Name: NF-KB-bağımlı yetişkin nöron Modülasyon ve Analiz Yöntemleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-02-13T23:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 58 s
Description: Keşfedin NF-κB bağımlı yetişkin hipokampal nörogenez modülasyon ve analiz yöntemlerini. Farelerde davranışsal testler ve histolojik analizlerle bilişsel sonuçları ve yapısal değişiklikleri araştırın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Biz mükemmel teknik destek için Angela Kralemann-Köhler teşekkür ederim. Burada açıklanan deneysel çalışmalar bizim laboratuvarımızda gerçekleştirildi ve CK ve BK ve BK Araştırma ve Eğitim Alman Bakanlığı (Bmbf) bir hibe Alman Araştırma Kurumu (DFG) hibelerinden tarafından desteklenmiştir.

Etik beyanı Bu çalışma, toplum ve hayvan bakımı kullanım komitesi, devlet Kuzey Ren-Vestfalya, (Düsseldorf, Almanya) ve LANUV düzenlemeleri ile tam uyum içinde yürütülmüştür. Tüm hayvan deneyleri lisans numarası 8.87-51.04.20.09.317 (LANUV, NRW) altında LANUV, Düsseldorf tarafından kabul edildi. Tüm çabalar sıkıntı ve çalışma için gerekli hayvan sayısını en aza indirmek için yapılmıştır. 1.. Hayvan Bakım ve Barınma <ol><li> European Federation Laboratory Animal Science Derneği (FELASA) tarafından tanımlanan, burada tarif edilen protokollere kullanılan tüm hayvanlar, özel patojen içermeyen koşullar altında tutulmalıdır. </li><li> HEPA süzülmüş havası sahip olan fareler, günlük koşullarında (12 saat ışık / karanlık çevrimi) altında bir ısı-ve nem-kontrollü (22 ° C) bir odada standart kafeslerde muhafaza edilmelidir. </li><li> Standart yiyecek ve su ad libitum temin edilmelidir. &lt;/ Li&gt; <li> IkB / tTA ve IkB / ise - kontrol fareleri kullanılır 7, 18 de tarif edildiği gibi, PCR tabanlı bir genotipleme, her bir hayvan için gerçekleştirilmelidir. </li><li> Az dört gün bir yaş farkı olan erkek hayvanlar bireysel değişkenliği azaltmak için kullanılacak gerekir. </li><li> (İSTEĞE BAĞLI): NF-KB etkinleştirme deneyler için, doksisiklin, en az 14 gün boyunca (% 2.5 sükroz ile 2 mg / ml) içme suyu içinde tatbik edilmelidir. </li></ol> 2. Mekansal Desen Ayırma-Barnes Maze (SPS-BM) <ol><li> Tüm davranış testi uluslararası ve yerel kurallara uygun olarak yapılmalıdır. </li><li> ÖNEMLİ! Altı ay veya daha eski bir çağda sadece erkek fareler kullanın. Bir test serisinin hayvanlar arasındaki yaş farkı az dört gün olmalıdır. Test, her seri için aynı operatör tarafından gerçekleştirilmelidir. Fareler ayrıca kısmen olarak tahrik motivasyonunu artırmak için önce test için bir standart diyet almalıdırweet gıda ödül. </li><li> Sert plastikten yapılmış bir beyaz dairesel plaka ayarlayın en az 4 x 80 W ve 3 x 215 W neon floresan lambalar ile aydınlatılan bir nem ve sıcaklık kontrollü bir odada (22 ° C) ve (çapı 120 cm, Şekil 5A bakınız) . ÖNEMLİ! Farelerin motivasyon kısmen aydınlık, maruz yerlere kendi kaçınma tarafından yönlendirilen gıda evlere girmek için, doğru aydınlatma kullanıldığından emin olun. </li><li> Video izleme sistemi kurmak. Kamera 115 cm plakasının merkezinde (bkz. Şekil 5A) üstünde olmalıdır. </li><li> Hayvanların, plakanın sınırında yaklaşık 100 cm (Şekil 5A bakınız) kolayca görülebilir pozisyonlarda beyaz renkli kumaş için çok renkli ekstra-labirent ipuçları (EMC) takın. </li><li> Dikkatli deneysel set-up herhangi bir koku kaldırabilirsiniz hızlı bir dezenfektan ile plakasını temizlemeyin. </li><li> Yedi özdeş sarı gıda evler (12 cm x 7 cm x 8 cm, bakınız Şekil 5A yerleştirin </beyaz plaka üzerinde)&gt; güçlü. Konumları (Şekil 5A bakınız) Tümden işaretlenmiş olmalıdır. </li><li> Şekil 5A, tek bir tanımlanmış gıda ev hayvan (konum F serbestçe erişilebilir olmak (Şekil 5A bakınız) tanımlanmış pozisyonlara tüm gıda evlerin içine tatlı gıda pelet ödülleri (bir Kellogs `s Froot Döngü / gıda evin bir çeyrek) bkz yerleştirin .) Şeffaf folyo ile nontarget gıda evleri kapatın. </li><li> Testten önce, alışma (görev başlamadan bir gün önce) gerçekleştirin. Tüm gıda evler serbestçe erişilebilir yapın ve fareler serbestçe labirenti keşfetmek ve bir gıda pelet ödül (10 dk / hayvan) almak için izin verir. </li><li> Üzerinde bilgisayar ve kamerayı açın ve video izleme sistemi yazılımını başlatmak. </li><li> Kayda başlayın. </li><li> Dairesel plaka üzerinde tanımlanmış başlangıç ​​noktası (Şekil 5A, S: başlangıç ​​pozisyonu) de hayvan koyun ve fareler 10 dakika boyunca hedef gıda evde aramak için izin verir. </li><li> Stop video izleme. </li><li> ÖNEMLİ! Hızlı dezenfektan ile her deneme sonrasında dairesel plaka ve gıda evler temizleyin. </li><li> (Her hayvan için) yedi gün boyunca günde testi tekrarlayın. </li><li> Uygun istatistik yazılımını kullanarak sonuçları (gecikme, katedilen mesafe ve hatalar) analiz. Yanlış gıda ev ve / veya girme ve gıda pelet ödül almak olmadan uygun bir kutu ile temas yaklaşıyor gibi hataları tanımlayın. Gruplandırılmış analizi için Bonferroni post-hoc testi ile iki yönlü ANOVA kullanın. </li><li> (İSTEĞE BAĞLI) fareler Kurban ve aşağıda açıklandığı gibi hippocampi analiz. </li></ol> 3. BrdU Etiketleme <ol><li> 3 gün (farklılaşma ve entegrasyon analizi) ya da tek bir enjeksiyon (proliferasyon analizi) için 200 mg / kg ip boyunca günde bir defa intraperitoneal olarak 50 mg / kg ip BrdU enjekte edilir. </li><li> , Hayvanların Kurban hipokampus incelemek ve aşağıda açıklandığı gibi 40 mikron bölümleri hazırlamak. </li><li> Denatüre10 dakika için 2 M HCI ile bölümler ve 10 dakika boyunca 0.1 M borat tamponu içinde inkübe edilir. </li><li> BrdU karşı antikorlar kullanılarak aşağıda tarif edildiği gibi, immünohistokimyasal olarak, her bir hayvandan 40 um bölümler (ayrı 240 um) bir tek-in-on iki serisi etiketleyin. </li><li> Tanecik hücre katmanlarında ve subgranular zonunun rostro ölçüde boyunca konfokal mikroskopi analizi ile etiketlenmiş hücrelerin ölçmek. DG başına etiketli hücrelerin toplam sayısını elde etmek için iki ile hipokampus ve bölme başına BrdU etiketli hücrelerin tahmini toplam sayısını elde etmek için, 12 ile elde edilen numaralar çarpın. </li></ol> 4. Perfüze olmayan hayvanlardan Brain ve kriyokesitler Hazırlanması çıkarılması <ol><li> Hayvanların ötenazi için lokal olarak onaylanmış prosedürlere uymak. Fareler doğrudan servikal dislokasyon ile ötenazi olabilir. </li><li> (İSTEĞE BAĞLI) Hayvanlar periton inje örneğin, yerel ve uluslararası kurallara uygun olarak, ölümden önce anestezi olabilir(taze ya da fizyolojik tuz tamponu 1.85 ml 2.2 mg 2,2,2-tribromoethanol izoamil etanol ml 1 içinde yapılmış 150 ml stok çözelti karıştırılarak yapılan) 33 g bir fare için 0.8 ml olarak Avertin&#39;in şeklinde gösterilmektedir. </li><li> Betadine (% 10 povidon-iyot)-batırılmış% 70 etanol ile ıslatılmış gazlı bez ile sonradan gazlı bez ve bez ile kafası sterilize. </li><li> Uygun cerrahi makas kullanılarak hayvan başını kesmek ve bir kenara cilt çekin. </li><li> (İSTEĞE BAĞLI) Fiksatörleri geri zekalı cilt katlama önlemek için uygulanabilir. </li><li> Kafatasında bir ensizyon olun ve dikkatli bir kenara kafatası parçaları çekin. </li><li> Dikkatle uygun bir cerrahi alet (örneğin Moria Kaşık) kullanılarak tüm beyin kaldırmak. </li><li> Kuru buz üzerinde -30 ila -40 ° C, 50 ml&#39;lik bir cam kaba (örneğin, Schott Duran) içindeki bir 2-metilbütan ön soğutma 25 mi. Not: ideal konfokal lazer taramalı mikroskopi için uygundur &quot;kalın&quot; bölümlerinin serbest yüzen boyama için, beyin kaldırmak, 3 yıkamabeyin (tipik olarak gece boyunca) dibine kadar batmış fosfat içinde 4 ° C&#39;de tampon ve mağaza kez 50 ml bir tüp içinde% 30 sukroz çözeltisi tamponlu. </li><li> Dikkatle nescofilm (Parafilm) bir parça beyin koyun ve TissueTek Ekim bileşik bol miktarda kapak, -80 ° C&#39;de kullanıma kadar 2-metilbutan, mağaza nescofilm dondurulması. Not:% 9 sakaroz, 7 mM MgCI2, 50 mM fosfat tampon maddesi,% 44 gliserol içinde -20 ° C bir mağazada uzun süre depolama için. </li><li> Uygun cryomicrotome 10-12 mikron kalınlığında kesitler halinde beyin kesin. Not: Kalın, serbest yüzen kesitler için, (örneğin Reichert Jung, Frigomobil.) Ve -20 ° 40 mikron yatay bölümleri kesmek uygun kriyotomu arasında kriyotomu sahnede beyin dondurmak - 25 ° C. Ince bir fırça ile bıçak bölümleri toplayın ve tampon toplamak veya uzun süre depolama için -20 ° C&#39;de (4.9 adım) depolama çözümü tutmak. </li><li> Dikkatle tek mikroskop lamı üzerine iki dilim monte. BiziUltraPlus Superfrost slaytların e çok bölümlerden yapışmasını arttırmak için tavsiye edilir. </li><li> Oda sıcaklığında 5 dakika boyunca slaytlar kurutun. Slaytlar, kullanılıncaya kadar -80 ° C&#39;de muhafaza edilebilir. </li></ol> 5. Perfüze Animals Bölümler hazırlanması <ol><li> (Adım 4.2) yukarıda tarif edildiği gibi hayvanların anestezisi. </li><li> Dikkatle 10-15 dakika boyunca PBS içinde% 4 paraformaldehid, ardından 2-4 dakika boyunca fosfat tamponlu heparin ihtiva eden tuzlu su (PBS) (0.025 g/100 ml PBS) ve prokain (0.5 g/100 mi PBS) ile transkardiyal hayvan perfüze . Perfüzyon en iyi şekilde yaklaşık olarak 1.2-1.4 m ya da yaklaşık olarak 15 ml / dak &#39;ya ayarlanmış bir peristaltik pompa kullanılarak bir hidrostatik basınç kullanarak sol ventrikül ve sağ atriyum açıklığı yoluyla perfüze edilmesi ile gerçekleştirilir. Hiç kırmızı kan damarları görünür olmak bir soluk beyaz beyin Optimal perfüzyon sonuçları. </li><li> Inceleyin ve 24 saat boyunca 4 ° C &#39;de% 4 paraformaldehid içinde beyinleri sonrası düzeltin. </li><li> Cryoen az 24 saat boyunca 4 ° C&#39;de PBS içinde% 30 sukroz içinde beyinleri korur. </li><li> Kriyotomu sahnede beynini dondurur. </li><li> Uygun bir kriyotomu kullanarak tüm forebrains 40 mikron yatay kesitler hazırlamak. </li><li> Slaytlar, -20 ° C&#39;de kullanıma kadar, dondurarak saklama çözeltisi (0.1 M fosfat tampon maddesi,% 50 gliserol,% 0.14 MgCI2,% 8.6 sukroz) saklanabilir. </li></ol> 6. Perfüze Hayvanlar Beyin Bölümler İmmünohistokimyası <ol><li> 10 dakika boyunca -20 ° C soğuk metanol kullanılarak, yukarıda tarif edildiği gibi hazırlanan cryosections, Post-düzeltin. </li><li> 4 ° C de bir gece (ikincil antikor yükseltilmesi için kullanılan türden)% 0.3 Triton-X içeren% 5, normal serum ile bloke </li><li> 1x PBS ile 3 kez yıkayın ve 4 ° C de bir gece primer antikorlar ile inkübe </li><li> 1x PBS ile 3 kez yıkayın ve bir saat süre ile, oda sıcaklığında, ikincil antikor ile inkübe edin. </li><li> 1x PBS ile 3 kez yıkayın </li><li> CouSYTOX yeşil veya DAPI (ya da bir başka DNA boya) kullanılarak DNA bölümünün nterstain. </li><li> 1x PBS ile 3 kez yıkayın </li><li> Sulu bir ortam içinde gömme bölümleri Embed. </li><li> Gömülü maddenin en az 48 saat boyunca polimerize olsun. </li></ol> 7. Perfüze Hayvanlar Beyin Bölümler İmmünohistokimyası <ol><li> Adım 6.2 &#39;de tarif edilen ve daha sonra 4 ° C de bir gece boyunca% 0.3 Triton-X (yüzer) ihtiva eden PBS içerisinde seyreltilmiş primer antikor çözeltisi içinde tespit edilmiş olan beyin bölümleri inkübe olarak Block </li><li> 1x PBS ile üç kez yıkayın ve 3 saat boyunca oda sıcaklığında,% 0.3 Triton-X (serbest yüzen) ihtiva eden PBS içerisinde seyreltilmiş sekonder antikor, çözelti içinde inkübe edilir. </li><li> 1x PBS ile 3 kez yıkayın </li><li> SYTOX DAPI, yeşil ya da (ya da bir başka DNA boya) kullanılarak DNA bölümü Counterstain. </li><li> 1x PBS ile üç kez yıkayın </li><li> Sulu bir ortam içinde gömme bölümleri Embed. </li><li> Gömme ortamı için polimerize olsunt en az 48 saat. </li></ol> 8. Yosunlu Fiber Projeksiyonlar Araştırılması <ol><li> , Hayvanlar kurban yukarıda tarif edildiği gibi 40 mikron koronal kesitler hazırlamak ve sinir lifi M. antikoru kullanılarak hipokamp bölümü leke </li><li> Mossy elyaflar çekirdek ve görselleştirmek için bir odaklı lazer tarama mikroskobu kullanılarak, uygun dalga boyunda bölümleri tara. Düşük büyütme taramayı başlatın. </li><li> Yönlendirme için düşük büyütme görüntüleri kullanmak ve yosunlu lif projeksiyonları ile hipokampus hedef. </li><li> Yüksek çözünürlüklü ve yüksek büyütme bölümleri (z-bölümleme) tarayın. </li><li> NF-M lekeleme ile görselleştirilmiştir mossy liflerinin morfolojik görünümünü ve bağlantı analiz edin. </li><li> (İSTEĞE BAĞLI) hipokampal bıçaklarının boyutu ve hacmini analiz. Ölçümler için DNA sinyali kullan. </li></ol> 9. Fluoro-Jade C Deneyi (Nöron Hücre Ölümü) <ol><li> Hayvanların Kurban, hipokampusunda teşrihAmpus, ve yukarıda tarif edildiği gibi 12 um kesitler hazırlamak. </li><li> Kesitler oda sıcaklığında 30 dakika boyunca kurumasına izin verin. </li><li> Oda sıcaklığında 40 dakika boyunca% 4 PFA içinde bölümleri düzeltildi. </li><li> Kısaca bölümler GKD 2 O. ile 3 kez yıkayın </li><li> , Sürekli, yumuşak çalkalama altında 10 dakika boyunca% 0.06 potasyum permanganat (KMnO 4) ile bölümleri inkübe edin. </li><li> Bölümler GKD 2 O. ile 3 kez yıkayın </li><li> Oda sıcaklığında 20 dakika boyunca% 0.002 Floro-Jade C solüsyonu ile bölümleri inkübe edin. </li><li> (İSTEĞE BAĞLI) eşzamanlı nükleer boyamalar için,% 0.002 Flor-Jade C çözeltisi 10 mg / ml DAPI ile takviye edilebilir. </li><li> Kısaca bölümler GKD 2 O. ile 3 kez yıkayın </li><li> Kesitler oda sıcaklığında 30 dakika boyunca kurumasına izin verin. </li><li> Ksilen ile inkübe bölümleri (1 dakika) </li><li> Bir ksilen bazlı montaj ortamı (DPX) kullanarak bölümleri monte edin. </li></ol>

<ol><li>Gutierrez, H., Davies, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+neural+process+growth%2C+elaboration+and+structural+plasticity+by+NF-kappaB%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Regulation of neural process growth, elaboration and structural plasticity by NF-kappaB.</a> Trends Neurosci. 34, 316-325 (2011).</li>
<li>Imielski, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regrowing+the+adult+brain%3A+NF-kappaB+controls+functional+circuit+formation+and+tissue+homeostasis+in+the+dentate+gyrus%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Regrowing the adult brain: NF-kappaB controls functional circuit formation and tissue homeostasis in the dentate gyrus.</a> PLoS One. 7, (2012).</li>
<li>Zheng, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrahippocampal+injection+of+A+beta%281-42%29+inhibits+neurogenesis+and+down-regulates+IFN-gamma+and+NF-kappaB+expression+in+hippocampus+of+adult+mouse+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Amyloid%22%5BJournal%5D)">Intrahippocampal injection of A beta(1-42) inhibits neurogenesis and down-regulates IFN-gamma and NF-kappaB expression in hippocampus of adult mouse brain.</a> Amyloid. 20 (1-42), 13-20 (2013).</li>
<li>Denis-Donini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+adult+neurogenesis+associated+with+short-term+memory+defects+in+NF-kappaB+p50-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Impaired adult neurogenesis associated with short-term memory defects in NF-kappaB p50-deficient mice.</a> J. Neurosci. 28, 3911-3919 (2008).</li>
<li>Bracchi-Ricard, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astroglial+nuclear+factor-kappaB+regulates+learning+and+memory+and+synaptic+plasticity+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J%2C+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Astroglial nuclear factor-kappaB regulates learning and memory and synaptic plasticity in female mice.</a> J, Neurochem. 104, 611-623 (2008).</li>
<li>Koo, J. W., Russo, S. J., Ferguson, D., Nestler, E. J., Duman, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+factor-kappaB+is+a+critical+mediator+of+stress-impaired+neurogenesis+and+depressive+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">Nuclear factor-kappaB is a critical mediator of stress-impaired neurogenesis and depressive behavior.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 2669-2674 (2010).</li>
<li>Fridmacher, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forebrain-specific+neuronal+inhibition+of+nuclear+factor-kappaB+activity+leads+to+loss+of+neuroprotection%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Forebrain-specific neuronal inhibition of nuclear factor-kappaB activity leads to loss of neuroprotection.</a> J. Neurosci. 23, 9403-9408 (2003).</li>
<li>Whiteside, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C-terminal+sequences+control+degradation+of+MAD3%2FI+kappa+B+alpha+in+response+to+inducers+of+NF-kappa%5BTitle%5D)+AND+%22B+activity.+Mol.+Cell.+Biol%22%5BJournal%5D)">C-terminal sequences control degradation of MAD3/I kappa B alpha in response to inducers of NF-kappa.</a> B activity. Mol. Cell. Biol. 15, 5339-5345 (1995).</li>
<li>Mayford, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+memory+formation+through+regulated+expression+of+a+CaMKII+transgene%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Control of memory formation through regulated expression of a CaMKII transgene.</a> Science. 274, 1678-1683 (1996).</li>
<li>Rosenfeld, M. E., Prichard, L., Shiojiri, N., Fausto, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+hepatic+apoptosis+and+embryonic+lethality+in+RelA%2FTNFR-1+double+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Pathol%22%5BJournal%5D)">Prevention of hepatic apoptosis and embryonic lethality in RelA/TNFR-1 double knockout mice.</a> Am. J. Pathol. 156, 997-1007 (2000).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci.+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J Neurosci. Methods. 11, 47-60 (1984).</li>
<li>Barnes, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Memory+deficits+associated+with+senescence%3A+a+neurophysiological+and+behavioral+study+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Compar.+Physiol.+Psychol%22%5BJournal%5D)">Memory deficits associated with senescence: a neurophysiological and behavioral study in the rat.</a> J. Compar. Physiol. Psychol. 93, 74-104 (1979).</li>
<li>Brun, V. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Place+cells+and+place+recognition+maintained+by+direct+entorhinal-hippocampal+circuitry%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Place cells and place recognition maintained by direct entorhinal-hippocampal circuitry.</a> Science. 296, 2243-2246 (2002).</li>
<li>Meshi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+neurogenesis+is+not+required+for+behavioral+effects+of+environmental+enrichment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampal neurogenesis is not required for behavioral effects of environmental enrichment.</a> Nat. Neurosci. 9, 729-731 (2006).</li>
<li>Bakker, A., Kirwan, C. B., Miller, M., Stark, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pattern+separation+in+the+human+hippocampal+CA3+and+dentate+gyrus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Pattern separation in the human hippocampal CA3 and dentate gyrus.</a> Science. 319, 1640-1642 (2008).</li>
<li>Dupret, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+relational+memory+requires+hippocampal+adult+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Spatial relational memory requires hippocampal adult neurogenesis.</a> PLoS One. 3, (2008).</li>
<li>Leutgeb, J. K., Leutgeb, S., Moser, M. B., Moser, E. I. Pattern separation in the dentate gyrus and CA3 of the hippocampus. Science. 315. , 961-966 (2007).</li>
<li>Kaltschmidt, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NF-kappaB+regulates+spatial+memory+formation+and+synaptic+plasticity+through+protein+kinase+A%2FCREB+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Cell.+Biol%22%5BJournal%5D)">NF-kappaB regulates spatial memory formation and synaptic plasticity through protein kinase A/CREB signaling.</a> Mol. Cell. Biol. 26, 2936-2946 (2006).</li>
<li>Clelland, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+functional+role+for+adult+hippocampal+neurogenesis+in+spatial+pattern+separation%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A functional role for adult hippocampal neurogenesis in spatial pattern separation.</a> Science. 325, 210-213 (2009).</li>
<li>Kempermann, G., Jessberger, S., Steiner, B., Kronenberg, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milestones+of+neuronal+development+in+the+adult+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Milestones of neuronal development in the adult hippocampus.</a> Trends Neurosci. 27, 447-452 (2004).</li>
</ol>

Yazarlar, hiçbir çıkar çatışması olmadığını beyan ederim.

Yetişkin nöron ve doksisiklin ile nöronlarda NF-KB inhibisyonu, ve daha sonra yeniden aktivasyonu ile kendi manipülasyon olasılığı, yetişkin beyin, hem de nöronal de-ve yeniden üretimi içine yeni doğmuş nöronlar araştırmalar için ilginç bir sistem sunar . Bu sistemin güzelliği olduğu nöronal hücre ölümü, progenitör çoğalma ve yer değiştirme, ve ağır yapısal ve anatomik değişimler değil, aynı zamanda açık bir öğrenme kusurları değişikliklere nöron sonuçlar sadece NF-KB sinyal yolu inhibisyonu. Önemlisi, IKB / tTA hayvanl...

Ontolojik, hipokampus bilinen eski anatomik beyin yapılarından biridir. Bu tür uzun süreli bellek, uzaysal ve ilgili hafızanın oluşumu ve konsolidasyon düzenlenmesinde önemli fonksiyonlar gibi çeşitli karmaşık görevler için sorumludur. Anatomik olarak, hipokampus kendi subgranular bölge içinde granül hücreleri ve birkaç nöronal progenitörlerin içeren cornu ammonis (CA1, CA2, CA3 ve CA4) bölgeleri ve kıvrımlarının (dentat girus), dahil olmak üzere, piramidal hücre tabakası (stratum pyramidale) oluşmaktadır . Granül hücreleri olarak adlandırılan mossy liflerden (granül hücrelerin akson) ile CA3 bölgesine doğru çıkıntı. Geçen yüzyılın sonuna kadar, yetişkin memeli beyin hücre plastisite ve nöron eksik statik bir organ olduğuna inanılıyordu. Ancak, son iki yılda, kanıtların giderek artan miktarı açıkça yer alıyor yetişkin nörogenezi gösterir en azİki beyin bölgeleri, bölge subventricular (SVZ) ve hipokampus subgranular bölge. Daha önceki çalışmalar, ve diğer gruplar bu, transkripsiyon faktörü NF-KB yetişkin nöron önemli moleküler düzenleyicilerin biridir ve ağır yapısal kusurlar hipokampal ve bilişsel bozukluklar 1-6 onun de-regülasyon sonuçları olduğunu göstermiştir. NF-KB, beş DNA-bağlayıcı alt birimlerinin farklı dimerik kombinasyonlarından oluşan bir endüklenebilir transkripsiyon faktörünün genel adıdır: p50, p52, c-Rel, RelB ve p65 (RelA), bunlardan son üç transaktivasyon alanları vardır. Beyin içinde, sitoplazma içinde bulunan en bol bir şekilde p50 ve kappa B (IkB)-proteinleri inhibitörü ile bir inaktif halde tutulur p65, bir heterodimerdir. NF-KB odaklı nöron çalışma ve direkt olarak işlemek için, NF-KB subun tüm basit önlenmesini sağlamak için transgenik fare modelleri kullanmakonun, özellikle ön beyin 7 (Şekil 1). Ve -/tTA - Bu amaçla, biz şu transgenik fare hatları, IKB / çapraz yetiştirilmiş. Transgenik IKB / - hat NF-KB-inhibitörü IκBa (süper-represor IκBa-AA1) bir trans-dominant negatif mutant kullanılarak oluşturulan 8. Yabani tip IκBα aksine, IκBα-AA1 inhibitörünün fosforilasyonunu ve daha sonra proteozomal bozulmasını engelleyebilir alaninler (V32 ve V36) için mutasyona uğramış iki serin kalıntısına sahiptir. IκBa-AA1-transgenin ön beyin nöron-özel ifadesi için, IkB / - fareler fareler, kalsiyum-kalmodulin bağımlı kinaz barındıran çapraz-yetiştirilmiş IIα tetrasiklin trans-etkinleştirici bölgesiyle (tTA) tarafından tahrik edilebilir (CAMKIIα)-promoteri 9. p65 knock-out fareler nedeniyle masif karaciğer apoptoz 10, bir embriyonik ölümcül fenotip var, bu nedenle burada gösterilen yaklaşımı zarif bir yöntem sağlarpostnatal ve erişkin nöron NF-KB rolünü araştırmak için. Uzaysal öğrenme ve bellek çalışma klasik davranış testi Richard Morris, Morris su labirenti-(MWM) 11 olarak bilinen bir test tarafından 1980&#39;lerde tanımlanmıştır. Bu açık alanda su labirentinde, hayvanlar yönlendirme ve ekstra labirent ipuçları dayalı gizli bir platform üzerine opak sudan kaçmak için öğrenirler. MWM kuru bir varyant olarak adlandırılan Barnes labirenti (BM) 12&#39;dir. Bu test, bir bir çıkış kutusu olarak tanımlanan delik ve yönlendirme için görsel fazladan-maze ipuçları ile, plakanın sınırında düzenlenmiş dairesel delikler 20 ile dairesel bir levha kullanır. Hem deneysel paradigmalar bir kemirgen `ın su kaçınma, ya da açık, parlak ışıklı mekanlarda tarafından uyarılan uçuş davranış güveniyor. Her iki test uzaysal bir soruşturma ve ilgili bellek performansı sağlar. Hipokampus uzamsal hafıza oluşumunda genel ve önemli bir rol oynamasına rağmen, hipokampal rkatılan egions uygulanan teste göre değişir. BM test bellek enthorinal korteks (EC) ve DG 13-16 bir katkısı olmadan hipokampusun CA1-bölgesinde bulunan piramidal nöronlar arasında nöronal etkinlik ortaya çıkar. Özel olarak, klasik BM esas Önemli olarak, DG önemlisi işleme bölgesinin sadece ima sözde uzamsal örüntü tanıma 17, katılır EC V&#39;a CA1 EC III monosinaptik temporo-amonik yolu ile gösterime dayanır görsel ve mekansal bilgi değil, aynı zamanda farklı, örtüşmeyen gösterimleri içine benzer temsilleri veya anıları dönüşüm. Bu görev CA1 ve BM 15 test edilemez AT VI, için CA3 için DG EC II fonksiyonel bir tri-sinaptik devre gerektirir. Bu sorunları çözmek için, biz özellikle co dentat girus bağımlı bilişsel performansını test etmek için bir davranış testi olarak SPS-BM tasarladılarntrol hayvan ve NF-KB inhibisyonu aşağıdaki IkB / tTA süper-represör modelinde. Önemli olarak, MWM ya da BM aksine, SPS-BM nöron düşüklüğü kaynaklanan ince davranışsal hasarları ortaya çıkarabilir. Uzamsal-desen-ayırma EC II ve DG ve CA3 ve CA1 ve AT VI arasında işlevsel bir devre üzerinde sıkı sıkıya bağlı olduğundan, bu test içinde potansiyel nörojenezindeki değişiklikler, yosunlu lif yolunun değişiklikler veya doku homeostasisin değişikliklere son derece hassas DG. Teknik olarak, bizim test set-up Clelland ve arkadaşları tarafından araştırmaya dayanmaktadır., Mekansal ayrılık desen ahşap 8-kollu radyal kollu labirent (RAM) 19 kullanılarak test edildiği. Bizim modifiye set-up, sekiz silah yedi özdeş sarı gıda evler almıştır. Özet olarak, yöntemler, hipokampus, mossy lif çıkıntılar, nöronal hücre dE içinde doublekortin salgılayan (DCX +) hücre analizleri de dahil olmak üzere, burada gösterilenATH ve özellikle SPS-BM Burada yer, yetişkin nöron üzerinde bir etkiye sahip transgenlerin katıldığı diğer fare modelleri araştırmalar uygulanabilir. Diğer uygulamalar farmakolojik ajanların çalışma ve DG ve mekansal desen ayrılık üzerindeki etkisini ölçmek içerebilir.

<table><tbody><tr><td>Moria MC17 Delikli Kaşık&nbsp;</td><td>FST</td><td>10370-18</td><td>beyinlerin çıkarılması</td></tr><tr><td>Diseksiyon mikroskobu</td><td>Carl Zeiss</td><td>Stemi SV8</td><td>beyinlerin çıkarılması</td></tr><tr><td>Cerrahi makas&nbsp;</td><td>FST</td><td>14084-08</td><td>beyinlerin çıkarılması</td></tr><tr><td>Cerrahi makas ve nbsp;</td><td>FST</td><td>14381-43</td><td>beyinlerin çıkarılması</td></tr><tr><td>Dumont # 5 forseps</td><td>FST</td><td>11254-20</td><td>beyinlerin çıkarılması</td></tr><tr><td>SuperFrost Slaytları</td><td>Carl Roth</td><td>1879</td><td>immünohistokimya slaytları</td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6148</td><td>sabitleyici</td></tr><tr><td>TissueTek OCT bileşiği</td><td>Sakura Finetek</td><td>1004200018</td><td>beyinlerin gömülmesi</td></tr><tr><td>Normal Keçi</td><td>Serumu Jackson Immunolabs</td><td>005-000-001</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Normal Tavşan Serumu</td><td>Jackson Immunolabs</td><td>011-000-001'de</td><td>blokaj</td></tr><tr><td>IHC Normal Eşek</td><td>Serumu Jackson Immunolabs</td><td>017-000-001</td> IHC anti-Nörofilament-M <td>antikorunda bloke etme</td></tr><tr><td></td><td>Gelişimsel Çalışmalar Hibridoma Bankası</td><td>2H3</td><td>IHC, Seyreltme 1:200</td></tr><tr><td>anti-Doublecortin&nbsp; antikor</td><td>sc-8066</td><td>Santa Cruz</td><td>IHC, Seyreltme 1:800</td></tr><tr><td>anti-GFP antikoru</td><td>Abcam</td><td>ab290</td><td>IHC, Seyreltme 1:2.000</td></tr><tr><td>anti-BrdU antikoru</td><td>OBT0030G</td><td>Doğru Kimyasallar</td><td>IHC, Seyreltme 1:2.000&nbsp;</td></tr><tr><td>Floro-Yeşim C</td><td>FJ-C</td><td>HistoChem</td><td>Nöronal hücre ölümünün belirlenmesi</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Mundipharma</td><td>D08AG02</td><td>dezenfektan</td></tr><tr><td>Kriyomikrotom</td><td>Leica</td><td>CM1900</td><td>beyin dilimlerinin hazırlanması</td></tr><tr><td>Heparin sodyum tuzu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3393</td><td>perfüzyon</td></tr><tr><td>Sert plastikten yapılmış dairesel plaka (çap 120 cm)</td> <td>laboratuvar yapımı</td><td></td><td>SPS-BM için plaka yok, çap 120 cm</td></tr><tr><td>Buraton hızlı dezenfektan&nbsp;</td><td>Sch&uuml; lke Mayr</td><td>113 911</td><td>dezenfektan</td></tr><tr><td>VideoMot 2 Yazılım Paketi ile TSE VideoMot 2</td><td>TSE Sistemleri</td><td>302050-SW-KIT,</td><td>SPS-BM</td></tr><tr><td>Triton X-100&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T8787</td><td>geçirgenlik/IHC</td></tr><tr><td>Cryotome</td><td>Reichert Jung/Leica</td><td>Frigomobil 1206</td><td>40 & mikronun hazırlanması; m beyin dilimleri</td></tr><tr><td>Mowiol 4-88</td><td>Carl Roth</td><td>Art.-Nr. 0713</td><td>slaytların gömülmesi</td></tr><tr><td>SYTOX green</td><td>Invitrogen</td><td>S7020</td><td>Nükleer boyama</td></tr><tr><td>Gıda peletleri (Kellog's Froot Loops)</td><td>Kellog's</td><td></td><td>SPS-BM</td></tr><tr><td>Prism, Version 3.0</td><td>Graph Pad Software, San Diego, ABD</td><td></td><td>SPS-BM</td></tr><tr><td>Zen 2008 veya Zen 2011 Yazılımının</td> istatistiksel değerlendirmesi<td>Carl Zeiss</td><td></td><td>Yazılımı (Konfokal mikroskop)</td></tr> <tr><td>Floro-Jade C boyama için</td> <td>DPX</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>317616</td> montaj ortamı</tr></tbody></table>

nf-kb-bağımlı yetişkin nöron modülasyon ve analiz yöntemleri

Methods for the Modulation and Analysis of NF-&#954;B-dependent Adult Neurogenesis

Hipokampus epizodik anıların oluşumu ve konsolidasyon önemli bir rol oynar, ve mekansal yönde. Tarihsel olarak, yetişkin hipokampus, memeli beyin, çok statik bir anatomik bölgesi olarak incelendi. Ancak, son bulgular hipokampusun dentat girus mevcut nöronal devrelerin değişiklikler, aynı zamanda yetişkin nöron sadece içeren, yetişkinlerde büyük bir plastisite bir alan olduğunu göstermiştir. Bu esneklik, transkripsiyon faktörü NF-KB önemli bir rol oynadığı, kompleks transkripsiyonel ağlar tarafından düzenlenir. Yetişkin nöron, NF-KB aktivitesi ön beyin özgü nöronal engellenmesi için bir fare modeli de kullanılabilir çalışma ve işlemek için. Bu çalışmada, yöntem, yapısal açıdan, nöronal apoptoz ve progenitor çoğalması ve bilişsel önemi, hangi içeren NF-KB-bağımlı nöron analizi tarif edilmektedirh özellikle kıvrımlarının (DG)-bağımlı davranış testi, mekansal desen ayrılık-Barnes labirenti (SPS-BM) üzerinden değerlendirildi. SPS-BM protokolü sadece erişkin hipokampal nöron özellikle genlerin etkisini değerlendirmek için tasarlanmış diğer transgenik hayvan modelleri ile kullanım için adapte olabilir. Dahası, SPS-BM farmakolojik ajanları kullanarak, örneğin, DG-bağımlı öğrenmeyi araştıran ve manipüle amaçlı diğer deneysel ortamlarda kullanılabilir.

IkB / çapraz yetiştirme - tTA ve transgenik fare hatları hipokampta NF-KB aktivitesi şartlı inhibisyonuna yol açar. Çift transgenik fare (Şekil 1A) &#39;de IκBα-AA1-transjenin ekspresyonunu incelemek için, beyin izole cryosectioned ve GFP (yeşil floresan protein) karşı bir antikor kullanılarak boyandı. Konfokal lazer tarama mikroskobu CA1 ve CA3 bölgelerde transgenin yüksek ifade ile uyumlu idi ve dg içinde (Şekil 1 B). <p class="jove_co...

NF-KB-bağımlı yetişkin hipokampal nöron manipülasyonu ve analiz için yöntemler tarif edilmiştir. Ayrıntılı bir protokol farelerin bilişsel sonuçların araştırılması için bir dentat girus-bağımlı davranış testi (uzaysal desen ayrılık-Barnes labirent adlandırılır) için sunulmuştur. Bu teknik aynı zamanda, diğer deneysel ortamlarda araştırmaları sağlama yardımcı olmalıdır.

NF-KB-bağımlı yetişkin nöron Modülasyon ve Analiz Yöntemleri

The hippocampus plays a pivotal role in the formation and consolidation of episodic memories, and in spatial orientation. Historically, the adult ...

Bu prosedürün genel amacı, yetişkin beyninde transkripsiyon faktörü NF kappa B'nin işlevini araştırmaktır. Bu, nöronlarda NF kappa B aktivitesini spesifik olarak inhibe eden ilk üreme transgenik fareler tarafından gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, uzamsal desen, ayırma veya ahırlar, labirent kullanarak NF kappa B inhibisyonunun davranışsal sonuçlarını test etmektir.Üçüncü adım, hayvanların dikkatli bir şekilde çoğaltılması, beyinlerin çıkarılması ve bunların uygun şekilde bölümlere ayrılmasıdır. Son adım, immün boyama ile yosunlu lif projeksiyonlarını görselleştirmek gibi histolojik ve yapısal etkileri analiz etmektir. Sonuç olarak, davranış testini ve ardından histolojiyi kullanmak, dentat girusa bağlı öğrenmedeki değişiklikleri ilişkili dokulardaki yapısal değişikliklerle ilişkilendirebilir.Bu tekniğin Mars Vazo gibi mevcut yöntemlere göre en büyük avantajı, uzamsal örüntü ayırma bağlarının MA'sı, bu beyin alanındaki nöro dejenerasyon ve rejenerasyonun yanı sıra çocuk bağımlılığı karşıtı öğrenme süreçlerini özel olarak ölçme fırsatı sunmasıdır. Bu yöntem, özel model ayırma olarak öğrenme gibi yetişkin nörojenez alanındaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir. Lab

methods-for-modulation-analysis-nf-b-dependent-adult

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Yetişkin hayvanlarda yenidoğan dentat granül hücrelerin entegrasyonu çalışma bir şekilde açıklanmıştır. Bu teknik, yeni doğan nöronlar, in vivo işlevsel entegrasyonu belirlemek için elektrofizyolojik kayıtlar takip etiketlemek için tasarlanmış bir retrovirüs kullanır.

Yetişkin doğmuş Nöronlar Entegrasyon incelenmesi

Yetişkin doğumlu memeli nöronların işlevi, soruşturma aktif bir alan kalır. İyonize radyasyon yeni nöron doğum engeller. Bilgisayar tomografi rehberliğinde fokal ışınlaması (CFIR) kullanılarak özel nöral progenitör popülasyonlarının üç boyutlu anatomik hedefleme şimdi yetişkin nöron işlevsel rolünü değerlendirmek için kullanılabilir.

Odak Radyolojik Geciktiricisinin Erişkin Hipotalamus nöron Fonksiyonel Sorgulama

Neuroblast göç postnatal nörojenezindeki çok önemli bir adımdır. Protokol Burada açıklanan DNA / küçük firkete RNA (ShRNA) nucleofection ve kemirgen doğum sonrası rostral göçmen akımından izole nöroblast ile 3D göç deneyi kullanılarak neuroblast göç aday düzenleyicilerinin rolünü araştırmak için kullanılabilir.

Kemirgen neuroblasts nucleofection Neuroblast Göç Eğitim için<em&gt; In vitro</em

Bu video makale, aynı doku kesitinde yetişkin hipokampal nörogenezin tüm aşamalarını tespit etmek ve ölçmek için kapsamlı bir protokolü göstermektedir. Farklı konakçı türlerden uygun antikorlar mevcut olmadığında ortaya çıkan dolaylı çoklu immünofloresan sınırlamalarının üstesinden gelmek için bir yöntem geliştirdik.

Aynı Sunucu Türlerin Antikorlar ile İmmünohistokimya ve Çoklu Etiketleme Yetişkin hipokampal nöron Eğitim için

Biz nörogelişimsel kökenli bilişsel bozuklukların ile karakterize bir fare modelinde bir mekansal öğrenme göreve maruz kaldıktan sonra hipokampal nöron aktivasyonu profilini incelemek için bir immünohistokimya protokol açıklar. Bu protokol bilişsel karakterize hem genetik ya da farmakolojik fare modellerine uygulanabilir.

Nörogelişimsel Bozukluklar Fare Modeli Mekansal Öğrenme ardından Hipokampal Nöron Faaliyet immünohistokimyasal Görselleştirme

Burada, erişkin ventriküler-subventriküler nörojenik nişteki nöral kök hücrelerin ve/veya bunların bitişik ependimal hücrelerinin uzun vadeli genetik modifikasyonu için lentiviral partiküllerin kullanımına dayanan ve nöral kök hücreler üzerindeki hücre otonom ve otonom olmayan, nişe bağlı etkilerin ayrı ayrı analizine izin veren bir prosedürü açıklıyoruz.

Nöral Analizi Yetişkin Fare V-SVZ&#39;una Hücre istikrarlı ve verimli Genetik Modifikasyon Kök Hücre Özerk ve Non-özerk Etkileri

Bu protokolün amacı, belirli bir lokal nöral devrenin kemogenetik manipülasyonuna yanıt olarak yetişkin nöral kök/progenitor hücrelerin davranışını analiz etmek için bir yaklaşım tanımlamakta.

Yetişkin hipokampal sinirsel precursor hücrelerinin devre spesifik Yönetmeliği

İndüklenebilir bir transgenik soy izleme fare çizgisi kullanarak kök hücreleri ve soylarını bir florofor ile kalıcı olarak işaretleme yeteneği, in vivo aktivasyon, proliferasyon, göç ve / veya farklılaşmanın mekansal ve zamansal analizine izin verir. Soy izleme, soy bağlılığı, müdahaleye yanıt ve çok potansiyelli hakkında yeni bilgiler ortaya çıkarabilir.

Yetişkin Fare Beynindeki İndüklenebilir Floresan Etiketli Kök Hücrelerin Soy İzi

Burada, floresan ile aktive olmuş çekirdekler (FAN) sıralama yoluyla çoğu nöronu dışlayan fare dentat girusundan izole edilen tek çekirdekleri sıralamak için bir yöntem sunulmaktadır. Bu yaklaşım, yüksek kaliteli ekspresyon profilleri oluşturur ve nöral kök hücreler gibi kıt popülasyonlar da dahil olmak üzere niş içinde temsil edilen diğer hücre tiplerinin çoğunun incelenmesini kolaylaştırır.

Hipokampal Nörojenik Nişi İncelemek için Tek Çekirdekli RNA Dizilimi ile Birleştirilmiş Floresan Aktive Edilmiş Çekirdekler Negatif Nöronik Sıralama

Burada, erişkin murin subventriküler bölgesinden izole edilen genişletilmiş nöral kök hücrelerde (NSC'ler) gen iletim verimliliğini artırmak için tasarlanmış bir nükleofeksiyon sistemini açıklıyoruz. Bulgular, bu yöntemin NSC'lerde gen bozulmasını önemli ölçüde iyileştirdiğini, geleneksel transfeksiyon protokollerinin etkinliğini aştığını ve hücre sağkalım oranını artırdığını göstermektedir.

Erişkin Murin Subventriküler Bölgesinden Nöral Kök Hücrelerin İzolasyonu, Genişlemesi ve Nükleofeksiyonu

Nörit büyüme testleri, rejeneratif nöronal süreçler hakkında nicel bir değer sağlar. Bu yarı otomatik yazılımın avantajı, bir maske oluşturarak hücre gövdelerini ve nöritleri ayrı ayrı bölümlere ayırması ve nörit uzunluğu, dal noktası sayısı, hücre-gövde küme alanı ve hücre kümesi sayısı gibi çeşitli parametreleri ölçmesidir.

Nörit büyüme ölçümü için yeni bir yarı otomatik yazılımın standardizasyonu 

Keşfedin NF-κB bağımlı yetişkin hipokampal nörogenez modülasyon ve analiz yöntemlerini. Farelerde davranışsal testler ve histolojik analizlerle bilişsel sonuçları ve yapısal değişiklikleri araştırın.

NF-KB-bağımlı yetişkin nöron Modülasyon ve Analiz Yöntemleri

Daha fazla video keşfet