Uzun Süreli Tek Taraflı Üreter Tıkanıklığının Tersine Çevrilmesinden Sonra Uzun Vadeli Yapısal ve Fonksiyonel Sonuçları Değerlendirmek İçin Bir Fare Modeli
18 Temmuz 2025
Bu makale, araştırmacıların, uzun süreli üreter tıkanıklığının tersine çevrilmesinden sonra uzun vadeli yapısal ve fonksiyonel sonuçların analizine izin veren standart bir model kullanarak farelerde geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığı gerçekleştirmelerini sağlamak için ayrıntılı talimatlar sağlar.
Laboratuvarım, böbrek hasarından sonra uzun vadeli sonuçları iyileştirmek için mekanizmalar ve tedavi üzerinde çalışıyor ve bu protokolün özel odak noktası, idrar tıkanıklığının tersine çevrilmesinden sonra uzun vadeli sonuçları incelemek için bir araç geliştirmektir. Böbrekte idrar tıkanıklığını tersine çevirmenin uzun vadeli fonksiyonel ve yapısal sonuçlarını değerlendirmemize olanak tanıyan, tek taraflı geri dönüşümlü üreter tıkanıklığının bir fare modelini geliştirdik. Diğer yöntemler, çoğu laboratuvarın erişemediği birden fazla ameliyat veya mikrocerrahi uzmanlığı gerektirir. Ayrıca bu tek taraflı obstrüksiyon olduğu için diğer yöntemlerin çoğu, split böbrek fonksiyon testleri yapılmadan iyileşmenin fonksiyonel olarak değerlendirilmesine izin vermez. Gerçekten sadece iki tane var. Birincisi, her deneyde vasküler klempin proksimal üreter üzerinde aynı pozisyonda tutarlı bir şekilde yerleştirilmesi, ikincisi ise vasküler klempin birkaç gün sonra üreter veya böbreğe zarar vermeden çıkarılmasıdır.
[Rachel] Başlamak için, anestezi uygulanmış bir farenin cerrahi tarafını antiseptiklerle hazırlayın. Makas ve forseps kullanarak cilt ve deri altı katmanları boyunca orta hat boyunca 1,5 santimetre uzunlamasına dorsal kesi yapın. Böbreğin üzerindeki sol yan kas ve fasyadan küçük bir kesi yapın. Daha sonra bir çift forseps ile sol böbreği dışsallaştırın. Künt forseps kullanmak. Alt kutuptaki yağı ve üreterin yakınındaki bir miktar bağ dokusunu dikkatlice inceleyin. Üreter bölgesini bulun. Ardından, renal ven ve arterin klemp ile dahil edilmesini önlemek için üreteri bağ dokusu ile birlikte renal pedikülden ayırın. Vasküler kelepçeyi açmak için kelepçe aplikatörleri kullanın ve doğrudan üreterdeki renal pelvisin altına yerleştirin. Tüm farelere eşit basınç uygulandığından emin olmak için kelepçe üzerindeki işaretleri kullanın. Şimdi böbreği kelepçe ile nazikçe retroperitoneal boşluğa geri itmek için tuzlu suya batırılmış steril bir pamuklu çubuk kullanın. Ardından emilebilir bir dikiş kullanarak kas tabakasını dikin. Cilt katmanını kapatmak için cilt klipsleri kullanın. Üreter kelepçesini çıkarmak için yara klipslerini çıkarın ve kelepçeye erişmek için orijinal kesileri kullanarak cerrahi alanı yeniden şekillendirmeden temizleyin. Kas tabakasını yeniden açın ve retroperitoneal boşluğu ortaya çıkarın. Böbreği dışsallaştırmadan klempi retroperitoneal boşluğa dikkatlice yerleştirmek için forseps kullanın. Kelepçe aplikatörleri ile, güvenli bir şekilde çıkarmak için forseps kullanarak çevreleyen dokuyu çekerken kelepçeyi yavaşça açın. Şimdi renal pelviste tıkanıklık olup olmadığını kontrol etmek için böbreği dışarıya çıkarın. Şişmiş bir renal pelvis hidronefrozu doğrular. Tuzlu suya batırılmış steril bir pamuklu çubuk kullanarak böbreği retroperitoneal boşluğa geri itin ve insizyonu gösterildiği gibi dikin. Kontralateral nefrektomi yapmak için, orijinal cilt kesisini kullanarak dorsal bölgeyi yeniden açın. Boyut olarak, sağ yan kas ve böbreğin üzerinde fasya. Ardından forseps kullanarak sağ böbreği dışarıya çıkarın. Sağ böbreği pürüzsüz, kavisli forseps ile tutun ve üst ve alt kutupları çevre dokudan ayırın. Böbreği serbest bıraktıktan sonra, çift cerrahi düğüm kullanarak böbrek damarlarının ve üreterin etrafına bir Foro ipek sütür bağlayın. Böbrek koyulaşana kadar yaklaşık 30 saniye bekleyin. Ardından pürüzsüz kavisli forseps ile tutun ve kavisli makas kullanarak düğümün distalini keserek çıkarın. Kalan böbrek pedikülünü tuzlu suya batırılmış steril bir pamuklu çubuk kullanarak yavaşça retroperitoneal boşluğa geri itin, ardından dikişler ve klipsler kullanarak kas ve cilt katmanlarını kapatın. Tipik sağkalım ve böbrek fonksiyon ölçümleri, geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığından 84 gün sonra yapıldı. Fonksiyonel çalışmalar, geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığını, kan üre azotu, transdermal glomerüler filtrasyon hızı ve 18 saatlik su yoksunluğundan sonra idrar ozmolaritesi açısından tek başına nefrektomi ile karşılaştırdı. İdrar ozmolarite değerleri, aynı zaman noktalarında nefrektomi kontrol farelerinden belirgin şekilde daha düşüktü.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu çalışma, farelerde geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığının gerçekleştirilmesi için standart bir protokol sunmakta ve idrar tıkanıklığının tersine çevrilmesinin ardından uzun vadeli sonuçların analizini kolaylaştırmaktadır.
Çalışmanın Temel Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nefroloji
- Hayvan Modelleri
- Böbrek Hasarı Araştırmaları
Arka Plan
- Böbrek hasarı sonrası uzun vadeli sonuçları araştırmak, etkili tedaviler geliştirmek için kritik öneme sahiptir.
- Mevcut yöntemler genellikle karmaşık cerrahi beceriler veya çoklu ameliyatlar gerektirir.
- Bu model, kapsamlı cerrahi uzmanlık gerektirmeden fonksiyonel değerlendirme sağlar.
- Tek taraflı tıkanıklık, bölünmüş renal fonksiyon testleri olmadan iyileşmeyi değerlendirmek için eşsiz bir fırsat sunar.
Çalışmanın Amacı
- Idrar tıkanıklığının tersine çevrilmesinden sonra uzun vadeli sonuçları incelemek için güvenilir bir fare modeli geliştirmek.
- Araştırma laboratuvarlarında daha geniş erişilebilirlik için cerrahi prosedürü basitleştirmek.
- Tıkanıklık sonrası fonksiyonel ve yapısal böbrek iyileşmesini değerlendirmek.
Kullanılan Yöntemler
- Cerrahi alanın hazırlanması ve farenin anestezi altına alınması.
- Böbrek ve üretere erişim için uzunlamasına bir insizyon yapılması.
- Tıkanıklığı indüklemek için vasküler bir klemp yerleştirilmesi.
- Klempin çıkarılması ve zamanla böbrek fonksiyonu ve yapısının değerlendirilmesi.
Ana Sonuçlar
- Fonksiyonel çalışmalar, tıkanıklıklı ve nefrektemize edilmiş fareler arasında böbrek fonksiyonunda önemli farklılıklar göstermiştir.
- Nefrektemize kontrol farelerinde idrar ozmolaritesi belirgin şekilde daha düşüktü.
- Bu model kullanılarak uzun vadeli sonuçlar etkili bir şekilde izlenmiştir.
- Protokol, deneyler arasında tutarlı ve tekrarlanabilir sonuçlar sağlar.
Sonuçlar
- Bu model, tıkanıklık sonrası böbrek iyileşmesini incelemek için değerli bir araç sağlar.
- Cerrahi süreci basitleştirerek daha fazla araştırma laboratuvarı tarafından erişilebilir hale getirir.
- Bulgular, böbrek hasarı ve iyileşme mekanizmalarını anlamak için katkıda bulunur.
Sıkça Sorulan Sorular
Executive Industry Relevance
Long-term renal outcomes after urinary tract obstruction reversal remain a critical challenge in translational nephrology and preclinical drug development. This mouse model enables robust evaluation of both structural and functional kidney recovery, supporting predictive confidence in target validation and mechanistic de-risking for chronic kidney disease and acute kidney injury portfolios. Its reproducibility and adaptability across strains position it as a foundational tool for early discovery and preclinical research pipelines.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of therapeutic hypotheses related to renal injury and recovery mechanisms.
- Supports functional target validation by quantifying long-term renal outcomes post-obstruction reversal.
- Facilitates mechanistic de-risking for CKD and AKI targets by modeling persistent functional deficits.
Screening & Assay Development
- Provides a validated in vivo system for assessing candidate interventions on renal structure and function.
- Standardizes outcome measures such as blood urea nitrogen and urinary osmolarity for reproducible screening.
- Enables quantitative comparison of intervention efficacy across experimental cohorts.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant endpoints by modeling chronic and acute renal dysfunction post-obstruction.
- Supports continuity from mechanistic discovery to preclinical validation of therapeutic strategies.
- Informs risk-adjusted advancement decisions by revealing persistent medullary defects despite histological recovery.
Pipeline & Workflow Integration
This model bridges early discovery, lead identification, and preclinical validation by enabling longitudinal assessment of renal outcomes after injury reversal.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing on renal recovery mechanisms and pathway involvement.
- Screening: Delivers reproducible, quantitative outputs for intervention assessment.
- Analytics: Provides standardized measurements (e.g., blood urea nitrogen, urinary osmolarity) for cross-condition comparison.
- Translational Research: Models clinically relevant endpoints for CKD and AKI risk stratification.
- Enterprise Reuse: Adaptable across mouse strains and experimental designs for broad R&D utility.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in renal target validation and mechanistic understanding.
- Operational Value: Standardizes complex surgical procedures for reproducible, scalable outcomes.
- Strategic Value: Enables informed go/no-go decisions and reduces late-stage biological risk in renal portfolios.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of CKD and AKI therapeutic candidates.
Implementation Considerations
- Requires surgical expertise for consistent vascular clamp placement and multi-stage procedures.
- Demands access to instrumentation for renal function measurement (e.g., blood urea nitrogen, osmolarity assays).
- Necessitates cross-team standardization of surgical and analytical protocols.
- Adaptable to different mouse strains by adjusting obstruction duration for reproducibility.
- Practical limitations include technical complexity and the need for survival surgeries.
