Encyclopedia of Experiments: Biology
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- La diabetes mellitus tipo 1 es una enfermedad humana en la que el sistema inmunitario destruye la insulina que produce células beta en el páncreas. La estreptozocina puede inducir diabetes mellitus tipo 1 en el pez cebra. En primer lugar, anestesiar un pez en una solución de 2-fenoxietanol en agua de pescado. Tomar el pescado y colocarlo en una placa de Petri, lado ventral hacia arriba. Calcular la dosis de estreptozocina basada en 0,35 miligramos por gramo del peso del pez y diluirlo en solución salina.
Administrar la estreptozocina mediante inyección intraperitoneal debajo de la faja pélvica en el lado ventral del pez cebra. Streptozocina es estructuralmente similar a N-acetilglucosamina, un ligando que une el receptor GLUT2 en células beta pancreáticas, lo que conduce a la secreción de insulina.
Al entrar en las células beta, la estreptozocina desencadena una respuesta inmune que conduce a la liberación de autoanticógenos. Los autoanticágenos hacen que el sistema inmunitario reconozca las células beta como extrañas y las destruya provocando niveles reducidos de insulina.
En el siguiente ejemplo, generaremos un modelo de pez cebra de diabetes mellitus tipo 1. preparar un tanque de recuperación con agua de pescado normal y un tanque anestésico de agua de pescado con una dilución de 1 a 1.000 de 2 fenoxietanol. Bajo una capucha de humo, preparar una solución del 0,3% de estreptozocina o STZ añadiendo 6 miligramos de STZ a 2 mililitros de cloruro de sodio del 0,09% y colocar inmediatamente la solución sobre hielo.
En un tubo separado, aliquot suficiente solución salina para el control de peces. Llene una jeringa de medio CC equipada con una aguja de calibre 27 y 1/2 con el STZ, o controle las soluciones, asegurándose de que no haya burbujas de aire atrapadas.
Una vez anestesiado, coloque brevemente el pescado en una toalla de papel para absorber cualquier exceso de agua. Entonces, coloque el pez en un bote de pesaje y sopese.
Después de la inyección, coloque los peces en el tanque de agua de recuperación y monitorícelo para la actividad normal de natación. Después de inyectar suficientes peces para el experimento, transfiéralos a tanques vivos normales y manteniéndolo a una temperatura de 22 a 24 grados centígrados. La temperatura reducida es crítica para la inducción eficiente de hiperglucemia.
