Name: Farelerde Video-oculography (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-07-19T12:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 43 s
Description: Öğrenin farelerde video-okülografi yöntemiyle göz hareketlerini ölçme ve motor davranışların fizyolojisini inceleme. Bu teknik, serebellar ve vestibüler kökenli hastalıkları araştırmak için güçlü bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Biz nazik Sağlığı Araştırma ve Geliştirme için Hollanda Organizasyonu (MDJ, CDZ), Bilimsel Araştırma Hollanda Örgütü (CDZ), NeuroBasic (CDZ) teşekkür ederim, Beatrix Viyana (CDZ), SENSOPAC (CDZ), C7 (CDZ) ve Prinses mali destek için Avrupa Topluluğu CEREBNET (CDZ) programı.

1. Hazırlık Aşağıdaki deney Hayvan Deneyleri için Duch Etik Kurul uygun olarak yapılmıştır. <ol><li> Video oculography farelere hazırlanması. Bir fare göz hareketleri ölçmek için, fare kafası immobilize edilmesi gerekmektedir. Bu nedenle, bir kaide yapım fare kafatası (Şekil 1) üzerinde yapılmıştır. <ol><li> Ve bir gaz odası içindeki oksijen; bir karışımı izofluran (Rhodia Organique Fine Ltd, Fransa İsofluran% 1-1.5) tarafından fare uyuşturmak. Aşırı gaz atma edilir. Burun konisi ile anestezi koruyun. Bir ayak tutam ile anestezi derinliği onaylayın. </li><li> Bir anal thermosensor kullanımı ve bir ısıtma pedi (FHC, Bowdoinham, ME) ile 37 ° C de vücut ısısını korumak. </li><li> Bir göz merhemi (duratears, Alcon, Belçika) ile kaplayarak gözleri koruyun. Dorsal kranial kürk Tıraş ve bodur ve betadin bir rotasyon ile cerrahi alanı temizlemeke veya klorheksidin çözüm. </li><li> Kafatasının dorsal kranial yüzey için, bir orta çizgi kesi olun. Yüzey temiz ve kuru olun. </li><li> Bregmadan lambda kafatasının dorsal kranial yüzeyine; fosforik asit (Kerr, CA fosforik asit jel asitlenmesi% 37.5) bir damla uygulayın. 15 saniye sonra asitlenmesi çıkarın ve kranial yüzey yeniden tuzlu ve kuru temizleme yapın. </li><li> Bu kazınmış kranial yüzey Optibond&#39;un başbakanı damla (Kerr, CA) ve 30 saniye süreyle hava-kuru üstüne uygulayın. </li><li> Optibond&#39;un başbakan üstüne Optibond&#39;un yapıştırıcı (Kerr, CA) bir damla koyun ve 1 dakika (Maxima 480 görünür ışık kavurma ünitesi; Henry Schein, ABD) ışık ile tedavi. </li><li> Charisma kompozit (Heraeus Kulzer, Almanya) ince bir tabaka ile yapışkan tabaka kaplayın. Kompozit: İki bağlı fındık (3 mm çapında) Embed. Işık ile kompozit sonra Cure. Gerektiğinde, kompozit ilave kat uygulayın ve ışık ile onları tedavi. </li><li> Ilanpost-operatif analjezi bakanı buprenorfin (0.015 mg / kg, sc). Hayvan yaklaşık 5 dakika içinde kendi ayakları üzerinde tekrar edilmelidir. Fare cerrahisinden sonra, en azından 3 gün için oda sıcaklığında ev kafesinde kurtarmak için olanak sağlar. </li></ol></li><li> Fareler için video-oculography kurulumu (Şekil 2). <ol><li> Restrainer içinde fare yerleştirin ve iki vidayı (Şekil 1) restrainer başını düzeltmek. Fare bu işlem için narkoz gerekmez. Restraining süresi 1 saat / gün geçmemelidir. </li><li> Buna karşılık döner tabla (: 60 cm çaplı) üzerine monte edilmiş bir XY platform üzerinde fare baş ve vücut restrainer, monte edilir. XY platformu kullanarak fare kafası pikap merkezinin üzerinde yerleştirilebilir. Fare pitch, yaw ve roll eksenler üzerinde hareket ettirilebilir. Fare kafası İŞCAN syste tarafından üretilen göz görsel görüntüsünü kullanarak göz hizalayarak doğru pitch, yaw ve roll açısı yerleştirilirm. Alternatif olarak, kaidenin yapım bir stereotaksik çerçevesi 11 fare başına yerleştirilebilir. </li><li> Pikap bir servo kontrollü motor (Harmonik sürücü AG, Hollanda) ve pikap pozisyonuna bağlı pikap eksenine bağlı bir potansiyometre (Bourns inc., CA) tarafından izlenir. </li><li> Bir silindirik çevreleyen ekran (çap: 63 cm, yüksekliği: 35 cm) rastgele bir noktalı desen (her elemanın 2 °) ile pikap kapsar; Bu davulun aynı zamanda bir AC servo kontrollü motor (Harmonik sürücüsü AG, Hollanda) ile donatılmıştır . Silindirik ekran konumu kendi ekseni ve ekran bir halojen ışık (20 Watt) ile aydınlatılmış olabilir bağlı bir potansiyometre (Bourns inc., CA) tarafından izlenir. Çevreleyen ekran ve pikap iki bağımsız tahrik edilmektedir. </li><li> Pikap ve çevresindeki ekranın hareketi bir I / O arabirimini (CED sınırlı, Cambridge, İngiltere) bağlı bir bilgisayar tarafından kontrol edilir. Ta, I / O arayüzü ile sayısallaştırılmış ve bu bilgisayarda depolanan: ble ve çevresindeki ekran konumu sinyalleri (20 Hz cut-off frekans) filtrelenir. </li><li> Farenin gözü üç kızılötesi yayıcılar ile aydınlanıyor (600 mW, dağılma açısı: 7 °, tepe dalga boyu: 880 nm, RS bileşenleri, Hollanda). İki kızılötesi yayıcılar döner sabitlenir ve üçüncü bir emiter makinesi eklenir. Bu üçüncü verici kalibrasyon prosedürü sırasında ve göz hareketi kayıtları sırasında kullanılan bir referans kornea yansıması (CR), üretir. </li><li> Bir zoom lens (Zoom 6000, Navitar inc., NY) ile donatılmış bir kızılötesi CCD kamera pikap takılır ve pikap merkezinde fare kafası odaklanmıştır. Kamera kalibrasyon işlemi sırasında tam 20 ° üzerinde kilidi olabilir ve pikap ekseni etrafında yawed edilebilir. </li><li> Video sinyali bir göz takip sistemi (İŞCAN ETL-200, Burlington, MA) tarafından işlenir. İŞCAN sistemi algoritması kullanıröğrenci ve referans CR merkezleri izlemek için bir model geliştirilmiştir. Sistem 120 Hz örnekleme hızı yatay ve dikey yönde öğrenci ve referans CR izleyebilirsiniz. </li><li> Referans CR konumu, gözbebeği konumunda ve gözbebeği boyutuna sinyalleri I / O arayüzü ile sayısallaştırılmış ve tablo ve çevresindeki ekran konumu sinyalleriyle aynı dosyada saklanır. Video öğrenci takip sistemi yaklaşık 27 ms göz hareketi sinyalleri bir gecikme neden olur. </li></ol></li></ol> 2. Öğrenci-video izleme kullanma Göz Hareketleri Kalibre ve Ölçme Göz izleme sistemi bir ötelenme hareketi olarak öğrenci hareketi yakalar. Izlenen öğrencinin ötelenme hareketi göz dönme merkezi ve göz (kornea eğriliğinin yani merkezi) anatomik merkezi ve göz küresinin açısal rotasyon nedeniyle bir dönme bileşeni arasındaki eksenel farkı nedeniyle öteleme bileşeni içermektedir. Subtract tarafındanöğrenci hareketi / pozisyondan referans CR ing, istenmeyen translasyonel bileşeni yalnızca gözün rotasyon nedeniyle bir ötelenme hareketi sonucu, sinyal elimine edilir. Genellikle çok küçük olmasına rağmen, bu çıkarma da baş ve kamera arasında çevirileri ortadan kaldırır. Kalıntı izole ötelenme hareketi aşağıdaki kalibrasyon yöntemi 8,12 tarafından gözün açısal dönüş dönüştürülür. Bu kalibrasyon herhangi bir göz hareketi deney öncesinde yapıldı. <ol><li> Öğrencinin video görüntüsü monitörün ortasında yer alan ve referans CR temsil tercihen doğrudan öğrencinin yukarıda göz dikey orta hat üzerinde yer aldığını, bu gibi bir şekilde kameraya fare baş pozisyonu ayarlayın. Nedeniyle kamera / tablo ekseni üzerinde kornea eğrilik merkezi yerleştirilmesiyle gerçekleştirilebilir açısal makinesi rotasyonlar, referans CR hareketleri en aza indirir. &lt;/ Li&gt; <li> 10 ° (yani 20 derece tepeden tepeye) pikap dikey ekseni etrafında + / - ile kamera birkaç kez döndürün. (Öğrenci dönme yarıçapı hesaplamak için makinesi dönme uç konum kaydedilmiş paletli pupil (P) ve referans CR pozisyonları kullanmak Rp, Rp = Δ / sin (20 °); Δ = (CR -P)) Şekil 3A bkz. </li><li> Rp değeri gözbebeği boyutuna bağlıdır olması nedeniyle, bir öğrenci boyutu düzeltme 12 (Şekil 3B) uygulanması gerekmektedir. Rp ilişki ve bir Rp düzeltme eğrisi (Şekil 3D) compose - öğrenci boyutunu belirlemek amacıyla; (Şekil 3C yani gözbebeği boyutu manipüle) çeşitli aydınlatma koşullarında 2.2 birçok kez yineleyin. Rp değeri ayrıca dikey göz konumuna bağlıdır. Deney dikey göz hareketlerinin neden olacak zaman sonra dikey göz pozisyonlar için kalibrasyon bir düzeltme yüksek tavsiye edilir13. </li><li> Referans CR pozisyonu, P konum ve boyut ölçümü ile pupil gözün (E) açısal pozisyonunu belirlemek. Referans CR konumu öteleme ücretsiz gözbebeği konumunda üreten gözbebeği konumunda çıkarılır. Pupilla büyüklüğü ölçülerek Rp değeri Rp düzeltme eğrisi elde edilebilir ve E aşağıdaki formül kullanılarak hesaplanabilir E arcsin = {(Δ1) / Rp} (Şekil 4A; nerede Δ1 = (P 2 P-1) ve P 1 ve P 2) referans CR çıkarılması ile düzeltilir. </li><li> Döner tabla ve / veya çevre ekranı rotasyonlar büyük bir repertuarı artık okülomotor sistemi uyarmak için kullanılabilir. Koyu video oculography gerçekleştirmek için, fare göz dilatasyon sınırlamak ve bu koşullar altında pupil izlenmesine izin bir miyotik ilaç ile ön tedavi edilmesi gerekmektedir. Deneylerde, biz pilokarpin (% 4, Laboratuarlar Chauvin, Fransa) dilatasyon sınırlamak için kullanabileceğinizkaranlık. </li></ol> 3. Veri Analizi <ol><li> Göz pozisyonları, masa pozisyonları ve çevresindeki ekran konumu, (2.4 Şekil 4B ve formül bakınız) açısal konumlar dönüştürülür. Göz sinyalleri öğrenci izleme sisteminin görüntü işleme göre 27 ms indüklenen onların gecikme için düzeltilmiştir. </li><li> Göz, masa ve çevresindeki ekranın Açısal pozisyonları farklılaşmış ve 20 Hz frekanslı kapalı bir kesim kullanarak Butterworth alçak geçiren filtre ile filtrelenir. </li><li> Sakkadlar 40 ° / s değerinde bir algılama eşik kullanılarak göz hızı sinyali kaldırılır. Veri algılama eşiği geçtikten sonra 20 ms için 80 ms önce ve yukarı başlayarak kaldırılır. </li><li> Tablo, çevredeki ekran ve göz hız sinyalleri parkuru (Şekil 4C) her çevrimi kullanılarak ortalaması alınır. </li><li> Ortalamalı sinyalleri uygun bir fonksiyon ile donatılmıştır. Genel olarak, bir sinüsoidal hızı uyarı kullanılan ve ortalaması alınırdöngüleri sinüs veya cosinus fonksiyonu (Şekil 4C) ile donatılmıştır. Aşaması göz hızı ve uyaranın hızı arasındaki fark (derece) olarak hesaplanabilir oysa Sonra, kazanç, uyaran hızı göz hızı oranı olarak hesaplanabilir. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar Yanı sıra, motor öğrenme (VOR adaptasyonu; okr adaptasyon) Video-oculography çeşitli okülomotor performansları formları (:;:; VOR görsel açıdan geliştirilmiş vestibülookuler refleks VVOR vestibülookuler refleks okr yani optokinetik refleks) araştırmak için kullanılabilir. Okr görsel geribildirim kullanılarak düşük frekans bozuklukları telafi eder. Okr iyi aydınlatılmış çevreleyen ekran (Film 1) çevirerek bağlı olabilir. 1.6 derecelik bir genlik ile 0.2 -1.0 Hz frekans aralığında çevreleyen ekran döndürme optokinetik sistemi düşük frekans aralığı tha daha verimli bir telafi mekanizması nasıl gösterirn, yüksek frekans aralığında (Şekil 5A). VOR vestibüler organları gelen sinyalleri kullanarak yüksek frekanslı baş hareketlerini telafi eder. VOR (Movie 2) karanlıkta hayvan (yani pikap) çevirerek bağlı olabilir. 1.6 derecelik bir genlik ile 0.2 -1.0 Hz frekans aralığında pikap Döner (Şekil 5A) vestibülookuler sistemi düşük frekans aralığında daha yüksek frekans aralığında telafi göz hareketleri üreten de daha verimli nasıl gösterir . Konserde optokinetik ve vestibülookuler sistemi hareket, görüntü kafa hareketleri geniş bir aralıkta retina üzerine stabilize edilebilir zaman. Çevreleyen ekranı iyi aydınlatılmış iken, 1.6 ° &#39;lik bir genlik ile 0.2 -1.0 Hz frekans aralığında pikap Döner (Movie 3) göz tüm frekans aralığı içinde &quot;yüksek kazanç&quot; telafi edici hareketleri (Şekil 5A üretir nasıl gösterir ). Tüm bu artışı ve pHcinsiyet 14 ve zorlanma 15,16,17 farklılıklar rapor edilmiştir ancak ase değerleri, fareler için tipiktir. Pikap ve çevresindeki ekran üzerinde bağımsız kontrol bize görsel ve vestibüler bilgi arasında bir uyumsuzluk ile farelere karşı karşıya sağlar. Uyumsuz görsel ve vestibüler bilgi uzun vadeli ve düzgün maruz kaldıktan sonra, farenin VOR değişmiş görsel girdi (; Film 4 VOR adaptasyon) telafi etmek için değişecektir. Çevredeki ekran (1 Hz, 1.6 °) ile (yani 180 °) faz pikap dışarı Döner VOR kazanç (Şekil 5B) artırır. VOR kazancı maksimum değişim, bir deneme öğrenme paradigması kullanırken, genellikle 30 dakika sonra ulaşılır. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3971/3971fig1.jpg" /> Şekil 1. Fare baş ve vücut restrainer şematik çizimi. Farenin gövdesi kullanılarak kısıtlanır35 mm&#39;lik bir çapa sahip bir plastik silindirik tüp. Fare kafası iki vida ile demir çubuğuna fare kaide bağlanarak immobilize edilir. Demir çubuk yürüme sırasında normal pitch farenin kafasının bulunduğu için, 30 derecelik bir açı yapar. * Iki fındık içeren kaidenin üst görünümü. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3971/3971fig2.jpg" /> Şekil 2. Fare video oculography kurulum şematik çizimi. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3971/3971fig3.jpg" /> Şekil 3. Video öğrenci izleme sisteminin kalibrasyon. 10 ° (yani zirveye 20 derecelik tepe) pikap dikey eksen etrafında - A) kamera + / döndürülebilir birkaç kez. Paletli pupil (P) ve makinesi dönme uç konum kaydedilmiş referans yansıma kornea (CR) pupil dönme yarıçapı hesaplamak için kullanılmıştır(Rp). B) pupil çapının yarıçapı pupillanın büyüklüğüne bağlıdır. C) Örnek (iki piksel (piksel cinsinden)) Kalibrasyon işlemi sırasında öğrenci pozisyonuna pupilla büyüklüğünün etkisini gösteren. D) Rp ve pupil çapı arasındaki ilişki tek bir fare cinsinden ölçülür. On üç farklı pupil çapı çevredeki ışığın yoğunluğunu değiştirerek tarafından gerçekleştirilmiştir. <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3971/3971fig4.jpg" /> Şekil 4. Ölçme ve video öğrenci-izleme ile göz hareketlerini analiz. CR pozisyon için düzeltilmiş); A) açısal gözbebeği konumunda öğrenci yarıçapı (Rp) ve Öğrenci pozisyonu (P hesaplanır. B) telafi edici göz hareketi örneği vestibüler ve görsel sistemi (görsel gelişmiş VOR) uyararak indüklenen. Çevreleyen ekranı iyi aydınlatılmış iken pikap, 1.6 ° &#39;lik bir genlik ile 0.6 Hz&#39;de döndürülmüş sinüsoidal oldu. C) kayıt Analizleri) B işleminde gösterildiği gibi. Grafik turntable (mavi) ve öğrenci (kırmızı) ortalama hız iz gösterir. Bu ortalama izleri sinüzoidal bir fonksiyonu (siyah) ile donatılmıştı. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/3971/3971fig5.jpg" /> Şekil 5. Performans ve bir C57Bl6 fare ölçülen okülomotor sistemi öğrenme. (Vestibülookuler refleks karanlıkta fare döndürerek, okr, üst paneller): VOR, orta paneller) ve (görsel ışık fare döndürerek A) Göz hareketleri çevredeki ekran döndürme (optokinetik refleks tarafından oluşturulur artırılmış vestibülookuler refleks: 0.2 1.6 ° &#39;lik bir genlik az 1.0 Hz arasında değişen frekansları ile VVOR, alt panel). Refleksinin kazancı uyaran hızına göz hızı oranı (sol paneller) ve refleksinin faz olarak hesaplanmıştır göz hızı ve uyaran hızı (sağ paneller) arasındaki faz farkı ile hesaplanmıştır. B) Motor öğrenme ile gerçekleştirilmiştir<html> bağdaşık aşamalı eğitim paradigmasının dışında bir kullanarak VOR artmaktadır. Fare fare rotasyon kırk dakika boyunca çevredeki ekran (1.0 Hz, 1.6 ° dönen iki) bu rotasyon ile faz (180 °) dışındaydı hangi bir visuovestibular eğitim paradigma tabi oldu. Her 10 dakikalık VOR (1.0 Hz, 1.6 °) test edilmiştir. Bu fare faz eğitim dışarı VOR kazancı arttı. Film 1. Farelerde okr neden paradigma gösteren animasyon <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3971/3971movie1.mov" target="_blank">filmi görmek için buraya tıklayın</a> . Film 2. Farelerde VOR neden paradigma gösteren animasyon. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3971/3971movie2.mov" target="_blank">filmi görmek için buraya tıklayın</a> . Farelerde VVOR neden paradigma gösteren Movie 3. Animasyon..com/files/ftp_upload/3971/3971movie3.mov &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; filmi görmek için buraya tıklayın. Film 4. Farelerde VOR adaptasyon (artış) neden aşamalı eğitim paradigmasının visuovestibular dışarı gösteren animasyon. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/3971/3971movie4.mov" target="_blank">filmi görmek için buraya tıklayın</a> .

<ol><li>Collewijn, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optokinetic+and+vestibulo-ocular+reflexes+in+dark-reared+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Optokinetic and vestibulo-ocular reflexes in dark-reared rabbits.</a> Exp. Brain Res. 27, 287(1977).</li>
<li>Collewijn, H. E. ye- <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((and+head+movements+in+freely+moving+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Physiol%22%5BJournal%5D)">and head movements in freely moving rabbits.</a> J. Physiol. 266, 471(1977).</li>
<li>Collewijn, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCollewijn%2C+H+%22The+oculomotor+system+of+the+rabbit+and+its+plasticity%22">The oculomotor system of the rabbit and its plasticity</a>. , 1st edition, Springer-Verlag. Berlin. (1981).</li>
<li>Fuller, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linkage+of+eye+and+head+movements+in+the+alert+rabbit%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Linkage of eye and head movements in the alert rabbit.</a> Brain Res. 194, 219(1980).</li>
<li>Buttner-Ennever, J. A., Horn, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomical+substrates+of+oculomotor+control%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Anatomical substrates of oculomotor control.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 7, 872(1997).</li>
<li>Robinson, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+control+systems+analysis+in+the+neurophysiology+of+eye+movements%5BTitle%5D)+AND+%22Annu.+Rev.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of control systems analysis in the neurophysiology of eye movements.</a> Annu. Rev. Neurosci. 4, 463(1981).</li>
<li>Robinson, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+purpose+of+eye+movements%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">The purpose of eye movements.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 17, 835(1978).</li>
<li>Stahl, J. S., van Alphen, A. M., De Zeeuw, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+video+and+magnetic+search+coil+recordings+of+mouse+eye+movements%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">A comparison of video and magnetic search coil recordings of mouse eye movements.</a> J. Neurosci. Methods. 99, 101(2000).</li>
<li>De Zeeuw, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+a+protein+kinase+C+inhibitor+in+Purkinje+cells+blocks+cerebellar+LTD+and+adaptation+of+the+vestibulo-ocular+reflex%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Expression of a protein kinase C inhibitor in Purkinje cells blocks cerebellar LTD and adaptation of the vestibulo-ocular reflex.</a> Neuron. 20, 495(1998).</li>
<li>Picciotto, M. R., Wickman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+knockout+and+transgenic+mice+to+study+neurophysiology+and+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Using knockout and transgenic mice to study neurophysiology and behavior.</a> Physiol. Rev. 78, 1131(1998).</li>
<li>Oommen, B. S., Stahl, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eye+orientation+during+static+tilts+and+its+relationship+to+spontaneous+head+pitch+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Brain.+Res%22%5BJournal%5D)">Eye orientation during static tilts and its relationship to spontaneous head pitch in the laboratory mouse.</a> Brain. Res. 1193, 57(2008).</li>
<li>Stahl, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+Channelopathy+Mutants+and+Their+Role+in+Ocular+Motor%5BTitle%5D)+AND+%22Research.+Ann.+N.Y.+Acad.+Sci%22%5BJournal%5D)">Calcium Channelopathy Mutants and Their Role in Ocular Motor.</a> Research. Ann. N.Y. Acad. Sci. 956, 64(2002).</li>
<li>Stahl, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eye+movements+of+the+murine+P%2FQ+calcium+channel+mutant+tottering%2C+and+the+impact+of+aging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Eye movements of the murine P/Q calcium channel mutant tottering, and the impact of aging.</a> J. Neurophysiol. 95, 1588(2006).</li>
<li>Andreescu, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estradiol+improves+cerebellar+memory+formation+by+activating+estrogen+receptor+beta%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Estradiol improves cerebellar memory formation by activating estrogen receptor beta.</a> Journal of Neuroscience. 27, 10832(2007).</li>
<li>Katoh, A., Kitazawa, H., Itohara, S., Nagao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+characteristics+and+adaptability+of+mouse+vestibulo-ocular+and+optokinetic+response+eye+movements+and+the+role+of+the+flocculo-olivary+system+revealed+by+chemical+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Dynamic characteristics and adaptability of mouse vestibulo-ocular and optokinetic response eye movements and the role of the flocculo-olivary system revealed by chemical lesions.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95, 7705(1998).</li>
<li>Stahl, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+eye+movements+to+assess+brain+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">Using eye movements to assess brain function in mice.</a> Vision Res. 44, 3401(2004).</li>
<li>Koekkoek, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gain+adaptation+and+phase+dynamics+of+compensatory+eye+movements+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Funct%22%5BJournal%5D)">Gain adaptation and phase dynamics of compensatory eye movements in mice.</a> Genes Funct. 1, 175(1997).</li>
<li>Faulstich, B. M., Onori, K. A., du Lac, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+plasticity+and+development+of+mouse+optokinetic+and+vestibulo-ocular+reflexes+suggests+differential+gain+control+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">Comparison of plasticity and development of mouse optokinetic and vestibulo-ocular reflexes suggests differential gain control mechanisms.</a> Vision Res. 44, 3419(2004).</li>
<li>Koekkoek, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gain+adaptation+and+phase+dynamics+of+compensatory+eye+movements+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Funct%22%5BJournal%5D)">Gain adaptation and phase dynamics of compensatory eye movements in mice.</a> Genes Funct. 1, 175(1997).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Farelerde yüksek kaliteli video göz hareketleri kayıtları elde etmek için çeşitli gereksinimler gereklidir. Kalibrasyon işlemi, yukarıda sözü edilen standart madde olarak yapılması gerekmektedir. Örneğin merkez dışı kalibrasyon, pupil kalibrasyon işlemi sırasında referans CR ile dikey orta hat üzerinde konumlandırılmış değilken, RP küçümsenmesi ve göz hareketi dolayısıyla bir abartılmasını neden olacaktır. Çok kararlı öğrencinin boy göstermektedir çalışmalarda çok nadir görülmesi nedeniyle Ayrıca, biz, kalibrasyon prosedürü 12 öğrenci boyutu düzeltme yöntemi entegre öneririz. Yargılama sırasında bile küçük bir stresör zaten büyük ölçüde pupil çapı değiştirebilir. Bir göz hareketi Deney tasarlama, aşağıdaki faktörler de göz hareketi yanıtı etkilediği bilinen çünkü hesaba ya da kontrol edilmesi gerekir: 13,18 yaş, cinsiyet 14 ve gerginlik 15,16, 19. Pupil ve iris arasındaki kontrast BALB / c fare gibi, çok düşük olduğunda öğrencinin algılama ve izleme imkansız olduğundan Ayrıca, deneysel hayvan pigmente iris tabakası olmalıdır. Son derece sinirli ve endişeli hayvanların deneysel kurulum ve ölçülü duruma alışmak için, önce deneme, eğitim görmem gerekir. Bu hayvanın gözlerin az kapanma ya da yarı-kapatılması işlemi sonucu işleme ve deney sırasında göz sıvı kuşak önler, ve bunun sonucu daha iyi bir pupil izleme gerçekleştirilir. Son olarak, edinme ve verilerin analiz hayvan başına iki ile üç saat gerektirir. Bu nedenle, göz hareketlerinin kayıtları olasılıkla seçilen farelere uygulanan ve yüksek verimli tarama testi olarak kullanıma uygun değildir belirli bir prosedür kalacaktır.

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td></tr><tr><td> İsofluran </td><td> Rhodia Organique Güzel LTD </td><td></td></tr><tr><td> Isıtma pedi </td><td> FHC </td><td> 40-90-8 </td></tr><tr><td> Duratears </td><td> Alcon </td><td></td></tr><tr><td> Fosforik asit jel </td><td> Kerr </td><td> 31297 </td></tr><tr><td> Optibond&#39;un başbakan </td><td> Kerr </td><td> 35369 </td></tr><tr><td> Optibond&#39;un yapıştırıcı </td><td> Kerr </td><td> 35369 </td></tr><tr><td> Charisma kompozit </td><td> Heraeus Kulzer </td><td></td></tr><tr><td> Maxima 480 ışık kavurma ünitesi </td><td> Henry Schein </td><td></td></tr><tr><td> AC servo kontrollü motor </td><td> Harmonik sürücü AG </td><td></td></tr><tr><td> Silindirindric ekranı </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Halojen ışık (20 W) </td><td> RS bileşenler </td><td></td></tr><tr><td> Potansiyometreler (hassas) </td><td> Bourns inc. </td><td> 6574 </td></tr><tr><td> Güç 1401 (I / O arabirimi) </td><td> CED sınırlı </td><td></td></tr><tr><td> Bilgisayarlar </td><td> Vadi </td><td></td></tr><tr><td> Kızılötesi emmitters </td><td> RS bileşenler </td><td> 195-451 </td></tr><tr><td> ETL-200 </td><td> İŞCAN </td><td></td></tr><tr><td> Zoom lens (zoom 6000) </td><td> Navitar inc. </td><td></td></tr><tr><td> Pilocarpinenitrate (minims) </td><td> Laboratoire Chauvin </td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde video-oculography

Video-oculography in Mice

Göz hareketleri bir nesne veya izlemek için hareketi sırasında retina üzerine bir görüntü stabilize edilmesi için son derece önemlidir. Fare gibi bir fovea olmadan Hayvanlar, bir hedef üzerine gözlerini kilitlemek için sınırlı bir kapasiteye sahip. Bu hedefe yönelik göz hareketlerinin aksine, telafi edici göz göz hareketleri kolayca afoveate hayvanlar 1,2,3,4 CERVARIX edilir. Telafi göz hareketleri göz kasları sürücü olacak bir komut sinyali haline vestibüler ve optokinetik bilgi işlem tarafından oluşturulur. Vestibüler ve optokinetik bilgi işleme okülomotor sistemindeki bir açığın özellikleri sağlayan, ayrı ayrı ve birlikte incelenebilir. Okülomotor sistemi optokinetik refleks (okr), vestibülo-oküler refleks (VOR) veya görsel olarak geliştirilmiş vestibülookuler refleks (VVOR) çağrıştıran test edilebilir. VOR bir refleks göz m iken okr, retina üzerine &quot;tam saha&quot; görüntü hareketleri telafi eden bir refleks hareketidirbaş hareketleri dengeler ovement. VVOR uygun kompanzasyon yapmak için de optokinetik bilgi olarak hem de vestibüler kullanan bir refleks göz hareketi olduğunu. Serebellum izler ve bu telafi göz hareketleri ayarlanabilmesi mümkündür. Bu nedenle, oculography gibi patolojik durumlar (vestibüler, oküler ve / veya serebellar kökenli fe) altında normal şartlarda beyin-davranış ilişkisini araştırmak için çok güçlü bir araçtır. Okülomotor sistemi test, davranışsal bir paradigma olarak, çeşitli nedenlerden dolayı ilginçtir. Birincisi, okülomotor sistemi iyi anlaşılmış sinir sistemi 5&#39;tir. İkinci olarak, okülomotor sisteminin göreceli basit 6 olduğu; mümkün göz hareketi miktarı, bilyalı-in-soket mimarisi (&quot;tek bir ortak&quot;) ve ekstra-oküler kas 7 üç çifti tarafından sınırlandırılır. Üçüncü olarak, çıkış davranışsal ve duyusal giriş kolayca niceliksel için, bu bir çok erişim sistemi kılan, ölçülebiliranalizi 8. Birçok davranış testleri nicel gücü yüksek seviyede yoksundur. Ve nihayet, okülomotor sistemin hem performansı hem de plastisite izin test edilebilir öğrenme ve bellek süreçleri 9 araştırma. Genetiği değiştirilmiş fareler günümüzde yaygın olarak bulunmaktadır ve bunlar çeşitli düzeylerde 10 beyin fonksiyonlarının keşfi için önemli bir kaynak oluşturmaktadır. Ek olarak, insan hastalığı modelleri taklit etmek olarak kullanılabilir. Normal üzerinde oculography uygulanması farmakolojik tedavi edilen ya da genetiği değiştirilmiş farelerde normal ve patolojik şartlarda motor hareketlerin altında yatan fizyolojisi keşfetmek için güçlü bir araştırma aracı. Burada, fareler 8 video-oculography ölçmek nasıl açıklar.

Video-oculography çok kantitatif oküler motor performansını incelemek için yöntem yanı sıra motor öğrenmedir. Burada, farelerde video oculography ölçmek nasıl açıklar. Normal, bu tekniği uygulamak-farmakolojik tedavi ya da genetik olarak değiştirilmiş fareler motoru davranışların altında yatan fizyolojik keşfetmek için güçlü bir araştırma aracı.

Farelerde Video-oculography

Göz hareketleri, bir nesneyi takip etmek veya hareket sırasında retinadaki görüntüyü sabitlemek için oldukça önemlidir. Foveası olmayan hayvanlar, örneğin ...

Bu prosedürün genel amacı, farelerde video okulografisi gerçekleştirmektir. Bu işlem, öncelikle farenin kafatasına, başın özel bir baş sabitleyicide sabitlenmesini sağlayan bir pedestal yapısının yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. İkinci adım ise farenin video okul setup'ına yerleştirilmesi ve video pupil izleme sisteminin kalibre edilmesidir.Ardından, vestibüler ve optik kinetik stimülasyonlardan oluşan geniş bir repertuvar kullanılarak okülomotor sistem aktive edilirken göz hareketleri kaydedilir. Son adım ise bu göz hareketlerini analiz etmektir. Nihayetinde, normal, farmakolojik olarak tedavi edilmiş veya genetik olarak modifiye edilmiş farelerdeki video okülografisi, motor davranışların fizyolojisini araştırmak için kullanılabilir.Bu yöntem oküler motor sistem hakkında bilgi sağlayabilse de, insan patolojilerini taklit eden fare mutantları kullanılarak serebellar vestibüler veya oküler kökenli hastalıkların incelenmesi için de uygulanabilir. Bu prosedüre başlamak için, fareyi izofluran ve oksijen karışımı içeren bir gaz haznesinde anestezi altına alın. Ardından, gazı bir maske aracılığıyla vererek anesteziyi sürdürün.Ardından, farenin vücut sıcaklığını 37 °C'de tutmak için bir ısıtma pedi ve anal termosensör kullanın. Sonrasında, gözlerin kurumasını önlemek için göz pomadı uygulayın, dorsal kranial tüyleri tıraş edin ve cerrahi alanı temizleyin. Daha sonra, kafatasının dorsal kranial yüzeyini açığa çıkarmak için orta hatta bir insizyon yapın, yüzeyi temizleyin ve kurulayın.Ardından, bgma'dan Lambda'ya bir damla fosforik asit uygulayın. 15 saniye sonra asidi uzaklaştırın, ardından kranial yüzeyi salin ile temizleyin ve tekrar kurulayın. Aşındırılmış kranial yüzeyin üst kısmına bir damla opti bond prime uygulayın ve hava ile kurutun.30 saniye boyunca kurulayın. Ardından, opti bond prime üzerine bir damla opti bond yapıştırıcı ekleyin. UV ışığı ile bir dakika boyunca kürüleyin.Ardından, adezif tabakayı ince bir charisma kompozit tabakasıyla kaplayın. Mıknatıs vida deliği ve tutunma bölgeleri içeren konnektör kompozitin içine gömülür. Daha sonra kompoziti UV ışığı ile sertleştirin.Gerekirse, ek kompozit katmanları uygulayın ve bunları ışıkla kürleyin. Cerrahi işlemden sonra farenin iyileşmesi için en az üç gün bekleyin. Bir sonraki adım, fareyi sabitleyiciye yerleştirmek ve başını mıknatıs ve bir vida ile sabitleyiciye sabitlemek, ardından fare başı ve vücut sabitleyicisini bir XY platformuna monte etmektir.XY platformunu kullanarak, farenin başını döner tablanın merkezinin üzerine, farenin ya yunuslama (pitch) ve roll eksenleri üzerinde hareket ettirilebileceği şekilde yerleştirin. Ardından, göz tarama sistemi tarafından oluşturulan gözün görsel görüntüsünü kullanarak gözü hizalayıp, başı doğru yunuslama ya ve roll açısına getirin. Artık döner tabla, AC servo kontrollü bir motora bağlanmıştır.Döner tablanın konumu, döner tabla eksenine bağlı bir potansiyometre ile izlenir. Döner tabla, rastgele nokta desenine sahip, aynı zamanda AC servo kontrollü bir motora sahip olan silindirik bir çevreleme ekranı ile kaplıdır. Silindirik ekranın konumu, kendi eksenine bağlı bir potansiyometre ile izlenir.Ekran, bir halojen ışık ile aydınlatılabilir. Döner tablanın ve onu çevreleyen ekranın hareketi, bir giriş çıkış arayüzüne bağlı bir bilgisayar tarafından kontrol edilir. Döner tabla ve çevreleyen ekran konum sinyalleri, giriş çıkış arayüzü tarafından dijitalleştirilen 20 hertz kesim frekansıyla filtrelenir ve bu bilgisayarda saklanır.Fare gözü, üç kızılötesi yayıcı ile aydınlatılır. Bunlardan ikisi döner tablaya sabitlenmiş, üçüncüsü ise kameraya takılmıştır. Bu üçüncü yayıcı, kalibrasyon prosedürü ve göz hareketi kayıtları sırasında kullanılan referans bir korneal yansıma oluşturur.Zoom lensle donatılmış bir kızılötesi CCD kamera, döner tablaya monte edilmiştir ve döner tablanın merkezinde bulunan fare kafasına odaklanmıştır. Kamera kilidi açılarak döner tabla ekseni üzerinde tam olarak 20 derecelik bir açıyla hareket ettirilebilir.Kalibrasyon prosedürü sırasında, video sinyali; pupillayı ve referans kornea yansımasını yatay ve dikey yönlerde 120 hertz örnekleme hızında takip edebilen bir göz izleme sistemi tarafından işlenir. Ardından referans kornea referans pozisyonu, pupilla pozisyonu ve pupilla boyutu sinyalleri, giriş çıkış arayüzü tarafından dijitalleştirilir; göz hareketlerini kalibre etmek için tablo ve çevreleyen ekran pozisyon sinyalleriyle aynı dosyaya kaydedilir, farenin baş pozisyonu kameraya göre, pupillanın video görüntüsü monitörün ortasında ve referans kornea referansının temsili gözün dikey orta hattında, doğrudan pupillanın üzerinde yer alacak şekilde ayarlanır.Ardından, kamerayı birkaç kez 20 derecelik tepe açılarıyla hareket ettirin. Tepe noktaları döner tablanın dikey ekseni etrafında olsun. Göz bebeğinin dönme yarıçapını hesaplamak için kameranın uç konumlarda kaydedilmiş takip edilen pupil ve referans kornea konumlarını kullanın.Pupil boyutu ile pupil rotasyonu arasındaki ilişkiyi belirlemek için bu adımları çeşitli aydınlatma koşulları altında birçok kez tekrarlayın. Ardından bir pupil rotasyon düzeltme eğrisi oluşturun. Şimdi, referans kornea referans pozisyonunu, pupil pozisyonunu ve pupil boyutunu ölçerek gözün açısal konumunu hesaplayın.Pupil rotasyon değeri, pupilin rotasyon düzeltme eğrisinden çıkarılabilir ve gözün açısal pozisyonu aşağıdaki formül kullanılarak hesaplanabilir. VVOR göz hareketi deneyi burada gösterilmiştir. Şimdi göz pozisyonlarını, tablo pozisyonlarını ve çevre ekran pozisyonlarını açısal pozisyonlara dönüştürün.Ardından, göz tablosunun ve çevreleyen ekranın açısal konumlarını türevle ve bir Butterworth Alçak Geçiren filtre ile filtrele. 20 hertz kesme frekansı kullanarak, saniyede 40 derece olan bir tespit eşiği ile göz hız sinyalindeki sarsıntıları gider. Daha sonra, deneydeki her bir bireysel döngüyü kullanarak tablo ve göz hızı sinyallerinin ortalamasını al ve ortalama sinyalleri uygun bir fonksiyonla uydur.Genel olarak, sinüzoidal bir hız stimülasyonu kullanılır ve ortalama döngüler bir sinüs veya kosinüs fonksiyonu ile uydurulur. Bu video, çevredeki ekranın 0,2 ile bir hertz arasındaki frekans aralığında 1,6 derecelik bir genlikle döndürülerek optokinetik refleksi tetiklemesiyle göz hareketlerinin nasıl oluşturulduğunu göstermektedir. Farelerin optokinetik sisteminin, düşük frekans aralığında yüksek frekans aralığına göre daha verimli olduğu görülmektedir.Göz hareketlerinin nasıl oluştuğunu gösteren bir başka video burada yer almaktadır. Fareyi karanlıkta döndürerek vestibüler oküler refleksi tetiklemek için, döner tabla 0,2 ile 1 hertz arasındaki bir frekans aralığında ve 1,6 derecelik bir genlikte döndürülmüştür. Farenin vestibüler oküler sisteminin, yüksek frekans aralığında düşük frekans aralığına göre daha verimli olduğu gösterilmiştir.Burada, çevredeki ekran iyi şekilde aydınlatılmışken, döner tablanın 0,2 ile 1 hertz arasındaki bir frekans aralığında 1,6 derecelik bir genlikle döndürülerek ışık altında farenin döndürülmesiyle, görsel olarak güçlendirilmiş vestibüler oküler refleksin nasıl oluşturulduğuna dair başka bir video gösterilmektedir; burada farenin tüm frekans aralığı boyunca etkili telafi edici göz hareketleri oluşturduğu görülmektedir. Ve bu video, vestibüler oküler refleksin adaptif olarak artırılmasıyla motor öğrenmenin nasıl gerçekleştirildiğini göstermektedir. Faz dışı bir eğitim paradigması kullanılarak, döner tablanın çevredeki ekrana faz dışı şekilde döndürülmesi, bu farenin VOR kazancını artırmaktadır.Bu videoyu izledikten sonra, farelerde video oküler muayenesinin nasıl yapılacağı konusunda iyi bir bilgiye sahip olmalısınız.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Bu video, transgenik fare embriyolarından alınan okülomotor dilimlerin ex vivo kültürünü ve görüntülemesini göstermektedir. Embriyolar izole edilir ve agaroza gömülür. Bir vibratom kullanılarak, okülomotor çekirdekleri ve gözleri içeren dilimler elde edilir. Dilimler kültürde tutulur ve bir floresan mikroskobu kullanılarak görüntülenir.

Transgenik Fare Embriyolarından Okülomotor Kesitlerin Ex Vivo Kültürü ve Görüntülenmesi

Kaynak: Wang, Z.,  et al. Transpupiller İki Fotonlu Fare Retinasının İn Vivo Görüntülemesi.  J. Vis. Uzm. (2021). Bu video, iki foton mikroskobu kullanılarak in vivo retinal görüntüleme için bir tekniği göstermektedir. Anestezi uygulanmış fareler, başlarını sabitleyerek, göz kayganlaştırıcı uygulayarak ve gözün üzerine bir lamel yerleştirerek görüntülemeye hazırlanır. Floresan proteinleri eksprese eden retinal ganglion hücreleri (RGC'ler) ilk olarak hizalama için epifloresan kullanılarak...

Fare Retinasının İki Fotonlu İn Vivo Görüntülemesi

Kaynak: Bosco, A.,  et al.  Nörodejenerasyon Sırasında Retinal Mikroglial Aktivasyonun İn Vivo Dinamiği: Fare Glokomunda Konfokal Oftalmoskopik Görüntüleme ve Hücre Morfometrisi. J. Vis. Uzm. (2015) Bu video, bir fare glokom modelinde retinal mikroglianın in vivo görüntülemesini göstermektedir. Floresan protein eksprese eden retinal mikrogliaya sahip transgenik bir fare, bir oftalmoskop altına yerleştirilir. Kızılötesi aydınlatma, optik sinir başını (ONH) bulmak için kullanılır ve odak düzlemi,...

Glokomun Fare Modelinde Retinal Mikroglia'nın İn vivo Görüntülenmesi

Source: Jagodzinska, J., et. al., Optik Koherens Tomografi: Fare Retinal Ganglion Hücrelerini Görüntüleme In Vivo. J. Vis. Exp. (2017)  Bu videoda, optik nöropatili genetik olarak değiştirilmiş bir fare modelinde retina katmanlarını görüntülemek ve yapısal değişiklikleri değerlendirmek için spektral alan optik koherens tomografinin (SD-OCT) kullanımını gösteriyoruz.

Optik Koherens Tomografi Kullanılarak Fare Retinasının İn Vivo Görüntülenmesi

İntravital mikroskopi, hayvanlarda retina vasküler çaplarını, kan dolaşım hızlarını ve toplam retinal kan akışını görselleştirmek ve ölçmek için kullanılabilir.

Farelerde Retinal Kan Akışının İntravital Video Mikroskobu Ölçümleri

Mikroglia aktivasyonu ve mikroglioz kronik nörodejenerasyona önemli tepkilerdir. Burada, in vivo, konfokal oftalmoskopi retinal CX3CR1-GFP + mikroglial hücreleri uzun süreli görselleştirme için yöntemler sunmak ve eşik ve morfometrik için belirlemek ve aktivasyonunu ölçmek için analiz eder. Biz yaşa bağlı glokomun erken evrelerinde mikrogliyal değişiklikleri takip.

Fare Glokomda Konfokal Oftalmoskopik Görüntüleme ve Hücre morfometrisi: Nörodejenerasyonda sırasında Retina Mikroglial Aktivasyonu Vivo Dynamics

Bu el yazması ile yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi (SD-Ekim) fare retinanın vivo içinde görüntüleme için bir protokol açıklar. Retina ganglion hücrelerinin (RGC) peripapillary bölgede çeşitli tarama ve açıklanan yaklaşımlar miktarının üzerinde duruluyor.

Optik Koherens tomografi: Fare retina Ganglion hücreleri Vivo içinde görüntüleme

Bu protokolü nasıl yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi gibi görüntüleme teknikleri açıklar ve lazer ophthalmoscopy tarama bir oftalmik görüntüleme platformu üzerinde bilgi edinme sistemiyle küçük Rodents yararlı olabilir dağıtım, hücre sırasıyla retina kalınlığı ve mikroglial.

Vivo Tayf alanlı optik Koherens tomografi ve lazer Ophthalmoscopy tarama Cx3cr1gfp/gfp muhabir farelerin görüntüleme

Sunulan Protokolü kalıcı duyu çakışma uzun vadeli öğrenme eğitim amaçlı deneyler için üretir. Kalıcı olarak sabit bir aygıt başlarına giyerek, fareler sürekli ev kafeslerde serbestçe taşırken görsel ve Vestibüler girdiler arasında duyusal bir uyumsuzluk maruz kalır.

Fareler serbestçe davranıyor uzun vadeli duyusal çatışma

Mevcut protokol, in vivo görüntülerde gözlenen retinal ganglion hücre akson demeti morfolojisini doğrulamak amacıyla in vivo görünür ışık optik koherens tomografi fibergrafi (vis-OCTF) görüntülerini aynı fare retinasının ex vivo konfokal görüntüleriyle hizalama adımlarını özetlemektedir.

Görünür Işık Optik Koherens Tomografi Fibergramlarının Aynı Fare Retinasının Konfokal Görüntüleri ile Hizalanması

Burada, optokinetik refleksi ölçmek için standart bir protokol açıklıyoruz. Sanal davul stimülasyonunu ve video-okülografiyi birleştirir ve böylece davranışın özellik seçiciliğinin ve uyarlanabilir plastisitesinin hassas bir şekilde değerlendirilmesine izin verir.

Farelerde Optokinetik Refleksin Görsel Özellik Seçiciliğinin Ölçülmesi

Öğrenin farelerde video-okülografi yöntemiyle göz hareketlerini ölçme ve motor davranışların fizyolojisini inceleme. Bu teknik, serebellar ve vestibüler kökenli hastalıkları araştırmak için güçlü bir araçtır.

Farelerde Video-oculography

Daha fazla video keşfet