Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- כדי להתחיל, פיפטה טיפה של חיץ על כרית ניתוח נקי. לאחר מכן, מניחים זחל חי מיובש על הטיפה. Drosophila, כמו פרוקי רגליים אחרים, יש מערכת מחזור הדם פתוח שבו הלב משאבות hemolymph סביב הגוף, רחצה את האיברים הפנימיים.
לאחר מכן, להשליך את הפגר ולהעביר את פתרון hemolymph מן הצלחת לנתח לפתרון חיץ צונן בצינור microcentrifuge. לבסוף, להשתמש hemocytometer לספור את מספר המוציטים, התאים hemolymph, שנאספו. בפרוטוקול זה, אנו אוספים hemolymph מזחלים מלנוגסטר Drosophila.
- התחל אוסף hemolymph על ידי הוספת 10 microliters של 1x PBS לצינור microcentrifuge, והנחת הצינור על קרח. הבא, למקם טיפה 10 microliter של 1x PBS על כרית ניתוח נקי. בחר זחל בודד, ולייבש אותו על ידי הנחת אותו על מגבון רקמה.
באמצעות מלקחיים, לקרוע בעדינות ולהפוך את הקוטיקל כדי לשחרר את hemolymph, ולאחר מכן להשליך את הפגר. עם פיפטה, לאסוף את hemolymph מן כרית הניתוח.
