Neglebånd Disruption: En metode til at indsamle Hæmolymph fra Drosophila Larver

- For at starte, pipette en dråbe buffer på en ren dissekering pad. Placer derefter en tørret levende larve på dråben. Drosophila har ligesom andre leddyr et åbent kredsløbssystem, hvor hjertet pumper hæmolymph rundt i kroppen og bader de indre organer.

Kassér derefter slagtekroppen og overfør hæmolymphopløsningen fra dissekerepladen til kølet bufferopløsning i et mikrocentrifugerør. Endelig skal du bruge et hæmocytometer til at tælle antallet af hæmocytter, cellerne i hæmolymphen, der blev indsamlet. I denne protokol vil vi samle hæmolymph fra Drosophila melanlanogaster larver.

- Begynd hemolymph indsamling ved at tilføje 10 mikroliter af 1x PBS til en mikrocentrifuge rør, og placere røret på is. Næste, placere en 10 mikroliter dråbe 1x PBS på en ren dissekering pad. Vælg en individuel larve, og tør det ved at placere den på en vævsservietter. Derefter overføre den til PBS dråbe på dissektion pad.

Brug pincet, forsigtigt rive åbne og vende neglebånd til at frigive hæmolymph, og derefter kassere slagtekroppen.