Encyclopedia of Experiments: Biology
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-量化产卵的实验揭示了影响这种行为的神经成分和环境线索。产卵行为的变化可能表明对神经肌肉或生殖系统的有毒影响。
为了测试毒性,在线虫生长介质板上培养发育同步的卵子,无论是否含有兴趣的化合物,这些实验都使用热杀菌虫食物来防止细菌代谢化合物。让这一代人成长,直到他们成为年轻人。
然后在适当的控制或实验条件下将蠕虫移到新盘子中,让它们产卵24小时。 每天,将成人转移到一个新的盘子,并计算前一盘的鸡蛋。 继续,直到成人停止产卵,大约五天野生型蠕虫。 计算每个成年蠕虫每天产卵的数量,并在实验结束时将总数相加。
在示例协议中,我们将使用 C. elegans 产卵检测来测试etoposide - 一种化疗药物 - 生殖毒性。
- 在20摄氏度的NGM板上孵育含有DMSO或叶托波旁的年龄同步卵子64小时,直到年轻的成人阶段。将5个成年蠕虫转移到新的NGM板,没有化学物质或含有相同化学预处理的新NGM板,并孵育24小时。
将成人转移到新的NGM板,正如刚刚证明的那样,每天数一数鸡蛋的数量。此外,数一数爬走、死亡或内部孵化的蠕虫。根据文本协议进行计算。