Encyclopedia of Experiments: Biology
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- 首先准备对化合物进行毒性测试,并将其分配到检测板的井中。将适当发育阶段的蠕虫转移到每口井,并立即启动计时器。注意任何损坏且未将其包含在生存计算中的蠕虫。
在预先确定的时间之后,计算每口井中仍然存活的蠕虫数量。解剖显微镜的亮光或轻轻敲击板应导致任何活蠕虫移动。 每次间隔后重复此观察,直到大多数动物死亡。在下列协议中,我们将观察L4幼虫在接触百草枯期间的存活时间,百草枯是一种诱导氧化应激的化合物。
-在此演示中,使用百草枯诱导氧化应激。 按照附带的协议文本中描述,准备一个新的 100毫摩尔的副夸特溶液。 百草枯是一种危险和剧毒的化合物,必须按照适当的准则处理。
派珀特40微升的百草枯溶液到 96 井板的每一口井。使用至少 12口井作为每个测试条件的复制品。使用铂线蠕虫采摘,将五到八只 L4 幼虫动物转移到每口井。
指示测试的每个条件的开始时间和结束时间。 将96 井板放置在 20 摄氏度。 开始时间一小时后,用解剖显微镜对死活动物进行评分。 在开始计数之前轻轻摇动盘子。
即使在发现高强度光后也不会移动的蠕虫也会被记为死亡。以高倍率观察蠕虫的形状、尾巴和头部运动,以区分死蠕虫和活蠕虫。 每小时得分存活,直到大多数蠕虫死亡,并重复此分析至少三次独立。
要确定每个时间点的存活率,首先通过添加转移到每个井中的动物总数来计算每个条件的动物总数。忽略在转移时损坏或死亡的动物。 接下来,对于每个时间点,计算每个条件的死亡动物总数。计算死亡百分比和存活率。