Bu fare karotis arter intraplak neo-vaskülarizasyon (dört hafta) ile rahatsız akış koşulları ve sonraki ateroskleroz gelişimi (iki hafta) neden olan bir kısmi karotis ligasyonu cerrahi, açıklamaktadır. Ayrıca, yüksek saflıkta endotel RNA, RNA izolasyonu, karotis intima yeni bir yöntem açıklanmaktadır.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Kısmi ligasyon Fare Karotis Arter Disturbed Akış Kaynaklı Ateroskleroz ve Karotis Endotel RNA İzolasyonu Basit Bir Yöntem Bir Model
Bu makalede
Özet
Özet
Bilinen yakın ilişki olmasına rağmen, rahatsız akış aterogenez bağlayan doğrudan kanıt eksikliği olmuştur. Biz son zamanlarda, karotis kısmi ligasyonu yöntemleri değiştirilmiş bir versiyonu kullanılmıştır [1,2], akut fare karotis arterde düşük ve salınımlı akış koşulları, rahatsız akışının iki önemli özellikleri, uyardığı göstermek için. Bu modeli kullanarak, bozulmuş akışı gerçekten Apolipoprotein E nakavt fare [3] hızlı ve sağlam ateroskleroz gelişimine yol açtığı doğrudan kanıt sağladı. Ayrıca fare karotis intima [3], yüksek saflıkta endotel RNA hazırlık bir yöntem geliştirdi. Bu fare modeli ve yöntemi kullanarak, bu kısmi ligasyonu intraplak neovaskülarizasyon gibi kompleks lezyon oluşumu özellikleri ile dört hafta boyunca bir hiperlipidemik fare modeli iki hafta içinde sağlam ve hızlı bir aterom oluşumu takip, bir hafta içinde endotelyal disfonksiyon neden bulundu. Bu hızlı
Protokol
1. Kısmi sol karotis arter ligasyonu
- Fare yaş ~ 8 hafta kullanılır. Farelerin ağırlığı en az 18 gram olması tavsiye edilir.
- Boncuk enstrüman sterilizatör 30 saniyelik aletleri sterilize edin ve soğuması
- Ketamin (80mg/kg) ve Xylazine (10mg/kg) intraperitoneal (ip) enjeksiyonu veya alternatif anestezi IACUC tarafından onaylanmış olarak anestezi neden. Ip enjeksiyon için, karın sol alt kadranda fare enjekte edilir.
- Tamamen uyuşturuluyor kadar bir ısınma odası yerleştirin fare. Ayak tutam tepki ile anestezi derinliği olun.
- Supin (karın tarafı yukarı) konumuna cerrahi bir sahnede Yeri fare. Teyp kadar ön patilerini avuç i....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Bu yöntemde, eksternal karotid, internal karotid, oksipital arter ve üstün tiroid arter da dahil olmak üzere karotis tüm şube uygun bir şekilde tanımlanması çok önemlidir. Gösterildiği gibi ultrason kullanarak akış modeli doğrulamak için de önemlidir. Deneyimli ellerde, 500'den fazla farelerin ultrason çalışmaları dayalı kısmi ligasyonu ameliyatlarında başarı oranı% 90 daha iyidir. Karotis intimal RNA hazırlıkları için, ilk perfüzyon adımdan sonra, karotis görünümünü dikkat etmek önemlidir. Bu noktada sol karotis ak.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Teşekkürler
Bu çalışma, Bilim, Teknoloji ve G. Kore Eğitim Bakanlığı NIH hibe HL87012 (HJ), HL75209 (HJ), UO1HL80711 (DH, DG, HJ) ve Dünya Sınıfı Üniversitesi Projesi (HJ) fon tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Normal Salin (%0.9 sodyum klorür) | Baxter Internationl Inc. | 2B1323 | |
| İnsülin şırıngası (3/10 ml 29g şırınga) | Tyco Healthcare, Covidien | 8881600145 | |
| HBSS | Cellgro | 21-023 | |
| miRNeasy mini kit (QIAzol dahil) | Qiagen | 217004 | |
| Vevo 770 Yüksek Çözünürlüklü Mikro Görüntüleme Sistemi | VisualSonics, inc. | a.Visualsonics 770 sistemi b.Görüntüleme tablası c.Vevo entegre ray sistemi d.Fareler için RMV tarama başlığı | veya benzeri sistem |
| 6-0 İpek Sütür, steril | Covidien | s-1172 c2 | |
| Küçük makas | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5675 | veya benzeri |
| Diseksiyon Penseti | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5005 | veya benzeri |
| Tissue Mend II | Webster Veterinary | 07-856-7946 |
Kaynaklar
- Korshunov, V. A., Berk, B. C. Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 23 (12), 2185-2191 (2003).
- Sullivan, C. J., Hoying, J. B.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
