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Encyclopedia of Experiments: Biology

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Preparação de slides de nematode

 
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Preparação de slides de nematode: um método para montar animais em um agar pad

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- Primeiro, coloque um slide de microscópio entre dois outros slides com fita. Estes fornecem suporte e espaçadores para a preparação da almofada agarose. Em seguida, coloque uma gota de agarose derretida sobre o slide.

Depois que a agarose se solidificar, separe cuidadosamente os slides para que a agarose permaneça em um slide. Use sempre almofadas recém-feitas, pois as almofadas secas podem desidratar os animais. Certifique-se de que não rachaduras ou bolhas, o que pode interromper a integridade da almofada.

Em seguida, adicione uma gota de anestésico ao centro do bloco e transfira de 10 a 15 animais para ele, trazendo o mínimo possível de bactérias com eles. Excesso de bactérias podem interferir com a imagem. Se a solução anestésica secar, adicione uma segunda gota aos animais.

Coloque delicadamente uma mancha sobre a almofada. Evite formar bolhas ou colocar muita pressão sobre ela para evitar danificar os animais. Por fim, rotule o slide, que está pronto para a imagem.

- Comece preparando slides para imagens. Coloque uma gota de agarose derretida em um slide de microscópio e pressione imediatamente para baixo a gotícula com outro slide de microscópio suavemente achatada a ágarose Precisa que a agarose seque por um minuto.

Em seguida, separe cuidadosamente os dois slides e deixe a almofada solidificada em um dos slides. Coloque o slide no estágio do microscópio e adicione uma gota de 5 a 10 micrita de anestésico ao centro da almofada de agrs.

Use uma picareta esterilizada a calor para transferir rapidamente 10 a 15 animais da placa de estoque para a gota anestésico antes que a solução seque. Em seguida, aplique um tapa-tampa posicionando-o logo acima da almofada de agarose e gentilmente deixando-o para baixo.

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