Fare modeli değiştirilmiş manşet tekniği kullanarak pankreas nakli için

Benim adım Benno Cardini, Innsbruck Tıp Üniversitesi İç Organ, Organ Nakli ve Göğüs Cerrahisi Anabilim Dalı Daniel Swarovski Araştırma Laboratuvarı'ndan. Bugün size modifiye manşet tekniği kullanılarak pankreas nakli için bir fare modeli göstereceğiz. Donör hayvanı intraperitoneal ketamin ve ksilazin enjeksiyonu ile uyuşturun ve karın bölgesini tıraş edin.

Daha sonra alıcıyı sırtüstü pozisyonda bir ameliyat alanına yerleştirin ve cerrahi bölgeyi klorheksidin ile üç kez ovalayın. Şimdi, kasık bölgesinden ksifoide doğru bir orta hat laparotomisi yapın ve ameliyat alanında daha iyi bir görüş elde etmek için insizyonu subkostal olarak her iki tarafa genişletin. Daha sonra iç organları sol tarafa doğru dışa doğru genişletin ve heparini infrarenal vena kavaya enjekte edin.

Bir sonraki adımda, sol renal venin geçişine proksimalden abdominal aortu tanımlayın, aortu zayıflatın ve o noktada bağlayın. Şimdi, karaciğer hilusuna gidin, karaciğere yakın ortak safra kanalını tanımlayın ve inceleyin ve pankreasa yakın bir yerde bağlayın. Son olarak, ortak safra kanalını bağın üzerine geçirin.

Daha sonra, venöz anastomoz için yeterli uzunluk elde etmek için karaciğere yakın portal veni inceleyin. Bir ipucu olarak, daha sonra daha kolay tanımlama için portal ven üzerinde küçük bir karaciğer parçası bırakın. Daha sonra, periaortik dokudaki sol böbrek damarını zayıflatın ve bağlayın.

Daha sonra bağın sağ tarafında kalarak renal veni ve periaortik dokuyu kesin. Daha sonra, abdominal aortu çölyak gövdesinden diyaframa kadar künt bir şekilde inceleyin, diyaframa yakın aortu zayıflatın ve bu noktada kesin. Ardından, tüm bel dallarını tanımlayın ve pıhtılaştırın ve bunları kesin.

Şimdi aortu önceden ayarlanmış ligatür altında kesin. Şimdi pankreası aort yaması yoluyla buz gibi soğuk perfüzyon solüsyonu ile portal venden çıkan atık suyu görene kadar perfüze edin. Üstte perfüze portal veni ve altında perfüze aortu görebilirsiniz.

Şimdi iç organları periton boşluğuna yerleştirin ve 8-0 kullanarak pankreası bağırsaktan adım adım ayırın ipek ligatürler. Postpilorik bölgeden başlayarak duodenumu iki kez baltalayın ve 8-0 çekin içinden ipek bağ. Sonra onu bağlayın ve pankreası duodenumdan keskin bir şekilde ayırın.

Bu yaklaşım, Treitz ligamenine ulaşana kadar tekrar tekrar gerçekleştirilir. Olası kontaminasyon nedeniyle grefti deneylerden çıkaracağı için duodenuma zarar vermemek önemlidir. Pankreas duodenumdan tamamen ayrıldıktan sonra, mezenteryuma geçin, onu baltalayın ve bağlayın ve sonra onu kesin.

Önceki adımlara benzer şekilde, pankreası enine kolondan baltalayarak, bağlayarak ve son olarak keserek ayırın. Şimdi aynı yaklaşımı kullanarak, ligasyondan sonra keskin bir şekilde diseke ederek pankreası safra bölgesinden ayırın. Daha sonra, pankreası mideden künt bir şekilde inceleyin.

Sol gastrik arteri tanımlayın, bağlayın ve kesin. Sonunda, pankreası bağlı dalak ile çıkarın ve daha fazla implantasyon olana kadar buz gibi soğuk reperfüzyon solüsyonuna koyun. Dalağı tutamak olarak kullanın.

Donöre benzer şekilde, alıcı hayvanı intraperitoneal ketamin ve ksilazin enjeksiyonu ile uyuşturun ve servikal bölgeyi tıraş edin. Daha sonra donör hayvanı ameliyat alanına sırtüstü pozisyonda koyun ve servikal bölgeyi klorheksidin ile üç kez ovalayın. Ardından, juguler kesiden sağ mandibular açıya kadar bir cilt kesisi yapın.

Daha sonra, sağ dış juguler venin tüm yan dallarını tanımlayın, harekete geçirin, zayıflatın ve bipolar pıhtılaşmadan sonra bölün. Daha sonra, sağ submandibular bezin alt kutbunu kavrayın, kraniyal olarak kaldırın ve besleme damarlarının bipolar pıhtılaşmasından sonra inceleyin. Şimdi bipolar pıhtılaşmadan sonra sağ dış juguler venin tüm medial dallarını kesin.

Dış juguler veni mümkün olduğunca iki kat daha fazla kraniyal olarak bağlayın ve ligatürler arasında bölün. Dış juguler venin proksimal ucunu bir polietilen manşetten geçirin. Burada manşetin sapının ameliyatı yapan cerraha bakması önemlidir.

Bir sonraki adım olarak, lateral taraftan gelen mikrovasküler venöz klempi yerleştirin. Şimdi damarı heparin ile nemlendirin, bağı çıkarın ve damarı nazikçe polietilen manşetin üzerine çekin. Sonunda, damarı manşetin üzerine dairesel bir 8-0 ile sabitleyin Arkada bir düğüm ve önde üç düğüm olan ipek bağ.

Sağ ortak karotis artere erişim sağlamak için, proksimal ve distal pıhtılaşmadan sonra sağ sternokleidomastoid kası mobilize edin ve kesin. Daha sonra, vagal sinir gibi bitişik yapılara zarar vermemeye dikkat ederek ortak karotis arteri nazikçe harekete geçirin. Damara benzer şekilde, ortak karotis arteri mümkün olduğunca kraniyal olarak iki kez bağlayın ve ligatürler arasında bölün.

Şimdi damarı arteriyel manşetten geçirin. Son olarak, arteriyel manşeti medial taraftan gelen mikrovasküler kelepçe ile sabitleyin. Daha sonra, ligatürü çıkarın ve damar genişleticileri kullanarak arterin lümenini genişletin.

Lümenin yeterince genişlemesinden sonra, arteri arteriyel manşetin üzerine çekin. Sonunda, damara benzer şekilde, arteri 8-0 ile sabitleyin ipek ligatür. Burada arteriyel venöz anastomoz için onarılan damar ve arteri görebilirsiniz.

İmplantasyon için, grefti servikal bölgede nemli bir Ace üzerine yerleştirin. Ardından, portal damarını 8-0'dan çekin ipek ligatür halkası, gerilimsiz bir anastomoz için damarı kısaltın ve ardından portal veni venöz manşetin üzerine çekin. Son olarak, damarı dairesel bir 8-0 ile sabitleyin ipek ligatür.

Damara benzer şekilde, aort kütüğünü bir ligatür halkasından geçirin ve aortu kısaltın. Ardından, aortu arteriyel manşetin üzerinden çekin ve son olarak dairesel bir 8-0 ile sabitleyin ipek ligatür. Reperfüzyondan önce, dalak damarlarını tanımlayın ve bunları bağlayın ve son olarak keskin bir şekilde inceleyin ve dalağı çıkarın.

Reperfüzyon için önce venöz klempi çıkarın, ardından arteriyel klempi çıkarın. Greftin yeterli bir reperfüzyonu, arterin gözle görülür bir nabzını ve tüm greftin pembemsi bir rengini gösterir. Grefti normotermik salin solüsyonu ile nemlendirin.

Yara kapanmadan önce, damarın bükülmesini önlemek için venöz manşetin sapını çıkarın. Sonunda, yarayı 6-0 koşu sütürüyle kapatın ve deri altına 0.5 mililitre normotermik salin enjekte edin. Modeli doğrulamak için, nakledilen pankreasın endokrin fonksiyonunu test ettik.

Fareler, ameliyattan dört gün önce streptozotosin ile ön tedavi ile hipoglisemik hale getirildi ve kan şekeri seviyeleri yüzde 300 miligramın üzerindeyse hipoglisemik olarak kabul edildi. Bu çizgi çekimi, nakli yapılmamış canlı kontrol farelerinin kan şekeri seviyelerini kırmızı renkle ve uzun süreli soğuk iskemi süresine maruz kalmamış greft alıcılarının kan şekeri seviyelerini mavi renkle göstermektedir. Ek olarak, 16 saatlik soğuk iskemi süresine maruz kalan pankreas grefti alıcılarının kan şekeri seviyeleri yeşil renkle gösterilmiştir.

Canlı fareler tüm gözlem süresi boyunca hipoglisemik kaldı. Buna karşılık, uzun süreli soğuk iskemi süresine maruz kalmayan pankreas greftlerinin nakli, 24 saat içinde normal glisemi ile sonuçlandı ve greftin endokrin fonksiyonunu doğruladı. 16 saatlik soğuk iskemi süresine maruz kalan greftlerin nakli, alıcılara normal glisemiyi geri kazandırmadı.

Dahası, bu grupta tüm fareler, erken greft hasarına bağlı iskemi reperfüzyon hasarı nedeniyle 48 saat içinde safide edilmek zorunda kaldı. Bu videoda, dikişsiz manşet tekniği kullanılarak farelerde pankreas nakli için bir yöntem sunduk. Bu, mükemmel başarı oranları ile teknik ve mikrocerrahi olarak mümkündür.

Bununla birlikte, kanal tıkanıklığına bağlı pankreasın progredient fibrozu göz önüne alındığında, bu modelin erken iskemi reperfüzyon yaralanması ile ilişkili greft hasarına odaklanan araştırma alanları için en uygun olduğu kanaatindeyiz.