C.エレガンス 生存アッセイ:短期毒性試験

-毒性をテストする化合物を準備し、アッセイプレートの井戸に配布するから始めます。適切な発達段階のワームを各井戸に転送し、すぐにタイマーを開始します。

所定の時間を過ぎると、各井戸にまだ生きているワームの数を数え、解剖顕微鏡の明るい光やプレートを穏やかに叩くと、生きたワームが動くはずです。

- このデモンストレーションでは、パラコートを使用して酸化ストレスが誘発されます。付随するプロトコルテキストに記載されているように新鮮な100ミリモルパラコート溶液を準備してください。

96ウェルプレートのすべての井戸にパラコート溶液のピペット40マイクロリットル。テストされたすべての条件の複製として少なくとも12の井戸を使用してください。

試験した全ての状態の開始時間と終了時間を示す。96ウェルプレートを摂氏20度に置き、開始時刻の1時間後に、解剖顕微鏡を使って死んだ動物と生きている動物を得点する。

高強度光を見つけても動かないワームは死んだものとして採点される。死んだワームと生きたワームを区別するために高倍率でワームの形、尾、頭の動きを見て、ほとんどのワームが死ぬまで1時間ごとに生存をスコアし、このアッセイを少なくとも3回は繰り返す。

各時点の生存率を求めるには、まず各ウェルに移送された動物の総数を加算して、条件ごとの動物の総数を計算します。