Örnekleri ayıklayın. Numuneler (bu durumda tortu) ekstraksiyondan önce dondurulur, dondurularak kurutulur, ezilir ve homojenize edilir ve verimliliği en üst düzeye çıkarmak için gruplar halinde ekstrakte edilir.
Numunenin boyutuna bağlı olarak, 40 veya 60 mL hacimli toplama şişeleri kullanın. Bu deney için borosilikat cam şişeler (40 mL) ve solvent güvenli kapaklar kullanılır. Olası organik kirleticilerin uzaklaştırılmasını sağlamak için şişeleri, borosilikat cam pipetleri ve tartım kutularını 550 °C'de 6 saat boyunca yakın.
Diklorometan (DCM) ve metanol çoğu organik jeokimya laboratuvarında yaygındır. Kullanmadan önce laboratuvar aletlerini ve cam malzemeleri durulamak için bunları ayrı ayrı (önce metanol, ardından DCM) kullanın. Diklorometan ile metanol karışımı (MeOH; 9:1), birçok laboratuvarda çok çeşitli polaritelere sahip biyobelirteçleri verimli bir şekilde çıkarmak için kullanılır. Solventler organik kirleticilerden arındırılmış olmalıdır.
Bu deney için kullanmak üzere bir Hızlandırılmış Çözücü Çıkarıcı edinin.
2. Örnek Hücrelerin Hazırlanması
Çıkarılacak her numune için bir numune hücresi ve bir boş numune oluşturun.
Her hücre için, hücre gövdesinin bir ucuna bir uç kapağı vidalayın.
Solventle durulanmış cımbız kullanarak her hücrenin üzerine yanmış bir cam elyaf filtre yerleştirin. Ardından, filtre pistonunu kullanarak filtreyi hücreye nazikçe ve yavaşça bastırın.
Her örnek için hücre gövdelerini numaraya göre etiketleyin (, örneğin 1 - 22) ve boş hücreye "boş" yazın.
Boşluğu diyatomlu toprakla (veya kumla) doldurun ve ikinci bir uç kapakla kapatın. Elle sıkın.
3. Numunelerin Hazırlanması
Laboratuvar terazisine yanmış bir tartım tenekesi yerleştirin ve ardından dara alın.
Laboratuvar spatulasını çözücü ile durulayın, ardından uygun bir numune kütlesini tartım kutusuna aktarmak için kullanın ve kütleyi kaydedin.
Numunenin kütlesi, organik madde içeriğine bağlı olarak değişir. Nispeten organik madde bakımından zengin materyal (deniz çamuru) birkaç gram gerektirebilirken, organik madde bakımından zengin materyal (yaprak dokusu) çok daha azına ihtiyaç duyabilir.
Tartım kutusundaki tüm malzemeyi hazırlanmış bir ASE hücresine aktarın.
Hücrenin üstüne başka bir cam elyaf filtre yerleştirin, ardından filtre pistonunu kullanarak numunenin üst kısmına ulaşana kadar yavaşça ve nazikçe aşağı doğru bastırın.
Neredeyse dolana kadar hücreye diyatomlu toprak (veya kum) ekleyin. Hücre gövdesi ipliklerindeki kalıntıları temizlemeye dikkat edin.
Hücrenin üst kısmını başka bir uç kapakla kapatın.
Her örnek için 3.1 - 3.6 arasındaki adımları tekrarlayın.
4. Toplama şişelerinin hazırlanması
Her şişeyi karşılık gelen bir hücrenin numarasıyla etiketleyin (, örneğin 1 - 22 veya boş) ve ASE toplama şişesi kapağı ile kapatın.
5. Çıkarma
Her örnek hücreyi, üst ASE tepsisindeki numaralı bir yuvaya yerleştirin.
İlgili toplama şişesini alt ASE tepsisindeki aynı sayı yuvasına yerleştirin.
ASE'deki tuş takımını kullanarak ayıklama yöntemini oluşturun. 100 °C ve 1.200 psi'de ekstrakte edin. Her bir örneği 10 dakikalık statik tutma ile 3 kez çıkarın ve hücre gövdesini statik tutma işlemleri arasında toplam hacminin %50'si ile yıkayın.
Solvent şişesinin tüm numuneleri çıkarmak için yeterli solvent içerdiğinden emin olun.
Çalıştırmaya başlamadan önce ASE kontrol pedi üzerindeki "durulama" düğmesine basarak ASE 3x'i durulayın.
Başlat'a basın.
Kaynak: Jeff Salacup Laboratuvarı - Massachusetts Amherst Üniversitesi
Bir dizi arke ve bakteri tarafından üretilen gliserol-dialkil gliserol-tetraete…