Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

 
Click here for the English version

תחזוקה וחזקה של דגי זברה

Overview

דג הזברה(דניו ריו)הוא מערכת מודל חוליות רבת עוצמה לחקר התפתחות, מידול מחלות והקרנה לטיפולים חדשניים. בשל גודלם הקטן, ניתן לשכן במעבדה מספר גדול של דגי זברה בעלות נמוכה. למרות שדגי זברה קלים יחסית לתחזוקה, יש לתת שיקול מיוחד הן לתזונה והן לאיכות המים כדי לייעל את בריאות הדגים ואת הצלחת הרבייה.

וידאו זה יספק סקירה של גידול דגי זברה ותחזוקה במעבדה. לאחר סקירה קצרה של בית הגידול הטבעי של דגי הזברה, יידונו טכניקות החיוניות לשחזור סביבה זו במעבדה, כולל אלמנטים מרכזיים של מערכות מתקן דגים להזרמת מים והכנת שרימפס במי מלח כחלק מדיאטת דגי הזברה. בנוסף, המצגת תכלול מידע על אופן המעקב אחר זני דגי זברה ספציפיים בסביבת מעבדה, תוך התייחסות ספציפית לאיסוף דגימות סנפירי זנב להפקת DNA וגנוטיפינג. לבסוף, שינויים ניסיוניים בסביבת דגי הזברה יידונו כאמצעי לקידום הבנתנו את הדגים הללו, ובתמורה את עצמנו.

Procedure

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

גידול נכון חיוני להצלחת הניסויים המבוצעים בדגי זברה. איכות מים אופטימלית מקדמת את בריאות הדגים ואת יכולת הרבייה הניסיונית. בנוסף, ייצור ביצי דגי זברה תלוי מאוד בתזונה נכונה. סרטון זה מתאר כיצד דגים שוכנים ומאכילים במעבדה, טיפים לטיפול וניהול מלאי, והצצה לאופן שבו סביבת דגי הזברה מתומרנת בניסויים ביולוגיים.

בואו נתחיל על ידי עובר על היסודות של בית הגידול של דגים.

דגי זברה פראיים מקורם במים טריים של ההימלאיה. באקלים זה, הדגים מבלים את רוב ימיהם בעשיית גופים איטיים של מים מתוקים.

איך גן העדן הזה נוצר מחדש במעבדה? בואו נתחיל עם החלק החשוב ביותר: המים. למרות שמים מתוקים עשויים להיראות קלים להשגה, מי ברז רעילים לדגי זברה בגלל כלור ומזהמים פוטנציאליים. לכן, יש להעביר מי אקווריום דרך מערכת טיהור, כגון יחידת אוסמוזה הפוכה. מלחים ומאגרי pH מתווספים בחזרה למים המטוהרים כדי לייעל את המליחות ואת ה- pH.

כדי למקסם את היעילות הניסיונית, דגים רבים נשמרים בכמות מוגבלת של מים. הפסולת מצטברת במהירות עם כל הדגים האלה שוחים מסביב, מה שהופך את שינוי המים לחיוני. צורך זה יוצר ביקוש גבוה למים, ולכן מתקני דגים משתמשים במערכת recirculation כדי למזער את השימוש במים. מים מלוכלכים מסוננים ומעוקרים על ידי טיפול UV לפני שהם זורמים בחזרה למערכת.

דגי זברה נשמרים במיכלים מיוחדים, הזמינים בגדלים מרובים. הטנקים מכוסים כדי להפחית את האידוי ולמנוע בריחה של דגים. כדי לאפשר למיכל להשתלב במערכת, למכסה יש חורים שדרכם זורמים מים נקיים כל הזמן. מפלס המים נשאר יציב הודות ליציאת הצפה בחלק האחורי של המיכל, המכוסה בבלבל עם חורים קטנים המאפשרים למים מלוכלכים, אך לא דגים, לזרום החוצה.

למרות חילופי המים, אצות ופסולת מוצקה עדיין יכולים להצטבר במיכלים, ולכן הם צריכים להיות מנוקים באופן קבוע.

גם בקרה סביבתית במתקני דגים חשובה ביותר. הטמפרטורה נשמרת ליד 28 °C (55 °F), או 80 °F. כדי לשמור על השעון הביולוגי של בעלי החיים, האורות נשלטים על מחזור עם 14 שעות של אור ו -10 שעות של חושך.

עכשיו שעברנו על תנאי הדיור של דגי הזברה, בואו נדבר על התזונה שלהם.

בסביבתם הטבעית, דגי זברה צורכים במידה רבה זואופלנקטון וחרקים. דיאטה זו נוצרת מחדש במעבדה על ידי שילוב של מזון יבש ואורגניזמים קטנים. דגים זחליים וצעירים משגשגים על מיקרואורגניזמים חיים כמו פרמזיה, בעוד דגים בוגרים מוזנים לעתים קרובות אבקות זמינות מסחרית וסרטנים קטנים המכונה שרימפס מי מלח.

יצורים אלה נוחים במיוחד להכנת מעבדה, כי הביצים שלהם ניתן לאחסן כמו ציסטות רדומות בטמפרטורת החדר. כדי להכין את השרימפס לאכילה, הקליפות החיצוניות הקשות שלהם מוסרות על ידי טיפול עם אקונומיקה. לאחר מכן, ביצים ערופות נשטפות ביסודיות. הביצים מועברות לאחר מכן למגדל מאוורר כדי לאפשר צמיחה במי מלח במשך יום אחד. לבסוף, השרימפס בקעה נאספים ונשטפים במסננת רשת ולאחר מכן לשים לתוך בקבוקים להאכלה. דגים ניזונים בדרך כלל 2 - 3 פעמים ביום, לסירוגין הזנה חיה ויבשה, וזרימת המים כבויה בתקופה זו, כך שהמזון לא צף לפני שהוא נאכל.

עכשיו שאתה יודע איך לשכן ולהאכיל דגים, הגיע הזמן ללמוד איך לעבוד עם ולעקוב אחר מלאי הדגים שלך.

מתקני הדגים במעבדה מאכלסים סוגים רבים ושונים של דגי זברה, מזני סוג בר, לדגים שהגנום שלהם שונה עם מוטציות נקודתיות מפריעות וטרנסגנים מוחדרים. כדי לעקוב אחר כל הדגים האלה, בעלי חיים עם רקע גנטי דומה נשמרים יחד במיכלים מסומנים. תוויות טנקים צריכות להכיל מידע מזהה יסודי, כולל גנוטיפ הדגים ותאריך הלידה.

פריון דגי הזברה מתחיל לרדת לאחר השנה הראשונה לחיים, ולכן יש לחדש את המלאי מדי שנה. דגי זברה אינם שורדים היטב זנים מולדים לחלוטין, ולכן יש לשמור על המגוון הגנטי על ידי איסוף צאצאים מצלבים של דגים שאינם קשורים זה מזה, או "מפרצונים".

כאשר outcrossing קווים מהונדסים או מוטנטיים, צאצאים הנושאים את השינוי הגנטי הרצוי חייבים להיות מזוהים על ידי ביטוי פלואורופור או genotyping. לגנוטיפ, ראשית להרגיז את הדגים בטריקאין. לאחר מכן, לחתוך חתיכה קטנה של סנפיר הזנב כמקור של DNA.

לבסוף, לבודד DNA מדגימת הזנב ולהשתמש בו לניתוח PCR כדי לזהות רצפים ספציפיים. בזמן ההמתנה לתוצאות, שמור כל דג במיכל הקטן שלו עם מזהה.

כעת, לאחר שעברנו על תנאי גידול דגים סטנדרטיים, בואו נבחן כמה דרכים שבהן הסטנדרטים האלה מופעלים כדי לחקור תהליכים ביולוגיים.

טמפרטורת מי המערכת יכולה להשפיע עמוקות על בריאות דגי הזברה. כדי ליצור מודל של סוכרת, חוקרים אלה מטפלים בדגים עם רעלן הלבלב, סטרפטוזוצין, ומאחסנים אותם במיכלים עם טמפרטורת מים מופחתת. הדגים הסוכרתיים מראים פנוטיפים צפויים, כגון נזק לכליות ולעיניים, כמו גם התחדשות מופחתת של סנפירי הזנב, וניתן להשתמש בהם כדי לבחון את הביולוגיה של הסוכרת.

ניתן גם לשנות מערכות טנקים למטרות ניסיוניות ספציפיות. מחקרים על התנהגות השחייה בדגים יכולים לשמש כקריאה לחרדה, תוקפנות או התנהגויות חברתיות. כאן, מעקב וידאו משמש כדי לנתח את ההבדל בהתנהגות השחייה בין דגים לא מטופלים ואלה שטופלו בתרופה נוירואקטיבית. מחקרים כאלה עוזרים לקדם את ההבנה שלנו במדעי המוח ויכולים להיות כלי לגילוי סמים.

תנאי אור משתנים יכולים להשפיע גם על דגי זברה. טיפול אור אינטנסיבי יכול אפילו לשמש כדי לפטור את התאים חישת האור של הרשתית. לדגים אלה יש את היכולת לתקן רקמת רשתית פגומה על ידי התפשטות תאים, וזה עניין משמעותי למדענים חוקרים ניוון רשתית אצל אנשים.

הרגע צפית בסרטון של ג'וב על תחזוקת דגי זברה וצמחות. עברנו על היסודות של איך דגים שוכנים, מאכילים ומנוהלים במעבדה. תודה שצפיתם!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

לא הוכרזו ניגודי אינטרסים.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter