Entretien et élevage du poisson-zèbre

Un bon élevage est essentiel au succès des expériences réalisées sur le poisson-zèbre. Une qualité optimale de l’eau favorise la santé des poissons et la reproductibilité expérimentale. De plus, la production d’œufs de poisson-zèbre dépend fortement d’une bonne nutrition. Cette vidéo décrit comment les poissons sont logés et nourris en laboratoire, des conseils sur la manipulation et la gestion des stocks, et un aperçu de la façon dont l’environnement du poisson-zèbre est manipulé dans les expériences biologiques.

Commençons par passer en revue les bases de l’habitat du poisson.

Le poisson-zèbre sauvage est originaire des eaux douces de l’Himalaya. Dans ce climat, les poissons passent la plupart de leurs journées à se prélasser dans des étendues d’eau douce qui se déplacent lentement.

Comment ce paradis est-il recréé en laboratoire ? Commençons par la partie la plus importante : l’eau. Bien que l’eau douce puisse sembler facile à obtenir, l’eau du robinet est toxique pour le poisson-zèbre en raison du chlore et des contaminants potentiels. Par conséquent, l’eau de l’aquarium doit passer à travers un système de purification, tel qu’une unité d’osmose inverse. Des sels et des tampons de pH sont ensuite rajoutés à l’eau purifiée pour optimiser la salinité et le pH.

Pour maximiser l’efficacité expérimentale, de nombreux poissons sont maintenus dans une quantité limitée d’eau. Les déchets s’accumulent rapidement avec tous ces poissons qui nagent autour, ce qui rend le changement d’eau essentiel. Ce besoin crée une forte demande en eau, de sorte que les installations piscicoles utilisent un système de recirculation pour minimiser la consommation d’eau. L’eau sale est filtrée et stérilisée par traitement UV avant de retourner dans le système.

Les poissons-zèbres sont gardés dans des réservoirs spécialisés, qui sont disponibles en plusieurs tailles. Les bassins sont couverts pour réduire l’évaporation et empêcher les poissons de s’échapper. Pour permettre au réservoir de s’intégrer dans le système, le couvercle comporte des trous par lesquels de l’eau propre s’écoule constamment. Le niveau de l’eau reste stable grâce à un orifice de trop-plein à l’arrière du réservoir, qui est recouvert d’un déflecteur avec de petits trous qui permettent à l’eau sale, mais pas aux poissons, de s’écouler.

Malgré l’échange d’eau, les algues et les déchets solides peuvent encore s’accumuler dans les réservoirs, ils doivent donc être nettoyés régulièrement.

Le contrôle de l’environnement dans les installations piscicoles est également extrêmement important. La température est maintenue près de 28 °C C, ou 80 ?F. Pour entretenir les animaux ? rythme circadien, les lumières sont contrôlées sur un cycle avec 14 heures de lumière et 10 heures d’obscurité.

Maintenant que nous avons passé en revue les conditions de logement des poissons-zèbres, parlons de leur régime alimentaire.

Dans leur habitat naturel, les poissons-zèbres consomment en grande partie du zooplancton et des insectes. Ce régime est recréé en laboratoire par une combinaison d’aliments secs et de petits organismes. Les larves et les juvéniles se nourrissent de micro-organismes vivants comme la paramécie, tandis que les poissons adultes sont souvent nourris avec des poudres disponibles dans le commerce et de petits crustacés connus sous le nom d’artémias.

Ces bestioles se prêtent particulièrement à une préparation en laboratoire, car leurs œufs peuvent être stockés sous forme de kystes dormants à température ambiante. Pour préparer les crevettes à la consommation, leurs carapaces extérieures dures sont enlevées par un traitement à l’eau de Javel. Ensuite, les œufs décapsulés sont soigneusement lavés. Les œufs sont ensuite transférés dans une tour aérée pour permettre la croissance dans l’eau salée pendant environ une journée. Enfin, les crevettes écloses sont collectées et rincées dans une passoire à mailles, puis mises dans des bouteilles pour être nourries. Les poissons sont généralement nourris 2 à 3 fois par jour, en alternant aliments vivants et secs, et le débit d’eau est coupé pendant cette période afin que la nourriture ne flotte pas avant d’être consommée.

Maintenant que vous savez comment héberger et nourrir les poissons, il est temps d’apprendre à travailler avec vos stocks de poissons et à en faire le suivi.

Les installations piscicoles de laboratoire abritent de nombreux types différents de poissons-zèbres, des souches de type sauvage aux poissons dont le génome a été modifié avec des mutations ponctuelles perturbatrices et des transgènes insérés. Pour garder une trace de tous ces poissons, des animaux ayant des antécédents génétiques similaires sont gardés ensemble dans des bassins étiquetés. Les étiquettes des réservoirs doivent contenir des renseignements d’identification complets, y compris le génotype et la date de naissance du poisson.

La fertilité du poisson-zèbre commence à décliner après la première année de vie, de sorte que les stocks doivent être reconstitués chaque année. Les poissons-zèbres ne survivent pas bien en tant que souches entièrement consanguines, de sorte que la diversité génétique doit être maintenue en recueillant une descendance à partir de croisements de poissons non apparentés, ou « croisements ».

Lors du croisement de lignées transgéniques ou mutantes, la descendance porteuse de la modification génétique souhaitée doit être identifiée par expression de fluorophores ou génotypage. Pour génotyper, anesthésie d’abord le poisson dans la tricaïne. Ensuite, coupez un petit morceau de la nageoire caudale comme source d’ADN.

Enfin, isolez l’ADN de l’échantillon de queue et utilisez-le pour l’analyse PCR afin d’identifier des séquences spécifiques. En attendant les résultats, gardez chaque poisson dans son propre petit aquarium étiqueté avec un identifiant.

Maintenant que nous avons passé en revue les conditions standard d’élevage des poissons, examinons certaines façons dont ces normes sont manipulées pour étudier les processus biologiques.

La température de l’eau du système peut profondément affecter la santé du poisson-zèbre. Pour créer un modèle de diabète sucré, ces chercheurs traitent les poissons avec la toxine pancréatique, la streptozocine, et les logent dans des bassins à température réduite de l’eau. Les poissons diabétiques présentent des phénotypes attendus, tels que des lésions rénales et oculaires, ainsi qu’une régénération réduite de la nageoire caudale, et peuvent être utilisés pour examiner la biologie du diabète.

Les systèmes de réservoirs peuvent également être modifiés à des fins expérimentales spécifiques. Les études du comportement de nage chez les poissons peuvent être utilisées comme lecture de l’anxiété, de l’agressivité ou des comportements sociaux. Ici, le suivi vidéo est utilisé pour analyser la différence de comportement de nage entre les poissons non traités et ceux traités avec un médicament neuroactif. Des études comme celles-ci contribuent à faire progresser notre compréhension des neurosciences et peuvent être un outil pour la découverte de médicaments.

Des conditions de lumière modifiées peuvent également affecter le poisson-zèbre. Un traitement à la lumière intense peut même être utilisé pour enlever les cellules photosensibles de la rétine. Ces poissons ont la capacité de réparer les tissus rétiniens endommagés par la prolifération cellulaire, ce qui est d’un intérêt considérable pour les scientifiques qui étudient la dégénérescence rétinienne chez l’homme.

Vous venez de regarder la vidéo de JoVE sur l’entretien et l’élevage du poisson-zèbre. Nous avons passé en revue l’essentiel de la façon dont les poissons sont logés, nourris et gérés en laboratoire. Merci d’avoir regardé !