Per iniziare, usando un microtomo, tagliare i tessuti di fibrosi sottomucosa orale incorporati in paraffina fissati in formalina in sezioni continue di tre in 10 micrometri di spessore, quindi dispiegare le sezioni in acqua. Posizionare sezioni di tre micron sul vetrino del microscopio di adesione o sul vetrino A e di 10 micron sul vetrino a membrana della penna o sul vetrino B.Posizionare entrambi i vetrini su una piastra calda a 60 gradi Celsius. Dopo due ore, posizionare i vetrini A e B in xilene per 10 minuti, quindi idratare i vetrini in concentrazioni graduate di etanolo per un minuto in ciascuna concentrazione.
Successivamente, immergere i vetrini in acqua distillata ultrapura per 30 secondi. Immergere i vetrini nella soluzione colorante di ematossilina Harris per 90 secondi. Lavare nuovamente i vetrini tre volte in acqua distillata ultrapura per 30 secondi ciascuno.
Successivamente, immergere i vetrini in una soluzione di div-ematossilina per due secondi. Il ritorno scivola in acqua distillata ultrapura per 30 secondi, ripetendo tre volte. Successivamente, immergere i vetrini A e B in una soluzione re-blue all’1% per due secondi.
Dopo aver lavato i vetrini con acqua distillata, metterli in una soluzione di eosina per due secondi. Immergere nuovamente i vetrini in acqua distillata ultrapura per 30 secondi prima di disidratarli e aumentare le concentrazioni di etanolo, quindi immergere i vetrini A in xilene per tre minuti. Infine, applicare una goccia del mezzo di montaggio sulla diapositiva A e coprirla con una copertura di vetro.