию. Здесь мы показываем, что инженерии рекомбиназы может эффективно акцизного вопросы борьбы с ВИЧ-1 провирусной ДНК из генома инфицированных клеток.

Abstract

ВИЧ-1 интегрирует в хромосому хозяина зараженной клетки и сохраняется до тех провируса окружении длинных концевых повторов. Существующие стратегии лечения в первую очередь цель вируса ферментов или вирус слияния клеток, подавляя жизненного цикла вируса без искоренения инфекции. С интегрированным провируса не мишенью для этих подходов, новых устойчивых штаммов ВИЧ-1 может появиться. Здесь мы сообщаем, что разработаны рекомбиназы Tre (см. Молекулярная эволюция Tre рекомбиназы Бухгольц Ф., Института Макса Планка по клеточной биологии и генетики, Дрезден) эффективно акцизов вопросы борьбы с ВИЧ-1 провирусной ДНК из генома инфицированных клеток. Мы выпустили loxLTR содержащие вирусные pseudotypes и инфицированных клеток HeLa изучить вопрос о Tre рекомбиназы может акцизных провируса из генома ВИЧ-1-инфицированных человеческих клеток. Вирусной частицы-рилизинг-клеточная линия была клонирована и трансфицированных плазмидой выражения Tre или с родительской переносчиками болезней. Деятельности рекомбиназы и вирусных производства были контролировать. Все анализы показали эффективное удаление провируса из инфицированных клеток без видимых цитотоксических эффектов. Эти результаты служат доказательством принципа, что можно развиваться рекомбиназы непосредственно для ВИЧ-1 LTR и что это рекомбиназы способна иссечения ВИЧ-1 провируса из генома ВИЧ-1-инфицированных человеческих клеток.

Перед инженерии рекомбиназы мог войти лечебных средств, однако, существенные препятствия должны быть преодолены. Среди наиболее важных вопросов, с которыми мы сталкиваемся, являются эффективной и безопасной доставки клеток-мишеней и отсутствие побочных эффектов.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Пожалуйста, просмотрите похожие видео озаглавленный Принципы сайт-специфического рекомбиназы (SSR) технологии и молекулярной эволюции рекомбиназы Tre для получения дополнительной информации о конкретных участков рекомбинации и инженерных сайт-специфичности рекомбиназы ферментов.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Интервью: ВИЧ-1 провирусной Иссечение ДНК Использование Evolved рекомбиназы
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).More

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter