Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Experimenten om het leggen van eieren te kwantificeren hebben de neurologische componenten en omgevingssignalen onthuld die dit gedrag beïnvloeden. Veranderingen in het leggedrag van eieren kunnen wijzen op toxische effecten op de neuromusculaire of reproductieve systemen.
Om te testen op toxiciteit, verhogen ontwikkelings-gesynchroniseerde eieren op nematoden groei media platen met en zonder de verbinding van belang. Deze experimenten gebruiken warmte-gedode bacteriële worm voedsel om te voorkomen dat de bacteriën van het metaboliseren van de verbinding. Laat deze generatie groeien totdat ze jongvolwassenen worden.
Verplaats vervolgens wormen naar nieuwe platen onder de juiste controle- of experimentele omstandigheden en laat ze 24 uur eieren leggen. Breng de volwassenen elke dag over naar een nieuw bord en tel de eieren op het vorige bord. Ga door totdat de volwassenen stoppen met leggen, ongeveer vijf dagen voor wormen van het wilde type. Bereken elke dag het aantal eieren dat per volwassen worm wordt gelegd en tel het totaal op aan het einde van het experiment.
In het voorbeeldprotocol zullen we de C. elegans eierlegtest gebruiken om etoposide te testen- een chemotherapiemedicijn - op reproductietoxiciteit.
- Incubeer de leeftijdssynchrone eieren op de NGM-plaat met DMSO of etoposide bij 20 graden Celsius gedurende 64 uur, tot het jongvolwassen stadium. Breng vijf volwassen wormen over op nieuwe NGM-platen zonder chemicaliën of nieuwe NGM-platen die dezelfde chemische voorbehandeling bevatten, en incubeer ze gedurende 24 uur.
Breng de volwassenen over naar nieuwe NGM-platen, zoals zojuist is aangetoond, en tel elke dag het aantal eieren. Tel daarnaast de wormen die eraf kropen, stierven of intern werden uitgebroed. Voer berekeningen uit volgens het tekstprotocol.
