JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Sinirbilim
0 görüntülenme • 4:28 dk. • April 28th, 2025
İki fotonlu bir mikroskop altında aCSF içeren bir perfüzyon odasına bir fare beyin dilimi yerleştirin.
Fare, GFP'yi mikroglia cinsinden ifade etmek için genetik olarak tasarlanmıştır ve mikroglial hareket takibini mümkün kılar.
Dilimi bir tutucu ile sabitleyin.
Parlak alan aydınlatmasını kullanarak ilgilendiğiniz bölgeyi bulun.
Mikroglia'yı görselleştirmek için floresan aydınlatmaya geçin.
Bir mikropipeti test bileşiği ile doldurun, bir şırınga tutucusuna monte edin ve dilime değecek şekilde indirin.
Düşük enerjili yakın kızılötesi ışığı dokuya odaklayarak iki fotonlu görüntüleme modunu etkinleştirin.
Lazerin odak noktasında, iki foton enerjilerini GFP'yi uyarmak ve floresan yaymak için birleştirir.
Mikroglial süreçlere odaklanmak için birden fazla Z düzleminde görüntü yakalayın.
Temel aktiviteyi kaydedin, ardından bileşiği enjekte edin ve kayda devam edin.
Bileşik, mikroglial reseptörlere bağlanarak, mikroglial süreç uzantısını bileşik kaynağına doğru yönlendiren sinyal yollarını tetikler.
Hareketi izlemek için zaman içinde enjeksiyon bölgesinin yakınındaki floresan artışını izleyin.
Kayda başlamadan 30 dakika önce, doku dilimlerinin oksijenlenmesini ve canlılığını optimize etmek için peris
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin