Streptozocinbehandling: En zebrafiskmodell av typ 1-diabetes Mellitus

- Typ 1-diabetes mellitus är en mänsklig sjukdom där immunsystemet förstör insulin som gör betaceller i bukspottkörteln. Streptozocin kan inducera typ 1-diabetes mellitus hos zebrafisk.

Administrera streptozocin genom intraperitoneal injektion under bäckenhålorna gördel på den ventrala sidan av zebrafisken. Streptozocin är strukturellt lik N-acetylglukosamin, en ligand som binder GLUT2-receptorn på bukspottskörteln betaceller, vilket leder till utsöndring av insulin.

När man kommer in i betacellerna utlöser streptozocin ett immunsvar som leder till frisättning av autoantigener. Autoantigenerna gör att immunsystemet känner igen betaceller som främmande och förstör dem vilket leder till reducerade insulinnivåer. Administrera upprepade doser av streptozocin dag tre och fem, följt av veckodoser, en var sjunde dag för att bibehålla immunsvaret.

I följande exempel kommer vi att generera en zebrafiskmodell av typ 1-diabetes mellitus. För att generera zebrafisk med diabetes mellitus, bereda en återvinningstank med normalt fiskvatten och en bedövningstank med fiskvatten med en utspädning på 1 till 1 000 av 2-fenoxietanol.

I ett separat rör, alikvot tillräckligt saltlösning för kontrollfisk. Fyll en halv CC-spruta utrustad med en 27 och 1/2 gauge nål med STZ, eller kontrolllösningar, vilket säkerställer att inga luftbubblor fångas.

När fisken har sövts, placera fisken kort på en pappershandduk för att absorbera eventuellt överflödigt vatten. Sedan placera fisken i en vägningsbåt och väg den. Därefter placera fisken på en fast yta.

Efter injektionen, placera fisken i återhämtningsvattentanken och övervaka den för normal simaktivitet. Efter att ha injicerat tillräckligt med fisk för experimentet, överför dem till normala levande tankar och underhåll vid en temperatur av 22 till 24 grader Celsius. Den reducerade temperaturen är avgörande för effektiv induktion av hyperglykemi.