Taramalı Elektron Mikroskobu Kullanılarak Membran Fırfır Oluşumunun Miktar Tayini

Dış stimülatörler hücreleri aktive eder ve çeşitli hücresel aktiviteler için gerekli olan üç boyutlu dairesel zar çıkıntısını veya zar fırfır oluşumunu indükler.

Membran fırfır oluşumunu görselleştirmek için, tabanda bir lamel içeren çok kuyulu bir plaka ile başlayın. Lamelin üst kısmında kültürlenmiş makrofajlar vardır.

Bu makrofajları, hücreleri aktive eden, hücre iskeletinin yeniden düzenlenmesini ve zar çıkıntı oluşumunu kolaylaştıran stimülatör moleküllerle tedavi edin. Hücreleri sabitleyici bir çözelti ile kaplayın, proteinleri çapraz bağlayın ve hücresel yapıyı koruyun.

Tam dehidrasyon için sabit makrofajları artan alkol konsantrasyonları ile tedavi edin. Bu makrofajları kritik bir nokta kurutucu kullanarak kurutun ve daha iyi görüntüleme için su kalıntılarını ortadan kaldırın.

Lameli iletken bant kullanarak bir taramalı elektron mikroskobu veya SEM numune tutucusuna monte edin. Makrofaj içeren lameli ince bir metal tabaka ile püskürterek kaplayın ve görüntüleme sırasında iyi bir elektronik iletkenlik sağlayın.

Lameli SEM odasına yerleştirin. Elektron demetini lamel üzerine odaklayın. Elektron ışını, metal kaplı makrofajın zarına çarpar ve zar yüzeyinden düşük enerjili ikinc