-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

TR

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

tr_TR

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biochemistry
Yöntem gözünüzde canlandırın ve Transmisyon Elektron Mikroskobu Membran Etkileşen Proteinler Anal...
Yöntem gözünüzde canlandırın ve Transmisyon Elektron Mikroskobu Membran Etkileşen Proteinler Anal...
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Method to Visualize and Analyze Membrane Interacting Proteins by Transmission Electron Microscopy

Yöntem gözünüzde canlandırın ve Transmisyon Elektron Mikroskobu Membran Etkileşen Proteinler Analiz için

Full Text
14,020 Views
10:49 min
March 5, 2017

DOI: 10.3791/55148-v

Ramakrishnan B. Kumar1, Lin Zhu2, Hans Hebert1,2, Caroline Jegerschöld1,2

1Department of Biosciences and Nutrition,Karolinska Institutet, 2School of Technology and Health,KTH Royal Institute of Technology

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study demonstrates a method to visualize the binding of extrinsic membrane proteins to nanodisc membranes using negative stain transmission electron microscopy. The technique reveals how protein binding can prevent the characteristic stacking of nanodiscs, providing insights into protein-membrane interactions.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Biochemistry
  • Structural Biology

Background

  • Extrinsic proteins play crucial roles in cellular membrane functions.
  • Negative stain transmission electron microscopy is a valuable imaging technique.
  • Nanodiscs are used as model membranes to study protein interactions.
  • Understanding protein binding is essential for drug development and structural biology.

Purpose of Study

  • To visualize the binding of extrinsic proteins on nanodisc membranes.
  • To explore the implications of protein interactions for drug screening.
  • To provide a low-resolution structure of the protein-nanodisc complex.

Methods Used

  • Negative stain transmission electron microscopy.
  • Preparation of nanodisc membranes.
  • Binding assays for extrinsic proteins.
  • Analysis of nanodisc stacking patterns.

Main Results

  • Binding of extrinsic proteins prevents the formation of nanodisc stacks.
  • Characteristic stacking patterns are visible when proteins do not bind.
  • The method provides insights into optimal conditions for protein binding.
  • Potential applications in drug development are highlighted.

Conclusions

  • This technique is effective for studying protein-membrane interactions.
  • It offers a pathway for high-resolution structure determination.
  • The findings have implications for understanding membrane protein functions.

Frequently Asked Questions

What is the significance of studying protein binding to membranes?
Studying protein binding to membranes is crucial for understanding cellular functions and developing drugs that target membrane proteins.
How does negative stain transmission electron microscopy work?
This technique uses heavy metal stains to enhance contrast in electron microscopy images, allowing visualization of protein structures.
What are nanodiscs?
Nanodiscs are lipid bilayer structures that mimic cellular membranes, used to study membrane proteins in a controlled environment.
Can this method be used for all types of membrane proteins?
While effective for many proteins, the method's success may vary depending on the specific protein and its binding characteristics.
What are the potential applications of this research?
The research can aid in drug development and enhance our understanding of membrane protein functions in various biological processes.

Birçok protein, zar yüzeylerine bağlandığında işlevlerini yerine getirir. Ekstrinsik proteinlerin nanodisk membranları üzerindeki bağlanması, transmisyon elektron mikroskobu ile dolaylı olarak görüntülenebilir. Negatif leke sodyum fosfotungstat tarafından indüklenen nanodisklerin karakteristik istiflenmesinin (rouleau), ekstrinsik proteinin bağlanmasıyla önlendiğini gösteriyoruz.

Bu prosedürün genel amacı, proteinin yüksek çözünürlüklü yapı tayinine yönelik ilk adım olarak, negatif leke iletimli elektron mikroskobu ile bir nanodisk membran yüzeyine bir dışsal membran proteininin bağlanmasını görselleştirmektir. Bu yöntem, hücresel zarların içinde ve üzerinde meydana gelen protein aktiviteleri ile ilgili olduğu için çeşitli araştırma alanlarındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı, proteinin zarlara bağlanamaması durumunda nanodisk formlarının karakteristik yığınlarıdır.

Bu yığınlar, transmisyon elektron mikroskobu ile açıkça görülebilir. Bu tekniğin anlamı, bileşiklerin membran protein etkileşimlerini bloke etme veya etkinleştirme yeteneği için kolayca taranabilmesi nedeniyle ilaç geliştirmeye doğru uzanır. Bu yöntem, monotopik proteinin zarınıza bağlanması için en uygun koşullar hakkında bilgi sağlayabilse de, aynı zamanda protein nanodisk kompleksinin düşük çözünürlüklü bir yapısını da sağlar.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Biochemistry Sayı 121 negatif boyama protein kompleksi TEM lipoksijenazlar görselleştirme denatüre edici olmayan jel elektroforezi

Related Videos

Membran Proteinleri Konformasyonel Dynamics incelenmesi In situ Site Floresan Etiketleme

11:55

Membran Proteinleri Konformasyonel Dynamics incelenmesi In situ Site Floresan Etiketleme

Related Videos

15.6K Views

Elektron Cryo-tomografi ile Mitokondri ATP Sintazı dimerlerini Görselleştirme

10:39

Elektron Cryo-tomografi ile Mitokondri ATP Sintazı dimerlerini Görselleştirme

Related Videos

31.2K Views

Floresan Proteaz Koruma Kullanma Membran Protein topolojisini belirlenmesi (FPP)

08:14

Floresan Proteaz Koruma Kullanma Membran Protein topolojisini belirlenmesi (FPP)

Related Videos

18.4K Views

Flaş-ve-Freeze: Elektron Mikroskobu ile Membran Dinamikler Yakalama Yeni Bir Tekniği

10:01

Flaş-ve-Freeze: Elektron Mikroskobu ile Membran Dinamikler Yakalama Yeni Bir Tekniği

Related Videos

14.7K Views

Kırılan numune hazırlama için iletim elektron mikroskobu

09:04

Kırılan numune hazırlama için iletim elektron mikroskobu

Related Videos

20.8K Views

İfade ve insan Lipid duyarlı ba * kanal TRPC3 arınma için tek-parçacık Cryo-elektron mikroskobu ile yapısal kararlılık

08:27

İfade ve insan Lipid duyarlı ba * kanal TRPC3 arınma için tek-parçacık Cryo-elektron mikroskobu ile yapısal kararlılık

Related Videos

10K Views

Göreli ışık ve hacim elektron mikroskobu ile mitokondri ve endoplazmik reticulum görüntüleme

09:21

Göreli ışık ve hacim elektron mikroskobu ile mitokondri ve endoplazmik reticulum görüntüleme

Related Videos

14K Views

Ultrayapısal Olarak Korunmuş Hücrelerde Membran Protein Lokalizasyonunun Elektron Mikroskobu Analizi için CryoAPEX Yöntemi

11:45

Ultrayapısal Olarak Korunmuş Hücrelerde Membran Protein Lokalizasyonunun Elektron Mikroskobu Analizi için CryoAPEX Yöntemi

Related Videos

10.2K Views

Sağlam, fonksiyonel membran proteinlerine bağlanan nükleotidin gerçek zamanlı olarak ölçülmesi

08:33

Sağlam, fonksiyonel membran proteinlerine bağlanan nükleotidin gerçek zamanlı olarak ölçülmesi

Related Videos

2.3K Views

Membranla İlişkili Makromolekül Dinamiğini Karakterize Etmek için Kütleye Duyarlı Partikül İzleme

13:30

Membranla İlişkili Makromolekül Dinamiğini Karakterize Etmek için Kütleye Duyarlı Partikül İzleme

Related Videos

5K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code