Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

ראיון: HIV-1-DNA כריתה Proviral שימוש recombinase התפתח

doi: 10.3791/793 Published: June 16, 2008

Summary

נוכחי HIV-1 אסטרטגיות לפעול כדי לדכא את מחזור החיים של נגיפי אבל לא יעיל למיגור זיהום. כאן, אנו מראים כי recombinase מהונדסים יכולים הבלו ביעילות משולב DNA HIV-1 proviral מן הגנום של תאים נגועים.

Abstract

HIV-1 משתלב בכרומוזום המארח של תאים נגועים נמשכת כמו provirus מוקף חוזר מסוף ארוך. אסטרטגיות טיפול מקומי בעיקר יעד אנזימים וירוס או וירוס תאים היתוך, מחזור לדכא את נגיפי חיים בלי להשמיד את הזיהום. מאז provirus משולב אינו ממוקד על ידי גישות אלו, זנים עמידים חדש של HIV-1 עשויים לצוץ. כאן אנו מדווחים כי מהונדסים recombinase Tre (ראה אבולוציה מולקולרית של recombinase Tre, בוכהולץ, פ ', מכון מקס פלאנק Cell Biology וגנטיקה, דרזדן) ביעילות excises DNA משולב HIV-1 proviral מן הגנום של תאים נגועים. הפקנו loxLTR המכיל pseudotypes ויראלי תאים נגועים הלה לבחון האם Tre recombinase יכול הבלו מן provirus הגנום של HIV-1 תאים אנושיים נגועים. החלקיקים משחררים וירוס קו תא שוכפלה ולאחר transfected עם טרה מביע פלסמיד או וקטור עם בקרת הורים. פעילות הייצור recombinase וירוס נוטרו. כל מבחני הפגינו את המחיקה יעיל של provirus מן התאים הנגועים ללא תופעות ציטוטוקסיות גלוי. תוצאות אלו לשמש הוכחה של העיקרון כי ניתן להתפתח recombinase למקד ספציפית LTR HIV-1, וכי recombinase זה מסוגל גוזמות provirus HIV-1 מתוך הגנום של HIV-1-נגועים בתאים אנושיים.

לפני recombinase מהונדסים יכול להיכנס לזירה טיפולית, עם זאת, מכשולים משמעותיים צריך להתגבר. בין הנושאים הקריטיים ביותר, כי אנו מתמודדים, הם אספקה ​​יעילה ובטוחה התאים הממוקדים והעדר תופעות לוואי.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

אנא לצפות בקטעי וידאו הקשורים זכאי עקרונות ספציפיות לאתר טכנולוגיה (SSR) recombinase ו אבולוציה מולקולרית של recombinase Tre לקבלת מידע נוסף על רקומבינציה אתר ספציפי והנדסה באתר, סגוליות של אנזימים recombinase.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

ראיון: HIV-1-DNA כריתה Proviral שימוש recombinase התפתח
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).More

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter