İnsan Epitelyal Enteroid Modelinde Nekrotizan Enterokolit İndüksiyonu

İnsan ince bağırsak dokusundan türetilmiş kriptler elde edin - kök hücreler ve çeşitli epitel hücreleri içeren tübüler istilalar.

Bağırsak kriptlerini soğutulmuş bir bodrum matrisine ekleyin.

Bu karışımı çok kuyulu bir plakaya aktarın ve üç boyutlu bir kubbe oluşturun.

Büyüme ortamı ekleyin ve inkübe edin.

Kök hücreler kendi kendini organize eder, çoğalır ve enterosferler oluşturarak birden fazla bağırsak hücresi tipine farklılaşır.

Zamanla, enterosferler enteroidlere dönüşür – bağırsak kriptlerine benzeyen üç boyutlu kendi kendini yenileyen yapılar.

Enteroid içeren kuyucuğa lipopolisakkaritler veya bakteriyel bir endotoksin olan LPS ekleyin ve inkübe edin.

LPS molekülleri, enteroiddeki toll benzeri reseptöre bağlanarak bir pro-inflamatuar yanıt başlatır ve reaktif oksijen türlerinin birikmesine neden olur. Bu, apoptoza yol açan bir dizi olayı tetikler.

Sonuç olarak, enteroidin bütünlüğü tehlikeye girer, bu da LPS'nin lümene nüfuz etmesine yol açarak enflamatuar yanıtı daha da yoğunlaştırır.

Bu, prematüre bebeklerin bağırsaklarında ciddi bir iltihaplanma olan nekrotizan enterokolit gelişimini taklit eder.

Ameliyat odasında toplama sırasında, insan ince bağırsak dokusu örneğini soğu