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샘플의 보존 : 냉장고,냉동고, 극저온 냉동고의 이용

Overview

극심한 감기를 이용한 실험실 샘플, 표본 및 시약의 보존은 생물 의학 연구 실험실에서 일상적으로 수행됩니다. 이 비디오는 실험실 샘플을 차갑게 유지하는 몇 가지 방법에 대해 설명하고 각 실험 요구 사항에 사용할 올바른 냉각 방법을 설명합니다.

예를 들어, 얼음과 드라이 아이스와 같은 냉각제는 일반적으로 실험 중에 샘플을 차갑게 유지할 때 사용됩니다. 이 비디오에서는 가장 일반적으로 사용되는 냉각제의 물리적 특성뿐만 아니라 작업시 안전 주의 사항을 설명합니다.

실험 사이에 샘플을 차갑게 유지하는 데 있어 실험실 급 냉장고와 냉동고를 포함한 냉각 장비를 사용하여 장기간 시료를 보존할 수 있습니다. 또한 이 비디오에서 논의되는 것은 일반적으로 이용 가능한 실험실 냉각 장비에 저장할 수 있는 샘플 및 시약의 유형입니다.

마지막으로, 극저온 보존의 개념은 조직, 세포 및 생체 분자가 영하의 온도로 냉각되어 모든 시료 분해 생물학적 활성을 효과적으로 중지하는 과정으로 도입됩니다. 얼음 결정의 형성을 최소화하거나 제거하는 여러 가지 동결 보존 방법이 논의됩니다.

Procedure

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실험실 샘플, 표본 및 시약의 보존은 전 세계 연구 실험실의 요구 사항입니다. 시간이 지남에 따라 샘플 무결성과 생존력을 보존하는 효율적인 방법은 추운 온도에서 이를 유지하는 것입니다.

벤치에서 샘플을 작업하든 실험 끝에 샘플을 저장하든 다양한 냉각 방법을 사용할 수 있습니다. 이 비디오는 일반적으로 실험실에서 발견되는 냉각 에이전트 및 계측기의 유형을 보여 주며 어떤 유형의 샘플이 온도에 저장되는지 이해하는 데 도움이 됩니다.

냉각제의 선택은 수행되는 실험 절차의 특성에 따라 달라집니다.

기존의 얼음은 단기적으로 샘플을 보존하기위한 논리적 선택입니다. 당신은 아마 얼음이 이 위상 다이어그램에서 볼 수 있듯이 정상 대기압에서 0 °C의 융점을 가지고 냉동 물것을 알고있다. 실온에서 따뜻해짐에 따라 액체가 되기 때문에 "젖은 얼음"이라고도 불리는 경우도 있습니다.

"습식 얼음"은 샘플과 시약을 차갑게 유지하거나 작업하거나 운반하는 데 이상적입니다.

「젖은 얼음」은 고체 H2O이지만, "드라이 아이스'는 -78.5°C의 융점을 가지는 고체 형태의 이산화탄소입니다. 드라이 아이스는 대기압에서 액체로 녹지 않고 승화라는 공정을 통해 이산화탄소 가스로 직접 변환됩니다. 승화는 물질의 위상을 솔리드에서 가스로 직접 전환하고 위상 다이어그램의 삼중점 아래에서 발생합니다.

일반적으로 0°C 이하의 온도에서 저장되는 냉동 세균 또는 포유류 세포 또는 조직과 같은 생물학적 표본으로 작업할 때 드라이 아이스를 사용하십시오.

드라이 아이스는 변화하는 상태일 때 잔여물이 남지 않아 드라이 아이스 위에 액체를 부어 얼어붙은 목욕을 만드는 데 이상적입니다.

액체 질소는 응축 질소 가스이며 입니다. 일반적으로 "LN2"로 작성됩니다. 대기압 액체 질소종가나 액체에서 가스로 전환하여 -196°C로 전환하여 위상 다이어그램으로 볼 수 있습니다.

대부분의 실험실 냉동고가 얻을 수 있는 온도 이하의 온도에서 생물학적 표본을 보관해야 하는 경우 액체 질소가 사용됩니다.

액체 질소는 시스템 내에서 압력 축적을 방지하기 위해 느슨한 피팅 뚜껑 또는 대형 탱크 데워링이 장착된 데워드 또는 진공 플라스크에 보관할 수 있습니다.

독성이 없는 드라이 아이스와 액체 질소는 위험한 물질이지만 실험실의 숙련된 구성원이 교육을 받을 때까지 처리해서는 안 됩니다.

액체 질소와 드라이 아이스의 매우 낮은 온도로 인해 피부와 접촉하면 심각한 조직 손상이 발생할 수 있습니다. 항상 극저온 장갑과 실험실 코트를 포함한 적절한 보호 기능을 착용하십시오. 도구를 사용하여 샘플을 조작하여 피부와의 접촉을 방지합니다.

또한, 밀폐 용기는 건조 얼음이나 액체 질소를 저장하는 데 사용해서는 안됩니다, 이러한 냉각 제는 가스로 상태를 변경하기 때문에. 밀폐된 조건에서 압력이 가해질 수 있으며 폭발로 이어질 수 있습니다.

그리고 지금 샘플을 차가운 유지 악기에 대한 ... 실험실 냉장고와 냉동고는 집안의 온도보다 온도를 더 엄격하게 조절하여 장치 전체에 균일한 온도를 보장합니다.

일반적으로 온도 모니터링 시스템과 상당한 온도 변화에 따라 꺼진 경보가 장착되어 있습니다.

이 독성 화학 물질이나 박테리아에 오염될 수 있기 때문에, 실험실 냉장고 또는 냉동고에 음식이나 음료를 저장하지 마십시오. 점심을 보관할 다른 장소를 찾아야 합니다.

냉장고는 4°C에서 유지되며 일반적으로 동결이 샘플 무결성에 영향을 줄 수 있는 경우 시료를 임시 보관하는 데 사용됩니다.

많은 시약 및 용액은 4°C에 저장되어 조직 배양 배지및 부어세포 배양판을 포함하여 유통 기한을 연장하며, 이는 사용하기 전에 따뜻하게 합니다.

차가운 방은 액체 크로마토그래피 장치와 같은 저온에서 작동해야하는 더 큰 장비를 보관하기에 이상적입니다.

실험실 급 냉동고는 극저온 냉동고의 경우 -20° C에서 -196°C까지 온도범위입니다.

제한 효소와 같은 핵산 및 시약의 저장을 위해 -20°C가 적절한 선택입니다. 냉동고에서 제거하면 샘플과 시약을 얼음 위에 보관해야합니다.

-80°C 및 극저온 냉동고는 액체 질소의 냉동 보존에 따라 장기간 냉동 조직 및 세포를 보관하는 데 적합합니다. 드라이 아이스는 일반적으로 -80 °C 냉동고에서 채취한 샘플을 운반하는 데 사용됩니다.

냉동 보존은 조직의 장기 저장을 참조 하는 용어, 또는 살아있는 세포. 영하의 온도에서 시료를 저하시키는 반응을 포함한 모든 생물학적 활성은 효과적으로 중단된다.

살아있는 세포와 조직을 동결할 때, 얼음 결정은 세포 탈수및 손상으로 이끌어 내는 형성할 수 있고, 유해한 농도에 단두한 분자의 축적으로 이끌어 냅니다.

스냅 또는 플래시 동결은 생물학적 샘플이 액체 질소 또는 드라이 아이스및 에탄올혼합물에 빠르게 침수되는 과정으로, 큰 얼음 결정이 세포를 형성하고 손상시킬 수 없도록 한다. 냉동 보호제는 또한 얼음의 형성을 줄이기 위해 첨가제로 사용할 수 있습니다.

플래시 동결의 대안으로, 기계는 천천히 동결 과정을 제어하는 데 사용할 수 있습니다, 이는 당신이 여기에서 볼 수있는 양 배아를 냉동 보존하는 데 필요한.

최근에는 얼음 결정으로 인한 손상 없이 극저온 보존 세포와 조직을 위한 방법으로 유리화가 도입되고 있다. 이 공정은 특정 극저온 보호제가 있는 상황에서 빠른 냉각을 통해 시료의 액체를 비결정, 유리 고체로 변환합니다.

당신은 방금 냉각 실험실 표본 및 시약에 대한 JoVE의 소개를 지켜보았습니다.

이 비디오에서는 다양한 유형의 냉각 에이전트 및 장비와 각 냉각 방법을 사용할 시기의 예를 검토했습니다. 우리는 또한 생물학적 표본을 냉동 보존하는 여러 가지 방법을 소개했습니다. 시청해 주셔서 감사합니다.

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