Name: Hasta Sare Retinasında Mikroglia Dinamikleri ve Sinapslarla Etkileşimlerin Canlı Görüntülemesi ve Karakterizasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-16T12:50:00.000+00:00
Duration: 7 min 19 s
Description: Keşfedin fare retina eksplant modelinde mikroglia dinamikleri ve sinaptik proteinlerle etkileşimleri. Spinning disk konfokal mikroskopi ve makine öğrenimi segmentasyonu kullanarak nörodejeneratif hastalıklarda mikroglia kaynaklı sinaptik budamayı inceleyin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Wu, Y. K., Hengen, K. B., Turrigiano, G. G., Gjorgjieva, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homeostatic+mechanisms+regulate+distinct+aspects+of+cortical+circuit+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Homeostatic mechanisms regulate distinct aspects of cortical circuit dynamics.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 117 (39), 24514-24525 (2020).</li>
<li>Paolicelli, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+pruning+by+microglia+is+necessary+for+normal+brain+development%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Synaptic pruning by microglia is necessary for normal brain development.</a> Science. 333 (6048), 1456-1458 (2011).</li>
<li>Rosin, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+microglia+interact+with+hypothalamic+radial+glia+during+development+and+upregulate+the+TAM+receptors+MERTK+and+AXL+following+an+insult%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Embryonic microglia interact with hypothalamic radial glia during development and upregulate the TAM receptors MERTK and AXL following an insult.</a> Cell Rep. 34 (1), 108587(2021).</li>
<li>Wang, X., Li, K., Guo, L., Liu, X., Guo, Y., Zhang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+changes+in+microglia+development+on+the+plasticity+of+the+developing+visual+cortex+circuit+in+juvenile+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">The influence of changes in microglia development on the plasticity of the developing visual cortex circuit in juvenile mice.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 66 (4), 45(2025).</li>
<li>Blume, Z. I., Lambert, J. M., Lovel, A. G., Mitchell, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+in+the+developing+retina+couple+phagocytosis+with+the+progression+of+apoptosis+via+P2RY12+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Microglia in the developing retina couple phagocytosis with the progression of apoptosis via P2RY12 signaling.</a> Dev Dyn. 249 (6), 723-740 (2020).</li>
<li>Brown, T. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+are+dispensable+for+experience-dependent+refinement+of+mouse+visual+circuitry%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Microglia are dispensable for experience-dependent refinement of mouse visual circuitry.</a> Nat Neurosci. 27 (8), 1462-1467 (2024).</li>
<li>Huang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+use+TAM+receptors+to+detect+and+engulf+amyloid+%CE%B2+plaques%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Microglia use TAM receptors to detect and engulf amyloid β plaques.</a> Nat Immunol. 22 (5), 586-594 (2021).</li>
<li>Ding, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+microglial+SIRP%CE%B1+promotes+synaptic+pruning+in+preclinical+models+of+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Loss of microglial SIRPα promotes synaptic pruning in preclinical models of neurodegeneration.</a> Nat Commun. 12 (1), 2030(2021).</li>
<li>He, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+mediate+synaptic+material+clearance+at+the+early+stage+of+rats+with+retinitis+pigmentosa%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Microglia mediate synaptic material clearance at the early stage of rats with retinitis pigmentosa.</a> Front Immunol. 10, 912(2019).</li>
<li>Yu, A., Fang, C., Tan, L. X., Lakkaraju, A., Della Santina, L., Ou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+target+synaptic+sites+early+during+excitatory+circuit+disassembly+in+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">Microglia target synaptic sites early during excitatory circuit disassembly in neurodegeneration.</a> iScience. 28 (4), 112201(2025).</li>
<li>Xu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptic+changes+and+the+response+of+microglia+in+a+light-induced+photoreceptor+degeneration+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Synaptic changes and the response of microglia in a light-induced photoreceptor degeneration model.</a> Mol Vis. 27, 206-220 (2021).</li>
<li>Paolicelli, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+states+and+nomenclature%3A+a+field+at+its+crossroads%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Microglia states and nomenclature: a field at its crossroads.</a> Neuron. 110 (21), 3458-3483 (2022).</li>
<li>Yu, Z., Gutu, A., Kim, N., O'Shea, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synapse+weakening-induced+caspase-3+activity+confers+specificity+to+microglia-mediated+synapse+elimination%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Synapse weakening-induced caspase-3 activity confers specificity to microglia-mediated synapse elimination.</a> bioRxiv. , (2024).</li>
<li>Miller, E. B., Zhang, P., Ching, K., Pugh, E. N., Burns, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+reveals+transient+microglia+recruitment+and+functional+recovery+of+photoreceptor+signaling+after+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging reveals transient microglia recruitment and functional recovery of photoreceptor signaling after injury.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 116 (33), 16603-16612 (2019).</li>
<li>Wahl, D. J., Ng, R., Ju, M. J., Jian, Y., Sarunic, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorless+adaptive+optics+multimodal+en-face+small+animal+retinal+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Sensorless adaptive optics multimodal en-face small animal retinal imaging.</a> Biomed Opt Express. 10 (1), 252(2019).</li>
<li>Ou, Y., Jo, R. E., Ullian, E. M., Wong, R. O. L., Della Santina, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+vulnerability+of+specific+retinal+ganglion+cell+types+and+synapses+after+transient+ocular+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Selective vulnerability of specific retinal ganglion cell types and synapses after transient ocular hypertension.</a> J Neurosci. 36 (35), 9240-9252 (2016).</li>
<li>Della Santina, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disassembly+and+rewiring+of+a+mature+converging+excitatory+circuit+following+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Disassembly and rewiring of a mature converging excitatory circuit following injury.</a> Cell Rep. 36 (5), 109463(2021).</li>
<li>Ramírez, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglial+changes+in+the+early+aging+stage+in+a+healthy+retina+and+an+experimental+glaucoma+model%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Microglial changes in the early aging stage in a healthy retina and an experimental glaucoma model.</a> Prog Brain Res. 256, 125-149 (2020).</li>
<li>de Hoz, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+early+activation+of+retinal+microglial+cells+in+a+mouse+model+of+unilateral+laser-induced+experimental+ocular+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Bilateral early activation of retinal microglial cells in a mouse model of unilateral laser-induced experimental ocular hypertension.</a> Exp Eye Res. 171, 12-29 (2018).</li>
<li>Soliño, M., Yu, A., Della Santina, L., Ou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large-scale+survey+of+excitatory+synapses+reveals+sublamina-specific+and+asymmetric+synapse+disassembly+in+a+neurodegenerative+circuit%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">Large-scale survey of excitatory synapses reveals sublamina-specific and asymmetric synapse disassembly in a neurodegenerative circuit.</a> iScience. 26 (8), 107262(2023).</li>
<li>Negrini, M., Wang, G., Heuer, A., Björklund, T., Davidsson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((AAV+production+everywhere%3A+a+simple%2C+fast%2C+and+reliable+protocol+for+in-house+AAV+vector+production+based+on+chloroform+extraction%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">AAV production everywhere: a simple, fast, and reliable protocol for in-house AAV vector production based on chloroform extraction.</a> Curr Protoc Neurosci. 93 (1), e103(2020).</li>
<li>Imaris reference manual. , 
 <a target="_blank" href="https://lims.gzzoc.com/files/instrument/20240722/2024072212391299299_ImarisManual.pdf">https://lims.gzzoc.com/files/instrument/20240722/2024072212391299299_ImarisManual.pdf</a> (2024).</li>
<li>Joseph, A., Power, D., Schallek, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+the+dynamics+of+individual+processes+of+microglia+in+the+living+retina+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Imaging the dynamics of individual processes of microglia in the living retina in vivo.</a> Biomed Opt Express. 12 (10), 6157(2021).</li>
<li>Wu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+in+mouse+spinal+cord+reveals+that+microglia+prevent+degeneration+of+injured+axons%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging in mouse spinal cord reveals that microglia prevent degeneration of injured axons.</a> Nat Commun. 15 (1), 8837(2024).</li>
<li>Lee, J. E., Liang, K. J., Fariss, R. N., Wong, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+dynamic+imaging+of+retinal+microglia+using+time-lapse+confocal+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Ex vivo dynamic imaging of retinal microglia using time-lapse confocal microscopy.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49 (9), 4169-4176 (2008).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>25 Gauge İğne</td><td>Alcon</td><td>8065420920</td><td></td></tr><tr><td>26s Gauge 10 & mikro; L Şırınge</td><td>Hamilton</td><td>701RNWG</td><td></td></tr><tr><td>7m8</td><td>Addgene</td><td>64839</td><td>http://n2t.net/addgene:64839</td></tr><tr><td>Bükülüp Kalın-Kalınma Çok Amaçlı 304 Paslanmaz Çelik Tel</td><td>Stanford İleri Malzemeler</td><td>SS3368</td><td>Halka yapmak için çelik tel</td></tr><tr><td>Kalsiyum klorür heksahidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5080-500G</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon Mikroskobu</td><td>Amscope</td><td></td><td>Retinaları disseksiye etmek ve monte etmek için</td></tr><tr><td>Diseksiyon Makasları</td><td>FST</td><td>15024-10</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Glikoz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G7528-250G</td><td></td></tr><tr><td>Forseps</td><td>Dumont</td><td>11252-21</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3375-500G</td><td></td></tr><tr><td>Imaris 10.0.2</td><td>Oxford Instruments</td><td></td><td>Analiz yazılımı</td></tr><tr><td>Imaris Dosya Dönüştürücü</td><td>Oxford Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Loctite Süper Yapıştırıcı Ultra Jel Kontrolü</td><td>Loctite</td><td>1363589</td><td>Halka yapmak için yapıştırıcı</td></tr><tr><td>Magnezyum klorür heksahidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M9272-100G</td><td></td></tr><tr><td>MCE Membran filtre kağıdı (13 mm)</td><td>Millipore</td><td>HABG01300</td><td>0.45 &mu; m Gözenek Boyutu</td></tr><tr><td>Mikroçevre Odası</td><td>Tokai Hit</td><td>STXG-TIZBX-SET</td><td></td></tr><tr><td>Nikon Eclipse Ti2-E ters mikroskop</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>NIS Unsurları</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Neomisin ve Polimiksin B Sülfleri ve Bacitracin Çinko Oftalamik Çözelti Merhem, USP</td><td>Bausch + Lomb</td><td>24208-780-55</td><td></td></tr><tr><td>Fırça Boyutu 00</td><td>Amazon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Prism 8.0</td><td>GraphPad</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Proparakain Hidroklorür Oftalmik Çözelti USP, %0,5</td><td>Sandoz</td><td>61314-0016-01</td><td></td></tr><tr><td>PDL kaplamalı petri kabı (35 mm)</td><td>Matek</td><td>P35GC-1.5-14-C</td><td>No 1.5 Coverslip</td></tr><tr><td>PSD95_pTagRFP</td><td>Addgene</td><td>52671</td><td>http://n2t.net/addgene:52671</td></tr><tr><td>Potasyum klorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9333-500G</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Klorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S7653-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Fosfat Monobazik Monohidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9638-25G</td><td></td></tr></tbody></table>

hasta sare retinasında mikroglia dinamikleri ve sinapslarla etkileşimlerin canlı görüntülemesi ve karakterizasyonu

Live Imaging and Characterization of Microglia Dynamics and Interactions with Synapses in Diseased Murine Retina

Hasta Sare Retinasında Mikroglia Dinamikleri ve Sinapslarla Etkileşimlerin Canlı Görüntülemesi ve Karakterizasyonu

Microglia are the resident macrophages of the central nervous system (CNS) that respond to tissue infection and injury. In addition to their role in ...

live-imaging-characterization-microglia-dynamics-interactions-with

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Source: Maruoka, H., et. al. uyanık farelerde mikroglial dinamiklerin ve nöronal aktivitenin eşzamanlı görüntülenmesi. J. Vis. Exp. (2022) Bu video, görsel stimülasyon sırasında uyanık bir farede nöronal aktiviteyi ve mikroglial dinamikleri görüntülemek için iki fotonlu bir mikroskopi prosedürünü göstermektedir. kalsiyum geçişleri ve hücresel etkileşimler.

Uyanık Bir Farede Mikroglial Dinamiklerin ve Nöronal Aktivitenin Eş Zamanlı Görüntülenmesi

Kaynak: Bosco, A.,  et al.  Nörodejenerasyon Sırasında Retinal Mikroglial Aktivasyonun İn Vivo Dinamiği: Fare Glokomunda Konfokal Oftalmoskopik Görüntüleme ve Hücre Morfometrisi. J. Vis. Uzm. (2015) Bu video, bir fare glokom modelinde retinal mikroglianın in vivo görüntülemesini göstermektedir. Floresan protein eksprese eden retinal mikrogliaya sahip transgenik bir fare, bir oftalmoskop altına yerleştirilir. Kızılötesi aydınlatma, optik sinir başını (ONH) bulmak için kullanılır ve odak düzlemi,...

Glokomun Fare Modelinde Retinal Mikroglia'nın İn vivo Görüntülenmesi

Mikroglia aktivasyonu ve mikroglioz kronik nörodejenerasyona önemli tepkilerdir. Burada, in vivo, konfokal oftalmoskopi retinal CX3CR1-GFP + mikroglial hücreleri uzun süreli görselleştirme için yöntemler sunmak ve eşik ve morfometrik için belirlemek ve aktivasyonunu ölçmek için analiz eder. Biz yaşa bağlı glokomun erken evrelerinde mikrogliyal değişiklikleri takip.

Fare Glokomda Konfokal Oftalmoskopik Görüntüleme ve Hücre morfometrisi: Nörodejenerasyonda sırasında Retina Mikroglial Aktivasyonu Vivo Dynamics

Bu protokolü nasıl yüksek çözünürlüklü spektral etki alanı optik Koherens tomografi gibi görüntüleme teknikleri açıklar ve lazer ophthalmoscopy tarama bir oftalmik görüntüleme platformu üzerinde bilgi edinme sistemiyle küçük Rodents yararlı olabilir dağıtım, hücre sırasıyla retina kalınlığı ve mikroglial.

Vivo Tayf alanlı optik Koherens tomografi ve lazer Ophthalmoscopy tarama Cx3cr1gfp/gfp muhabir farelerin görüntüleme

Bu protokol, nöro-glio-vasküler yapıların uzunlamasına görüntülemesi, hem sağlıklı hem de hastalıklı koşullarda fonksiyon ve fonksiyon için kullanılabilecek kronik bir kafatası pencere implantasyon tekniğini açıklamaktadır. Genellikle tercih edilirken bazı kritik sınırlamalara sahip olan transkraniyal görüntüleme yaklaşımına tamamlayıcı bir alternatif olarak hizmet vermektedir.

Farelerde Nöro-İmmün Dinamiğin Vivo Görüntülemesinde Tekrarlayan Performans için Hassas Beyin Haritalaması

İn vivo görüntüleme, sağlık ve hastalıkta biyoloji çalışmaları için güçlü bir araçtır. Bu protokol, standart iki foton mikroskobu ile fare retinasının transpupiller görüntülemesini tanımlar. Ayrıca, retinanın birden fazla hücresel kohortunu floresan olarak etiketlemek için farklı in vivoimaging yöntemleri göstermektedir.

Transpupiller İki Foton Fare Retinasının In vivo Görüntülenmesi

Burada, uyanık farelerde mikroglial dinamiklerin ve nöronal aktivitenin eşzamanlı görüntülenmesi için adeno ilişkili virüs enjeksiyonunu kraniyal pencere implantasyonu ile birleştiren bir protokolü tanımladık.

Uyanık Farelerde Mikroglial Dinamiğin ve Nöronal Aktivitenin Eşzamanlı Görüntülenmesi

Gelişmekte olan zebra balığı optik tektumunda mikroglia hücrelerinin canlı görüntülemesini gerçekleştirmek için hızlı taramalı konfokal mikroskopiden yararlanan ve bu hücrelerin dinamiklerinin in vivo analizine olanak tanıyan bir yöntem gösteriyoruz.

Zebra Balığı Embriyosunda Mikroglia Dinamiğinin Canlı Görüntülenmesi ve Karakterizasyonu

Biz sürekli fare mikroglia görselleştirme ve dolaşımdaki monositler için bir yöntem...

Kronik İki foton için İnce kafatası Pencere Tekniği In vivo</emNöro-inflamasyon Modelleri murin mikroglia> Görüntüleme

Mevcut video, gelişmekte olan zebrafish önbeyin bireysel nöral progenitör hücrelerin canlı görüntüleme gerçekleştirmek için elektroporasyon ve konfokal mikroskopi kombinasyonu yararlanır bir yöntem gösteriyor.

Gelişmekte olan Zebra balığı önbeyin klonal olarak ilişkilidir Sinir Progenitör Hücreler Zaman atlamalı Canlı Görüntüleme

Keşfedin fare retina eksplant modelinde mikroglia dinamikleri ve sinaptik proteinlerle etkileşimleri. Spinning disk konfokal mikroskopi ve makine öğrenimi segmentasyonu kullanarak nörodejeneratif hastalıklarda mikroglia kaynaklı sinaptik budamayı inceleyin.

Hasta Sare Retinasında Mikroglia Dinamikleri ve Sinapslarla Etkileşimlerin Canlı Görüntülemesi ve Karakterizasyonu

Daha fazla video keşfet