JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Kanser Araştırmaları
0 görüntülenme • 4:35 dk. • April 30th, 2023
Yumurtalığın dış yüzeyinde bulunan epitel hücreleri, yumurtalık tümörlerine dönüşebilen kanserli hücrelere kötü huylu dönüşüm geçirebilir.
Bu epitelyal yumurtalık kanseri hücrelerini veya EOC'leri izole etmek için, bir yumurtalık tümörü örneği alarak başlayın ve küçük parçalar halinde doğrayın. Kıyılmış parçaları, istenen proteaz enzimi ile desteklenmiş bir sindirim tamponu içeren bir tüpe aktarın.
Bu proteazlar, doku içindeki hücre dışı matriks proteinlerini bozarak EOC hücrelerini, eritrositleri ve birkaç ayrışmış fibroblastı süspansiyona bırakır.
Asılı tek hücreleri ayrışmamış doku parçalarından ayırmak için hücre bulamacını bir süzgeçten süzün. EOC hücrelerini, eritrositleri ve fibroblastları peletlemek için süspansiyonu santrifüjleyin. Enzim içeren süpernatanı atın.
Hücre peletini bir epitelyal büyüme ortamına yeniden süspanse edin ve bir kültür kabına aktarın. Eritrositler ortamda yüzerken, EOC hücrelerinin ve fibroblastların tabağın tabanına yapışmasına izin vermek için kültürü inkübe edin.
Ortamı tazeleyerek asılı eritrositleri çıkarın. Zamanla, ortam, birincil yumurtalık kanseri hücrelerinin tek tabakasını oluşturmak için EOC hücrelerinin fibroblastlar üzerinde seçici büyü
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin