Name: Hazırlık ve İn Vitro Mıknatıslanmış karakterizasyonu Endotel Hücreleri miR-modifiye (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-05-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 58 s
Description: Öğrenin, endotelyal hücrelere mikroRNA teslimi ve manyetik hücre rehberliği için PEI/MNP vektörü kullanarak hücre modifikasyonu. Bu yöntem rejeneratif tıpta hücre tutunmasını ve MRI görüntüleme yeteneğini artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Biz filtrelenmiş superparamanyetik nanopartiküllerin TEM görüntüleri kazanılmasında ve bunların X-ışını analizi yapan teknik destek için G. Fulda (Elektron Mikroskopi Merkezi, Rostock Üniversitesi, Almanya) teşekkür etmek istiyorum. RTC Rostock yürütülen çalışmalar Federal Eğitim Bakanlığı ve Araştırma Almanya (FKZ 0312138A, FKZ 316.159 ve VIP + 03VP00241) ve AB Yapısal Fonları ile Devlet Mecklenburg-Vorpommern (ESF / IV-WM-B34- tarafından desteklenmiştir 0030/10 ve ESF / IV-BM-B35-0010 / 12) ve DFG (DA 1296-1), Islak-Vakfı ve Alman Kalp Vakfı (F / 01/12) ile. Frank Wiekhorst AB 7.ÇP araştırma programının &quot;Nanomag&quot; FP7-NMP-2013-BÜYÜK-7 tarafından desteklenmiştir.

Biz ifşa rakip mali çıkarlarını hiçbir var.

Onların bundan başka manyetik kontrollü rehberlik için superparamanyetik nanopartiküller ile yüklü genetik hücrelerin üretimi mevcut protokol sunulmuştur. Bu stratejinin başarılı bir uygulama nakli için hedeflenebilir bir hücre ürünü sunarak, örneğin yaralı alan 2, 3, 4, düşük tutma ve zayıf engraftment olarak hücre tedavisi, bazı zorluklar, çözünürlüğü sağlar. Ayrıca, uygun bir şekilde seçilmiş bir genetik materyalin eş zamanl...

Gen ve hücre terapisi CVD tedavisinde güncel zorlukları çözmek için potansiyele sahip güçlü araçlardır. Bu yaklaşımların her ikisi halen klinik deneylerle test ediliyor olmasına rağmen, henüz geniş klinik uygulamada 1 için hazır değildir. Özellikle, gen ve hücre tedavisi güçlüğün üstesinden gelmek için, ortak bir yaklaşımı, klinik uygulama için uygun olan çok işlevli bir gen iletim vektörleri geliştirmektir. Güvenli ve verimli gen aktarım sistemlerinin eksikliği gen terapisinin önemli konudur. Aynı zamanda, hücresel ürünlerin genetik mühendisliği gibi düşük verim (örneğin, kalp alanında, fonksiyonel iyileşme sadece yaklaşık% 5 elde edilir sonrası kök hücre nakli 1 gibi hücre tedavisinin ciddi zorluklar üstesinden naklinden önce saat po dakika içinde% 10 -) ve zayıf tutma / yaralanma yerinde melezleme (yani, hücre tutma altında 5 damlaSt-uygulama, uygulama yolundan bağımsız 2, 3, 4). Bugüne kadar, viral vektörler, büyük ölçüde klinik çalışmalarda daha geniş bir uygulama ile sonuçlanmıştır verimlilik açısından viral olmayan sistemler (~% 67) 5 üzerindedir. Ancak, viral araçlar taşınan genetik malzeme 6&#39;nın boyutu ciddi (şiddetli komplikasyonlara ve sonraki enflamatuar tepki,) bu tür immünojenisite gibi riskler, onkojeniklik ve sınırlamaları taşırlar. Bu güvenlik kaygıları ve viral vektör üretiminin yüksek maliyetler nedeniyle, viral olmayan sistemlerin kullanımı bazı durumlarda 7, 8 tercih edilir. Bu, örneğin (CVD tedavisi için, örneğin,) anjiyogenezi kontrol büyüme faktörünün ekspresyonu gibi geçici genetik düzeltme gerektiren bozuklukların veya delive için özellikle uygunduraşıların ry. Grubumuz, bir iletim sistemi dallı bir 25-kDa &#39;lık polietilenimin (PEI) ve biyotin-streptavidin interaksiyonundan 9 ile birbirine bağlanmış süperparamanyetik demir oksit nano-tanecikleri (MNT) birleştirilmesi ile tasarlanmıştır. Bu vektör, transplantasyondan önce bunların eşzamanlı olarak manyetizasyon sağlayan hücrelerin genetik mühendisliği için potansiyel bir araçtır. İkincisi, gelişmiş manyetik hedefleme teknikleri başarıyla 10 geliştirilmektedir olarak, günümüzde özellikle umut vericidir manyetik rehberlik / birikmesiyle bağlantılı bir temel oluşturur. Dahası, ortaya çıkan manyetik tepkili hücreler olma potansiyeline sahip olmayan invaziv manyetik rezonans görüntüleme (MRI) veya manyetik parçacık görüntüleme 11, 12 ile izlenebilir. PEI / MNP vektörü durumunda, poliamin düşürücü etken nükleik asit yoğunlaşmasını ve böylece koruma sağlar<html> s, hücrelerde vektör içselleştirme ve endozomal 5 kaçmak. MNPS manyetik yönlendirme açısından değil, aynı zamanda bilinen PEI toksisite 7, 13, 14 azaltarak, sadece, PEI özelliklerini tamamlar. Daha önce, PEI / MNP vektör özellikleri fibroblastlar ve mezenkimal kök hücreleri 15, 16 kullanılarak temin verimi (yani, pDNA ve miRNA) ve güvenlik açısından ayarlandı. Bu yazıda, miRNA modifiye edilmiş hücrelerin üretilmesi için PEI / MNPS uygulanması hakkında detaylı bir protokol 17 tarif edilmiştir. Bu amaçla, HUVECler kullanılmış ve in vitro olarak anjiyojenez için kurulmuş bir modelini temsil eder. Onlar transfect zorlu ve toksik etkisi 18, 19 duyarlıdıreşek = &quot;xref&quot;&gt; 20. Buna ek olarak, bunların hedefleme, hücreler arası iletişim, ve MR tespiti de dahil olmak üzere, in vitro olarak bu tür hücreleri, değerlendirmek için bir algoritma sağlar.

<table><tbody><tr><td>PEI 25 kDa</td><td>Sigma Aldrich</td><td>408727</td><td></td></tr><tr><td>EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin</td><td>Thermo Scientific</td><td>21335</td><td></td></tr><tr><td>PD-10 Tuzdan Arındırma Kolonları</td><td>GE Healthcare</td><td>17085101</td><td>Sephadex G-25 Orta</td></tr><tr><td>Ninhidrin Reaktif çözeltisi İçeren %2</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>7285</td><td></td></tr><tr><td>Glisin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>410225</td><td></td></tr><tr><td>Pierce Biotin Kantitasyon Kiti</td><td>Thermo Scientific</td><td>28005</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplaka okuyucu Model 680</td><td>Bio-Rad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Streptavidin MagneSphere Paramanyetik Parçacıklar</td><td>Promega</td><td>Z5481</td><td></td></tr><tr><td>Millex-HV PVDF Filtre</td><td>Merck</td><td></td><td>SLHV013SL 0.45 ve mikro; m</td></tr><tr><td>Libra 120 transmisyon elektron mikroskobu</td><td>Zeiss</td><td></td><td>İvme Gerilimi 120&nbsp; kV</td></tr><tr><td>Safir X-ışını dedektörü</td><td>EDAX-Amatek</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü plastik</td><td>TPP</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NHS-Esther Atto 565</td><td>ATTO-TEC GmbH</td><td>AD 565-31</td><td></td></tr><tr><td>NHS-Esther Atto 488&nbsp;</td><td>ATTO-TEC GmbH</td><td>AD 488-31</td><td></td></tr><tr><td>Cy5 miRNA Etiket IT kiti</td><td>Mirus Bio</td><td>MIR 9650</td><td></td></tr><tr><td>Biotin Atto 565</td><td>ATTO-TEC GmbH</td><td>AD 565-71</td><td></td></tr><tr><td>Kollajen Tip IV Gibco</td><td>Thermo Scientific</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>Endotelyal büyüme ortamı, EGM-2</td><td>Lonza</td><td>CC-3156 & CC-4176</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin / Streptomisin</td><td>Termo Bilimsel</td><td>15140122</td><td>100 U / mL, 100 ve mikro; g/mL</td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>BD Biosciences</td><td>356234</td><td></td></tr><tr><td>anti-PECAM-1 antikoru</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-1506</td><td></td></tr><tr><td>MS MACS kolonları</td><td>Miltenyi Biotec&nbsp;</td><td>130-042-201</td><td></td></tr><tr><td>Near-IR Canlı/Ölü Hücre Leke Kiti</td><td>Thermo Scientific</td><td>L10119</td><td></td></tr><tr><td>Cy3 Boya Etiketli Pre-miR Negatif Kontrol</td><td>Thermo Scientific</td><td>AM17120</td> <td>"Cy3-miR" veya "Siyanin-miR3" el yazmasında</td></tr><tr><td>Pre-miR miRNA Öncü Molekülleri - Negatif Kontrol&nbsp;</td><td>Thermo Scientific</td><td>AM17110</td><td>"scr-miR" el yazmasında</td></tr><tr><td>Anti-has-miR92a-3p sentetik İnhibitör&nbsp;</td><td>Thermo Scientific</td><td>AM10916</td><td></td></tr><tr><td>LSM 780 ELYRA PS.1 sistemi</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>Sigma Aldrich</td><td>158127</td> PBS DAPI nükleer <td>lekesinde %4'lük çözelti</td></tr><tr><td></td><td>Thermo Scientific</td><td>D1306</td><td></td></tr><tr><td>NucleoSpin RNA izolasyon Kiti</td><td>Machery-Nagel</td><td>740955</td><td></td></tr><tr><td>mirVana miRNA İzolasyon</td><td>Kiti Thermo Scientific</td><td>AM1560</td><td></td></tr><tr><td>TaqMan MicroRNA Ters Transkripsiyon Kiti</td><td>Thermo Scientific</td><td>4366596</td><td></td></tr><tr><td>StepOnePlus Gerçek Zamanlı PCR Sistemi</td><td>Uygulamalı Biyosistemler</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yüksek Kapasiteli cDNA Ters Transkripsiyon Kiti</td><td>Thermo Scientific</td><td>4368814</td><td></td></tr><tr><td>has-miR-92a TaqMan testi</td><td>Termo Bilimsel</td><td>000431</td><td>Olgun miRNA Dizisi: UAUUGCACUUGUCCCGGCCUGU</td></tr><tr><td>FastGene Taq Hazır Karışım</td><td>Nippon Genetics</td><td>LS27</td><td></td></tr><tr><td>ITGA5 TaqMan testi</td><td>Thermo Scientific</td><td>Hs01547673_m1</td><td></td></tr><tr><td>RNU6B TaqMan testi</td><td>Thermo Scientific</td><td>001093</td><td></td></tr><tr><td>18S rRNA Endojen Kontrol</td><td>Thermo Scientific</td><td>4333760F</td><td></td></tr><tr><td>Jelatin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G7041</td><td></td></tr><tr><td>CellTrace Calcein Kırmızı-Turuncu</td><td>Thermo Scientific</td><td>C34851</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Pan Biotech</td><td>P04-53500</td><td></td></tr><tr><td>BSA</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MACS tamponu</td><td>Miltenyi Biotec&nbsp;</td><td>130-091-221</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A9539</td><td></td></tr><tr><td>7.1 Tesla hayvan MRI sistemi</td><td>Bruker Corporation</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ yazılımı</td><td>Ulusal Sağlık</td><td></td> Enstitüleri <td>bir AngiogenesisAnalyzer (NIH)</td></tr> <tr><td>MPS cihazı</td> ile yükseltildi <td>Bruker Biospin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Matlab yazılımı</td><td>Mathworks</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Halka Neodim Mıknatıs&nbsp;</td><td>magnets4you GmbH</td><td>RM-10x04x05-G</td><td>&oslash; 10 mm; kalıcılık ~ 1.3&nbsp; T, zorlama ve ge; 955 kA/m</td></tr><tr><td>Click-iT EdU Alexa Fluor 647 Görüntüleme Kiti</td><td>Thermo Scientific</td><td>C10340</td><td></td></tr><tr><td>FluorSave Reaktifi</td><td>Merck</td><td>345789</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasonik banyo</td><td>Bandelin elektronik</td><td>Tip: RK 100 SH</td><td></td></tr></tbody></table>

hazırlık ve<em&gt; İn vitro</em&gt; mıknatıslanmış karakterizasyonu endotel hücreleri mir-modifiye

Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

Bugüne kadar, kardiyovasküler hastalıklar için mevcut cerrahi ve farmakolojik tedaviler (CVD) sınırlıdır ve genellikle palyatif. Aynı zamanda, gen ve hücre tedavileri CVD tedavisi için son derece ümit verici bir alternatif yaklaşımlardır. Ancak, gen terapisi birçok klinik uygulaması büyük ölçüde uygun gen iletim sistemlerinin eksikliği ile sınırlıdır. Uygun gen dağıtım vektörlerinin gelişimi hücre tedavisi mevcut sorunlara bir çözüm sağlayabilir. Örneğin yaralı organda sınırlı verimlilik ve düşük hücre tutma gibi belirli mevcut dezavantajların, içinde, uygun hücre mühendisliği ile (yani, genetik) transplantasyondan önce üstesinden gelinebilir. Sunulan protokol, bir polietilenimin süperparamanyetik manyetik nanoparçacık (PEI / MNP) tabanlı bir iletim vektörü kullanılarak endotel hücreleri, verimli ve güvenli geçici modifikasyonu da tarif edilmektedir. Ayrıca, algoritma ve hücre karakterizasyonu için yöntemler tarif edilmiştir. başarılı intracellumikroRNA, insan göbek damarı endotel hücrelerine (MIR) (HUVECler) ve lar dağıtım hücre canlılığı, fonksiyonu veya hücreler arası iletişim etkilemeden elde edilmiştir. Üstelik bu yaklaşım tanıtıldı eksojen miR güçlü fonksiyonel etkiye neden olduğu kanıtlandı. Önemli olarak, bu MNP-esaslı vektörün uygulaması manyetik hedefleme ve invazif olmayan MR izleme olanaklarını eşlik ile hücre mıknatıslanma sağlamaktadır. Bu MR ile non-invazif olarak izlenebilir manyetik destekli, genetik olarak işlenmiş hücre terapötik bir temel teşkil edebilir.

Önerilen protokolün amacı, manyetik açıdan karşılık miR-modifiye edilmiş hücreler üretmek için ve doğru olarak nitelendirilebilir (Şekil 1) yapmaktır. Sonuç olarak, MRI ile manyetik seçimi ve rehberlik duyarlı ve saptanabilir verimli transfekte hücreler, elde edilmelidir. İlk olarak, izole edilmiş HUVEC kimlikleri endotelyal işaretleyici CD31 ile tipik boyama (PECAM) (Şekil 2A) ve uygun taban ...

Bu yazıda bir PEI / MNP vektörü ve mıknatıslanarak endotel hücrelerine miR verimli, viral olmayan iletimi açıklanır. Bu nedenle, genetik modifikasyon ek olarak, bu yaklaşım, manyetik hücre rehberlik ve MR taranabilirlik sağlar. teknik terapötik hücre ürünleri özelliklerini geliştirmek için de kullanılabilir.

Hazırlık ve<em&gt; İn Vitro</em&gt; Mıknatıslanmış karakterizasyonu Endotel Hücreleri miR-modifiye

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

Bu prosedürün genel amacı, hücrelerin mikroRNA ile modifikasyonunu ve eş zamanlı olarak hücrelerin mıknatıslanmasını sağlayan bir tekniği tanıtmaktır. Bu yöntem, transplantasyon öncesi hücrelerin genetik mühendisliği gibi rejeneratif tıp alanındaki temel zorlukların çözümüne yönelik olabilir.MikroRNA ile gerçekleştirilen etkili hücre modifikasyonuna ek olarak, demir oksit ile modifikasyon yapılmasına da olanak sağlanmıştır. Bu yöntem, manyetik alan uygulamasıyla ilgilenilen bölgedeki hücre tutulumunu artırmak için kullanılabilir. Hücre tedavisi, kalp hastalıklarının tedavisi için oldukça gelecek vaat etmektedir; ancak düşük hücre tutulumu ve hücre sağkalımıyla ilgili durumların acilen iyileştirilmesi gerekmektedir.Bu prosedüre, metin protokolünde açıklandığı üzere transfeksiyon komplekslerinin hazırlanması için insan göbek ven endotel hücre kültürü ile başlayın. Transfeksiyondan 48 saat önce, HUVEC'leri uygun boyuttaki plastik hücre kültürü kuyucuk plakalarına ekin. Başlangıç hücre yoğunluğu, büyüme yüzeyinin santimetrekare başına yaklaşık 13.000 hücre olacak şekilde ayarlanmalıdır.Ardından, taze miR/polietilenimin/süper paramanyetik demir oksit nanoparçacıkları hazırlayın. İlk ola

preparation-vitro-characterization-magnetized-mir-modified

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu yöntem, fare beyin mikrovasküler endotel hücreleri izole etmek ve ölümsüzleştirmek açıklamaktadır. Biz beyin dokusu, sindirim adımları, tohumlama ve hücre ölümsüzlük ve homojenizasyon başlayarak adım adım protokol açıklar. Genellikle, homojen, ölümsüzleştirdi mikrovasküler endotel hücre hattı elde etmek için yaklaşık beş hafta sürer.

Bir olarak ölümsüzleştirdi murin Beyin Mikrovasküler Endotel Hücre Hattı Üretimi<em&gt; In Vitro</em&gt; Kan Beyin Bariyeri Modeli

Bu videoda, manyetik olarak aktive edilmiş hücre sıralaması (MACS) kullanılarak bir kültürden CD31+ endotelyal progenitör hücrelerin (EPC'ler) saflaştırılması için bir teknik gösterilmektedir. Hücre süspansiyonu, EPC'ler üzerindeki CD31'e bağlanan florofor konjuge bir antikor ile muamele edilir. CD31+ EPC'lerin etiketlenmesinin tamamlanması, floroforlara bağlanan bir antikor kompleksinin ve antikor kompleksine bağlanan polimer kaplı bir manyetik nanopartikülün eklenmesini içerir. Etiketli...

Manyetik Aktive Hücre Sıralaması Kullanılarak CD31+ Endotelyal Öncü Hücrelerin Saflaştırılması

Primer hücre kültürü özellikle belirli gelişim aşamalarında transgenik fare embriyolardan, hücrelerin belirli nüfus analiz etmek için yararlı bir tekniktir. Burada, embriyonik ventriküller disseke ve ayrışmış ve antikor konjuge boncuk tanımak ve daha fazla analiz için endotel hücreleri ayırmak vardır.

Embriyonik Ventriküler Endotel Hücre İzolasyonu

Hedeflerimiz, tasarlamak, üretmek ve endotel hücre yakalama için ferromanyetik stent test edildi. On stent kırığı için test edildi ve 10 daha fazla stent muhafaza manyetik için test edildi. Nihayet, 10 stent in vitro test edildi ve 8 daha stent hücre yakalama ve tutma göstermek için 4 domuzlarda implante edildi.

Endotel Hücre yakalama ve Saklanmasına İlişkin ferromanyetik Bare Metal Stent

Bu protokol, fare koroner endotel hücrelerini görüntüleme veya moleküler biyolojik deneyler yapmak amacıyla izole etme yöntemimizi paylaşmak için hazırlanmıştır.

Fare Koroner Endotel Hücreleri İzolasyon

Bu iletişim kuralı CD133 değiştirmek için güvenli ve verimli bir yordam gösterilmektedir+ hematopoietik kök hücre. Sunulan viral sigara, manyetik polyplex dayalı yaklaşım temel terapötik kök hücre etkileri de manyetik rezonans görüntüleme üzerinden yönetilen hücre ürün izleme gelince optimizasyonu için sağlayabilir.

Yetişkin kemik iliği türevi hematopoetik kök hücre mühendislik manyetik hedefleme ile kombine etkinleştirmek için hücre içine mikroRNA Transfer için iletişim kuralı

Mikrovasküler endotel hücreleri iskelet kas (MMEC) kas kılcal iç duvar şekil ve her ikisi de, düzenleyen sıvıları/molekülleri ve geçiş (bağışıklık) hücre arasında kas doku ve kan değişimi. Birincil fare MMEC, yalıtım burada açıklandığı gibi kapsamlı tüp bebek araştırmalar "myovascular birimi" sağlar.

Birincil fare iskelet kas mikrovasküler endotel hücre izolasyon

Venöz malformasyonun murine ksenogreft modelini oluşturmak için ayrıntılı bir protokol sayılmiyoruz. Bu model, hiper aktive edici TIE2 ve/veya PIK3CA gen mutasyonları içeren hasta kaynaklı endotel hücrelerinin deri altı enjeksiyonuna dayanmaktadır. Ksenogreft lezyonları VM hasta dokusunun histopatolojik özelliklerini yakından özetler.

Venöz Malformasyon için Hasta Kaynaklı Ksenogreft Modeli

Bu protokol, insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerin ayırt edilmesiyle elde edilen beyin mikrovasküler endotel hücrelerini türetmek, genişletmek ve kriyoprezerserve etmek ve bir ex vivo modelde kan beyin bariyeri özelliklerini incelemek için uyarlanmış bir yöntemi detaylandırmaktadır.

İnsan İndüklenen Pluripotent Kök Hücrelerden Beyin Mikrovasküler Endotel Hücrelerinin Derivasyonu, Genişlemesi, Kriyoprezervasyonu ve Karakterizasyonu

Burada, aynı biyolojik kökeni ve doğal hücre dışı veziküllerin (EV'ler) benzer yapısını, morfolojisini ve protein bileşimini paylaşan yeni bir tür eksozom taklitleri (EM'ler) olarak endozomdan türetilmiş nanoveziküllerin büyük ölçekli üretimi için manyetik ayırma destekli yüksek hızlı bir homojenizasyon yöntemini açıklıyoruz.

Endozom kaynaklı veziküllerin büyük ölçekli üretimi için manyetik ayırma destekli yüksek hızlı homojenizasyon yöntemi

Beyin mikrovasküler endotel hücrelerinin (BMEC) neonatal fare beyin dokusundan izole edilmesi ve birincil kültürü için bir protokol sunulur; bu protokol kan-beyin bariyer fonksiyonunu fizyolojik ve patolojik koşullarda incelemek için sağlam bir in vitro model oluşturulur.

Fare Bin Mikrovasküler Endotel Hücrelerinin İzolasyonu ve Kültürü

Öğrenin, endotelyal hücrelere mikroRNA teslimi ve manyetik hücre rehberliği için PEI/MNP vektörü kullanarak hücre modifikasyonu. Bu yöntem rejeneratif tıpta hücre tutunmasını ve MRI görüntüleme yeteneğini artırır.

Hazırlık ve

Daha fazla video keşfet