JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 5:09 dk. • April 28th, 2025
Bir fare beyninden alınan hipokampal bir dilimi tampon içeren bir kuyuya yerleştirin. Dilim, sinapslar aracılığıyla iletişim kuran bir nöron ağı içerir.
Presinaptik nöron terminalleri, karakteristik transmembran taşıyıcılara sahip nörotransmitter dolu veziküller içerirken, postsinaptik terminaller, nörotransmitter reseptörlerini düzenleyen karakteristik iskele proteinlerine sahiptir. Her ikisi de sinaptik yapılar için anahtar belirteçler olarak hizmet eder.
Tamponu geçirgenliği bloke eden bir solüsyonla değiştirin ve hücresel zarları geçirgen hale getirmek ve spesifik olmayan bağlanma bölgelerini bloke etmek için çalkalama ile inkübe edin.
Presinaptik ve postsinaptik belirteçleri hedefleyen primer antikorları ekleyin ve bağlanmaya izin vermek için ajitasyon ile inkübe edin.
Dilimi yıkayın, primer antikorlara özgü florofor konjuge ikincil antikorları ekleyin ve karanlıkta çalkalama ile inkübe edin.
Dilimi yıkayın, ardından bir slayta monte edin.
Konfokal bir mikroskop kullanarak, ilgilenilen bölgeyi belirleyin ve sinapsları görselleştirmek için büyütün.
Floresan etiketli presinaptik ve postsinaptik belirteçleri tanımlamak ve sinapslardaki kolokalizasyonlarını değerlendirmek için görüntüle
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin